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山西省太谷二中“三五三”学导型课堂工具单 2010级生物学科组多聚酶链式反应扩增DNA片段问题解决评价单设计人: 审核人: 序号:X1-5班级: 组名: 姓名: 时间:2012.04.10一、选择题(本题共20小题,每小题2.5分,满分50分)1如图表示PCR扩增的产物,请分析它是哪次循环的产物()A第一次循环 B第二次循环C第三次循环 D第四次循环2PCR仪实质上是一台自动调控温度的仪器,下列关于它调控不同温度的目的叙述错误的是()A95 ,使DNA分子变性,解开螺旋B55 ,使DNA分子两条单链与两种引物结合C72 ,使DNA分子开始复制,延伸D72 ,使DNA分子恢复双螺旋结构,恢复活性3下列关于DNA复制的叙述,不正确的是(多选)( )ADNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从5端延伸DNA链BDNA复制不需要引物C引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合DDNA的合成方向总是从子链的3端向5端延伸4PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比,主要有两点不同,它们是()PCR过程需要的引物是人工合成的单链DNAPCR过程不需要DNA聚合酶PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实现的PCR过程中,DNA不需要解旋,直接以双链DNA为模板进行复制ABCD5DNA的复制需要引物,其主要原因是()A可加快DNA的复制速度B引物可与DNA母链碱基互补配对结合C引物的5端有助于DNA聚合酶延伸DNA链DDNA聚合酶只能从3端延伸DNA链6PCR利用了DNA的热变性原理,PCR仪实际上也是一种能自动调控温度的仪器。下列对PCR过程中“温度的控制”的说法,错误的是()APCR反应需要高温,是为了确保模板是单链B延伸的温度必须大于复性温度,而小于变性温度C要用耐高温的DNA聚合酶D需要耐高温的解旋酶7从第二次循环开始,复制的DNA片段呈_扩增()A直线 B指数C对数 D不变8.下图为细胞内DNA复制过程示意图,该过程在体外也可进行,以获得大量相同的DNA片段,该项技术称之为PCR技术,又称多聚酶链式反应,请分析回答:(1)PCR过程与细胞内DNA复制相比,主要有两点不同:_、_。(2)PCR技术过程的三个步骤:_、_、_。(3)假设PCR过程中,只用一条DNA片段作为模板,请计算30次循环后,反应物中大约有多少个这样的DNA片段?_。(4)PCR技术能在几小时内将极微量的DNA片段特异性地扩增上百万倍,从而解决了样品中DNA含量低,难以分离的难题。试举两例,说明PCR技术的应用。_。9.请回答基因工程方面的有关问题:(1)利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。从理论上推测。第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为_。在第_轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。第1组:_;第2组:_。(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能,这是因为_。1-7 A D ABD C D D B 8.答案:(1)PCR过程的引物是一小段单链DNA或RNA,而细胞内DNA复制的引物是RNAPCR过程是高温变性解旋,不需要解旋酶(2)变性复性延伸(3)230(4)刑侦案件;亲子鉴定;凝难疾病的诊断;基因序列分析等(任选两例)9.答案:(1)15/16三(2)引物和引物局部发生碱基互补配对而失效引物自身折叠后会出现局部碱基互
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