试验动物及试验动物室.doc

实验动物及动物实验室管理规范复旦大学附属中山医院3复旦大学附属中山医院实验动物中心简介复旦大学附属中山医院实验动物中心位于枫林路180号中山医院内，是中山医院生物医学中心（ZS-BMC）的主要下属机构之一，主要为中山医院科研人员提供普通级和清洁级中小动物饲养和实验研究服务。实验动物中心现有工作人员6人，其中高级职称一人，中级职称一人，本科以上学历3人。拥有一栋使用面积约600m2的独立动物饲养实验综合楼，其中有8间共150m2的可以饲养普通级猪，犬的中动物室，两间共40m2的可以饲养普通级兔、大鼠和豚鼠的小动物室，两间40m2的普通动物手术室，包含一间手术室约90m2的屏障系统和30m2的IVC系统，可以饲养清洁级大、小鼠和豚鼠。另有约40m2的标准细胞实验室，可以进行细胞生物学实验。最多可以同时饲养清洁级小动物1000笼，普通级小动物120笼，普通级中等动物80只。最多可以同时供8人开展清洁级动物实验和两台动物手术。另外中心还有约150m2的动物实验教室，可以同时为50名学生开展20台动物术实验。目录实验动物管理委员会 . . . . . . .2实验动物保护、福利、伦理小组. . . . .3动物中心实验人员操作规章制度. . . . .4应急预案. . . . . . . . .8实验动物人道处死与尸体的处理制度. . . . .12外来人员进入动物中心标准操作规程13灭菌设备标准操作规程14实验动物购买使用标准操作规程15实验动物标记标准操作规程16饲料、垫料购买使用标准操作规程17人员进出屏障系统标准操作规程18实验用品进出屏障系统标准操作规程19动物进出屏障系统标准操作规程20动物饮用水、饲料进入屏障系统标准操作规程21动物笼具、垫料，无菌衣进入屏障系统标准操作规程22人员进出IVC系统标准操作规程23实验用品进出IVC系统标准操作规程24动物进出IVC系统标准操作规程25动物饮用水、饲料进入IVC系统标准操作规程26动物笼具、垫料，无菌衣进入IVC系统标准操作规程28超净台使用标准操作规程29清洁级动物饲养管理标准操作规程30普通级动物饲养管理标准操作规程31动物中心清扫与消毒标准操作规程32动物中心空调系统维护保养标准操作规程33附件：动物中心常用记录表格复旦大学附属中山医院实验动物管理委员会主任：朱同玉成员：姜红 张博恒 王向东 刘银坤 邹云增 李卡1. 贯彻落实实验动物管理的各项法规，结合本单位的实际情况制订并落实适合于本院实施动物管理的各项规章制度和操作规程。2. 对本院实验动物的发展及动物实验设施建设的发展做出规划并具体实施。3. 指导本院实验人员正确合理地使用实验动物。4. 组织本院从事实验动物和动物实验的人员进行岗位技术培训。5. 接受上海市实验动物管理委员会的指导和监督检查。6. 开展和其他单位实验动物部门的学习交流，共同提高实验动物的饲养管理水平。36复旦大学附属中山医院实验动物保护、福利、伦理小组组长：王向东组员：姜红 张博恒 邹云增 李卡1、 负责本单位实验动物保护、福利、伦理事项，制定相关规范。2、 对本单位的动物实验方案进行伦理学审核。督促指导动物实验人员执行伦理规范。3、 开展实验动物福利、伦理方面的交流。实验动物福利的基本原则：尽可能减少动物实验，对必须进行的动物实验要有明确的规定和限制，将实验动物的痛苦减少到最低程度。1. 坚决避免没有科学目的的动物实验。2. 如果有可能用替代方法的话，尽量应用替代方法，减少动物的使用量。3. 如果实验中有引起实验动物疼痛的因素，应在实验前采取必要的措施以防范或减轻疼痛。4. 对于一次性的动物实验，实验结束后，应该迅速采取相应措施，使其“安乐死”。一般大、小鼠采取颈椎脱臼法，兔子耳缘静脉注射空气针。5. 在所有引起慢性疼痛的实验中，应尽可能地减轻其疼痛或消除其恐惧，实验结束后，必须进行特殊照料。6. 实验过程中，抓取动物时动作要轻柔，切忌粗暴对待动物。禁止戏弄动物。7. 保证所有实验动物有丰富的饲料和清洁的饮用水供应，为实验动物提供足够的空间和舒适的温湿度环境。8. 对实验动物进行手术应避免暴露于非实验人员和其它实验动物面前。动物中心实验人员操作规章制度实验人员使用动物中心制度1. 到动物中心进行实验的人员必须经过培训取得实验动物上岗证。2. 到动物中心进行实验的人员必须学习并严格遵守中山医院实验动物中心管理规范。3. 实验人员至少在实验前一周到动物中心填写“动物实验伦理审查申请书”一式两份，一份申请人留存，一份由动物中心交医院实验动物管理委员会审批，经批准后或根据审批意见修改的实验方案得到批准后方可开始实验。批件由动物中心存档。4. 实验人员至少在实验前一周到动物中心签订“动物中心使用协议书”一式两份，和动物中心分别保存。5. 根据“动物中心使用协议书”估算的实验费用，实验方预付50%定金。动物中心收到定金后为实验人员安排动物饲养室和笼位。6. 根据上海市实验动物管理规定，实验动物必须到有资质的“实验动物生产单位”购买。实验人员至少在实验前一周到动物中心填写“实验动物订购申请表” 一式两份，预付80%现金为定金，由动物中心工作人员到合法单位代为购买。申请表一份申请人留存，一份在实验人员签收后由动物中心存档。因客观原因无法在实验人员要求进驻日期内购买到所需动物的，动物中心至少比进驻日期提前三天通知申请人。7. 动物中心购买到订购动物后通知实验人员签收并现金付清剩余费用，动物中心应提供发票及相关证明文件，实验人员有权拒绝接受相关文件不全的动物。8. 非动物中心购买的动物一律不得进入动物中心。9. 实验人员不得带进危害他人和其它动物健康的有毒有害器材或试剂，包括生物制品（如天然或基因修饰病原体，活载体，细胞, 血清等），放射性物质,腐蚀性物质,致癌性物质，易燃易爆化学品等，以及包含上述物质的器材。确需实验需要，以个案在填写“动物实验伦理审查申请书”同时填写“动物实验有毒有害器材、试剂使用申请表” 一式两份，一份申请人留存，一份由动物中心交医院实验动物管理委员会审批。经批准后或根据审批意见修改的实验方案得到批准后方可开始实验。批件由动物中心存档。10. 根据国家标准，动物饲养室应有规则的明暗交替时间。动物中心饲养室的开灯时间为8:00-20:00, 实验人员应合理安排实验在此段时间进行。如有特殊需要在晚上实验，必须向动物中心管理人员提出申请并获得许可，实验期间应尽可能缩短饲养室的照明时间，严禁打开其它饲养室的照明。11. 实验人员在操作过程中，如有损坏或遗失实验室中的仪器设备等，应照价赔偿；若故意损坏者，动物中心将上报医院实验动物管理委员会对责任人严肃处理。12. 由于环境、笼具不洁、饲料变质或未能及时提供饲料、饮水等造成动物死亡的，动物中心疏忽导致动物逃逸的，由动物中心和实验方协商减免实验费用，或赔偿同等级别和数量动物，并优先安排重复实验。13. 由于实验方案或操作不当而引起动物死亡的，由实验人员承担责任。14. 由于不可预料或不可抗衡的事故发生（如大范围停电、设施自然损坏、动物疫病等）而致实验失败，则由双方谅解协商解决。15. 如动物发生不明原因的死亡，双方应立即相互告知，并于两小时内处理动物尸体。16. 实验人员应每日至少一次在规定时间内进动物中心巡视，发现有异常情况，应主动与动物中心联系，以便及时解决。动物中心工作人员每日至少一次进动物中心巡视，发现有异常情况，立即与实验人员联系，以便及时解决。17. 动物中心为实验人员提供实验服务，包括提供灭菌器械，普通实验耗材，委托灭菌，动物给药，动物生理生化测定，实验项目委托服务等。18. 动物中心公布动物中心使用和相关服务费用。根据实际使用情况记录，由动物中心和实验人员共同填写“动物实验费用结算单”一式两份，作为最后费用结算依据。19. 根据“动物中心使用协议书”和“动物实验费用结算单”计算实验总费用，课题负责人必须在实验结束后两周内付清剩余实验费用。逾期不付动物中心将报告课题负责人科室领导和医院实验动物管理委员会，并有权申请从其课题经费中直接划拨剩余实验费用，或禁止该课题组成员进入动物中心。20. 动物中心管理人员有权对违反动物中心管理规范的实验人员进行批评教育，通报实验人员科室领导和医院实验动物管理委员会，情节严重者动物中心有权禁止该实验人员进入动物中心。由此而造成的后果应由实验人员承担。进出普通级动物中心和动物手术室规章制度1. 进入动物中心的实验人员必须先向动物中心管理人员提出申请，包括人员，时间，使用房间，使用设备和药品器械。2. 经动物中心管理人员同意后根据安排时间，领取药品器械和房间钥匙并填写人员进出记录后方可进入动物中心。3. 进入动物饲养室或进行实验前必须带上一次性帽子、口罩和乳胶手套。与动物饲养或实验无关的物品严禁带入动物中心。4. 进入动物饲养室严禁大声喧哗，避免惊吓动物。不能进食、饮水和吸烟。未经允许严禁操作他人实验动物。5. 使用过手术室设备的需填写使用记录。6. 实验过程中发生意外及时报告管理员，出现电器或设备故障不要擅自操作。7. 实验产生的废弃物应及时清理，做好实验台的清洁工作。动物尸体必须单独放于垃圾袋，实验结束后放到二楼清洗间冰柜中。其它废弃物根据种类分别放入医疗废物筐和普通垃圾筐，针头等锐器必须有外包装。8. 填写完整人员进出记录，交还剩余药品、器械和钥匙，经管理人员检查同意后离开。进出屏障系统和IVC系统规章制度1. 感冒未愈，有咳嗽、打喷嚏、呕吐、腹泻症状者，皮炎及传染病活动期患者不能进入屏障系统和IVC系统。2. 进入动物中心的实验人员必须先向动物中心管理人员提出申请，包括人员，时间，使用房间，使用设备和药品器械。3. 经动物中心管理人员同意后根据安排时间，并填写人员进出记录后方可进入动物中心。4. 严格遵守屏障系统和IVC系统操作规程，更换鞋子和穿灭菌衣后才可进入屏障系统和IVC系统。除实验药品和器械外严禁携带其它物品进入动物中心。动物中心中提供记录笔和纸。5. 严格遵守无菌操作。实验用品不能随人员带入屏障系统，必须经传递仓按标准操作规程进入。传递仓用完关闭两侧门，不能存放任何物品。6. IVC系统中实验操作必须在运转的超净台中进行。7. 冻干制品或粉剂必须在超净台溶解好以后经传递舱传入，严禁在屏障系统内溶解冻干制品或粉剂，特别是疫苗类生物制品。8. 进出屏障系统和IVC系统时不能同时打开两扇门，进入动物室后及时关门。以保持内环境清洁和稳定。9. 进入屏障系统后不能同时打开通向清洁走廊和污物走廊的门，进出动物室及时关门，不得开启或关闭室内排风口，以保持室内压差。10. 进入动物饲养室严禁大声喧哗，避免惊吓动物。不能进食、饮水和吸烟。未经允许严禁操作他人实验动物。11. 实验过程中发生意外及时报告管理员，出现电器或设备故障不要擅自操作。12. 实验结束做好实验台面的清理工作，用消毒液擦拭台面。实验结束后实验人员带走带入的实验物品从污物走廊离开屏障系统，不能留下任何物品，严禁从原路返回。动物尸体必须单独放于垃圾袋带出后放到二楼清洗间冰柜中。其它废弃物根据种类分别放入医疗废物筐和普通垃圾筐，针头等锐器必须有外包装。13. 填写完整人员进出记录，交还剩余药品和器械，经管理人员检查同意后离开。14. 如发现有违反以上规定者，第一次被口头警告，第二次将被中止进入屏障系统和IVC系统的资格。实验用品委托灭菌制度1. 根据动物伦理原则，持续观察实验中对动物进行操作应遵循无菌原则。进入屏障系统的实验用品应经过无菌处理。2. 动物中心可以代为实验人员消毒手术器械包和耐高压实验用品。3. 实验人员当天提出申请，待灭菌物品经灭菌锅操作员检查同意后灭菌处理，实验人员在“灭菌锅操作记录”上签名。4. 如果当天不能安排灭菌，待灭菌物品由实验人员带走。在灭菌锅操作员另行安排的时间消毒，实验人员在“灭菌锅操作记录”上签名。5. 实验人员说明待灭菌物品使用场所。不进入屏障系统的物品灭菌后由灭菌锅操作员放置于三楼灭菌锅旁边洁净区，由实验人员自己认领，中心不负责保管。6. 进入屏障系统的物品由灭菌员在屏障系统灭菌锅后门中打开取出，放置于屏障系统储物间，由实验人员自己认领，中心不负责保管。应急预案动物中心负责对设施设备定期进行专业维修、保养。使其长期处于良好工作状态，最大限度地减少设备故障的发生。严格执行管理规范并督促实验人员遵守操作规程，防止人为事故的发生。动物中心安排人员值班，保证24小时有工作人员。停电的应急预案1. 立即通知医院修理部门组织抢修并在30分钟内报告医院生物医学中心主任和医院实验动物管理委员会。2. 立即撤出所有在屏障系统和IVC系统中的人员，撤出时关好屏障系统动物中心两侧的门，维持室内正压。3. 在屏障系统手术室进行实验的人员将动物放回笼子或进行固定防止动物逃脱，不能将动物带回原饲养间。4. 在IVC中实验人员将动物放回笼子置于超净台中并落下玻璃门。5. 停电前正在使用的电器要关闭开关或切断电源，防止突然来电造成电器损伤。6. 关闭一楼电源总开关，防止检修时突然来电造成人员伤害。7. 检修完毕或供电恢复5分钟后开启电源,检测通风系统是否运转，电器是否正常工作。如有问题查明原因改正。8. 停电超过一小时，屏障系统和IVC中动物不得用于正式实验，按淘汰动物处理。9. 恢复供电后立即开启通风系统，通风恢复15分钟后实验人员方可重新进入屏障系统和IVC系统。10. 做好应急预案启动记录。通风系统或空调系统停机的应急预案1. 立即通知医院修理部门组织抢修并在30分钟内报告医院生物医学中心主任和医院实验动物管理委员会。2. 立即撤出所有在屏障系统和IVC系统中的人员，撤出时关好屏障系统动物中心两侧的门，维持室内正压。3. 在屏障系统手术室进行实验的人员将动物放回笼子或进行固定防止动物逃脱，不能将动物带回原饲养间。4. 在IVC中实验人员将动物放回笼子置于超净台中并落下玻璃门。5. 关闭一楼电源总开关，防止检修时突然来电造成人员伤害。6. 停止通风超过一小时，屏障系统和IVC中动物不得用于正式实验，按淘汰动物处理。7. 室内温度在35度以上，屏障系统和IVC中动物不得用于正式实验，按淘汰动物处理。8. 通风或空调系统恢复15分钟后实验人员方可重新进入屏障系统和IVC系统。9. 做好应急预案启动记录。停水的应急预案1. 立即通知医院修理部门组织抢修并在30分钟内报告医院生物医学中心主任和医院实验动物管理委员会。2. 如果1天内无法恢复供水，联系供应室准备灭菌处理过供动物饮用的水。3. 做好应急预案启动记录。火灾的应急预案1. 动物中心工作人员全部接受过消防知识培训，每年举行一次消防演习。2. 一旦发生火情，第一发现人立即向在动物中心的所有工作和实验人员报警。3. 管理人员安排人员立即向119报警并报告医院生物医学中心主任和医院实验动物管理委员会。根据火情判断组织灭火自救还是组织全体人员撤离。4. 管理人员根据着火位置立即切断相应部位电源，如果火势无法控制需全体撤离则立即关闭一楼电源总开关。5. 着火位置在屏障系统内，其中人员迅速撤离。屏障系统中动物不得用于正式实验，按淘汰动物处理。6. 着火位置在IVC系统内，其中人员迅速撤离。如果IVC未受损，其中动物可继续使用。如果IVC受损，其中动物不得用于正式实验，按淘汰动物处理。7. 着火位置不在屏障系统或IVC系统内且火势可以控制，立即撤出所有在屏障系统和IVC系统中的人员。撤出屏障系统时关好动物中心两侧的门，维持室内正压。在屏障系统手术室进行实验的人员将动物放回笼子或进行固定防止动物逃脱，不能将动物带回原饲养间。撤出IVC系统时将动物放回笼子置于超净台中并落下玻璃门。8. 灭火后根据通风系统和空调系统工作情况按之前应急预案处理。9. 做好应急预案启动记录。实验动物发生逃逸的应急预案1. 管理人员在1小时内报告医院生物医学中心主任和医院实验动物管理委员会。2. 管理人员判断逃逸动物是否房间内。如果是则迅速关闭门窗，封闭通风口和排水口，组织人员抓住逃逸动物。如果确定动物逃出房间，迅速关闭各个房间出入口，组织人员逐间搜索抓回动物。注意进入屏障系统和IVC系统人员不能太多，不要破坏内环境。3. 如果屏障系统内动物逃出清洁级动物中心则该动物做淘汰处理。如果普通级动物进入清洁级动物中心，则该房间内清洁级动物做淘汰处理，并对普通级动物污染过区域进行消毒处理。4. 如果未能找到逃逸动物，做好饲养同类动物动物中心的动物记录，防止逃逸动物混入。5. 做好应急预案启动记录。实验动物发生传染性疾病的应急预案1. 当突然发生不明原因的动物群体性死亡或患病时，立即报告医院生物医学中心主任、医院实验动物管理委员会和上海市实验动物管理委员会。2. 将死亡或患病动物所在区域划为污染区并和临近区域隔绝开来。包括在门口设置消毒区，暂时密封该区域门窗。如果在屏障系统中，则关闭该区域通风系统。3. 不得转移临近区域内的动物，防止扩大疫情。4. 禁止无关人员进入该污染区，进入过该区域人员需进行登记并严禁进入其它动物饲养室，离开该污染区后要进行严格消毒。5. 组织专业人员分析判断是否发生动物传染病，必要时进行实验室检查。6. 对确定患传染病的病例，将患病动物所在区域内所有动物全部扑杀，将患病死亡和扑杀动物尸体装入专用箱（桶）运到上海市南浦病死畜禽无害化处理站进行焚烧销毁。7. 按相关法规对污染区域进行卫生消毒。8. 根据相关法规对临近区域动物和接触过患病动物的人员进行相应处理。9. 做好应急预案启动记录。发生动物咬伤人事件的应急预案1. 立即利用三楼的急救箱进行消毒和止血处理。伤势严重的立即送急诊治疗。2. 根据咬人动物的分级、种类和健康状况确定是否给伤者注射破伤风和狂犬疫苗。3. 一小时内报告医院生物医学中心主任。4. 明确动物咬人的原因，鉴别是否为动物疾病表现。如确定为动物传染病表现，按之前应急预案处理。5. 将咬人动物隔离到同级动物笼中观察，防止咬伤同笼动物。6. 对血迹进行清洁消毒。将染血动物笼中动物转移到同级动物笼中，防止动物之间因见血引发争斗。7. 做好应急预案启动记录发生其它事故和人身伤害事件的应急预案1. 其它意外事故包括消毒锅爆炸或蒸汽泄露，人员触电、烫伤。2. 立即关闭相应电源，在不伤害自身情况下立即使受伤人员脱离现场，中止持续伤害。3. 利用三楼的急救箱对受伤人员进行消毒和止血处理。伤势严重的立即送急诊治疗。4. 15分钟内报告医院生物医学中心主任和医院动物管理委员会。5. 通知医院修理部门检测消毒锅或漏电设备是否可以继续正常运行。对无法继续正常工作的进行现场维修或联系生产单位维修。消毒锅不能工作期间相应消毒工作转移到供应室。6. 发生消毒锅事故后检测屏障系统内环境是否被破坏。如果是则其中动物不得用于正式实验，按淘汰动物处理。7. 查明事故原因，做好应急预案启动记录生物医学中心主任：王向东，联系电话：院内分机612578 医院动物管理委员会联络人：张博恒，联系电话：院内分机610436实验动物人道处死与尸体的处理制度1. 需要终结实验动物生命时.必须采用人道的手段终止实验动物的生命。大小鼠可用颈椎脱臼法等，兔子和豚鼠注射空气针或用棒击法等，犬和猪可用麻醉下主动脉放血法等。 2. 每次动物中心实验结束后, 应在动物中心内将死亡动物 (正常死亡或人道中止生命的动物)尸体收集在一塑料废物袋中,不能混有其它实验废弃物。将此袋放入二楼清洗间的冰柜中。3. 做好动物尸体存放记录。4. 上海市康环固体废物处置有限公司每天上午定时到医院收集医疗废弃物，由动物中心工作人员将冰柜中动物尸体交由其处理。复旦大学附属中山医院生物医学中心SOP文件编号：ZSBMCSOP生效日期： 2009 年 2 月 10 日外来人员进入动物中心标准操作规程第1版 第0次修改第1页 共1页1. 目的：对进入动物中心的外来参观人员或实验人员进行管理，确保动物中心内环境稳定不被污染。2. 适用范围：进入动物中心的外来参观人员或实验人员。3. 责任人：相应动物中心责任管理员。4. 程序：外来参观人员。4.1.1由组织参观人员至少提前一天通知动物中心主任，并填写“外来参观人员进入动物中心申请”。动物中心主任同意后确定参观时间。4.1.2进入动物中心填写“外来参观人员进入动物中心记录”。4.1.3 进入动物中心前在缓冲间换白大褂、戴上一次性帽子、一次性口罩及一次性鞋套。4.1.4参观者穿戴完毕后在相应动物中心责任管理员或动物中心主任的带领下进入参观，进入动物中心严禁大声喧哗。4.1.5参观者只允许在普通区域参观，禁止进入清洁级区域。参观结束，白大褂交交还动物中心工作人员，一次性物品放入污物桶。4.2外来实验人员。4.2.1外来实验人员第一次进入动物中心实验之前，至少提前一天通知动物中心，提交“动物实验伦理审查申请书”，动物中心使用定金支付凭证，并填写“外来实验人员进入动物中心申请”，经动物中心主任或主管人员的同意后才能进入动物中心。4.1.2外来实验人员每次进入动物中心前需填写“外来实验人员进入动物中心记录”。4.1.3外来实验人员进入动物中心必须严格遵守动物中心规章制度，各项操作严格按照标准操作规程进行，如有不清楚的问题，可以向动物中心工作人员询问。如被发现违反动物中心规章制度或实验未按标准操作规程操作，第一次被警告，第二次将通报实验人员科室领导和医院实验动物管理委员会，情节严重者动物中心有权取消其进入动物中心资格。复旦大学附属中山医院生物医学中心SOP文件编号：ZSBMCSOP生效日期： 2009 年 2 月 10 日灭菌设备标准操作规程第1版 第0次修改第1页 共1页1、 目的：对清洁级大小鼠使用的垫料、饮水瓶、饲养笼和屏障系统及IVC系统所用无菌衣，器械包及其它需要灭菌的实验器材进行高压灭菌，满足清洁级实验动物的实验要求。2、 适用范围：清洁级大小鼠使用的垫料、饮水瓶、饲养笼和屏障系统及IVC系统所用无菌衣，器械包及实验人员需要灭菌的实验器材。3、 责任人：动物中心持有灭菌锅操作证的人员4、 程序：4.1 班前准备。4.1.1 与送待灭菌物品人员核对待灭菌物品，填写灭菌锅使用记录。4.1.2打开总电源及各设备电源，打开水箱控制电源；打开蒸汽发生器开关，开始产生蒸汽。4.1.3带蒸汽发生器的蒸汽压力达到0.4Mpa时打开蒸汽阀门，让设备预热。4.2 消毒灭菌。4.2.1待设备预热后（夹层压力达0.150.2Mpa），按“开前门”装入待灭菌物品，按“关前门”，“返回”。4.2.2按“程序运行”，选择灭菌程序，按“开始”灭菌。灭菌过程中操作员不能离开，记录灭菌锅工作压力和灭菌时间。4.2.3灭菌结束后听到“嘟嘟”声，按下“数值显示”，再按“退出”“确定”；即退出灭菌程序。4.2.4灭菌物品在屏障系统内使用，按“开后门”，相关工作人员或实验人员按标准操作规程进入屏障系统取出物品放置于内准备间。4.2.5灭菌物品在屏障系统以外使用，按“开前门”，取出物品放置于洁净区台上。4.2.6填写完整灭菌锅使用记录。4.2.7通知相关工作人员或实验人员领取灭菌物品。4.3 班后工作。4.3.1灭菌锅使用后一定要保持前门在打开状态。4.3.2灭菌锅使用结束后，将蒸汽、水源、压缩空气源及电源全部关闭。4.4 维护和保养。4.4.1灭菌锅的内腔要定期清洗，安装时将胶条旋转一定角度，防止胶条长期在某一位置老化。4.4.3门驱动轴定期加润滑油。（一般34月）4.4.4蒸汽发生器每月放一次水以保持腔体清洁。复旦大学附属中山医院生物医学中心SOP文件编号：ZSBMCSOP生效日期： 2009 年 2 月 10 日实验动物购买使用标准操作规程第1版 第0次修改第1页 共1页1、 目的：保证实验动物的质量，保障动物实验的质量，避免发生动物疫病。2、 适用范围：所有进入动物中心的实验动物。3、 责任人：动物中心责任管理人。4、 程序：4.1实验人员至少在实验前一周到动物中心填写“动物实验伦理审查申请书”，由动物中心交医院实验动物管理委员会审批，实验方案需得到院实验动物管理委员会批准或根据审批意见修改后得到批准。4.2实验人员至少在实验前一周到动物中心签订“动物中心使用协议书”,根据“动物中心使用协议书”估算的实验费用，实验方将50%费用转到动物中心帐上或付现金。4.3 实验人员至少在实验前一周到动物中心填写“实验动物订购申请表”。由于购买动物为现金交易，实验人员必须根据动物价格预付80%现金。4.4 动物中心工作人员到有“实验动物生产许可证”单位代为购买。因客观原因无法在实验人员要求进驻日期内购买到所需动物的，动物中心至少比进驻日期提前三天通知申请人。4.5 动物中心收到订购动物后通知实验人员到场验收。实验人员无法到场的可以委托动物中心代为验收。4.5.1小动物包装盒是否符合要求，是否破损，不同品系和不同等级的动物是否混装。如不合要求，则退回生产单位。4.5.2动物品系、规格、级别、数量是否符合订购要求。4.5.3观察普通级动物外观初步判断动物的健康状况。健康的动物体形紧凑，被毛柔顺，肌肉丰满，两眼有神，精神活泼，对外界刺激反应灵敏。4.5.4 SPF级大小鼠根据预先安排，按标准操作规程进入屏障系统或IVC系统，转入饲养笼后观察动物外观初步判断动物的健康状况。健康的动物体形紧凑，被毛柔顺，肌肉丰满，两眼有神，精神活泼，对外界刺激反应灵敏。4.5.5有以下外观特征的动物需作退回处理：A.被毛粗乱，体形消瘦，精神沉郁。B.鼻腔有粘性分泌物，有腹泻症状。C.有脚癣和耳螨症状。D.有出汗症状或有外伤。4.6验收结束，动物中心向送货单位索取“实验动物质量合格证”和与实际相符的发票。4.7实验人员现金付清剩余费用，保留“实验动物质量合格证”和发票，可以要求动物中心提供实验动物生产许可证复印件。实验人员有权拒绝接受相关文件不全的动物。4.8 动物中心工作人员按实验要求将动物分笼上架，饲养。填写标记卡，记录动物品种、品系、来源、性别、数量、上架日期、实验人员单位及姓名、特殊饲养需求或实验摘要等。4.9 动物中心工作人员填写好实验动物验收记录。复旦大学附属中山医院生物医学中心SOP文件编号：ZSBMCSOP生效日期： 2009 年 2 月 10 日实验动物标记标准操作规程第1版 第0次修改第1页 共1页1.目的：满足实验动物编号需要，避免混淆。2.适用范围：需要标记的实验动物。3.责任人：实验人员和动物中心责任管理员。4.程序：4.1 染色法。4.1.1材料：灭菌水配制的5%苦味酸溶液(黄色)和0.5%品红溶液(红色)。4.1.2适用范围：被毛白色或浅色的实验动物。4.1.3标记方法：用消毒棉签蘸取适量有色溶液，在动物不同部位做标记。涂染顺序是从左到右、从上到下。一种颜色标记个位数：左前肢为1号、左侧腹部2号、左后肢3号、头部4号、背部5号、尾根部6号、右前肢为7、右侧腹部8号、右后肢9号、不作染色标记为10号。另一种颜色标记十位数：左前肢为10号、左侧腹部20号、左后肢30号、头部4 0号、背部50号、尾根部60号、右前肢70号、右侧腹部80号、右后肢90号，第100号不作染色标记。4.2 挂牌法：将号码烙压在圆形或方形铝牌上，挂在实验动物颈部、耳部、肢体或笼具上。或将号码按实验分组编号烙在动物颈部的颈圈皮带上。该法适用于狗等大型动物。4.3 剪脚趾法：适用于黑色、棕色小鼠以及裸鼠。两前肢八个趾从左到右分别代表20、30、40、50、60、70、80、90；两后肢十个趾从左到右分别代表110；将前后肢剪掉的脚趾编号相加即为该小鼠的编号。4.4 剪耳法：适用于大小鼠、豚鼠、兔等实验动物。按一定编码规则用消毒剪刀在动物耳朵特定部位剪出缺口，并用灭菌滑石粉涂抹缺口。复旦大学附属中山医院生物医学中心SOP文件编号：ZSBMCSOP生效日期： 2009 年 2 月 10 日饲料、垫料购买使用标准操作规程第1版 第0次修改第1页 共1页1、 目的：保证动物饲料和垫料的质量，保障动物实验的质量，避免发生动物疫病。2、 适用范围：所有进入动物中心的动物饲料和垫料。3、 责任人：动物中心责任管理人。4、 程序：4.1 动物饲料和垫料的采购。4.1.1动物中心根据饲养动物种类和数量维持一周左右的饲料和垫料储存量。当库存量少于一周用量时，仓库管理员填写购买申请表，报动物中心主任审批。4.1.2 经中心主任批准后，仓库管理员将购买申请表送达采购负责人购买，完成后购买申请表交仓库管理员留存。4.2 动物饲料和垫料的验收入库。4.2.1采购人员在货物送到后通知仓库管理员根据购买申请表共同验收。4.2.2货物包装是否破损，是否符合要求。不符要求作退回处理。4.2.3货物规格、级别、数量是否和订购要求一致。不符部分作退回处理。4.2.4货物质量合格证是否齐全，是否在保质期内。不符部分作退回处理。4.2.5取样检查，有异味、结块、霉变、虫蛀、异物污染等情况的作退回处理。4.2.6 验收结束，采购人员向送货单位索取与实际相符的发票。4.2.7 仓库管理员填写验收记录，将货物入库登记。4.3 动物饲料和垫料的保管。4.3.1 动物饲料和垫料应分开存放。并按不同种类、规格分别存放。4.3.2动物饲料和垫料的存放处应维持恒温恒湿，防止受潮结块霉变。4.3.3动物饲料和垫料的存放处应有防鼠、防虫装置，防止鼠咬和昆虫污染。4.4 动物饲料和垫料的使用。4.4.1 饲养员根据使用需要到仓库填写领料单。4.4.2 仓库管理员根据领料单发货并留存领料单，做好出库登记。4.4.3 饲养员根据不同等级饲料和垫料标准操作规程处理上架。复旦大学附属中山医院生物医学中心SOP文件编号：ZSBMCSOP生效日期： 2009 年 2 月 10 日人员进出屏障系统标准操作规程第1版 第0次修改第1页 共1页1. 目的：维护清洁区内环境稳定不被污染。2. 适用范围：所有进入屏障系统的人员。3. 责任人：实验人员和动物中心工作人员。4. 程序：4.1要进入屏障系统人员在休息室存放外套、首饰及与实验无关物品。4.2实验人员在屏障系统门厅填写好人员进出记录表。需要带入屏障系统的实验用品按“实验用品进出屏障系统标准操作规程”处理。4.3打开一更和二更的紫外灯消毒20分钟后关灯。洗手，在鞋柜前换拖鞋进入一更。进入一更后关门，脱下工作服挂在一更墙上。4.4进入二更后关门，穿戴经过灭菌处理的无菌工作服、口罩、手套。4.4.1先戴口罩，然后从衣架上取下经灭菌的无菌衣包并打开。4.4.2先穿裤子，后穿上衣。上衣的下摆露在裤子外，扎紧上衣袖口。头发包在无菌衣帽里，不许外露。女性最好用发夹夹住头发。拉紧帽子下端的系绳。4.4.3套上一次性鞋套，然后戴上一次性乳胶手套，手套要包住袖口，手部皮肤不许外露。4.4.4打开消毒液桶盖子，将戴有一次性乳胶手套的双手在消毒液里浸泡片刻，移出双手关上消毒液桶盖。4.5人员进入风淋室，检查通向清洁走廊的内门关紧后打开风淋按钮，关闭外门。等风淋结束后打开内门进入内准备间，关闭风淋室内门。4.6在内准备间关闭传递仓紫外灯，取出物品。4.7 进入清洁走廊，关闭走廊门。进入各个动物饲养室进行饲喂、实验和清洁操作。4.8 打开通向污物走廊的门，将换下的笼具或各种废弃物移入污物走廊并关好通向污物走廊的门。4.9操作完成后，人员从饲养室进入污物走廊，将换下的笼具或各种废弃物拿到缓冲间。4.10根据废弃物的种类，分别放入医疗废物筐和普通垃圾筐，针头等锐器必须有外包装。一次性物品放入医疗废物筐，动物尸体独立包装后置于二楼清洗间冰柜中。换下的笼具拿到二楼清洗间。4.11在门厅处鞋柜前换上自己的鞋，拖鞋留在鞋柜内，填写完整人员进出记录，离开动物中心。复旦大学附属中山医院生物医学中心SOP文件编号：ZSBMCSOP生效日期： 2009 年 2 月 10 日实验用品进出屏障系统标准操作规程第1版 第0次修改第1页 共1页1、 目的：维护清洁区内环境稳定不被污染。2、 适用范围：进入屏障系统的不宜高压灭菌或有包装的已灭菌实验用品。3、 责任人：实验人员和屏障系统责任管理人。4、 程序：4.1 不宜高压灭菌或有包装的已灭菌实验用品必须经传递仓进入屏障系统。4.1.1 开启外门，用消毒液喷洒仓内。4.1.2将物品放入仓内，喷洒消毒液。4.1.3关闭外门后开紫外线灯照射20分钟。4.1.4人员按标准操作规程进入屏障系统，在内准备室关闭传递仓紫外灯，开启内门取出物品。4.1.5关闭内门。4.2 物品经传递仓传出屏障系统。4.2.1在内准备室打开传递仓紫外灯照射20分钟。4.2.2关紫外灯后开启内门，放入物品，关闭内门。4.2.3人员从污物走廊离开屏障系统到外间。4.2.4开启传递仓外门取出物品。4.2.5喷洒消毒液后关闭外门。复旦大学附属中山医院生物医学中心SOP文件编号：ZSBMCSOP生效日期： 2009 年 2 月 10 日动物进出屏障系统标准操作规程第1版 第0次修改第1页 共1页1、 目的：保证实验动物的质量，维护清洁区内环境稳定不被污染。2、 适用范围：进入屏障系统的动物。3、 责任人：屏障系统责任管理人和动物饲养员。4、 程序：4.1. 进入屏障系统动物的运行路线：带动物的包装盒传递舱内准备室清洁走廊动物饲养室。4.1.1 动物购入后，核对动物品种，随货的合格证，检查外包装是否完整。如果品种和合格证与要求相符，外包装没有破损，则将动物包装盒带到屏障系统传递仓处。如果动物不合格则退回生产单位。4.1.2 用消毒液对包装盒表面进行擦拭或喷雾消毒。打开外舱门，将动物包装盒放入传递舱，用消毒液喷洒仓内，关上外舱门并打开紫外灯。4.1.2工作人员20分钟后按标准操作规程进入屏障系统，在内准备间关闭紫外灯，打开传递舱内门，取出动物包装盒。4.1.3把包装盒拿入相应饲养室，根据订购人员的分组要求把动物分别移入事先经过灭菌处理，添加饲料、饮用水和垫料的饲养笼内。4.1.4 每笼皆须制作标示卡片，记载笼内动物的数据，包括动物品种、品系、来源(或供货商)、性别、数量、出生日期、接收日期及实验人员姓名、饲养需求或实验摘要等。卡片由实验人员填写或委托工作人员填写。4.1.5 填写动物中心日常工作记录。4.1.6 动物包装盒内动物取完后，工作人员打开通向污物走廊的门，将动物包装盒移入污物走廊。关闭门后通过污物走廊将包装盒带出屏障系统。4.2 需要将动物移出屏障系统时，工作人员将动物饲养笼从动物饲育架上取下，打开通向污物走廊的门，将动物饲养笼移入污物走廊。关闭门后通过污物走廊将饲养笼带出屏障系统。4.3 动物一旦被移出屏障系统后不可再重新进入屏障系统。复旦大学附属中山医院生物医学中心SOP文件编号：ZSBMCSOP生效日期： 2009 年 2 月 10 日动物饮用水、饲料进入屏障系统标准操作规程第1版 第0次修改第1页 共1页1、 目的：保证实验动物的质量，维护清洁区内环境稳定不被污染。2、 适用范围：所有进入屏障系统的动物饮用水和饲料。3、 责任人：屏障系统责任管理员和动物饲养员。4、 程序：4.1动物饮用水的进入程序。4.1.1将饮水瓶内部和瓶塞用自来水清洗干净。4.1.2 将洗干净的饮水瓶倒置沥干水分，瓶塞收集于不锈钢网篮中。4.1.3 按需要量将沥干水分的饮水瓶整齐排列于饮水瓶篮中，逐个灌入自来水，留约2cm高空间，盖紧瓶塞，送至灭菌准备区。4.1.4 将水瓶篮放入灭菌锅，按标准操作规程灭菌，锅内压力1.1kg/cm2温度121维持20分钟。4.1.6 灭菌结束后填写灭菌锅使用记录，工作人员按标准操作规程进入屏障系统，在内准备间打开灭菌锅后门，取出水瓶篮，关闭灭菌锅后门。将水瓶篮送入动物饲养室。4.1.7 替换饲养笼上空的饮水瓶,填写动物中心日常工作记录。4.1.8进入饲养室的饮用水必须一次更换完，不能储存于动物饲养室。水瓶篮由工作人员从污物走廊带出。4.2 饲料的进入程序。4.2.1使用钴60辐照灭菌饲料。4.2.1.1 根据需要量将饲料包装盒送至灭菌准备区，将双层包装的饲料从包装盒中取出，用消毒液擦拭其表面。4.2.1.2 打开传递舱外门，将饲料包放入（注意不要重叠），喷洒消毒液，关上外门并打开紫外灯。4.2.1.3工作人员20分钟后按标准操作规程进入屏障系统，在内准备间关闭紫外灯打开传递舱内门，取出饲料包后关门。将饲料包送入动物饲养室。4.2.1.4添加饲料于需要的饲养笼上，填写动物中心日常工作记录。4.2.2使用用可高压灭菌的耐高压饲料。4.2.2.1检查饲料质量，如发现饲料有霉变、结块及虫蛀等情况，不得使用。4.2.2.2将饲料装入牛皮纸袋内，外套布袋，扎紧袋口，送至灭菌准备区。4.2.2.3将饲料袋放入灭菌锅，按标准操作规程灭菌，锅内压力1.1kg/cm2温度121维持20分钟。4.2.2.5灭菌结束后填写灭菌锅使用记录，工作人员按标准操作规程进入屏障系统，在内准备间打开灭菌锅后门，取出饲料包，关闭灭菌锅后门。将饲料包送入动物饲养室。4.2.2.6，添加饲料于需要的饲养笼上，填写动物中心日常工作记录。4.3 进入饲养室打开内包装的饲料必须一次添加完，不能储存于动物饲养室。包装袋由工作人员从污物走廊带出。复旦大学附属中山医院生物医学中心SOP文件编号：ZSBMCSOP生效日期： 2009 年 2 月 10 日动物笼具、垫料，无菌衣进入屏障系统标准操作规程第1版 第0次修改第1页 共1页1、 目的：保证实验动物的质量，确保清洁区内环境稳定不被污染。2、 适用范围：所有进入屏障系统的笼具、垫料、无菌衣。3、 责任人：屏障系统责任管理员和动物饲养员。4、 程序：4.1动物笼具和垫料的进入程序。4.1.1 将饲养笼用自来水清洗干净，充分晾干。4.1.2 将垫料放入饲养笼中，不要太多，保持薄薄的一层。根据需要量将铺好垫料的饲养笼送至灭菌准备区。4.1.3 将装有垫料的饲养笼放入灭菌锅，保持一定间隙。按标准操作规程灭菌，锅内压力1.1kg/cm2温度121维持20分钟。灭菌结束后填写灭菌锅使用记录。4.1.5工作人员按操作规程进入屏障系统，在内准备间打开灭菌锅后门，取出饲养笼后关门。将饲养笼送入动物饲养室。4.1.6将需要更换的饲养笼从架上取下，将动物转移到新的饲养笼中，添加饲料和饮用水,并将相应的标记卡挂到新饲养笼上。动物换到添加饲料和换笼后填写动物中心日常工作记录。4.1.7灭菌的铺垫料饲养笼必须一次更换完，不能储存于动物饲养室。将换下的饲养笼通过污物走廊带出屏障系统。4.2 无菌衣的进入顺序。4.2.1 将用过的无菌衣放入洗衣机进行清洗。4.2.2 清洗结束后将脱水甩干的无菌衣取出，放入干衣机进行烘干处理。4.2.3 将烘干的无菌衣取出，折叠整齐，每套无菌衣装入一个包装袋。将打包后的无菌衣放入不锈钢篮中，送至灭菌准备区。4.2.4将不锈钢篮放入灭菌锅，按标准