安徽农业大学生物分离复习资料

1、第一章 绪论一、生物物质：泛指自然界中由生物所产生的物质或通过人类的生产活动所产生的有生命的物质或其初级加工产物，也可指自然界中可供利用的生物性原料或废弃物。二、生物技术下游加工特点：1、发酵液或培养液是产物浓度很低的水溶液2、培养液是多组分的混合物3、生物产品的稳定性差4、对最终产品的质量要求很高三、下游加工技术操作1、发酵液预处理和固液分离：目的：了解目标产物表达特性，通过固液分离、细胞破碎等方法处理发酵液，初步获得含有目标产物的溶液。操作：过滤和离心，凝聚和絮凝2、初步纯化（高通量，低选择性，低成本）目的：提高产品浓度，以提高产品纯度为辅，去除与产品有较大差异的物质。操作：沉淀、萃取、吸

2、附3、高度纯化（低通量，高选择，高成本）目的：目标产物的精制，去除与目标产物理化性质接近的杂质操作：层析、电泳、沉淀4、成品加工目的：根据商业化要求对目标产物进行加工操作：浓缩和结晶四、分离纯化操作原则1、尽可能简单、低耗、高效、快速2、分离步骤尽量少（减少损失，降低成本）3、避免相同原理的分离技术多次重复出现4、尽量减少新化合物进入待分离的溶液（避免化学污染和蛋白质变性）5、合理的分离步骤次序（原则是先低选择性，后高选择性；先高通量，后低通量；先低成本，后高成本）五、分离纯化方案评价分析指标：有效成分含量（纯度和浓度）、纯化倍数（每步的纯度/粗提液纯度）、收得率（每步的总浓度/粗提液浓度）一

3、般认为，凡是在特定实验中能较快增大纯化倍数而缓慢降低收得率的方法均属于有应用价值，反之则不宜采用。六、产品类型1、初级代谢产物/次级2、胞内物质/胞外物质第二章 加工过程蛋白质活性的稳定和保存一、蛋白质链中氨基酸残基作用：1、与活性位点有关，参与催化过程或或与底物或受体的结合过程；2、氨基酸残基的准确定位对促进和维持蛋白质三级结构是非常必要的。二、影响蛋白质稳定性的因素及对策：1、微生物污染过滤除菌；低温或冷冻保存；除去水分；慎用抗菌剂。2、温度 低温操作，避免反复冻融。3、pH PH温和，接近生理pH4、表面活性剂避免添加表面活性剂5、光照/紫外/辐射避光6、泡沫 避免产生泡沫第三章 发酵液

4、的预处理和菌体的回收一、预处理1、目的：（1）改变发酵液的物理性质，提高从悬浮液中分离固形物的速率，提高固液分离器的效率。（2）尽可能地使产物转入便于后处理的某一相中（多数为液相）。（3）去除发酵液中部分杂质，以利于后续各步操作。2、方法及作用特点：（1）加热法：加热可降低悬浮液的粘度，还可以辅助去除一些杂蛋白。（2）调节悬浮液的PH值：起聚集作用（一般用草酸或者无机酸或碱处理）（3）凝聚和絮凝：不仅能使颗粒尺寸有效增加，并且会增大颗粒的沉降和浮选速率，提高滤饼的渗透性或者在深层过滤时产生较好的颗粒保留作用。（4）使用惰性助滤剂：扩大过滤表面的适用范围（常用硅藻土、未活化的碳等）（5）加入反应

5、剂：能与发酵液中部分杂质发生作用，从而降低过滤阻力，提高过滤效率。二、絮凝和凝聚异同点：相同：都显著改善固相特点，使固相易于沉积。区别：1、凝聚添加的是电解质，凝絮添加高聚大分子量线性分子 2、机理不同。凝聚破坏颗粒电荷，使其脱稳，凝絮形成分子架桥。 3、沉淀大小不同。凝聚1mm，凝絮10mm。三、悬浮液分离利用颗粒密度、颗粒大小、颗粒的表面性质，主要采用沉淀和离心。四、常用新型过滤器：真空过滤器（转鼓真空过滤器、圆盘真空过滤器）压滤器（板框压滤器、加压叶滤器、气压罐式连续压滤器、带式压滤器）第四章 细胞破碎与分离一、细胞壁破碎计数：直接计数法和间接计数法1、 二、细胞破碎方法：固体剪切法，液

6、体剪切法，超声波法，非机械法（酶法溶胞，化学法，物理法）第五章 离心分离一、离心分离：是利用惯性离心力和物质的沉降系数或浮力密度的不同来进行的一项分离、浓缩或提炼操作。三、离心分离技术的优点：离心机和其他分离机械相比可得到含湿量低的固相和高纯度的液相，而且具有占地面积小、停留时间短、无需助滤剂、系统密封好、放大简单、过程连续、分离效率易于调节、处理量大等特点。第六章 膜分离过程一、膜分离技术是以选择性透过膜为分离介质，利用膜对混合物各组分渗透性能的差异实现分离、提纯或浓缩的新型分离技术，近似于筛选过程，故可按分离离子或分子的大小予以分离。根据推动力本质的不同，可具体分为四类：1、以静压力差为推

7、动力的过程：微滤、超滤、纳滤和反渗透2、以蒸气分压差为推动力的过程：膜蒸馏、渗透蒸发3、以浓度差为推动力过程：渗析4、以电位差为推动力的过程：离子交换膜电渗析（电渗析）微滤：细菌、病毒、悬浮颗粒 超滤：蛋白质、酶等大分子有机物 纳滤：抗生素、合成药、染料、二价及多价盐、二糖等 反渗透：单价盐二、浓差极化：指在超滤过程中，水透过膜，因而在膜表面的溶质浓度增高，形成梯度，在浓度梯度的作用下，溶质与水以相反方向扩散，在达到平衡状态时，膜表面形成一溶质浓度分布边界层，它对水的透过起着阻碍作用。 通过改变诸如速度、压力、温度和料液浓度之类的操作参数，可以降低浓差极化效应，所以这一现象是可逆的。三、膜的分

8、类：按孔径大小可分为超滤膜和微滤膜。除菌选用微滤膜，浓缩蛋白选用超滤膜。四、膜运行的方式：死端过滤、错流过滤。死端操作：所有料液均被强制通过膜，被截留的颗粒在膜表面聚集，滤饼厚度不断增厚，料液的通过阻力不断增加，膜的通量时间衰减的很快错流操作：料液与膜平面平行流动，由于浓缩液不断将截留的颗粒带出，则膜表面的滤饼层可以稳定在一个稳定的水平上，从而膜的通量不至于衰减太快，料液的流速影响着膜面边界的厚度，提高膜面流速有利于降低浓度极化的影响，提高通透量五、膜污染：随着操作时间的增加，膜透过流速的迅速下降，溶质的截留率也明显下降的现象。原因：被处理的微粒、胶体粒子和溶质分子与膜发生物理化学相互作用或机

9、械作用从而引起在膜面或膜孔内吸附、堵塞，使膜产生透过流量与分离特性的不可逆变化现象，主要是由膜的劣化和水生物（附生）污垢所引起的。1、膜的劣化：化学性劣化、物理性劣化、生物性劣化2、水生物（附生）污垢：吸着层、堵塞改善膜污染方法：1、样品处理。料液进行预处理，除去较大颗粒；调节pH远离蛋白质等电点。2、采取错流操作并增加紊流器3、控制溶液温度、流速、流动状态、压力等。4、膜组件的清洗。物理清洗/化学清洗。第十章 溶剂萃取1、液-液萃取是一种利用物质在两个互不相溶的液相中（料液和萃取剂）分配特性不同来进行分离的过程。2、萃取溶剂性质：1、互不相溶两相2、分相3、分配差异3、优点：1、萃取过程具有

10、选择性2、能与其他需要的纯化步骤相配合3、通过转移到具有不同物理或化学特性的第二相中，来减少由于降解引起的产品损失4、可从潜伏的降解过程中分离产物5、适用于各种不同规模6、传质速度快，生产周期短，便于连续操作，容易实现计算机控制。4、高聚物的不相溶性：各个聚合物分子，都倾向于在其周围有相同形状，大小和极性分子，同时由于不同类型分子间的斥力大于它们同它们亲水性有关的相互吸引力，因此聚合物发生分离，形成两个不同的相第十二章 双水相萃取一、双水相萃取：利用溶质在两个互不相溶的水相之间的分配系数不同而进行分离的萃取技术。二、形成机制：聚合物不相溶性和盐析作用。聚合物不相溶性：各个聚合物分子，都倾向于在

11、其周围有相同形状、大小和极性分子，同时由于不同类型分子间的斥力大于同他们的亲水性有关的相互吸引力，因此，聚合物发生分离形成两个不同的相。常见的双水相体系是PEG/Dex-tran和PEG/无机盐体系、三、类型：高聚物/高聚物常用PEG/DEX，平衡后上相富含PEG，下相富含DEX。高聚物/盐常用PEG/无机盐（磷酸钾、硫酸铵、氯化钠等），平衡后上相富含PEG，下相富含无机盐。四、相图系线（直线TMB）：系线上各点处系统总浓度不同，但均分成组成相同（T,B）而体积不同的两相。（两相体积近似服从杠杆原则，即： ）K点：系线的长度是衡量两相之间差别的尺度。系线越长，两相间差别越大，反之则越小。在K点

12、系线长度趋近为0,两相差别消失，任何溶质在两相间的分配系数均为1，此点为临界点。双节线（曲线TKB）：上方为双水相，下方为均一相。五、混溶性六、影响物质分配平衡的因素：1、聚合物组成。（1）聚合物的类型，不同聚合物的水相显示不同的疏水性。（疏水性：葡萄糖硫酸盐甲基葡萄糖葡萄糖聚乙二醇聚丙三醇）（2）聚合物的分子量。在聚合物浓度不变的前提下，降低聚合物的分子量，被分配的蛋白质或核酸等生物大分子或细胞碎片和细胞器等颗粒，将更多的分配在该相。2、盐类。盐的种类和离子强度、pH值。3、溶质的物理化学性质。分子量、等电点等。4、体系的温度。第十三章 超临界流体萃取法一、1、超临界流体：温度和压力略超过或

13、靠近临界温度和临界压力、介于气体和液体之间的流体。2、超临界流体萃取技术：利用超临界流体作为萃取剂，从液体或者固体中萃取出某些成分并进行分离的技术。二、超临界流体性质：超临界流体的密度近似于液相的密度，溶解能力也基本相同，此外传递性质数值的范围在气体和液体之间，即超临界流体是一种低黏度，高扩散系数，易流动的相三、影响超临界流体选择因素：临界密度、临界温度、临界压力四、超临界CO作为流体萃取的特点：1、CO的临界温度接近于室温（31.1），适合于热敏性物质完整保留生物活性，而且能把高沸点、低挥发度、易热解的物质分离出来。2、CO的临界压力（7.39MPa）适中，目前工业水平易达到。3、CO的临界

14、密度是常用超临界流体溶剂中较高的，即溶解能力较好。4、CO无毒、无味、不燃、不腐蚀，价廉，易于精制，易于回收无污染。六、影响目标产物溶解度的因素：1、压力：随着压力增大，溶解度增加。2、温度：随着温度升高，溶解度先降低后升高。（随着温度升高，溶解度降低。另一方面，温度会影响物质蒸气压，温度升高，溶解度升高。）七、超临界流体萃取的优缺点：优点：1、超临界流体萃取同时具有液相萃取和精馏的特点。 2、其独特优点是可以通过调节温度和压力控制其萃取能力。 3、超萃中的溶剂回收很简单，并能大大节省能源。 4、条件温和，避免高温造成热稳定性差的物质变性或破坏，且无残留。 5、可以根据萃取对象来选择萃取剂和添

15、加夹带剂，避免高压影响。缺点：1、高压下萃取相平衡较复杂，物系数据缺乏。 2、高压装置和高压操作，投资费用高，安全要求高。 3、超临界流体中溶质浓度低，需要大量的溶剂循环。 4、超临界流体萃取过程中固体物料较多，连续化生产较困难。第十六章 沉淀法一、沉淀法：通常加入试剂，改变溶剂和溶质的能量平衡来降低其溶解度，是生物产物离开溶液生成不溶性颗粒，沉降析出的方法。二、沉淀和结晶异同：沉淀和结晶在本质上同属一种过程，都是新相析出的过程。其区别在于形态的不同，同类分子或离子以有规则排列形式而析出称结晶，同类分子或离子以无规则的紊乱排列形式析出称为沉淀。三、沉淀法优缺点：优点：设备简单、成本低、原材料易

16、得、便于小批量生产，在产物浓度越高的溶液中沉淀越有利，收率越高。缺点：所得沉淀物可能聚集多种物质，或含有大量盐类，或包裹着溶剂，所以沉淀法所得的产品纯度通常比结晶低，过滤也较困难。四、蛋白质沉淀的方法：中性盐盐析PH沉淀法有机溶剂沉淀法非离子型聚合物沉淀法聚电解质沉淀法金属离子沉淀法五、蛋白质形成稳定胶体溶液的因素：形成水化层和双电层影响蛋白质溶解度的因素：蛋白质性质（分子大小，氨基酸组成，蛋白质结构）溶液性质（PH，温度，离子强度，溶剂可利用度）六、盐溶与盐析盐溶：蛋白质溶解度随盐浓度增高而上升的现象。盐析：蛋白质在溶液中形成了稳定的体系，向其中加入盐，破坏了蛋白质的水化层和双电层，盐浓度增

17、高到一定数值时，蛋白质溶解度随盐浓度增加而降低，最终相互聚集并从溶液中析出的现象。Cohn公式：与Ks：常数S：溶解度 M：离子强度该经验公式主要描述了在蛋白质种类、温度、PH以及盐种类一定的情况下，蛋白质溶液度与离子强度的关系。表示盐浓度为零时，蛋白质溶解度的对数值，在图中表现为截距。七、蛋白质沉淀分离方法1、中性盐盐析法：加入中性盐盐析 （1）、“Ks”分级盐析法：在一定pH值及温度条件下，改变盐的浓度（即离子强度）达到沉淀的目的。主要用于粗提蛋白。 （2）、“”分级盐析法：在一定的离子强度，改变溶液的PH值及温度，达到沉淀的目的。主要用于分离纯化。2、等电点沉淀法：将pH值调到等电点3、

18、有机溶剂沉淀：加入可溶性有机溶剂4、非离子型聚合物沉淀法：加入非离子型亲水性聚合物5、聚电解质沉淀法：加入聚电解质絮凝6、金属离子沉淀法：加入多价金属离子第十八章：色谱考点复习：一、保留值：保留时间a：死时间t0。测定流动相平均线速时，可用柱长L与t0的比值计算，即 = L/t0b：保留时间tr。试样从进样到柱后出现峰极大点时所经过的时间，称为保留时间。c：调整保留时间tr。某组分的保留时间扣除死时间后，称为该组分的调整保留时间，即 tr= tr - t0二、定量和定性鉴定定性依据是：标准物质进行对照定性。（在一定色谱系统和操作条件下，每种物质都有确定的保留值，比较样品组分与已知组分的保留值，

19、即可鉴定每个色谱峰各代表何种物质）。还可以用相对保留值定性，化学反应条件定性，两谱联用定性。定量依据是：在实验条件一定时，峰面积或峰高与组分的含量成正比，因此可以利用峰面积或峰高定量。其定量方法有归一化法，内标法和外标法。三、高效液相与气相色谱的区别1、原理不同。GC采用气体为流动相流经装有填充剂的色谱柱进行分离测定的方法。物质或其衍生物汽化后，被载气带入色谱柱进行分离，各组分先后进入检测器，用记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。HPLC是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分

20、离后，依次进入检测器，色谱信号由记录仪或积分仪记录。2、分析对象和范围不同。GC只限于气体和低沸点的稳定化合物，占有机物的总数的20%。HPLC分析高沸点、高分子量的稳定或不稳定的化合物，占有机物80%。3、流动相的选择不同。GC的流动相是有限的几种惰性气体，只起运载作用，对组分作用小。HPLC采用流动相为液体或几种液体混合，可供选择多。除运载作用外，还可以与组分作用，并可与固定相对组分产生的作用产生竞争，即可通过溶剂来控制和改善分离。4、操作温度不同。GC需高温，HPLC在常温下即可进行。四、色谱检测系统分类1、浓度型和质量型检测器（根据检测器响应原理）2、通用型和选择型检测器（根据应用范围

21、）3、破坏型检测器和非破坏型检测器（根据工作过程）五、为什么要进行色谱柱老化？新色谱柱含有溶剂和高沸点物质，所以基线不稳，出现鬼峰和噪声；旧柱长时间未用，也存在同样问题。一般采用升温老化，即从室温程序升温到最高温度并在高温段保持数小时。（新柱老化时最好不要连接检测器）TCD第十八章、层析考点：一、层析：原理：主体介质由互不相溶的流动相和固定相组成，利用混合物中各组分物理化学性质的差异（如吸附力、分子形状及大小、分子亲和力、分配系数等），使各组分在两相中的分布程度不同，从而使各组分以不同速度移动而达到分离的目的。二、列举四个层析技术，并分析原理。1、吸附层析：利用吸附剂吸附溶质分子富集表面的能力

22、而进行纯化分离的技术。原理：利用吸附剂对液体或气体某一组分具有选择吸附的能力，使其富集在吸附剂表面，从而达到从混合物中分离的目的。2、离子交换层析：利用离子交换剂与溶质分子离子交换作用而进行分离的技术原理：以离子交换剂为固定相，利用它与流动相中带电溶质分子间进行离子交换而达到分离纯化的目的。离子交换剂组成：载体，电荷基因，反离子3、凝胶过滤层析：是利用某些凝胶对于不同组分因分子大小而阻滞作用不同的差异进行分离的技术。原理：利用凝胶层析介质（固定相）交联度的不同所形成的网状孔径的大小，在层析时能阻止比网孔直径大的生物大分子通过。利用流动相中溶质分子量的大小差异而进行分离纯化的一种方法。4、 分配

23、层析：通过被分离组分在固定相与流动相之间的分配性质（溶解能力）不同而实现分离纯化的技术。5、 层析的特点 优：分辨率高应用范围广设备简单，操作方便 缺：处理量小，操作周期大，不能连续操作原理：被分离组分在固定相与流动相之间的分配性质（溶解能力）不同而实现分离。三、层析组成部件：固定相+流动相+支持物柱层析部件：蠕动棒、色谱柱、检测器、记录仪、以及部分收集器。离子交换剂组成部分：载体+电荷基团+平衡离子（阳离子交换剂功能基团带负电荷交换阳离子）四、离子交换剂的基本原理：是用离子交换剂（具有离子交换性能的物质）作固定相，利用它与流动相中的带电离子进行可逆的交换性质来区分带电离子型混合物的层析方法，

24、溶液中的带电粒子因为固定相之间结合力差异而得到分离。离子交换剂：载体+电荷集团+平衡离子（反离子）阳离子交换剂：功能集团带负电电荷，与阳离子交换。阴离子交换剂：功能集团带正电荷，与阴离子交换。阴离子交换树脂对化学试剂及热都不如阳离子交换树脂稳定。五、交换容量：上样量由有效交换容量决定，非总交换容量。影响交换容量因素：筛孔、离子强度、PH蛋白质进行离子交换时，上样量不是理论量，只占40%-50%，上样量由有效交换量决定。六、分离PI分别为4,5,6,7的蛋白质。（电泳、离子交换层析）原理：选择阳离子交换剂，缓冲液pH为4.5。上样时，PI为4的蛋白被洗脱出来，依次用pH为5，6，7的缓冲液把PI

25、为5,6,7的蛋白质洗脱下来。操作步骤：1、选择合适的阳离子交换剂，并进行处理、再生和转型。2、装柱。3、用pH为4.5的缓冲液进行平衡。4、上样。将蛋白质混合物进行上样，则PI为4的蛋白会被直接洗脱下来，选用不同烧杯盛放。5、洗脱。再依次用pH为5，6，7的缓冲液，即可把PI为5,6,7的蛋白质洗脱下来，选用不同烧杯盛放。七、测定分子量大小（SDS-PAGE电泳、凝胶层析）答：SDS-PAGE测蛋白质分子量：迁移距离只与分子量大小有关，与其他无关，分子量大结合的电荷数多，跑得快，蛋白质的流动速率取决于其分子量大小差异，所以凝胶过滤层析中洗脱体积与M呈线性关系。八、缓冲液的离子组成1、缓冲液的

26、PK值要接近所用的PH2、采用阳离子交换剂应选用阴离子缓冲液，如磷酸盐。3、采用阴离子交换剂应选用阳离子缓冲液，如Tris Hcl九、凝胶过滤层析分级范围取决于：排阻极限和渗入极限。十、定量方法：归一化法，外标法，内标法，校正曲线定量法。外标法计算：需要标样，目标组分被检测到就可定量结果，测定条件要一致。1、渗入极限：能够完全进入到凝胶网络内部的最大分子的相对分子量2、高效液相与气相色谱的差别HPLC 适用于高沸点，大分子，强极性和热稳性差的化合物的分析流动相具有运载样品分子和选择性分离双重作用常温下进行，不需要高柱温GC 适用于沸点较低，热稳性好的中小分子化合物分析流动相只有运载样品分子的能

27、力样品需气化，分离过程恒温3、正向HPLC原理：分配作用 反相HPLC原理：疏水作用4、排阻极限：不能进入到凝胶网络内部的最小分子的相对分子量第十九章、电泳考点：一、概念1、 电泳：带电颗粒在电场的作用下，向着与其电性相反的电极方向移动。电泳技术：根据各种带电粒子在电场中的迁移速度的不同而对物质进行分离的一类实验技术。2、 双向电泳：第一向进行等电聚焦，蛋白质沿PH梯度分离至各自等电点，随后在沿垂直的方向进行SDS-PAGE，按照分子量大小进行分离。特点：分辨率高，高重复率。3、 等电聚焦：蛋白质分子在偏高其等电点的PH条件下带有电荷，因此可以在电场中移动，当蛋白质迁移至其等电点位置时，其静电

28、荷数为零。在电场中不在移动，就会产生聚焦现象，形成蛋白质区带，由此可将不同等电点的蛋白质分开。4、 电泳速率：V=EQ/(6r)，V-电泳速率，E-电场强度，Q-颗粒所带电荷量，R-颗粒半径，-样品粘度。影响电泳速率的因素：与电场强度和带电颗粒的电荷成正比关系，与颗粒半径以及介质粘度成反比关系。二、带电颗粒电场中迁移速率与哪因素有关？颗粒性质、分子量大小、颗粒形状、电荷大小三、凝胶孔径大小与T和C有关有效孔径随着T增加而减少。T一定时，b含量会影响孔径大小。四、在不同支持物上的区带电泳：1、纸电泳（滤纸、玻璃纤维）2、醋酸纤维膜电泳3、凝胶电泳（琼脂、琼脂糖、淀粉、聚丙烯酰胺）4、粉末电泳（淀

29、粉、纤维素、葡萄糖凝胶、聚氯乙烯、玻璃等）五、SDS-PAGE分离效应（分辨率高的原因）1、浓缩效应。可压缩蛋白2、SDS与电荷效应。可消除蛋白质分子形状差异和电荷效应3、分子筛效应六、SDS作用：消除氢键，消除蛋白质样品间分子形状差异；在添加还原剂还原二硫键后，与蛋白质定量结合，消除电荷效应七、SDS-PAGE电泳原理迁移距离只与分子量大小有关。因为蛋白质在电泳中受四种因素影响，即蛋白性质、电荷、形状、分子量大小、。SDS带有大量负电荷，能与蛋白结合，屏蔽了电荷效应；并且能够消除氢键从而消除蛋白样品中分子形状的差异，使得蛋白质的迁移率只取决于其分子量大小差异，所以SDS-PAGE电泳中迁移距

30、离与M呈线性关系。八、等电聚焦基本原理及优点：原理：利用电场和pH梯度的复合作用来实现两性物质的选择分离。优点：混合物可以达到完全分离，而且只要电场保持不变，扩散和对流迁移就不会影响分离的有效性。九、聚丙烯酰胺凝胶：是由丙烯酰胺和N，N-亚甲基双丙烯酰胺按一定比例（19:1）在化学试剂如过硫酸铵（APS）-四甲基乙二胺（TEMED）或者核黄素-四甲基乙二胺（TEMED）或光的催化作用下聚合而成的。单体：丙烯酰胺和N，N-亚甲基双丙烯酰胺。催化剂：过硫酸铵（AP）或核黄素提供自由基加速剂：四甲基乙二胺。十、曲带电泳（不同支持物上的曲带电泳）低电泳 优：设备操作简单 缺：分辨率差，电渗现象醋酸纤维

31、素电泳 优：设备操作简单，样品用量少 缺：分辨率差琼脂糖凝胶电泳 优：快速，分辨率高 缺：电渗现象严重PAGE 优：孔径可调节，不发生电渗，样品用量少，分辨率高 缺：高浓度胶难剥离一、名词解释1、盐析：蛋白质在溶液中形成了稳定的体系，向其中加入盐，破坏了蛋白质的水化层和双电层，盐浓度增高到一定数值时，蛋白质溶解度随盐浓度增加而降低，最终相互聚集并从溶液中析出的现象。2、“Ks”分级盐析法：在一定pH值及温度条件下，改变盐的浓度（即离子强度）达到沉淀的目的。主要用于粗提蛋白。3、“”分级盐析法：在一定的离子强度，改变溶液的PH值及温度，达到沉淀的目的。主要用于分离纯化。4、聚合物不相溶性：各个聚合物分子，都倾向于在其周围有相同形状、大小和极性分子，同时由于不同类型分子间的斥力大于同他们的亲水性有关的相互吸引力，因此，聚合物发生分离形成两个不同的相。5、双水相萃取：利用溶质在两个互不相溶的水相之间的分配系数不同而进行分离的萃取技术。6、超临界流体：温度和压力略超过或靠近临界温度和临界压力、介于气体和液体之间的流体。7、超临界流体萃取技术：利用超临界流体作为萃取剂，从液体或者