生物技术考试题答案整理打印

1、 生物技术历年试题答案整理Made By Ma Ling 2002 1.脂蛋白的分类？用什么方法可以分离？ 脂蛋白分为CM、VLDL、IDL、LDL、HDL、LP 根据脂蛋白的颗粒大小、密度不同，可采用超速离心分离 差速分离：采用不同离心速度和离心时间，是沉降速度不同的颗粒分批分离，达克粒先沉降后取上清，在加大离心力和离心时间再进行离心，如此多次离心使不同大小的颗粒分离。 密度梯度离心：样品在密度梯度介质中进行离心，不同大小、有一定沉降系数差异的颗粒在密度梯度溶液中形成若干界面清楚的不连续条带。 等密度离心：将CsCl2、CsSO4介质与样品溶液混合，然后在离心场中沉降形成密度梯度，样品中不同

2、浮力密度的颗粒在各自的等密度点位置下形成区带 2003 1.简述4种生物材料分离的方法，说明用途。 分离方法 用途 生物组织与细 胞的破碎制备生物膜制剂、胞内物质获得 /萃取/沉提取 淀分离技术生物大分子的提取 层析分离技术 吸附层析：利用吸附层析介质表面的活性基团或活性分子对流动相不同组分吸附性能差异进行分离； 分配层析：利用待分离的不同组分在流动相和固定相之间分配系数不同而进行分离； 离子交换层析：利用化学键合在固定相表面的具有交换能力的离子基团与流动相到分离组分的离子可逆结合能力的差异进行分离； 亲和层析：利用固相载体表面偶联的具有特殊亲和能力的配基对流动相中溶质分子发生可逆的特异性结合

3、作用而进行分离； 凝胶层析：利用凝胶层析介质中一定大小的网孔，对相对分子质量不同的组分阻滞程度不同而进行分离； 离心分离技术 借助离心机旋转所产生的离心力，根据物质颗粒的沉降系数、质量、密度及复粒等因子的不同是物质分离；还可用于分子量的测定，DNA中G-C碱基含量的推测、检测生物大分子中构想的变化 2.从形态学上区分细胞凋亡和细胞坏死。 细胞凋亡：胞膜及细胞器相对完整，细胞皱缩，核固缩 细胞坏死：细胞结构全面溶解、破坏、细胞肿胀 什么是细胞固定化技术,有哪些方法？ 定义：用理化方法使酶与水不溶性大分子载体结合或把酶包埋在水不溶性凝胶或半透膜的 微囊体中，方法如下 1）物理法 物理吸附：是以固体

4、表面吸附为依据，使酶与不溶性载体相接触而达到酶吸附的目的 包埋法：将酶包埋在高聚物凝胶网格中或高分子半透膜中的固定方法 2）化学法：将酶通过化学键连接到天然的或合成的高分子载体上，使用偶联剂通过酶表面的基团将酶交联起来，而形成相对分子量更大、不溶性的固定化酶的方法. 1.简述细胞过氧化损伤的原因和检测方法 1 生物技术历年试题答案整理Made By Ma Ling 原因：脂质过氧化是发生在细胞膜内多不饱和脂肪酸的一些列自由基反应 1）比色法 硫代巴比妥酸（TBA）显色法TBA与MDA形成红色化合物，532nm检测 氧化还原比色法 2）荧光法:TBA荧光沉淀法、简易荧光法、谷胱甘肽荧光法、亚甲蓝

5、比色法 3）紫外法 4）化学发光法 冷光剂鲁米诺等在自由基作用下获能，回到基态时释放光量子（LCL） 血清自发化学发光（SCL） 5）电子自旋共振法 2005 1. 简述细胞凋亡检测的三种方法 2. 举一个例子说明生物/酶法合成药物 3. 在体外研究药物的抗肿瘤作用及其分子机制，你将怎么进行实验设计？采用的实验技术方法解决了什么问题？ 1）观察药物对细胞增殖的影响，做细胞毒实验：测定药物的IC50值 2）观察药物对细胞周期的影响，可以采用流式细胞仪检测，判断药物是否为特异性作用于细胞周期的药物，作用于细胞周期的那个期。 3）观察药物诱导细胞凋亡 4）药物对细胞中基因和蛋白表达的作用：比如对抑癌

6、基因p-53、bcl蛋白表白的影响，借助PCR、凝胶电泳等技术进行分析，可以判断药物是否可以上调抑癌基因的表达，帮助分析作用的分子机制。 5）观察细胞对药物或制剂的摄取：检测药物的靶向性 4. 简述体内抗氧化体系的工作原理。 生物物体内自由基的清除剂和抗氧化剂，存在于细胞内核细胞外，起抗氧化的作用 抗氧化剂可以阻止自由基链锁反应启动和蔓延，终止自由基反应过程的物质；自由基清除剂能与自由基反应而除去自由基的物质 生物酶系统： 1）SOD：超氧化物歧化酶，清除O2-.，胞浆与线粒体中较高 2）Catalase：过氧化氢酶，清除H2O2，存在于过氧化体中 3）谷胱甘肽过氧化酶（GSH-PX）：清除H

7、2O2及脂质过氧化物，存在于线粒体及胞浆中 谷胱甘肽转硫酶：清除脂质过氧化物 抗氧化剂： 2 生物技术历年试题答案整理Made By Ma Ling -.的有效清除剂O 1） VE：由食物供给，防止脂质过氧化，是22） VC：是水溶性还原剂（可以看一下课件上的反应，任意记一个） 3） GSH：为含量最高的分蛋白质巯基化合物，是重要的内源性自由基清除剂（同上） 4） 尿酸：在血浆中，可有力清除羟自由基和超氧自由基，抑制脂质过氧化 -. O 5） 血浆铜蓝蛋白：防止脂质过氧化，清除26） 胡萝卜素与NADH：可减轻有机自由基的损伤 PS：名词解释是前辈们在总结的基础，根据06级的题增加了点。简答题

8、答案做得比较仓促，有错大家就自行修改吧。曾老师的题不大会答，答疑时再问问怎么答吧。生物技术历年题多多少少感觉出一些重复的重点，希望这份资料对大家的复习有帮助吧。之前杨晓达老师说会考青蒿素前体的生物制备过程，写个方案供参考： 答：在生物体中青蒿素的合成： 第一步是乙酰辅酶A形成FPP；第二步是通过FPP合成倍半萜紫穗槐-4，11-二烯，这一步在紫穗槐一4，11一二烯合酶作用进行的；最后一步是由紫穗槐4，11-二烯合成青蒿酸，并而形成青蒿素。（以上可以不答） 紫穗槐一4，11一二烯是青篙素生物合成的前体，紫穗槐一4，11一二烯合酶（ADS）是青篙素生物合成途径中的关键酶。青蒿素前体药物的生物制备过程： 获取紫穗槐一4，11一二烯合酶（ADS）的基因 通过PCR扩增ADS基因 将ADS基因与载体（质粒）连