（食品科学专业论文）苹果中农药残留的测定及其降解方法的研究.pdf

苹果中农药残留的测定及其降解方法的研究 詹萍 摘要农药的发明和使用无疑大大提高了农作物的产量，但随着农药的大量不 合理使用食品中农药残留对人类健康造成负面影响也日益显露出来，这就需要发 展快速、可靠、灵敏、实用的残留农药分析技术和有效简便的残留农药降解技术。 残留农药分析的第一个环节就是从样品中提取和净化痕量农药，以便进行分 析测定。提取的好坏直接影响到分析结果的正确性。目前在农药分析中经常使用 的分析方法如薄层色谱、气相色谱、液相色谱、色质联用等技术，一般均要求分 析较净化的样品，否则存在的大量杂质会对农药残留的分析造成干扰或阻碍残留， 甚至会损坏仪器的危险，因而提取、浓缩和净化是残留农药分析中一个重要的前 处理过程。 本试验在前人工作的基础上，就苹果样品的前处理条件进行了研究，其中包 括：提取溶剂的选择、提取方法的选择( 如：浸泡提取、超声波提取、机械振荡 提取、均质加溶剂提取等) 、净化方法的选择( 如：液液萃取法、柱层析法和浓硫 酸磺化法等) 。并在此测定基础上，采用不同的处理方法( 臭氧处理，双氧水处理 等方法) 处理苹果，对其残留农药降解状况进行了较为系统的研究。研究结果如 下： 1 、建立了苹果中有机氯农药的分析测定方法。本方法对苹果样品中添加有机 氯农药回收率在8 2 2 9 8 3 ，变异系数8 4 5 。各项技术指标均满足残留农药 检测的要求。 2 、建立了苹果中有机磷农药的分析测定方法。本方法对苹果样品中添加有机 磷农药回收率在8 2 9 _ _ 9 4 7 ，变异系数7 0 2 。各项技术指标均满足残留农药 检测的要求。 3 、建立了苹果中拟除虫菊酯农药的分析方法。本方法处理和测定拟除虫菊酯 农药的准确性好，回收率在8 6 争一1 0 1 8 ，精密度和灵敏度高，变异系数为3 2 8 - - 8 8 2 。该方法较传统的l l e 法简便、快速、准确。 4 、采用g c _ _ n p d 检测方法测定苹果中3 种有机磷农药残留的残留动态规律。 结果表明：对硫磷、甲胺磷农药在环境中的降解符合一级指数方程，相关系数均 为0 9 以上，只有马拉硫磷农药降解曲线的相关系数为0 8 8 5 1 。3 种有机磷农药 半衰期分别为1 2 6 d 、1 1 8 d 、2 0 3 d 。 5 、采用g c _ e c d 检测方法测定苹果中3 种拟除虫菊酯农药残留的残留动态规 律。结果表明：甲氰菊酯、氯氰菊酯、氯氟氰菊酯农药在环境中的降解符合级 指数方程，相关系数均为0 9 以上，3 种拟除虫菊酯农药的半衰期分别为1 4 2 d 、 i 8 7 d 、1 2 8 d 。 6 、臭氧处理对苹果中残留农药的降解有一定的作用。结果表明：在温度低于 5 0 c 时，臭氧处理温度的变化对于臭氧降解甲胺磷、对硫磷、甲氰菊酯、氯氰菊 酯、氯氟氰菊酯均不会产生影响，但对马拉硫磷的降解率影响较大：各种农药在 中性环境中最稳定，酸性和碱性环境下均会降解，在强碱性环境中降解速度最快； 苹果中以上6 种残留农药的降解速度随臭氧浓度的增加而加快。但高浓度的臭氧 可能对苹果品质产生消极影响，在达到降解苹果残留农药的前提下，臭氧处理的 浓度应越小越好；臭氧处理时间对残留农药的降解有一定的作用，但由于臭氧的 不稳定性，在3 0 m i n 后残留农药降解无显著变化。 7 苹果中的残留农药在双氧水作用下会氧化降解，氧化降解的程度受环境酸 碱度、氧化时间及双氧水添加量的影响，氧化降解程度与环境温度关系不大。通 过试验得出：双氧水氧化处理水果表面的最佳条件为：调整环境的p h 值为1 l ，在 达到降解苹果残留农药的前提下，双氧水的添加量应越小越好，处理时间越短越 好，本试验选用添加8 双氧水，处理2 0 m i n 。 关键词：苹果，农药残留，检测，降解方法 i i t e c h n i q u e so f d e t e r m i n a t i o na n dd e g r a d a t i o no f p e s t i c i d er e s i d u e si na p p l e s z h a np i n g a b s t r a c t ：t h ei n v e n t i o na n de m p l o y m e n to fp e s t i c i d eh a v ei m p r o v e dt h ey i e l do f c r o p p e rg r e a t l y h o w e v e r , w i t ht h eu s a g e o fi tl a r g em o u n ta n dl a r g ei l l o g i c a l l y , t h eb a d i n f l u e n c eo ft h er e m n a n t so fp e s t i c i d e si nt h ef o o d s t u f ft oh u m a nh e a l t hc o m et oa p p e 甄 w h i c hn e e dt od e v e l o pc e l e r i t i v ec r e d i b i l i t i v es e n s i t i v ea n da p p l i e da n a l y s i sn o l o g i e so f t h er e m n a n t so fp e s t i c i d e sa n dd e c a yn o l o g i e so ft h er e m n a n t so fp e s t i c i d e s t h ef i r s ts t e po fr e t e n t i o na n a l y s i si st oe x t r a c t i o na n dd e a nu pt h et r a c ep e s t i c i d e i th a sad i r e c te f f e c to nt h ea c c u r a c yo fr e s u l t s a tp r e s e n t ，t h ec o l i l l u o nm e t h o d s ，f o r e x a m p l e ，t h i n f i l mc h r o m a t o g r a p h ，g a sc h r o m a t o g r a p h ，l i q u i dc h r o m a t o g r a p ha n d g a sc h r o m a t o g r a p h - m a s s s p e c t u m ，r e q u k ea n a l y z i n g t h ep u r e rs a m p l e s t h e c o m p l i c a t e dm a t r i x e s w i l li n t e r f e r ew i t ht h er e t e n t i o na n a l y s e sa n dd a m a g et h e i n s t r u m e n t s s os a m p l i n g ，c o n t r a c t i o na n dp u r i f i c a t i o na l ei m p o r t a n tp r e p a r a t i o ns t e p s i nt h er e t e n t i o na n a l y s e so fp r e s l l d e s t h ec o n d i t i o no fp r e p a r a t i o ns t e p si nt h er e t e n t i o na n a l y s e so fp r e s t i d e s i na p p l e s a m p l ew a ss t u d i e di nt h e s i s ，i n c l u d i n gt h e c h o i c e so ft h ek i n g so ft h ed i s t i l l i n g i m p r e g n a n t ，t h ed i s t i l l i n gm e t h o d s ( s u c h a sd i p p i n gi nt h ed i s t i l l i n gi m p r e g n a n t ， u l t r a s o n i c ，m e c h a n i c a ls h a k i n g , m a e ，a n ds oo n ) a n dt h ed e p u r a t i n gm e t h o d s o nt h i s w o r k ，s o m ep e s t i c i d er e s i d u e sd e g r a d a t i o nt e c h n i q u e ss u c ha s o z o n eo x i d a t i o na n d h 2 0 2 一d e g r a d a t i o ne t c a r eu s e dt od e a lw i t ht h ep e s t i c i d er e s i d u e s ，a tt h es a n l et i m e ，w e r e s e a r c ht h e i rd e g r a d a t i o nt r e n di na p p l es y s t e m i c l y t h er e s u l t so ft h es t u d i e sa r el i s t e da sf o l l o w s ： 1 a na n a l y t i c a lm e t h o df o rd e t e r m i n a t i o no fo r g a n o c h l o d n ei na p p l e sh a sb e e n e s t a b l i s h e d t h er e c o v e r yo fa p p l es a m p l ei s8 2 2 - 9 8 3 ，c v = 8 4 5 s o ，w e c o n c l u d e dt h a tt h i sm e t h o di sa ni d e a lm e t h o df o rt h ed i s p o s a lo fo r g a n o c m o r i n e p e s t i c i d e sr e s i d u e si nc o n c e n t r a t e da p p l e 2 a na n a l y t i c a lm e t h o df o rd e t e r m i n a t i o no fo r g a n o p h o s p h o r u si na p p l e sh a sb e e n e s t a b l i s h e d t h er e c o v e r yo fa p p l es a m p l ei s8 2 9 _ 一9 4 7 ，c v = 7 0 2 s o ，w e c o n c l u d e dt h a tt h i sm e t h o di sa ni d e a lm e t h o df o rt h ed i s p o s a lo fo r g a n o p h o s p h o r u s p e s t i c i d e sr e s i d u e si nc o n c e n t r a t e da p p l e 3 a ne f f i c i e n ta n a l y t i c a lm e t h o df o rd e t e r m i n a t i o no fp y r e t h r i o d sp e s t i c i d e si n i i i a p p l e sh a sb e e ne s t a b l i s h e d t h er e c o v e rr a t ea n dt h ec v a l e 9 a n d1 0 1 8 i ti s a r a p i d e r , s i m p l e rm e t h o dt h a nl l em e t h o d t h e r e f o r e t h ep r o p o s e dm e t h o di s a p p l i c a b l et ot h ee f f i c i e n td e t e r m i n a t i o no fp y r e t h r i o d sp e s t i c i d e si nt h ec o u r s eo fa p p l e p r o c e s s i n g 4 t h el a wo ft h em a i no r g a n o p h o s p h o r u sr e s i d u e si na p p l e s ，a n a l y z e db yg cu s i n g n p dd e t e c t o r , w a so b t a i n e d t h er e s u l t ss h o w st h a tt h ed e g r a d a t i o no fp a r a t h i o na n d m e t h a m i d o p h o si nt h ee n v i r o n m e n ta c c o r d sw i t ht h ed e g r a d a t i o ne x p o n e n t i a le q u a t i o n a n dr e o 9 ，b u tf o rm a l a t h i o n ，t h er 2i s o n l yt ob e0 8 8 5 1 t h er e s i d u e sh a l fl i f e ( t l 2 t h e s e3k i n d so fp e s t i c i d e sa r e1 2 6 d 、1 1 8 d 、2 0 3 d 5 t h el a wo ft h em a i np y r e t h r i o d sp e s t i c i d e si na p p l e ，a n a l y z e db yg cu s i n ge c d d e t e c t o r , w a so b t a i n e d t h er e s u l t ss h o w st h a tt h ed e g r a d a t i o no f t h e mi n t h e e n v i r o n m e n ta c c o r d sw i t ht h ed e g r a d a t i o ne x p o n e n t i a le q u a t i o na n dr 2 0 9 t h e r e s i d u e sh a l fl i f e ( t 1 2 1 0 ft h e s e3k i n d so f p e s t i c i d e sa r e1 4 2 d 、8 7 d 、1 2 8 d 6 o z o n et e c l m i q d eh a se f f e c to nd e g r a d a t i o no fp e s t i c i d er e s i d u e si na p p l e t h e r e s u l t ss h o w st h a iw h e nt h et e m p e r a t u r ei su n d e r5 0 。c ，o z o n ed i s p o s a lt e m p e r a t u r ei s n o ti n f l u e n c eo nd e g r a d a t i o no fp a r a t h i o n ，m e t h a m i d o p h o s ，b i f e n t h r i n ，f e n p m p a t h r i n ， c y p e r m e t h r i n , b u tm a l a t h i o n ；p e s t i c i d er e s i d u e si na p p l ea r es t e a d yw h e np hi s7 0 ，o r e l s et h ep e s t i c i d er e s i d u e sc a nd e g r a d ea n dt h er a t eo fp e s t i c i d er e s i d u e sa tp l l 7 0i s g r e a t e rt h a np h 9 9 9 9 ) ：进样方式： 不分流l 儿进样。 2 2 1 4 2 有机磷农药气相色谱操作条件【1 2 l l ： g c 配n p d 检测器；色谱柱：s p b 一6 0 8 ( 3 0 m x 0 3 2 m m x 0 1 0 p - m ) ：进样口温度： 2 5 0 ；检测器：2 6 0 ；柱升温程序：初始1 7 5 c ，保持l m i n ，5 m i n 升至2 0 0 ，1 0 m i n 升至2 5 0 保持5 m i n ；：载气：高纯n 。( 9 9 9 9 ) ，3 m l m i n ；h 2 ： 2 3 m l m i n ；空气：6 0 m l m i n ；进样方式：不分流l 儿进样。 2 2 1 4 3 拟除虫菊酯气相色谱操作条件1 1 2 2 1 2 4 】： g c 配e c d 检测器；色谱柱：s p b 一6 0 8 ( 3 0 m x 0 3 2 m m x 0 1 0 9 i n ) ；进样口温度： 2 3 04 c ；检测器：2 5 0 ；柱升温程序：初始1 6 0 ，保持l m i n ，1 0 m i n 升至2 6 0 ，保持8 m i n ：载气：高纯n 2 ( 9 9 9 9 ) ，2 3 m l m i n ；空气：6 0 m l m i n ；进样方 式：不分流l g l 进样。 2 2 1 5 结果计算：本试验采用保留时间定性，外标法峰高或峰面积定量分析计算， 此法用已知各种含量的标样等量进行分析，然后做出响应信号( 峰高或峰面积) 与含量之间的曲线图，即标准曲线。根据有机氯、有机磷、拟除虫菊酯类农药各 自的回归方程和响应信号计算出待测样品中有机氯、有机磷、拟除虫菊酯类农药 的含量。 2 2 1 6 所确定方法的可靠性分析 在苹果样品中进行空白及添加回收试验，空白样品按照上述所确定的有机氯、 有机磷、拟除虫菊酯类农药样品处理过程进行处理；添加回收样品在处理样品之 前添加高中低3 个浓度的混合农药标准溶液后，按照上述所确定的有机氯、有机 磷、拟除虫菊酯类农药样品处理过程进行处理。每一个样品作3 个平行，依所确 定的有机氯、有机磷、拟除虫菊酯类农药气相色谱操作条件进行测定。 1 图谱分析 比较苹果样品空白及标准添加图谱，考察前处理方法对于杂质的净化效果和 该气相色谱检测条件下有机氯农药六六六、d d t 及其异构体、有机磷、拟除虫菊 酯类农药与杂质的分离效果。 2 灵敏度分析 以最低检出限来表示。最低检出限是指分析方法在准确的试验条件下可以检 测的样品中待测物的最低浓度或含量1 1 2 5 i 。根据称样量、定容体积和进样体积，以 仪器基线噪音2 倍的色谱峰高作为各种农药检出的衡量指标，确定方法的最低检出 限。 3 精密度和准确度分析 方法的准确度以回收率表示，精密度以变异系数表示【1 2 6 1 。将苹果按上述所确 定方法的步骤进行操作，选择无上述待测农药且杂峰尽量少的苹果作为空白，采 用空白样品标准添加法，分别加入一定量标准溶液，3 个添加水平，每个水平重复 测定3 次，按2 3 1 4 方法c , c 渤j 定，计算回收率和变异系数。 4 苹果样品的测定 应用所建立的方法分别对不同产地( 洛川、宜川、旬邑) 苹果样品进行测定。 2 2 2 农残降解方法的研究 2 2 2 1 苹果中农药残留自然降解规律的研究【1 2 7 1 3 2 】 有机磷农药： 将苹果分为3 组分别用浓度为0 0 5 的马拉硫磷、对硫磷、甲胺磷溶液浸泡 1 0 m i n ，待苹果表面药液充分干燥后，记录原始时间，按上述所确定的有机磷前处 理方法，根据试验设计的时问分别测定浸泡后不同时间苹果中马拉硫磷、对硫磷、 甲胺磷的残留量。 拟除虫菊酯类农药： 将苹果分为3 组，分别用浓度为0 0 5 的甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氯氰菊酯溶 液浸泡1 0 m i n ，待苹果表面药液充分干燥后，记录原始时问，按上述所确定的拟除 虫菊酯的前处理方法，根据试验设计的时间分别测定浸泡后不同时间苹果中甲氰 菊酯、氯氟氰菊酯、氯氰菊酯的残留量。 2 2 2 2 臭氧对苹果中农药残留降解效果的研究【孤5 & 5 9 删 分别将有机磷农药、拟除虫菊酯类农药按要求稀释到浓度为0 0 5 的溶液，取 若干苹果分别浸泡到以上农药的标准溶液中，过1 0 m i n 后取出，待苹果表面药液充 分干燥后，进行臭氧降解处理。 2 2 2 2 1 温度对苹果中臭氧处理农药残留降解的影响 将浸泡过农药的苹果浸没于2 0 0 0 m l 初始浓度为1 0 m g 几的臭氧水中，适当搅拌， 分别在1 0 、1 5 、2 0 、2 5 、3 0 、3 5 下处理3 0 m i n ，处理后的苹果样品阴干后，测定 苹果中各种农药的残留量。 2 2 2 2 2p h 值对苹果中臭氧处理农药残留降解的影响 用l m o l 几的h c l 溶液或4 n a o h 溶液将蒸馏水的p h 值分别调至3 、5 、7 、9 、1 1 ， 然后分别在不同p h 值的溶液中通入臭氧，使每种溶液中臭氧初始浓度均为1 0 m g l ， 将浸泡过农药的苹果分别浸没于其中，并做适当搅拌，在室温下处理1 0 m i n 后，阴 干，测定苹果中各种农药的残留量。 2 2 2 2 3 臭氧浓度对苹果中农药残留降解的影响 在大烧杯中分别放入2 0 0 0 m l 的蒸馏水，将臭氧以3 0 0 m g h 速度通入盛水的烧杯 中，放入苹果分别浸泡5 m i n 、1 0 m i n 、1 5 m i n 、2 0 m i n 、2 5 m i n 、3 0 r a i n 、3 5 m i r a 同 时在盛有等量水的另一容器中放入苹果浸泡，并作适当搅动。处理后的苹果样品 阴干，测定苹果中各种农药的残留量。 2 2 2 2 a 臭氧处理时问对降解农药残留的影响 将浸泡过农药的苹果浸没于2 0 0 0 m l 初始浓度为1 5 m g m l 的臭氧水中，适当搅 拌，放置时间分别为5m i n 、1 0 r a i n 、1 5m i n 、2 0 i n i n 、2 5r a i n 、3 0 r a i n 、4 0 m i n ，取 出样品阴干，测定苹果中各种农药的残留量。 2 2 2 3 双氧水对苹果中农药残留降解效果的研究【1 3 6 】 分别将有机磷农药、拟除虫菊酯类农药按要求稀释到浓度为0 0 5 的溶液，分 别取若干苹果苹果分别浸泡到以上农药的标准溶液中，过1 0 r a i n 后取出，待苹果表 面药液充分干燥后，进行双氧水处理。 2 2 2 3 1 p h 直对双氧水降解苹果中残留农药的影响 在大烧杯中放入等量蒸馏水，用l m o l 皿的h c i 溶液或4 n a o h 溶液将蒸馏水的 口h 值分别调至3 、5 、7 、9 、1 1 ，各添加1 0 双氧水，把浸泡过农药的苹果放入其 中，在室温下处理l o m i n 后，阴干，测定苹果中各种农药的残留量。 2 2 2 3 2 温度对双氧水降解苹果中残留农药的影响 把浸泡过农药的苹果放入1 0 的双氧水溶液中，分别在1 0 、1 5 、2 0 、2 5 、3 0 、 3 5 下处理1 0 m i n ，阴干，测定苹果中各种农药的残留量。 2 2 2 3 3 双氧水添加量对苹果中残留农药的影响 把浸泡过农药的苹果放入蒸馏水中，分别添加2 、4 、6 、8 、1 0 、1 2 双氧水， 在室温下处理l o m i n ，阴干，测定苹果中各种农药的残留量。 2 2 2 3 4 双氧水处理时问对苹果中残留农药的影响 把浸泡过农药的苹果放入1 0 的双氧水溶液中，在室温下分别处理1 0 、2 0 、3 0 、 4 0 、5 0 r a i n ，处理后的苹果样品阴干后，然后测定苹果中各种农药的残留量。 3 结果与分析 3 1 标准曲线的制作 3 1 1 苹果中有机氯农药标准曲线和回归方程 有机氯农药在不同浓度下在气相色谱中依据2 2 1 4 1 的操作条件下测得的峰 高见表6 。 表6 有机氯农药的浓度与其对应峰高的关系( m m ) a 一6 6 6 1 3 6 6 6 y 一6 6 6 d 6 6 6 p p - d d e p p - d d d 叩 - d d t 1 1 8 8 9 1 1 2 5 8 8 2 5 2 7 3 2 0 4 1 0 8 1 5 9 1 2 6 9 8 6 8 1 0 3 3 1 6 1 5 6 2 5 6 2 3 9 1 2 6 8 7 1 4 9 5 7 l 3 2 l 4 5 1 5 2 8 2 5 8 1 7 5 2 5 3 9 8 6 5 3 9 8 3 8 1 0 9 6 4 6 l 3 3 8 4 7 9 塑：里旦! ! ! ! ! ! 塑! ! ! 根据表6 中六六六、d d t 及其异构体标准品的浓度梯度，按2 2 1 4 1 色谱操作条 件测定峰高值，制作8 种有机氯农药标准曲线，并计算各自的回归方程，分别见图 l 一8 。 量 v 恒 彗 匡 v 恒 誊 星 v 框 堂 量 v 挺 堂 00 30 60 9 图7o p - d d t 农药标准曲线 1 2 0 图8 o 30 6 o 9 1 2 p p ，一d d t 农药标准曲线 由上图可以看出8 种有机氯农药的线性关系良好，灵敏度较好，相关系数在 0 9 9 4 7 0 9 9 9 3 之间。 3 1 2 有机磷农药标准曲线和回归方程 有机磷农药在不同浓度下在气相色谱中依据2 2 1 4 2 的操作条件下测得的峰 面积见表7 。 表7 有机磷农药的浓度与峰面积的关系 根据表7 中4 种有机磷农药标准品的浓度梯度和测得的相应峰面积，制作以上4 种有机磷农药标准曲线，并计算各自的回归方程，结果见图9 、l o 、1l 、1 2 。 一 娶 旧 髫 。 昌 一 释 l 县 磐 oo 4o 8l t21 62 图9对硫磷农药标准曲线 oo 4o 8 1 21 62 图l l 乐果农药标准曲线 遣 u 娶 喧 髫 飞 v 嚣 且 髫 oo 4o 81 2162 图1 2马拉硫磷农药标准曲线 上述4 种有机磷农药回归方程的相关系数均在0 9 9 以上，表明该方法线性良 好，灵敏度高。 3 1 3 拟除虫菊酯类农药标准曲线和回归方程 拟除虫菊酯农药在不同浓度下在气相色谱中依据2 2 1 4 3 的操作条件下测得 2 7 哪哪洲咖。 8 7 6 5 4 3 2 l 0 姗螂善|铷啪枷啪印 帅椰伽0 蚴删删鲫葶|伽铷枷啪 的峰面积见表8 。 表8 拟除虫菊酯类农药的浓度与峰面积的关系 根据表8 中4 种拟除虫菊酯农药标准品的浓度梯度和测得的相应的峰面积，制 作4 种拟除虫菊酯农药标准曲线，并计算各自的回归方程，见表图1 3 、1 4 、1 5 、1 6 。 4 0 0 0 0 3 5 0 0 0 3 0 0 0 0 七2 5 0 0 0 2 0 0 0 0 楼 旧1 5 0 0 0 堂l 0 0 0 0 5 0 0 0 0 00 30 60 91 2 图1 3甲氰菊酯农药标准曲线 4 0 0 0 0 3 5 0 0 0 ，、3 0 0 0 0 售2 5 0 0 0 2 0 0 0 0 旧1 5 0 0 0 彗1 0 0 0 0 5 0 0 0 0 8 0 0 0 0 7 0 0 0 0 6 0 0 0 0 5 0 0 0 0 嚣4 0 0 0 0 旧3 0 0 0 0 髫2 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 m 1 ) 00 30 60 91 2 图1 4磋苯菊酯农药标准曲线 图1 5氯氰菊酯农药标准曲线图1 6 氯氟氰菊酯农药标准曲线 由上图可以看出4 种拟除虫菊酯农药残留的色谱分析线性良好，相关系数均在 0 9 9 3 1 0 9 9 8 8 之间，可以满足定量分析的需要。 3 2 不同提取剂对苹果样品处理的影响 有机氯农药 纯溶剂石油醚和复合溶剂丙酮：二氯甲烷1 ：l 和丙酮：石油醚1 ：l 提取苹果中有 机氯农药的回收率结果见表9 。 表9 不同提取剂处理苹果有机氯农药回收率( n = 3 ) 从表9 中可以看出，纯溶剂提取的六六六和d d t 回收率较混合溶剂提取样品 的农药回收率低，复合溶剂丙酮：二氯甲烷1 ：l 作为提取剂时六六六和d d t 提取率 分别在9 4 4 2 和9 6 2 1 ，用丙酮：石油醚l ：1 作为提取剂时六六六和d d t 提取率分 别在9 0 2 3 和8 4 3 6 ，d d t 回收率相对丙酮：二氯甲烷l ：1 作为提取剂时较低，因 此采用复合溶剂丙酮：二氯甲烷1 ：l 作为样品的提取溶剂效果较好。 有机磷农药 纯溶剂丙酮和复合溶剂丙酮：- - 氯甲烷l ：1 和丙酮：正己烷l ：1 提取苹果中有机 磷农药的回收率结果见表1 0 。 表1 0 不同提取剂处理苹果有机磷农药回收率( n = 3 ) 由表l o 可以看出采用复合溶剂丙酮：正己烷l ：1 作为有机磷农药的提取溶剂时 回收率较高，回收率均在9 2 9 4 以上，而用丙酮作为有机磷农药的提取溶剂时4 种 有机磷农药的回收率相对偏低，采用复合溶剂丙酮：二氯甲烷1 ：1 时马拉硫磷的回 收率较低，仅为8 3 0 5 。综合考虑本试验选用复合溶剂丙酮：正己烷l ：1 作为有机 磷农药的提取溶剂。 拟除虫菊酯类农药 不同提取溶剂( 乙腈、丙酮：石油醚l ：l g l 丙酮：正己烷1 ：1 ) 提取苹果中拟除 虫菊酯类农药的回收率结果见表1 1 。 表l l 不同提取剂处理苹果有机磷农药回收率( n = 3 ) 从表1 1 中可以看出，乙腈和丙酮：正己烷l ：l 作为提取剂提取时回收率较高， 均满足农残分析要求，但相比之下，丙酮：正己烷l ：1 作为提取剂时4 种农药的回 收率均略高于乙腈，乙腈和丙酮：正己烷l ：l 作为提取剂提取时甲氰菊酯、联苯菊 酯、氯氰菊酯、氯氟氰菊酯的回收率分别为8 9 0 7 、8 7 0 3 ，9 2 6 3 、9 6 7 2 ， 9 1 2 6 、9 4 9 1 、9 5 1 2 、9 8 3 5 ；采用丙酮：石油醚1 ：l 作为提取剂时联苯菊 酯回收率偏低，平均回收率只有7 9 6 2 ，且氯氟氰菊酯回收率差别较大。综合比较 本试验选用复合溶剂丙酮：正己烷l ：1 作为样品的提取溶剂效果较好。 3 3 提取方法对苹果样品处理的影响 在选用复合溶剂作为提取溶剂的基础上，分别选用4 种不同的提取方法处理苹 果样品( 超声波提取、m a e 法、机械振荡提取、匀浆加溶剂提取) ，每种方法作3 个平行，取其平均值，结果见表1 2 、1 3 、1 4 。 不同提取方法对苹果样品有机氯农药的影响 表1 2 不同方法提取苹果样品有机氯农药回收率( n = 3 ) 不同提取方法对苹果样品有机磷农药的影响 表1 3 不同方法提取苹果样品有机磷农药回收率( n = 3 ) 不同提取方法对苹果样品拟除虫菊酯类农药的影响 表1 4 不同方法提取苹果样品拟除虫菊酯类农药回收率( n = 3 ) 由表1 2 、表1 3 、表1 4 可见，四种方法提取苹果中有机氯、有机磷、拟除虫 菊酯农药都非常有效，四种方法( 超声提取、m a e 法、机械振荡提取、匀浆加溶剂 提取) 提取样品的回收率分别大于8 9 3 2 、8 9 2 9 、6 9 9 2 、8 5 6 4 ，但机械振 荡提取较其他三种提取方法的回收率低，回收率只达到6 9 9 2 - 8 8 6 2 。超声波振 荡提取、m a e 法、匀浆加溶剂提取苹果样品回收率较好，回收率均在8 5 以上，因 此三种方法都可作为苹果样品中农药的提取方法。但相比之下，超声波法需重复 几次才能达到与其他方法效果相当，匀浆加溶剂提取变异系数相差较大，即每次 提取样品的回收率相差较大。综合比较，试验选用m a e 法作为苹果样品的提取方 法。 3 4 净化方法对苹果样品处理的影响 有机氯农药： 分别选用浓硫酸磺化法、柱层析法、液液分配法3 种方法处理样品，每种方 法作3 个平行，取其平均值，结果见表1 5 ，不同净化方法净化样品的色谱图见图1 7 、 图1 8 、图1 9 。 表1 5 不同净化方法处理样品有机氯农药回收率( n = 3 ) a - 6 6 67 8 4 13 2 19 l _ 7 46 1 98 8 2 53 6 6 b 6 6 67 7 9 96 6 69 0 5 43 9 88 5 9 44 5 6 7 - 6 6 6 7 8 4 75 0 39 2 0 2 6 1 38 5 4 33 6 8 d 6 6 67 3 8 56 2 09 2 9 83 7 l9 0 6 23 9 6 p p d d e 7 2 1 4 4 9 89 3 4 77 6 29 1 7 97 7 6 p p - d d d 6 9 3 5 3 7 l9 0 8 41 3 09 1 2 64 6 5 o p d d t 6 7 1 95 7 88 8 6 02 9 99 0 5 03 5 3 p p 一d d t 7 0 2 82 1 39 2 0 65 6 58 9 4 75 4 6 图1 7 液液法净化处理苹果样品有机氯农药色谱图 图1 8柱层析法净化处理苹果样品有机氯农药色谱图 图】9 浓硫酸磺化法净化处理苹果样品有机氯农药色谱图 图注：1a - 6 6 62b - 6 6 6 3 6 6 4d _ 6 6 6 5p p - d d e 6p p - d d d 7 印- d d t 8p p 一d d t 从表1 5 中可以得出，液液分配法检出的农药回收率最低，回收率为6 9 3 5 7 8 4 7 ，净化效果不是很理想，从图1 7 中可以看出5 号峰p p 一d i ) e 与杂质峰的 分离较差。柱层析法与浓硫酸磺化法回收率相差不大，回收率分别为 8 8 6 0 9 3 4 7 、8 5 4 3 9 1 7 9 ，由图1 8 和图1 9 中可以看出8 种有机氯农药分离 效果较好，所以两种方法均可作为检测有机氯类农药样品处理的较为理想的净化 方法，但柱层析法与浓硫酸磺化法相比较，前者需要选择合适极性的洗脱液较为 麻烦，且需要耗费大量的有机溶剂和较长的洗脱时间；而后者仅仅使用几毫升的 浓硫酸，即可达到同样的效果，因此试验选用浓硫酸磺化法作为有机氯农药的净 化方法。 有机磷农药 分别选用液液分配法、弗罗里硅土柱、活性炭净化法3 种方法处理样品，每 种方法作3 个平行，取其平均值，结果见表1 6 ，不同净化方法净化样品的色谱图 见图2 0 、图2 l 、图2 2 。 表1 6 不同净化方法处理样品有机磷农药回收率( n = 3 ) 图2 0液液分配法净化处理样品有机磷农药色谱图 图2 1弗罗里硅土柱净化处理样品有机磷农药色谱图 图2 2活性炭柱净化处理样品有机磷农药色谱图 图注： 卜甲胺磷( m e t h a m i d o p h o s ) 2 - 乐果( o m e t h o a t e ) 3 一马拉硫磷( m a l a t h i o n ) 4 - 对硫磷( p a r a t h i o n ) 表1 6 中得出，液液分配法检出的农药回收率较低，仅为7 1 0 2 7 6 9 5 ，且从 图2 0 中可以看出2 号峰乐果和4 号峰对硫磷与杂质峰的分离较差；柱层析法和活 性炭法回收率相差甚微，回收率均大于8 5 0 4 ，另由图2 1 和图2 2 中可以看出4 种有机磷农药分离效果较好，但柱层析法和活性炭法相比较，前者需要较长的洗 脱时间，而后者操作简单。因此本试验选用活性炭拄净化作为有机磷农药的净化方 法。 拟除虫菊酯类农药： 不同净化方法( 中性氧化铝层析柱、弗罗里硅土层析柱、活性炭柱) 处理样 品拟除虫菊酯类农药回收率结果见表1 7 ，不同净化方法净化样品的色谱图见图2 3 、 图2 4 、图2 5 。 表1 7 不同净化方法处理样品拟除虫菊酯农药回收率 从表1 7 中得出，3 种净化方法的回收率相差甚小，回收率均在8 8 4 5 以上。 但从图2 3 中看出采用中性氧化铝柱净化时氯氰菊酯异构体分离效果不好：由图2 4 和图2 5 中得出采用弗罗里硅土层析柱、活性炭柱净化样品时拟除虫菊酯分离效果 较好，但活性炭柱净化时氯氰菊酯中一种异构体的信号响应值较低。因此本试验 选用弗罗里硅土柱作为拟除虫菊酯农药的净化方法。 4 雌( 誓l 图2 3 中性氧化铝柱净化处理样品拟除虫菊酯农药色谱图 图2 4 弗罗里硅土柱净化处理样品拟除虫菊酯农药色谱图 图2 5 活性炭柱净化处理样品拟除虫菊酯农药色谱图 图注：l 联苯菊酯( b i f e n t h r i n ) ： 2 一甲氰菊酯( f e n p r o p a t h r i n ) ： 3 ，4 ，5 ，6 一氯氰菊酯( c y p e r m e t h r i n ) ：7 ，8 一氯氟氰菊酯 3 5 所确定方法的可靠性分析 3 5 1 图谱分析 有机氯农药标准品、苹果空白和苹果添加农药色谱图见图2 6 、图2 7 、图2 8 。 图2 6有机氯农药标品色谱图 图2 7 苹果样品空白色谱图 图2 8 苹果样品添加有机氯农药的色谱图 图注：1a - 6 6 6 ( 4 2 8 3 r a i n )2b - 6 6 6 ( 4 7 2 1 m i n ) 3 t - 6 6 6 ( 4 7 9 6 m i n ) 4d - 6 6 6 ( 6 1 0 8 m i n ) 5p p - d d e ( 1 1 3 2 9 m i n )6p p - d d d ( 1 2 5 1 3 m i n ) 7o p d d t ( 1 2 8 6 5 m i n ) 8p p - d d t ( 1 4 0 6 2 m i n ) 结果表明：六六六、d d t 农药标准品的4 种同分异构体的分离较好，苹果样品 添加有机氯农药的色谱图峰形标准，说明仪器条件适合。 有机磷农药标准品、苹果空白和苹果添加农药色谱图见图2 9 、图3 0 、图3 l 。 川 图2 9有机磷农药标品色谱图 ，。j l 。、一。，。_ 6 一 图3 0苹果样品空白色谱图 图3 l 苹果样品添加有机磷农药的色谱图 图注：卜甲胺磷( 4 0 6 3 m i n )2 - 乐果( 8 3 4 2 m i n ) 3 一马拉硫磷( 1 1 6 7 5 m i n ) 4 - 对硫磷( 1 2 5 3 8 m i n ) 结果表明：4 种有机磷农药的分离较好，苹果样品添加有机磷农药的色谱图 峰形标准，重现性好，说明仪器条件适合。 3 7 拟除虫菊酯农药标准品、苹果空白和苹果添加农药色谱图见图3 2 、图3 3 、图3 4 。 l 图3 2 拟除虫菊酯农药标品色谱图 图3 3苹果样品空白色谱图 图3 4 苹果样品添加拟除虫菊酯农药的色谱图 图注：l 联苯菊酯( 3 2 9 8 m i n ) 2 一甲氰菊酯( 4 3 8 6 m i n ) ； 3 ，4 ，5 ，6 一氯氰菊酯( 6 0 6 7 m i n ，6 5 7 2 m i n ，6 6 0 8 m i n ，6 6 2 1 m i n ) ； 7 ，8 一氯氟氰菊酯( 1 0 0 1 2 m i n ，1 0 6 3 1 r a i n ) 结果表明：4 种拟除虫菊酯农药的分离效果较好，苹果样品添加拟除虫菊酯 农药的色谱图峰形标准，重现性好，说明仪器条件适合。 3 5 2 精密度和准确度分析 以回收率表示方法的准确度，以变异系数表示精密度。在苹果样品中准确添 加一定量的混合标准溶液进行添加回收率试验，结果见表1 8 、表1 9 、表2 0 。 表1 8 苹果中添加有机氯农药回收率及变异系数( n = 3 ) ( ) 加入量 ! 堕壁 墨星兰垫堕堕 墅堕堕 m g l回收率c v 回收率c “回收率c “回收率c “ 表2 0 苹果中添加拟除虫菊酯类农药回收率及变异系数( n = 3 ) ( ) 结果表明：本试验方法处理和测定苹果样品回收率较好，均在8 2 9 _ 一1 0 1 8 。 可见，本试验方法准确度高；变异系数8 0 1 ，表明试验方法精密度高，满足苹 果中残留农药检测的需要。 3 5 3 灵敏度分析 根据