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生物制药学试题3一、名词解释（每题2分，共20分）1、 生物制药2、 tPA3、 McAb4、 IFN5、 rHu CSF6、 细胞因子7、 IL8、 脱分化9、 佐剂10、CDR二、填空题（每题2分，共20分）1、 生物药物包括 、 和 。2、 按学科领域的不同，生物制药可分为 、 、 和 。3、 植物培养基中含有 、 、 、 、 、 等成分。4、 植物激素包括 、 、 、 、 等五类。5、 农杆菌包括 和 两类。6、 体外培养的动物细胞根据其生长方式可分为 、 和 三类。7、根据复制的方式（拷贝数）的不同，质粒可分为两大类型 和 ，其中 是基因工程中常用的类型。8、原核表达载体可分为 、 和 三种类型。9、筛选单克隆抗体阳性克隆的方法有 、 和 。10、抗体的恒定区与 有关，而抗体的可变区与 有关。三、单项选择题（每题1分，共10分）1、 基因工程制药中常用的限制性内切酶是（）。A、I型 B、II型C、III型 D、IV型2、 Klenow酶与DNA聚合酶I相比不具有()的活性。A、53核酸内切酶活性B、35核酸内切酶活性C、53核酸外切酶活性D、35核酸外切酶活性3、 下列何种激素不属于生长素？A、2,4DB、IBAC、NAAD、6BA4、 植物激素（ ）是从经过高压灭菌处理的鲱鱼精细胞DNA中发现的。A、腺嘌呤 B、玉米素C、6苄基腺嘌呤D、激动素5、下列何种DNA聚合酶是不依赖模板的DNA聚合酶？（）A、DNA聚合酶IB、DNA聚合酶I大片段C、逆转录酶D、末端转移酶6、在下列酵母克隆载体中（）不能在染色体外自主复制。A、YIp质粒 B、YRp质粒C、YEp质粒D、YCp质粒7、（）在动物免疫时需要添加佐剂。A、颗粒性抗原 B、细胞性抗原C、可溶性抗原D、半抗原8、人鼠嵌合抗体是由（）组成的？A、人源抗体的V区+鼠源抗体的C区 B、人源抗体的Fab区+鼠源抗体的Fc区C、人源抗体的C区+鼠源抗体的V区 D、人源抗体的Fv区+鼠源抗体的Fc区9、下列何种药物不属于人工牛黄的成分？（ ）A、胆酸 B、胆红素C、胆碱D、胆固醇10、能使肝素失去活性的药物是（ ）。A、鱼精蛋白 B、硫酸软骨素C、透明质酸D、弹性蛋白酶四、简答题（每题5分，共20分）1 用于工业生产的动物细胞有哪几类？各有何特点？2 与克隆载体相比表达载体应具备哪些条件？3 试述溶血和凝血的过程，并请说明抗凝血药物是如何发挥作用的？4请列举第二代抗体药物单克隆抗体药物的优缺点。五、论述题（每题10分，共30分）1、 试列举蛋白质类药物分离纯化的方法。2、 试述研制单克隆抗体的工艺流程。3、 请说明HAT选择培养基筛选脾瘤杂交瘤细胞的机理。答案3一、名词解释1、 生物制药是指利用生物体、生物组织及其代谢产物或生物过程生产药物的技术。2、 组织型纤溶酶原激活剂，抗凝血药，抑制纤溶酶的产生。3、 单克隆抗体，针对一个抗原决定簇产生的抗体，由一个B淋巴细胞产生。4、 干扰素(Interferon)是人体细胞分泌的一类活性蛋白质，可以抗病毒、抗肿瘤、提高人体的免疫功能。5、 重组人集落刺激因子，是一组控制粒细胞、单核巨噬细胞及造血细胞增殖和分化的糖蛋白。6、 细胞因子是由免疫细胞或相关细胞分泌的高活性的多肽或蛋白质，能调节机体的生理功能，参与各种细胞的生长、增殖、分化、凋亡。包括细胞生长因子和细胞生长抑制因子。7、 白细胞介素，由白细胞或其它体细胞产生又在白细胞和其它细胞间起调节和介导作用，是一类重要的免疫调节剂，能刺激淋巴细胞的增殖，抗肿瘤。8、 在离体条件下，外植体分化的细胞转变成分生状态，形成胚性细胞团（胚性愈伤组织）的现象。9、 佐剂定义：又称免疫增强剂，伴随抗原物质注射机体，可增强抗原的免疫原性，佐剂可使弱抗原物质成为有效的抗原。10、 互补决定区，在抗原V区上有三个，决定了抗体和抗原的特异结合。二、填空题11、 天然生化药物、生物制品和生物技术药物。12、 发酵工程制药、基因工程制药、细胞工程制药和酶工程制药13、 大量元素、微量元素、铁盐、碳源、维生素、氨基酸14、 生长素、细胞分裂素、赤霉素、脱落酸和乙烯。15、 根癌农杆菌、发根农杆菌16、 贴壁依赖型、非贴壁依赖型和兼性贴壁细胞17、 严谨型质粒和松弛型质粒，松弛型质粒18、 融合型表达载体、非融合型表达载体和分泌型表达载体19、 放射免疫、酶联免疫、免疫荧光技术10、异种抗原性、与抗原的特异结合三、选择题1、B； 2、C； 3、D； 4、C； 5、D； 6、A； 7、C； 8、C； 9、C ； 10、A 四、简答题1、原代细胞：组织、器官粉碎消化获得，很难保证细胞一致性，含多种细胞，费时费力，获得数目有限二倍体细胞：原代细胞经传代、筛选、克隆化后得到了纯化的单形细胞。可传代扩增，但寿命有限转化细胞：染色体异倍化，细胞具有无限增殖的能力，更适于工业化生产，但有致癌的危险。2、1. 具有强启动子，能为RNA聚合酶所识别 2具有强终止子，使RNA聚合酶只转录目的基因而不转录其它无关基因。3所产生的mRNA 必须具有翻译起始信号（原核细胞须有起始密码AUG和SD序列），以便转录后能顺利翻译。4具有阻遏子，使启动子受到控制，只有当诱导时才能进行转录，以获得外源蛋白质表达合成的最佳时机。3、抗血栓药包括凝血因子抑制剂（肝素抑制凝血酶原激活剂的产生）和纤溶酶原激活剂 (尿激酶、tPA)4、具有良好的均一性和高度的特异性，单克隆抗体在疾病的诊断中得到广泛应用。但用于治疗时有缺陷：（1） 是鼠源性的，在人体内反复应用会引起人抗鼠抗体（HAMA）反应，发生排斥，从而降低疗效，甚至可引起过敏反应。（2） 分子量大，难以进入相关组织发挥药效。五、论述题1、（1）按溶解度不同进行分离的方法 蛋白质、酶的初步纯化往往用沉淀法。蛋白质形成胶体的稳定因素：水化层和同种电荷，打破即沉淀。常用的有盐析法、有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、与靶物质结合沉淀法（如抗体抗原）等。（2）按分子大小分离的方法 这类方法有超滤法和透析法、分子筛层析法、密度梯度离心法等。其中透析法可用于生物大分子物质的浓缩、分级和脱盐。（3）按所带电荷不同进行分离的方法 氨基酸、多肽、蛋白质、酶均为两性电解质，它们具有等电点，在离开等电点的pH时不同蛋白便会带不同的电荷。利用带电性质进行分离。利用电学性质进行分离的方法有离子交换柱层析法、电泳法（醋酸纤维薄膜电泳、PAGE、等电聚焦）等。（4）亲和层析法 大部分生物活性物质都有其作用的靶物质（配基 ），如酶与底物（或抑制剂）、抗原与抗体、激素与受体等，利用化合物的之间的特异的亲合作用设计的层析分离技术称为亲和层析。蛋白质能与配基特异结合，亲和层析分离专一性强，操作简便。2、以研究的Ag对鼠进行免疫，取脾细胞培养骨髓瘤细胞细胞融合（PEG 融合）选择培养基筛选融合细胞针对融合细胞产生的抗体进行筛选克隆培养，分离，再克隆培养对单克隆抗体进一步鉴定，大量制备3、细胞融合后可以产生脾脾、脾瘤、瘤瘤杂交细胞以及未融合的细胞，故需采用HAT选择培养基筛选出脾瘤杂交细胞。HAT选择培养基的成份H：次黄嘌