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文档简介
第二讲细_胞_工_程教材知识问题化梳理一、植物细胞工程1植物组织培养(1)理论基础:植物细胞的全能性。(2)操作过程:图中脱分化,再分化,a表示愈伤组织,b表示胚状体或丛芽2植物体细胞杂交技术(1)过程为去除细胞壁获得具有活力的原生质体,常用方法是酶解法,所用到的酶是纤维素酶和果胶酶。(2)过程是原生质体的融合,人工诱导的物理方法包括离心、振动、电刺激等;化学方法一般用聚乙二醇作诱导剂。(3)过程是原生质体融合后再生出细胞壁,这是原生质体融合成功的标志。二、动物细胞培养1概念与操作流程2培养条件(1)无菌、无毒的环境。(2)营养:除糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素之外,还通常需加入血清等天然成分。(3)适宜的温度和ph:温度为36.50.5,ph为7.27.4。(4)气体环境:co2和o2。o2是细胞代谢所必需的,co2的主要作用是维持培养液的ph。三、体细胞核移植技术四、单克隆抗体(1)制备过程:(2)单克隆抗体的特点:特异性强、灵敏度高。效果自评组合式设计一、在小题集训中洞悉命题视角1理论上,每个正常活细胞都具有全能性。()2植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的全能性。()3愈伤组织是外植体脱分化和再分化后形成的。()4原生质体融合的原理是细胞膜的流动性。()5再生出细胞壁是原生质体融合成功的标志。()6传代培养的细胞失去接触抑制现象。()7原代培养和传代培养都需要用胰蛋白酶处理。()8动物细胞核移植的受体细胞是卵细胞。()9克隆动物的性状与供体动物完全相同。()10单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点。()11杂交瘤细胞既能无限增殖,又能产生专一性抗体。()二、在回顾教材图表中强化学科能力据动物细胞培养过程回答下列问题:(1)能否用胃蛋白酶处理动物组织块,使之分散成单个细胞?为什么?答案:不可以,因为培养液ph为7.27.4,胃蛋白酶的最适ph为1.8左右。(2)细胞获得不死性是在原代培养过程中,还是在传代培养过程中?答案:传代培养过程中。(3)冷冻保存的细胞为什么要选10代以内的培养细胞?答案:保持细胞正常的二倍体核型。植物组织培养与动物细胞培养的比较1植物组织培养与动物细胞培养的异同项目植物组织培养动物细胞培养理论基础植物细胞全能性细胞增殖培养基类型固体或半固体培养基液体培养基成分水、矿质元素、维生素、蔗糖、氨基酸、琼脂葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子、动物血清等取材植物幼嫩部位或花药等动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织过程外植体(离体根、茎、叶等)动物胚胎或幼龄动物的组织器官结果新的组织或植株个体,可以体现全能性新的细胞系或细胞株,不形成个体,不体现全能性目的植株快速繁殖脱毒植株的培育人工种子生产药物、杀虫剂等转基因植物的培育蛋白质生物制品的生产皮肤移植材料的培育检测有毒物质生理、病理、药理学研究相同点两技术手段培养过程中都进行有丝分裂,都是无性繁殖,都可称克隆,都不涉及减数分裂均为无菌操作,需要适宜的温度、ph等条件2相关概念的辨析(1)原代培养和传代培养:原代培养:可有两种表述:a.细胞悬液第一次在瓶中培养,没有分瓶培养之前的细胞培养;b.第1代细胞的培养与传10代以内的细胞培养统称为原代培养。两种表述没有本质区别。传代培养:同样有两种表述:a.细胞悬液培养一段时间后,分瓶再进行的细胞培养;b.传10代以后的细胞培养,统称为传代培养。(2)细胞株和细胞系:细胞株:原代培养的细胞一般传至10代左右会出现生长停滞,衰老死亡,少数度过“危机”的细胞能传50代左右,形成细胞株。细胞株的遗传物质并没有发生改变。细胞系:细胞株传至50代以后,会出现第二次危机,少数度过第二次危机的细胞能够无限传代下去,形成细胞系。细胞系的遗传物质发生了改变,带有癌变细胞的特点。例1下列与细胞工程技术相关的表述中,不正确的是() a植物体细胞杂交技术可以克服常规的远缘杂交不亲和障碍b动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基成分相同c动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同d植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性解析植物体细胞杂交可以把来自不同植物的细胞融合在一起,克服了自然状态下植物间远缘杂交不亲和障碍,融合后的细胞能培育成一个植物个体,体现了植物细胞全能性,细胞融合原理是膜的流动性,但植物细胞培养基除基本成分外还需要植物激素,动物细胞培养液还需要动物血清。答案b植物体细胞杂交与动物细胞融合植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性过程细胞a、b去壁原生质体a、b融合融合的原生质体杂种细胞 植物组织培养杂种植株细胞a、b 融合杂交细胞 有丝分裂多个相同杂交细胞相关酶纤维素酶和果胶酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶融合方法物理法:离心、电激、振动;化学法:聚乙二醇等试剂诱导除物理法和化学法外还可以用灭活的病毒诱导结果杂种植株杂交细胞 意义克服了远缘杂交的不亲和性,获得杂种植株突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能例2(2013广东名校质检)下面是“白菜甘蓝”杂种植株培育过程示意图。下列叙述正确的是()a如将纯种的白菜和甘蓝的卵细胞分别制成原生质体,按相同的方法操作也可得到与图示相同基因型的杂种植株b可以通过观察在0.3 g/ml 蔗糖溶液中是否发生质壁分离来判断白菜原生质体的死活c该培养过程中可能发生细胞分化、染色体变异、基因突变或基因重组d植物组织培养和动物细胞培养的培养基、培养目的不完全相同,但诱导细胞或原生质体融合的方法完全相同解析a项用卵细胞杂交得到的植株细胞的遗传物质是体细胞杂交的一半。b项白菜的原生质体已经去掉了细胞壁,不会发生质壁分离。c项培养过程中可能发生细胞分化、染色体变异、基因突变或基因重组。d项植物组织培养是得到植株或细胞产物,而动物细胞培养是得到大量的细胞;细胞融合的方法也不完全相同,动物细胞融合可用灭活的病毒。答案c易误点不能准确掌握单克隆抗体的制备过程失误类型知识理解类失误1单克隆抗体的制备过程2两次筛选的目的不同(1)第一次筛选是将未融合的b淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及bb融合、瘤瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰,筛选出b瘤融合的细胞。(2)第二次筛选是将产生特定抗体的b瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出来。因为从体内取免疫过的b淋巴细胞时取出很多种,形成的杂交瘤细胞有很多种,所以需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。高考命题常从以下角度设置陷阱(1)给出单克隆抗体的制备过程,考查对相关过程的理解与掌握。(2)结合基因工程、细胞工程等知识,综合考查单克隆抗体的制备方法。 1对于下面制备单克隆抗体过程示意图,不正确的叙述是()a表示b淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾脏中提取的b中的筛选是通过抗原、抗体反应进行的c促进细胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介导d可以无限增殖解析:选a单克隆抗体是利用b淋巴(浆)细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合得到,融合方法可以有化学方法如聚乙二醇,生物方法如灭活病毒;如果要筛选可以通过检测抗原、抗体反应,如果有反应说明表达了抗体;融合细胞具有双亲特点,即能无限增殖又能产生单一抗体。骨髓瘤细胞是体外培养的。2(2013南京一模)下列方案中不能制备出抗h1n1流感病毒单克隆抗体的是()a将h1n1流感病毒抗原的基因导入骨髓瘤细胞,并使该基因表达b将抗h1n1流感病毒抗体的
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