坐骨神经腓肠肌标本的制备课件

坐骨神经腓肠肌标本制备 肌肉收缩性质 医学基础实验教学中心 薛 翔 医学基础实验教学中心 薛 翔 实验目的 v学会坐骨神经腓肠肌标本的制备 v通过观察肌肉收缩的性质，了解神经冲动的 频率和强度与肌肉收缩之间的关系 v明确阈下刺激、阈刺激、阈上刺激以及单收 缩、不完全强直收缩和完全强直收缩的概念 兴奋性 接受刺激产生反应（动作电位）的能力 刺激:能引起机体产生反应的内外环境变化（物理 、化学、生物、社会因素） 刺激引起反应的条件：刺激强度、刺激的持续时间 、刺激强度对时间的变化率。其它条件不变，引起 组织兴奋所需刺激强度与刺激持续时间呈反变关系 。 阈强度/阈值：引起活组织细胞产生反应所需的最小刺激强 度 阈下刺激：刺激强度小于阈值的刺激 阈上刺激：刺激强度大于阈值的刺激 阈下刺激 阈刺激 最适刺激 最大收缩 影响骨骼肌收缩的因素 v 前负荷 v 后负荷 v 肌肉收缩能力 在适宜的前负荷条件下，在一定范围内，骨 骼肌的收缩形式与刺激频率有关。 肌肉的收缩形式 v 单收缩（刺激间隔时间收缩+舒张期） v 不完全强直收缩(收缩期刺激间隔时间收缩+舒张期) v 完全强直收缩（刺激间隔时间收缩期） 实验动物、器材和试剂 v蟾蜍 v蛙类手术器械1套，刺蛙针1根，锌铜弓1只 ，玻璃分针一根，万能支架，PcLab实验系 统，张力换能器，烧杯，任氏液 方法与步骤 一、坐骨神经腓肠肌标本的制备 1 破坏脑脊髓 左手握蟾蜍，食指下压吻端，拇指按压背 部，其余三指紧贴腹部。找到枕骨大孔刺入1-2mm，分别捣损脑 组织和脊髓（脑和脊髓完全破坏的标志是：呼吸停止，四肢松 软并处于对称位置） 2 剪除躯干上部及内脏 在骶髂关节水平上2cm处剪断脊 柱，去除头、前肢和内脏，保留部分脊柱和下肢。用任氏液 小心冲洗坐骨神经及其周围组织上的血液。 3 剥皮 剪去尾骨，剥去余下组织的皮肤，沿脊柱正 中到耻骨联合将标本剪开，标本放到盛有任氏液的烧 杯中。 一、坐骨神经腓肠肌标本的制备 4 游离坐骨神经 腓肠肌向上将标本固定于蛙板上， 由脊柱仔细将坐骨神经分离至膝关节处，并在脊柱旁结 扎。 5 制成坐骨神经腓肠肌标本 剪断膝关节周围所有 大腿肌肉，剪断股骨（保留约1cm），在跟腱处结扎 并剪断腓肠肌，将膝关节以下小腿部分全部剪除，剩 下即为坐骨神经腓肠肌标本。 一、坐骨神经腓肠肌标本的制备 6 标本检验 用锌铜弓轻轻刺激坐骨神经，腓肠肌收 缩即表示标本制备完好。 二、连接刺激器和记录装置 1 将张力换能器和肌槽固定在铁支架上，腓肠肌跟腱 的结扎线固定在换能器弹簧片上，此连线不宜太紧或太 松，并应与桌面垂直 2 将穿好手术线的坐骨神经轻轻提起，放在刺激电极 上，并保证接触良好 3 换能器的输出 端连接放大器通道， 点击基线调零，采样 间隔2ms 三、实验内容 1刺激强度对肌肉收缩幅度的影响 1） 刺激方式用单刺激,刺激强度初始值设为0.1V，然 后采样； 2） 将刺激强度逐步增大，观察肌肉收缩反应开始出现 和逐渐增大，记录阈刺激和最大刺激强度数值。 2刺激频率对肌肉收缩形式的影响 1） 选用串刺激，串脉冲数选“1”，用最大刺激 强度采样，观察波形的高度与宽度； 2） 逐渐增加脉冲数，观察肌肉收缩形式的变化， 记录出现不完全强直收缩和完全强直收缩时的刺激 频率。 注意事项 1.抓取蟾蜍时，小心毒液 2.分离神经时，应用玻璃分针 3.保持坐骨神经腓肠肌标本活性（加任式液、不要用手 和器械夹捏） 4.每次刺激后必须让标本有一定的休息间隔（0.5-1min ） 思考题 1. 为什么在一定范围内骨骼肌的收缩张力会随 着刺激强度的大小而变化？ 2. 为什么随着刺激频率的增加，肌肉的收缩 会逐渐复合而发生不完全强直收缩或完全强 直收缩？ 坐骨神经干标本的 传导速度测定 实验目的 1. 学会蟾蜍坐骨神经干标本的制备 2. 了解神经干动作电位传导速度的测定 v 实验动物 蟾蜍 v 药品和器材 蛙类手术器械，刺蛙针，锌铜弓，玻璃分 针，万能支架，医用计算机实验系统，神经 屏蔽盒，任氏液 方法与步骤 1. 制备蟾蜍坐骨神经干标本 1）破坏脑脊髓 2）剪除躯干上部及内脏 3）剥皮 4）游离坐骨神经 5） 坐骨神经干标本的制备 在胫腓神经处结扎制成 神经干标本或在腓肠肌两侧肌沟内找胫神经和腓神经 ，剪去其中一支，分离另一支直至足趾，结扎并在远 端剪断，制成坐骨神经干胫神经或腓神经标本，放入 任氏液中备用 2.连接实验装置及参数设置 3. 引导动作电位 1） 将神经干标本置于屏蔽盒内，并保证接触良好 2） 刺激强度0.1V开始，逐渐增大，观察动作电位波 形 3） 测神经干动作电位传导速度 1. 测定神经冲动在神经干上传导的距离(d)与 通过这段距离所需的时间(t)，然后根据V=d/t可求 出神经冲动的传导速度 2. 在实际测量中，