北京市海淀区高三生物一轮复习教研《细胞工程、生态工程》教材教法分析课件.ppt

细胞工程生态工程教材教法分析 海淀区2018届高三生物一轮复习教研 一 克隆技术 细胞工程 知识框架 融合方法基因组分析生理研究疾病诊断治疗育种 一 克隆技术 考试说明要求及细化 基本原理 细胞生物学 分子生物学 遗传学操作水平 细胞水平或细胞器水平操作目的 按照人的意愿改变细胞内的遗传物质获得特定细胞 细胞产品或新型生物技术包括 植物细胞工程 动物细胞工程 细胞工程概念 一 克隆技术 植物细胞工程 综合运用相关的知识 技能和研究方法 分析各种生物学现象和数据 通过推理和判断 得出正确结论并解答问题 一 克隆技术 植物细胞工程 一 组培 授课思路 1以斯图尔德实验为材料 分析过程中细胞 分子水平的变化 2阅读p34胡萝卜的组织培养内容 了解组培原理步骤 实验操作 3组培概念总结 习题训练 回忆分裂 分化和全能性知识 明确步骤 分析原理 规范术语 概念的深化理解和运用 1 细胞的全能性 分裂 分化 植物组培的基础 一 克隆技术 植物细胞工程 一 组培 重难点分析 细胞分化 细胞内部分基因选择性活化或阻遏的结果 导致细胞形成不同结构 引起功能改变或潜在的发育方式改变的过程 体现在细胞分化 组织分化 器官分化三个水平上 1 细胞的全能性 分裂 分化 植物组培的基础 一 克隆技术 植物细胞工程 管家基因 所有细胞中均要表达的一类基因 其产物是对维持细胞基本生命活动所必需的 如 各种酶基因和结构蛋白基因 组织特异性基因 指不同的细胞类型进行专一性表达的基因 其产物赋予各种类型细胞特异的形态结构特征和特异的生理功能 如卵清蛋白基因 调节基因 其产物用于调节组织特异性基因的表达 或者起激活作用 或者起阻抑作用 影响细胞分化的外因 包括环境因素 胞外物质 细胞的基质 黏附分子 细胞因子 激素等 以及细胞之间的相互作用 一 组培 重难点分析 例 2015江苏高考 下图为白细胞与血管内皮细胞之间识别 黏着后 白细胞迁移并穿过血管壁进入炎症组织的示意图 下列叙述错误的是a 内皮细胞识别结合白细胞膜上的糖蛋白使白细胞黏着b 白细胞在血管内黏着 迁移需要消耗atpc 黏着 迁移过程中白细胞需进行基因的选择性表达d 白细胞利用细胞膜的选择透过性穿过血管壁进入炎症组织 细胞全能性 广义是指一个细胞发育成一个完整有机体个体的潜能或特性 植物细胞的全能性 具有完整细胞核的植物细胞 具有形成完整植株所必需的全部遗传信息 在适宜条件下能够分化发育成完整植株的潜在能力 在生长发育过程中不同的器官 组织细胞的基因表达有很大的差异 这种差异是遗传信息表达调控机制发生了变化的结果 而不是遗传信息发生了不可逆的消失或钝化 细胞全能性的表达 从离体培养的植物细胞或组织诱导生长分化成完整植株的过程成为植物细胞全能性的表达 1 细胞的全能性 分裂 分化 植物组培的基础 一 克隆技术 植物细胞工程 一 组培 重难点分析 细胞全能性的类型 在整体植株中 受精卵的全能性表达最强 受精卵经过细胞分裂 分化直接形成种胚 并萌发生长成植株 茎尖 根尖分生组织细胞和形成层细胞的全能性次之 它们分别能形成茎叶 根和其他组织与器官 少数植物的分化成熟的某些器官 例如落地生根叶片 叶肉细胞的全能性直接表达 分化成新的植物 对于绝大数植物来说 非分生组织细胞难以在整体植株上表达细胞的全能性 必须将他们与整体植株分裂后 在适宜的培养条件下诱导细胞脱分化和再分化 才能使细胞的全能性得到表达 并形成完整的植株 1 细胞的全能性 分裂 分化 植物组培的基础 一 克隆技术 植物细胞工程 一 组培 重难点分析 2 植物组织培养 流程 一 克隆技术 植物细胞工程 脱分化是细胞全能性表现的前提再分化使细胞全能性得以体现 一 组培 重难点分析 2 植物组织培养 流程 一 克隆技术 植物细胞工程 一 组培 重难点分析 g0期细胞接受外界信号后 由于基因的选择性表达 使细胞发生一系列生理生化变化 进而脱离g0期重新进入细胞周期 因而 静止细胞启动分裂是分化细胞成功脱分化的重要标志 脱分化过程中细胞的变化 细胞质显著变浓 大液泡消失 核体积增大并逐渐移至细胞中央 细胞器 如线粒体 增加 质体转变为原质体 脱分化的实质 2 植物组织培养 流程 一 克隆技术 植物细胞工程 一 组培 重难点分析 关于光照诱导培养阶段通常不给光照或较弱的散射光 以利于愈伤组织形成再分化阶段需要给予较强的光照 有利于维管组织形成 极性建立和形态发生培养条件下光合作用能力较低 因此光照的作用更大程度上是调节细胞的分化状态 而不是合成光合产物光照还可能影响生长素的极性运输 影响生长素信号转导系统 从而引起器官分化 2 植物组织培养 流程 一 克隆技术 植物细胞工程 一 组培 重难点分析 体细胞胚发生植物的胚胎发生是从合子开始的 但离体培养中可看到培养物在个体再生时经过类似于合子胚的发育形式 先形成胚的类似结构 再生长发育成完整植株 离体培养条件下没有经过受精过程 但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物统称为体细胞胚或胚状体 直接途径 外植体某些部位直接诱导分化出体细胞胚间接途径 先形成愈伤组织 再分化成体细胞胚或悬浮培养中先形成胚性细胞团再形成体细胞胚 摘自柳忠烈教法辅导 2 植物组织培养 流程 一 克隆技术 植物细胞工程 一 组培 重难点分析 2 植物组织培养 培养基 一 克隆技术 植物细胞工程 胡萝卜基本培养基 ph5 6 5 8 0 5mg l6 ba0 125mg l2 4 d 诱导愈伤组织形成的培养基 诱导分化芽的培养基 1 0mg l6 ba0 1mg lnaa 诱导生根的培养基 0 1mg lnaa 一 组培 重难点分析 一 克隆技术 植物细胞工程 二 植物体细胞杂交 授课思路 1番茄 土豆构想意义 路径猜想 2阅读p36植物体细胞杂交步骤 图文结合完善流程图 重点环节拓展 延伸 3体细胞杂交概念总结 习题训练 体细胞杂交的意义和操作原理 明确步骤 规范术语 明确原理 概念的深化理解和运用 1 植物体细胞杂交 流程 一 克隆技术 植物细胞工程 二 植物体细胞杂交 重难点分析 原生质体培养 原生质体融合 植物组织培养 嫁接 1 植物体细胞杂交 流程 一 克隆技术 植物细胞工程 二 植物体细胞杂交 重难点分析 原生质体 除去细胞壁的细胞或一个被质膜所包围的且具有生活力的裸露细胞 原生质体没有细胞壁 有利于细胞融合 体细胞杂交 基因转移和单细胞培养 原生质体能比较容易摄取外来的遗传物质 作为理想的受体系统进行各种遗传操作的研究 实现体细胞杂交在植物遗传育种方面的应用 原生质体分离和培养期间 需要渗透调节剂 山梨醇 甘露醇 葡萄糖或蔗糖 防护 直到原生质体再生细胞壁 一般在适宜的高渗溶液中表现较为稳定 二 植物体细胞杂交 重难点分析 一 克隆技术 植物细胞工程 融合过程中两个细胞膜从彼此接触到破裂形成细胞桥的变化过程图解 1 植物体细胞杂交 流程 1 植物体细胞杂交 流程 一 克隆技术 植物细胞工程 二 植物体细胞杂交 重难点分析 原生质体融合通常在一定密度下进行 诱导融合后实际上得到各种原生质体混合物 包括同核体 异核体 来自不同细胞的核融合 才形成真正的杂种细胞 若其中一个核完全消失 则形成胞质杂种 若亲缘关系太远 其中一个核的染色体可能会被排除 杂种细胞筛选是关键技术之一 二 植物体细胞杂交 重难点分析 一 克隆技术 植物细胞工程 1 植物体细胞杂交 流程 二 植物体细胞杂交 重难点分析 一 克隆技术 植物细胞工程 1 植物体细胞杂交 流程 细胞系互补筛选法 利用叶绿体缺失互补 营养缺失互补 抗性互补进行选择 物理特性筛选法 利用亲本原生质体大小 颜色 漂浮密度等差异选择杂种细胞 如用离心方法可以把异核体与亲本原生质体分开 从而获得融合体 生长特性筛选法 利用原生质体对培养基成分要求与反应的差异选择杂种细胞 例如 亲本原生质体生长要求外源激素 而有的杂种细胞由于双亲互补作用会产生内激素 杂种细胞能在无激素的培养基上生长 杂种细胞筛选 二 植物体细胞杂交 重难点分析 一 克隆技术 植物细胞工程 1 植物体细胞杂交 流程 利用药物选择 物理特性选择 双荧光素标记 体细胞杂种的鉴定 形态学鉴定 利用杂种植株与双亲在表现型上的差异进行比较分析 如叶片大小与形状 花的形状与颜色 叶脉 叶柄 花梗及表皮毛有无等 细胞学鉴定 杂种植株细胞中的染色体数目是否比任何一方亲本细胞中的染色体数目增多 同功酶鉴定 同功酶是功能相同的酶 是特异基因的产物 杂种细胞中的同功酶谱一般是双亲酶谱之和 但有时也会出现双亲没有的新带 分子生物学鉴定 rapd rflp aflp等 随机扩增多态性dna技术 又称任意引物pcr 可对整个未知序列的基因组进行分析 它的应用是基于这样的一个推理 对于不同模板dna 用同一引物扩增既可能得到相同的带谱 模板基因组间可能具有同源性 也可能得到不同的带谱 仅在某一特定dna中出现的条带就可作为该模板的分子标记 事实上 不同基因组dna总是一定差异的 所以用rapd就可以进行分子标记研究 对特定的引物 复杂性越高的基因组所产生的扩增条带数也越多 分子生物学鉴定 rapd 分子生物学鉴定 rapd 一 克隆技术 植物细胞工程 三 应用归纳 脱毒在病毒感染的植物体内 老叶和成熟组织及器官中病毒含量较高 幼嫩和未成熟组织含量较低 分生组织细胞分裂和生长速度快 而病毒在植物体细胞繁殖速度相对较慢 病毒是通过维管组织或胞间连丝传播至其他组织细胞 而茎尖分生组织无分化 没有维管组织 所以根尖 茎尖生长点区域几乎不含病毒 细胞培养生产次级代谢产物用单细胞或细胞团在培养基上进行培养 此方法操作简单 重复性好 群体大等优点 主要集中在研究制药 如抗癌药物紫杉醇 疗伤药物紫草宁 保健药物人参皂甙等 食品添加剂 如生姜 香子兰等 调味剂 如胡椒 留兰香等 食用色素 如花青素等 油料 如如豆寇油 春黄菊油等 饮料 如咖啡 可可等 树胶 如阿拉伯胶等 化妆品 生物杀虫剂和农用化学品等方面 细胞产生次级代谢产物的途径 3 2010浙江理综卷 将无根的非洲菊幼苗转入无植物激素的培养中 在适宜的温度和光照等条件下培养一段时间后 应出现的现象是 b 一 克隆技术 植物细胞工程 四 重点习题 1 2015海淀期中 下列关于植物组织培养的叙述中 正确的是a 以一株植物的叶片或花药为外植体培育的植株基因型相同b 培养过程中应给予适当光照以促进愈伤组织的光合作用c 愈伤组织可作为植物体细胞诱变的材料是因为细胞全能性高d 适当提高培养基中细胞分裂素的比例有利于愈伤组织分化成芽 2下列生物学过程中体现了细胞全能性的是a 转基因小麦的种子发育成小麦幼苗b 胚胎干细胞经诱导分化成神经细胞c 杂交瘤细胞在培养基中无限增殖d 经体细胞杂交获得白菜 甘蓝杂种植株 4 2015海淀期中 红豆杉能产生抗癌药物紫杉醇 为了培育产生紫杉醇的柴胡 科研人员将红豆杉 2n 24 与柴胡 2n 12 进行了不对称体细胞杂交 1 科研人员剥离红豆杉种子的胚作为外植体接种于经过 处理的培养基上 诱导形成愈伤组织 选用胚作为外植体是因为胚的分化程度低 易于 2 将红豆杉愈伤组织和柴胡愈伤组织用 酶分别处理 各自获得有活力的原生质体 用一定剂量的紫外线照射红豆杉原生质体 破坏部分染色体 与未经紫外线照射的柴胡原生质体用化学诱导剂 诱导融合 得到融合细胞 科研人员筛选的目标细胞不包括染色体数目大于24条的细胞 因为柴胡细胞染色体数为12条 并且红豆杉细胞 实验时 科研人员判断组号为 的细胞为杂交细胞 并进一步采用pcr方法鉴定这几组细胞 pcr扩增dna时 需要分别以 为引物 扩增红豆杉 柴胡和杂交细胞的dna 观察并比较扩增dna的电泳结果 4 红豆杉和柴胡的 较远 两种植物细胞的染色体间排斥较为明显 应在能够高效合成紫杉醇的杂交细胞中选择 的核基因含量较低的杂交细胞进行培养 3 诱导融合后 科研人员只统计了7组染色体数目不大于24条的细胞 如下表所示 5 2016海淀期中 科研人员利用野生型二倍体马铃薯 2n 24 和抗青枯病的二倍体茄子 2n 24 进行体细胞杂交 培育抗青枯病马铃薯 1 自然界中马铃薯和茄子间存在 难以通过有性生殖产生后代 2 科研人员将马铃薯和茄子的叶片用 酶分别处理 获得有活力的原生质体 将马铃薯和茄子的原生质体融合 融合细胞在培养基中培养 培养基中需要加入 促进形成愈伤组织和再分化形成杂种植株 3 科研人员从pcr鉴定为阳性的杂种植株中选出杂种植株b 用流式细胞仪进一步测定二倍体马铃薯 二倍体茄子和杂种植株b的dna相对含量 结果如下图 依据上述结果预测 马铃薯 茄子四倍体融合细胞的dna相对含量约为 据图中结果推测 杂种植株b应为 倍体 判断依据是 4 取杂种植株b的根尖制成临时装片 进一步从染色体水平进行鉴定 在显微镜下找到有丝分裂 期的细胞 观察并统计来自茄子和马铃薯的染色体数目 若 则支持上述推测 5 为确定杂种植株是否符合育种要求 还需对其进行 检测 6 2013天津卷 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病 野生黑芥具有黑腐病的抗性基因 用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化 并丧失再生能力 再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合 以获得抗黑腐病杂种植株 流程如下图 据图回答下列问题 1 过程 所需的酶是 2 过程 后 在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的 存在 这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志 3 原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压 其作用是 原生质体经过 再生 进而分裂和脱分化形成愈伤组织 纤维素酶和果胶酶 叶绿体 保持原生质体完整性 细胞壁 4 若分析再生植株的染色体变异类型 应剪取再生植株和 植株的根尖 通过 染色和制片等过程制成装片 然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目 5 采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组dna进行pcr扩增 得到两亲本的差异性条带 可用于杂种植株的鉴定 下图是用该引物对双亲及再生植株1 4进行pcr扩增的结果 据图判断 再生植株1 4中一定是杂种植株的有 6 对杂种植株进行 接种实验 可筛选出具有高抗性的杂种植株 双亲 或花椰菜和黑芥 解离 漂洗 1 2 4 黑腐病菌 7 dha对脑神经发育至关重要 以a b两种单细胞真核藻为亲本 利用细胞融合技术选育高产dha融合藻 两种藻特性如下表 据表回答 1 选育的融合藻应具有a藻产dha 自养与b藻生长速度快的优点 2 诱导融合前需用纤维素酶处理两种藻 其目的是获得原生质体 3 通过以下三步筛选融合藻 步骤b可淘汰b藻 步骤a可淘汰生长速率较慢的菌落 再通过步骤c获取生产所需的融合藻 步骤a 观察藻落的大小步骤b 用不含有机碳源 碳源 生物生长的碳素来源 的培养基进行光照培养步骤c 测定dha含量 7 dha对脑神经发育至关重要 以a b两种单细胞真核藻为亲本 利用细胞融合技术选育高产dha融合藻 4 以获得的融合藻为材料进行甲 乙 丙三组试验 结果如下图 甲组条件下 融合藻产生 h 的细胞器是 丙组条件下产生atp的细胞器是 与甲 丙两组相比 乙组融合藻生长速率较快 原因是在该培养条件下融合藻既能光能自养又能异养 甲 乙两组dha产量均较高 但实际生产中往往采用甲组的培养条件 其原因是融合藻利用光能和简单的无机物即能生长 不需要添加葡萄糖 可降低成本 也可防止杂菌生长 一 克隆技术 动物细胞工程 一 克隆技术 动物细胞工程 一 动物细胞培养 重难点分析 活体内的动物细胞按照分裂能力可以分为三大类 第一类保持继续分裂能力的细胞 如骨髓干细胞 各类前体细胞 第二类细胞群是永久失去分裂能力的细胞 如高度特化的细胞 第三类是静止细胞群 即所谓的g0细胞 在正常情况下 它们不分裂 但在受到刺激后 则重新进入细胞分裂 如人的肝脏细胞等 一 克隆技术 动物细胞工程 一 动物细胞培养 重难点分析 培养条件1 无毒 无菌的环境 2 温度 昆虫一般是25 28 哺乳动物37 3 ph 一般在7 2 7 4 一般原代细胞要求较严格 而永久细胞系对ph具有较强的忍耐性 4 气体环境 o2浓度95 co2浓度5 维持培养液的ph 5 营养 糖 氨基酸 促生长因子 无机盐 微量元素等 加入动物血清 血浆等二氧化碳培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞 组织在生物体内的生长环境 一 克隆技术 动物细胞工程 一 动物细胞培养 重难点分析 计数悬浮液中细胞的形态及浓度 以判断稀释程度 亦用于培养液中细胞浓度的检查 细胞接种浓度 3 10 105 ml 一 克隆技术 动物细胞工程 二 动物体细胞核移植技术 重难点分析 自然界存在很多细胞融合现象 如 受精 成肌细胞融合 但频率低 细胞内吞与外排也属细胞膜融合现象 细胞内膜系统物质运输过程等 一 克隆技术 动物细胞工程 三 动物细胞融合 重难点分析 一 克隆技术 动物细胞工程 四 单克隆抗体 重难点分析 细胞融合 细胞筛选 细胞培养 杂交瘤细胞筛选 hat选择性培养液 加入次黄嘌呤 h 氨基喋呤 a 和胸腺嘧啶核苷酸 t 其依据是细胞中的dna合成有两条途径 一条途径是生物合成途径 d途径 即由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸 为dna分子的合成提供原料 在此合成过程中 叶酸作为重要的辅酶参与这一过程 而hat培养液中氨基喋呤是一种叶酸的拮抗物 可以阻断dna合成的 d途径 另一条途径是应急途径 s途径 它是利用次黄嘌呤 鸟嘌呤磷酸核苷转移酶 hgprt 和胸腺嘧啶核苷激酶 tk 催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸 两种酶缺一不可 骨髓瘤细胞是次黄嘌呤 鸟嘌呤磷酸核苷转移酶缺陷型细胞 一 克隆技术 动物细胞工程 四 单克隆抗体 重难点分析 产生抗体的杂交瘤细胞 筛选通常采用有限稀释克隆细胞的方法 将杂交瘤细胞多倍稀释 接种在多孔的细胞培养板上 是每孔细胞不超过一个 通过培养让其增殖 然后检测各孔上清液中的细胞分泌的抗体 上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔 一 克隆技术 动物细胞工程 四 单克隆抗体 重难点分析 酶联免疫吸附法 原理是采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接 然后通过酶与底物产生颜色反应 用于定量测定 测定的对象可以是抗体也可以是抗原 抗原吸附在固相载体上 加待测抗体 再加相应酶标记抗体 生成抗原 待测抗体 酶标记抗体的复合物 再与该酶的底物反应生成有色产物 一 克隆技术 动物细胞工程 四 单克隆抗体 重难点分析 早早孕检测试纸 由在硝酸纤维素膜上包被的抗人绒毛膜促性腺激素 hcg 单克隆抗体和抗鼠1gg及在玻璃纤维膜上吸附的胶体金 抗hcg单克隆抗体结合物组成 应用双抗体夹心法及免疫层析法原理检测尿液中的人绒毛膜促进腺激素 hcg 一 克隆技术 动物细胞工程 四 单克隆抗体 重难点分析 双抗夹心法 一 克隆技术 动物细胞工程 四 单克隆抗体 重难点分析 质控线检测线 一 克隆技术 克隆总结 1 分子水平 基因克隆 重组载体通过宿主细胞的无性繁殖使目的基因扩增 pcr 2 细胞水平 细胞培养 动物细胞培养和单克隆抗体制备中杂交瘤细胞培养 3 个体水平 无性繁殖 不通过两性细胞的结合 从一个单一的细胞繁殖出新的生物个体 动物核移植 植物组培 克隆的层次 人的治疗性克隆 左 和生殖性克隆 右 一 克隆技术 动物细胞工程 五 重点习题 a 是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应t淋巴细胞b 中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成c 同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性d 是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群 1 下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图 下列有关叙述 正确的是 2 下列有关克隆的叙述 不正确的一项是a 生物体通过体细胞进行的无性繁殖b 将某肿瘤细胞体外培养繁殖成一个细胞系c 扦插和嫁接实质上也是克隆d 将鸡的某个dna片段整合到小鼠的dna中 一 克隆技术 动物细胞工程 五 重点习题 3 下列关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述 正确的是a 培养原理都是细胞的全能性b 都通过有丝分裂增加细胞数目c 培养材料都必须取自分生组织d 都经过脱分化恢复细胞全能性 4 研究表明 her2 neu是一种原癌基因 它表达的h蛋白在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达 抗h蛋白单克隆抗体能抑制过量表达h蛋白的乳腺癌细胞的生长 目前已成为有效的生物治疗手段 1 选择h蛋白作为单克隆抗体的作用靶点 是因为h蛋白在成年个体的正常组织中 填 低表达 或 高表达 h蛋白是一个跨膜蛋白 结构如右图所示 制备免疫小鼠用的h蛋白 抗原 时 应构建 区基因 转入原核细胞表达并提纯 2 将h蛋白注射到小鼠体内 取该小鼠的脾脏细胞与 细胞进行融合 使用的化学诱导剂是 细胞融合的原理是 3 将融合细胞在 培养基中培养 一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长 将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养 吸取有克隆生长的细胞培养孔中的 填 上清液 或 沉淀细胞 应用 技术进行抗体阳性检测 经多次筛选 就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞 4 将筛选得到的杂交瘤细胞 经过 或小鼠腹腔内培养 获取大量的单克隆抗体 5 治疗乳腺癌时 可单独使用抗h蛋白单克隆抗体 也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建 生物导弹 杀死癌细胞 这充分体现了单克隆抗体 的特点 5 graves病 gd 可导致甲状腺功能亢进 研究发现 gd患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间粘附分子1 icam 1 导致甲状腺肿大 科研人员通过制备单克隆抗体 对治疗gd进行了尝试 1 用icam 1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠 几周后取这些免疫小鼠的血清 分别加入多孔培养板的不同孔中 多孔培养板中需加入 以检测这些小鼠产生的抗体 依据反应结果 选出 反应最强的培养孔所对应的小鼠m 2 实验用骨髓瘤细胞置于 恒温培养箱中37 培养 融合前将部分培养细胞置于含hat的选择培养基中培养 一段时间后培养基中 填 有 或 无 骨髓瘤细胞生长 说明培养基符合实验要求 3 取小鼠m的脾脏细胞制备成细胞悬液 与实验用骨髓瘤细胞进行融合 用选择培养基筛选得到具有 能力的细胞 将获得的上述细胞在多孔培养板上培养 用icam 1检测 从中选择 的杂交瘤细胞 植入小鼠腹腔中 培养 一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体 4 若进一步比较实验用抗体和131i对gd模型小鼠的治疗作用 可将若干gd模型小鼠等分为三组 请补充下表中的实验设计 二 生态工程 1生物群落 2营养结构 3能量流动 4群落结构 二 生态工程 重难点分析 1 基础概念 2 基本原理 物质循环再生原理 物质循环 二 生态工程 重难点分析 厨余垃圾处理 电子垃圾 贵屿 2 基本原理 多样性原理 自我调节能力 二 生态工程 重难点分析 2 基本原理 协调与平衡原理 适应与容纳量 二 生态工程 重难点分析 2 基本原理 系统整体性原理 1 1 2 二 生态工程 重难点分析 二 生态工程 重难点分析 3 生态农业历史背景 3 生态农业 二 生态工程 重难点分析 环境恶化食品安全资源利用 3 生态农业 二 生态工程 重难点分析 生态农业的模式 作物间作与套作 间作 在一块田地上间隔种植两种作物 套作 在前一季作物后期 播种下一季作物 利用植物生态位差异 充分利用生态因子 改良土壤 增加养分 降低连作障碍 控制有害生物等 可持续提高单位面积产量 玉米 大豆间作 3 生态农业 二 生态工程 重难点分析 以太阳能为动力 把沼气技术 种植技术和养殖技术有机结合起来 形成了沼气池 猪舍 厕所 日光温室四位一体的良性循环生产模式 在农户庭院或空地建地下水压式沼气池 池顶坐落猪舍 侧面配建一个厕所 沼气池 猪舍和厕所都建在一个塑料大棚内 在猪舍的