《分枝杆菌属》PPT课件.ppt

抗酸染色法,石炭酸复红 加热 5分钟 3%盐酸酒精脱色 30秒 吕氏美兰 5分钟,结核杆菌,肺泡巨噬细胞吞噬,巨噬细胞破坏， 大量结核杆菌释 放至肺泡,飞 沫,繁 殖,炎 症 （原发灶）,经淋巴管,肺门淋巴结,淋巴管炎 肺门淋巴结 肿大（原发 综合征）,5发展成 活动性肺结核,90的原发感染 形成纤维化或 钙化，不治而愈,致病机制原发感染,外源性感染 内源性感染,干酪样坏死 （多局限）,形成空洞,向外排菌,干酪样结节破溃,致病机制继发感染,第14章 分 枝 杆 菌 属,Mycobacterium,共同特征,菌体细长、微弯，有分枝生长的趋势 细胞壁含有大量的脂质 常用染色方法抗酸染色（红色），又名抗酸杆菌 无鞭毛、无芽胞，不产外毒素或内毒素 引起的疾病呈慢性，并伴有肉芽肿,分 类： 结核分枝杆菌 非结核分枝杆菌 麻风分枝杆菌,一般情况,第一节 结核分枝杆菌,M. tuberculosis,结核分枝杆菌（M.tuberculosis）简称结核杆菌（tubercle bacilli），是结核病的病原体 人体的所有组织和器官均可感染结核杆菌而发病，其中以肺结核最常见,一般情况,柯霍 1882: 发现结核杆菌,Robert Koch (1843-1910) 细菌固体培养基 细菌染色法 发现结核杆菌、炭疽芽胞杆菌、霍乱弧菌 提取旧结核菌素及应用 郭霍法则,结核分枝杆菌流行概况,结核病是一种古老的传染病，俗称“痨病” 在80年代曾被认为是人类已经基本征服的疾病之一，上世纪90年代又卷土重来 世界卫生组织于1993年史无前例地宣布“全球结核病紧急状态”，并将3月24日定为“世界防治结核病日”,国际流行概况,目前全球三分之一（约20亿）已经感染 了结核菌 全球现有结核病人2000万 每年新发病人900万例 每年约有300万人死于结核病,国内流行概况,我国是全球22个结核病高负担国家之一，结核病人数占西太区病人数的70%，占全球的16% 全国约有5.5亿人感染结核菌 全国有活动性肺结核病人500万 每年约有25万人死于结核病 传染病死亡中有2/3是由结核病引起的,生物学特性 形态与染色,细长略带弯曲的杆菌 常聚集成条索状 抗酸染色阳性（红色）,生物学特性 培养特性,营养要求高 含蛋黄、马铃薯、甘油等培养基 酸性环境 生长缓慢 1224小时繁殖一代，34周才出现肉眼可见菌落,又馋又懒,生物学特性 培养特性,罗氏培养基: 黄色、干燥、菜花状菌落 液体培养基中细菌浮于液面,生物学特性 生化反应,触酶试验（+） 热触酶试验（）,与非结核分枝 杆菌鉴别试验,生物学特性 抵抗力,耐干燥：粘附在尘埃上保持传染性810天， 在干燥的痰液中可存活68个月。 耐酸碱：3盐酸、6硫酸、4氢氧化钠作 用30分钟不受影响 耐一般消毒剂：对1：13000的孔雀绿有抵抗力,三耐,怕湿热：液体中626315分钟或煮沸 怕紫外线：直接日光照射数小时即被杀灭 怕酒精、石炭酸、来苏儿 怕抗痨药,四怕,生物学特性 抵抗力,生物学特性 变异性,毒力变异： 牛型结核杆菌经13年230代培养，制成卡介苗（减毒活菌苗），广泛用于预防接种。 耐药性变异： 耐多药结核病 （MDRTB）,致病性,该菌不产生内、外毒素；无侵袭性酶 主要致病因素： 菌体成份,致病性致病因素,脂质：磷脂 脂肪酸 蜡质D 硫酸脑苷脂和硫酸多酰基化海藻糖 蛋白质 多糖 核酸 荚膜,脂质,脂肪酸 ： 与抗酸性有关；其中索状因子使结核分枝杆菌在液体培养基相互粘连平行排列呈索状，破坏线粒体膜，影响细胞呼吸，抑制白细胞游走和引起慢性肉芽肿。,脂质,磷脂：促进单核细胞增生，引起结核结节、 干酪样坏死 蜡质D：肽糖脂与分枝菌酸的复合物，作为佐 剂，激发机体产生迟发性变态反应 硫酸脑苷脂和硫酸多酰基化海藻糖：抑制吞 噬细胞中吞噬体与溶酶体的融合，使 结核杆菌在吞噬细胞中长期存在,结核菌素：诱发机体产生抗体，但无保护作用，与蜡质D一起注入体内引起迟发型变态反应。 分枝杆菌生长素（mycobic-tin）： 将环境中的铁转运到菌体内与宿主机体竞争铁。,蛋白质,多糖、核酸、荚膜,多糖：使中性粒细胞增多，引起局部病灶细 胞浸润 核酸：rRNA刺激机体产生特异性细胞免疫 荚膜：与细胞表面C3受体结合,帮助细菌侵入 保护菌体 提供营养,肺部感染：原发感染 继发感染 肺外感染：脑、肾、骨、关节、生殖器官等 全身播散性结核 消化道结核 皮肤结核,致病性所致疾病,免 疫 性,细胞免疫：属传染免疫（infection immunity），又叫带菌免疫，即只有结核杆菌在体内才会有免疫力，一旦体内结核菌被杀灭，免疫也随之消失。 体液免疫：机体能够产生抗体但无保护性作用。,以细胞免疫为主,结核杆菌,健康 豚鼠,皮下注射,再 次,1014天局部溃烂不愈， 附近淋巴结肿大， 细菌扩散至全身,结核杆菌,皮下注射,康复 豚鼠,1-2天，局部迅速产生浅 溃烂，易愈合。,郭霍现象,再次,大量 结核杆菌,皮下注射,豚鼠,局部及全身严重的变 态反应，甚至死亡,结核菌素蛋白 蜡质D,机体（巨噬细胞 移动抑制因子被 激活）,注入,产生变态反应 不产生免疫,结核杆菌 rRNA,注入,机体（结核杆菌 生长抑制因子被 激活）,产生免疫反应 不产生变态反应,完整结核杆菌,注入,激活以上两种 细胞因子,产生免疫反应 产生变态反应,结核杆菌诱导免疫物质：,是应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核杆菌是否能引起变态反应的一种试验。,结核菌素实验,概念,原理,人类感染结核杆菌后，产生免疫力的同时也会产生迟发型超敏反应 感染过结核杆菌 超敏反应 阳性 未感染过 无超敏反应 阴性,旧结核菌素（old tuberculin，OT）：主要成分是通过将结核菌接种于甘油肉汤培养基中，培养48周加热浓缩过滤而成。 纯蛋白衍化物（purified protein derivative， PPD）: OT纯三氯醋酸过滤而成。,试剂,常规试验： OT或PPD 5单位,皮内注射,前臂内侧,硬结直径,4872h,方法,阳性：0.51.5cm： 感染过结核杆菌，但不一定是结核病。 强阳性：1.5cm： 可能有活动性结核病。 阴性： 0.5cm： 未感染过结核； 感染初期； 老年人； 严重结核患者或正患有其他传染病； 获得性细胞免疫低下者,意义,选择卡介苗接种效果或免疫效果的测定。 婴幼儿结核病诊断的参考。 测定肿瘤患者的非特异性细胞免疫功能。 未接种卡介苗人群中结核病的流行病学调查。,应用,微生物学检查,标本：根据感染部位取材，如 痰、尿、胸水等。,微生物学检查是结核 的确诊试验。,标本直接涂片法：标本直接涂片行抗酸染色，镜检，结核杆菌为红色细长，略带弯曲的细菌。 浓缩集菌法：标本经酸或碱处理15分钟后离心沉淀，沉渣涂片，抗酸染色后镜检。,方法,分离培养,方法,罗氏培养基 液体培养基,集菌后的 材料注于 豚鼠腹股 沟皮下,局部淋巴结 肿大 OT试验阳性,34周,解剖,肺、肝、淋巴结 有无结核病变,作形态、 培养检查,68周不发病,解剖检查,动物试验,方法,结核核酸检测： PCR法 基因探针技术,方法,防治原则,预防：发现和治疗痰菌阳性的患者 新生儿接种卡介苗,治疗,直接督导下