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丹皮酚含量测定综述摘要：就各种丹皮酚测定方法研究进展进行了综述。牡丹皮中含有的丹皮酚具有镇痛、消炎、抗菌等作用，对现代医药研究与应用有着重大意义。随着中药现代化的进展,对中药有效成分的分离提取、含量测定已成为新的热点课题。关键词：牡丹 丹皮酚 含量测定 牡丹皮为毛茛科植物牡丹(Paeonia suffruticosa Andr1)的干燥根皮, 有清热凉血、活血化瘀的作用。用于湿热发斑、吐血衄血、夜热早凉,经闭痛经、痈肿疮毒、跌打伤痛等。,其主要有效成分为丹皮酚。丹皮酚(Paeonal)又名牡丹酚、芍药酚,化学名为“22羟基42甲氧基苯乙酮”1，为白色或微黄色有光泽的针状结晶，无色针状结晶（乙醇），熔点49-51，气味特殊，味微辣，易溶于乙醇和甲醇中，溶于乙醚、丙酮、苯、氯仿及二硫化碳中，稍溶于水，在热水中溶解，不溶于冷水，能随水蒸汽挥发。丹皮酚可随水蒸气蒸馏，且在紫外光区有强烈吸收，在274nm波长处E（1% 1cm）为862，利用此性质可用紫外分光光度计进行测定。现代药理研究证明丹皮酚具有抗炎、镇静、降压、抗氧化、保护心肌细胞及抑制血小板凝集等作用。丹皮酚的含量高低是作为衡量牡丹皮品质优劣的一种重要指标，其含量的高低直接影响药品的疗效。目前，丹皮酚的含量测定有高效液相色谱法（HPLC）、分光光度法、气相色谱法（GC）、薄层扫描法、胶束毛细管电泳法、化学发光法等。以下是对上述方法的简要介绍。1. 高效液相色谱法（HPLC） 高效液相色谱法具有分离能力高、灵敏度高、应用广泛的特点。杨洁等2采用HPLC法,结果显示丹皮酚在0. 010. 55g/ml范围内线性关系良好( r = 0. 999 6) ,平均回收率99. 87% , RSD 为1. 46%。该法简便、快速,重现性好,精度高,适用于牡丹皮中丹皮酚的定量分析。实验中试用不同体系和比例的流动相,如甲醇- 磷酸,甲醇2醋酸2水,结果以甲醇2醋酸2水溶液为流动相时丹皮酚的分离效果最好。而反相高效液相色谱（RP-HPLC）法对于含有多组分混合物的中药及其制剂的分析测定更具特色。梁贵键3等采用反相高效液相色潽法，测 51050g/ ml 范围内,峰面积(A) 与浓度(C) 呈良好的线性关系,相关系数r = 019997 ,平均回收率为97.86%，RSD为0.64%。2.分光光度法2.1紫外分光光度法（GV）应用分光光度法测定丹皮酚含量的技术较为成熟，按具体不同原理又可分为紫外分光光度法、双波长示差光谱法、一阶导数分光光度法、正交函数分光光度法等。其中紫外分光光度法具有操作简单、费用较低等优点。但由于该法基本上没有分离能力，样品处理要求严格，故常被用于要求不很严格的一般测定、中药材炮制方法与处理条件比较、制剂工艺选择等方面4。2.2双波长示差光谱法该法可消除干扰组分的影响，方法便捷，结果准确，但丹皮酚在碱性溶液中稳定性较差，应在加碱后30min内完成测定，以免造成误差。2.3一阶导数分光光度法此法可不经分离对丹皮酚进行含量测定，且结果准确。董善士5等以此法分析肺露,由于其他药材蒸提液在紫外区对丹皮酚有干扰,在一阶导数光谱图上,碱性介质中选择测定波长为328 、368 、372 ,可完全消除干扰。2.4正交函数分光光度法王焕云等6用水蒸气蒸馏法提取麦味地黄丸得供试品溶液，以水为空白，在220350nm 波长范围内分别对丹皮酚对照品、供试品和阴性对照品溶液进行扫描，得吸收光谱。根据光谱信息，选用二次正交多项式系数(P2)作为定量参数，以消除阴性对照的干扰，在263.8283.8nm 波长之间每间隔 测定各个波长的吸收度值，计算结果P2与质量浓度C呈良好的线性关系，平均回收率为99.0%。3. 气相色谱法（GC） GC 自动化操作,灵敏度高,重现性好,但对前处理要求高,且设备昂贵,受经济水平制约,广泛应用受到一定限制。其中闪蒸-GC 不需前处理,分析速度快,避免成分破坏,受试样品用量少,对含易挥发成分的贵重药材分析可降低成本,有独特优势7。4. 薄层扫描法 薄层扫描法测定丹皮中丹皮酚的含量，方法简便易行，测定结果稳定，重复性好，是一种准确可靠的含量铡定方法。尤其是在中药复方制剂中此方法对丹皮酚的测定可较好地排除其他成分的干扰8。5. 胶束毛细管电泳法 毛细管电泳电化学检测的装置简便、价廉、灵敏度高,其中非接触式检测（电极不与溶液直接接触)避免了分离电场对检测的干扰和电极中毒,可广泛用于荷电成分的检测9。6. 化学发光法选用鲁米诺一过氧化氢(H2O2)一钻离子（Co2+）为空白发光体系, 利用H2O2对丹皮酚结构中酚轻基的氧化, 而消耗发光体系中的H2O2, 致使原空白发光体系发光强度降低, 谓之淬灭, 这种淬灭程度的强弱在一定范围内与丹皮酚的浓度成线性关系, 进而实现对丹皮酚的高灵敏测定10。结语 综合以上几种方法来看，毛细管电泳法具有分析速度快,分离效率高,流动相和进样量少,成本低、适用范围广的优势。从HPLC发展来看,国内今后将发展适用面广的高效毛细管电泳,尤其胶束电泳色谱方法的引入进一步拓展了HPLC应用范围。HPLC和全自动的TLC将是今后中药领域分析手段的主流。参考文献【1】龚明贵,张巧明,秦翠丽,原小秋.牡丹中丹皮酚含量及其提取检测方法研究.时珍国医国药.2007,18(3):709-711【2】杨洁,贾国强,刘萍,等. HPLC法测定不同产地牡丹皮中丹皮酚的含量 J .科学技术与工程, 2006, 6 (3) : 299.【3】梁贵键,朱莉,张华,张蔚君,等.RP-HPLC法测定牡丹皮和杞菊地黄丸中丹皮酚的含量.空军总医院学报.2005,21(4):206【4】周宏兵.中药及其制剂中丹皮酚的含量测定.广东药学院学报，2000,16（2）;218-221【5】董善士,李菁,王旌,等.一阶导数光谱测肺露中丹皮酚含量J.中成药,1991 ,13 (3) :101【6】王焕云，温爱萍，乔俊缠，等.正交函数分光光度法测定麦味地黄丸中丹皮酚的含量J.中国药业，1999,8(12):31-32【7】吴美强.丹皮酚测定方法研究概述.海峡药学.2010.2(22):59-60【8】方岩雄，黄剑明，张昆.用超临界CO2从丹皮中提取丹皮酚J 精细化工，2001,