核酸的结构与功能

1、第三章 核酸的结构与功能,Chapter 3 Structure and Function of Nucleic Acid,核酸是存在于细胞中的一类大分子酸性物质，包括核糖核酸（RNA）和脱氧核糖核酸（DNA）两大类,一、Whats nucleic acid,二、核酸的分类及分布,DNA,RNA,脱氧核糖核酸,核糖核酸,RNA和DNA都是以单核苷酸为基本单位所组成的多核苷酸长链,Section 1 The Chemical Component and Primary Structure of Nucleic Acid,第一节 核酸的化学组成及一级结构,核酸的水解产物,核酸,核苷酸,磷酸,核苷,

2、戊糖,含氮碱,核糖,脱氧核糖,嘌呤碱,嘧啶碱,嘧啶碱,一、核苷酸中的碱基与戊糖,尿嘧啶 胞嘧啶 胸腺嘧啶 Uracil，U Cytosine，C Thymine，T,嘌呤碱,3,1,2,4,5,6,7,8,9,腺嘌呤(adenine, A,鸟嘌呤(guanine, G,戊糖,核苷,核苷是由戊糖与含氮碱基经脱水缩合而生成的化合物。 在大多数情况下，核苷是由核糖或脱氧核糖的C1-羟基与嘧啶碱N1或嘌呤碱N9进行缩合，生成的化学键称为糖苷键,腺苷(AR) 脱氧胞苷(dCR,1,1,N9,N1,OH,核苷：AR, GR, UR, CR 脱氧核苷：dAR, dGR, dTR, dCR,核苷酸： AMP,

3、 GMP, UMP, CMP 脱氧核苷酸： dAMP, dGMP, dTMP, dCMP,核苷酸的结构与命名,核苷（脱氧核苷）和磷酸以磷酸酯键连接形成核苷酸（脱氧核苷酸,3,5-磷酸二酯键的形成,核苷酸的命名及缩写符号,体内重要的游离核苷酸及其衍生物,含核苷酸的生物活性物质： NAD+、NADP+、CoA-SH、FAD 等都含有 AMP,多磷酸核苷酸：NMP，NDP，NTP,环化核苷酸: cAMP，cGMP,多核苷酸链,核酸就是由许多核苷酸单位通过3,5-磷酸二酯键连接起来形成的不含侧链的长链状化合物。 核酸是具有方向性的长链状化合物，多核苷酸链的两端，一端称为5-端，另一端称为3-端,C,G

4、,A,二、核酸的一级结构,定义 核酸中核苷酸的排列顺序。由于核苷酸间的差异主要是碱基不同，所以也称为碱基序列,书写方法,5 pApCpTpGpCpT-OH 3,5 A C T G C T 3,第二节 DNA的空间结构与功能,Section 2 Dimensional Structure and Function of DNA,一、DNA的二级结构双螺旋结构模型,DNA双螺旋结构是DNA二级结构的一种重要形式，它是Watson和Crick两位科学家于1953年提出来的一种结构模型（获1962年度诺贝尔奖,James Watson (L) and Francis Crick (R), and th

5、e model they built of the structure of DNA,Chargaff 研究小组的贡献,19501953，Chargaff研究小组对DNA的化学组成进行了分析研究，发现： DNA碱基组成有物种差异，且物种亲缘关系越远，差异越大； 相同物种，不同组织器官中DNA碱基组成相同，而且不因年龄、环境及营养而改变； DNA分子中四种碱基的摩尔百分比具有一定的规律性，即A=T、G=C、A+G=T+C。这一规律被称为Chargaff规则,B型DNA双螺旋结构模式图,碱基配对及氢键形成,B型双螺旋DNA的结构特征,1. 为右手、反平行双螺旋，形成大沟及小沟相间。 2. 主链位于

6、螺旋外侧，碱基位于内侧； 3. 两条链间存在碱基互补：A与T或G与C配对形成氢键，称为碱基互补原则（A与T为两个氢键，G与C为三个氢键）； 4. 螺旋的稳定因素为氢键和碱基堆砌力； 5. 螺旋的螺距为3.4nm，直径为2nm,B型双螺旋DNA的结构特点,大沟”、“小沟”的功能,沟状结构与DNA、蛋白质间的相互识别有关,目前已知DNA双螺旋结构可分为A、B、C、D及Z型等数种，除Z型为左手双螺旋外，其余均为右手双螺旋,二）DNA双螺旋结构的多样性,二）DNA双螺旋结构的多样性,A-DNA B-DNA Z-DNA,二、DNA的超螺旋结构及其在染色质中的组装,超螺旋结构(superhelix 或su

7、percoil) DNA双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构。 正超螺旋(positive supercoil) 盘绕方向与DNA双螺旋方向相同。 负超螺旋(negative supercoil) 盘绕方向与DNA双螺旋方向相反,绝大多数原核生物的DNA都是共价封闭的环状双螺旋。如果再进一步盘绕则形成麻花状的超螺旋结构,一）原核生物DNA的高级结构,二）DNA在真核生物细胞核内的组装,真核生物染色体由DNA和蛋白质构成，其基本单位是核小体(nucleosome,核小体的组成 DNA：约200bp 组蛋白：H1 H2A，H2B H3 H4,核小体的结构,核小体、染色质与染色体,三、DNA的功能,DNA

8、的基本功能是作为遗传信息的载体，为生物遗传信息复制以及基因信息的转录提供模板,DNA分子中具有特定生物学功能的片段称为基因（gene）。 一个生物体的全部DNA序列称为基因组（genome,第三节 RNA的结构与功能,Section 3 Structure and Function of RNA,RNA通常以单链形式存在，但也可形成局部的双螺旋结构。 RNA分子的种类较多，分子大小变化较大，功能多样化。 主要的RNA种类有rRNA、mRNA、tRNA、HnRNA,RNA的种类、分布与功能,一、mRNA的结构与功能,mRNA可形成局部双螺旋结构的二级结构。 mRNA在真核生物中的初级产物称为Hn

9、RNA,内含子(intron)编码序列,外显子 (exon)编码序列,大多数真核成熟的mRNA分子具有典型的5-端的7-甲基鸟苷二磷酸（m7GTP）帽子结构和3-端的多聚腺苷酸(polyA)尾巴结构,真核生物mRNA 3-端的polyA结构,mRNA分子中每三个相邻的核苷酸组成一组，在蛋白质翻译合成时代表一个特定的氨基酸，这种核苷酸三联体称为遗传密码（coden)。 mRNA分子中带有遗传密码，其功能是为蛋白质的合成提供模板(templet,真核细胞,二、tRNA的结构与功能,tRNA是分子最小，但含有稀有碱基最多的RNA，其稀有碱基的含量可多达20%。 tRNA是单链核酸，但其分子中的某些局

10、部也可形成双螺旋结构,二）tRNA的二级结构(三叶草形,二、转运RNA的结构与功能,DHU环 反密码环 TC环 附加叉 氨基酸臂,三环四臂一叉,三）tRNA的三级结构 倒L形,四）tRNA的功能 活化、搬运氨基酸到核糖体，参与蛋白质的翻译,二）tRNA的三级结构,三、rRNA的结构与功能,rRNA与蛋白质一起构成核蛋白体，作为蛋白质生物合成的场所,rRNA的种类（根据沉降系数,真核生物 5S rRNA 28S rRNA 5.8S rRNA 18S rRNA,原核生物 5S rRNA 23S rRNA 16S rRNA,大肠杆菌16S rRNA的二级结构,四、其他小分子RNA及RNA组学,第四节

11、 核酸的理化性质、变性和复性,Section 4 The Physical and Chemical Characters, Denaturation and Renaturation of Nucleic Acid,需要解决的问题,核酸具有哪些理化性质？ 什么是核酸的变性和复性？ 什么是核酸的分子杂交,核酸具有酸性；能吸收紫外光，最大吸收峰为260nm。 故常用紫外分光光度法测定核酸的含量,一、核酸的一般理化性质,二、DNA的变性,引起DNA变性的因素主要有：高温， 强酸强碱，有机溶剂等,定义：在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程,DNA变性的本质是双链间氢键的断裂,增色效应

12、：指DNA变性后对260nm紫外光的光吸收度增加的现象,DNA变性后的性质改变,加热DNA溶液，使其对260nm紫外光的吸收度突然增加，达到其最大值一半时的温度，就是DNA的解链温度（熔点，melting temperature, Tm,DNA的解链温度,Tm的高低与DNA分子中G+C的含量有关，G+C的含量越高，则Tm越高,三、DNA的复性与分子杂交,DNA复性的定义 在适当条件下，变性DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象，这一现象称为复性,减色效应 DNA复性时，其溶液OD260降低,热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火,不同来源的DNA变性后，在一起复性，只要核酸分子的核苷酸序列含有可以形成碱基互补的片段，彼此间就可以形成局部双链，即形成杂化双链，这一过程称为杂交,核酸杂交可以是DNA-DNA，也可以是DNA-RNA杂交,DNA 分子