细菌病的一搬诊断程序ppt课件

第三节 细菌的人工培养 是指把细菌生长繁殖所需的各种营养物质 合理地调配在一起制成的营养基质。 一、培养基的概念 二、培养基种类 液体培养基、固体培养基和半固体培养基 三种。 液体培养基：含有各种营养成分的水溶液。 固体培养基：在液体培养基中加入23%琼 脂即为固体培养基。 半固体培养基：加入0.3 0.5%琼脂即为半 固体培养基。 (一)按其物理性状分为 1、基础培养基 含有培养一般细菌的最基本成分。可供大 多数细菌人工培养用。如肉汤培养基、普通琼 脂培养基和蛋白胨水等。 (二)按其用途分为 2、营养培养基 于基础培养基中加入高营养物质如葡萄 糖、血液、血清、腹水、生长因子等，以 满足营养要求较高的细菌生长需要。有的 细菌还需加入特殊物质，如结核杆菌需加 入鸡蛋清、马铃薯、甘油等才能良好生长。 3、选择培养基 在培养基中加入某些化学物质，而选 择性地让欲分离的细菌旺盛生长的培养基 ，使用后可以达到选择分离的目的。如胆 盐和蔷薇色酸可以选择性地抑制G+菌的生 长，而不影响G菌的生长。在培养基中加 入二药后可选择性地分离出肠道杆菌。 利用细菌分解底物及其代谢产 物的不同，可在培养基中加入某种物质 和指示剂，即制为鉴别培养基，目的是 使得混合在一起的多种细菌在同一种培 养基上生长时，表现出不同的、肉眼可 鉴别的变化，从而达到鉴别细菌的目的 。 4、鉴别培养基 5.厌氧培养基 厌氧菌不能在有氧环境中生长。将培养基与空 气隔绝，或向培养基中加入一些物质，使培养 基中的氧气耗尽，则可用于培养厌氧菌。如肝 片肉汤培养基，应用时于液体表面加盖液体石 蜡以隔绝空气。 区分选择培养基和鉴别培养基 选择培养基上的菌类，有2种或两种以上 时，只有适应环境（选择培养基的基底 ）的菌种才能存活。 鉴别培养基上的菌类，有两种或两种以 上时，在培养基中加入某种试剂或化学 药品，使培养后会发生某种变化，从而 区别不同类型的微生物（但培养基上的 各个菌种均不死亡）。 三、制备培养基的基本程序 配料溶化测定及矫正pH过滤 分装灭菌无菌检验备用 培养基的基本要求 1.含有丰富的营养物质，不含任何抑菌物质。 2.具有适当的pH值和水分。 3.均匀透明，易于观察。 4.经过灭菌和无菌检验。 1、细菌在固体培养基上的生长现象： 观察细菌在平板上的菌落特征： 菌落：细菌接种在固体培养基上，经过一 定时间的培养后，表面可出现肉眼可见的单个 细菌集团，称为菌落。 四、细菌在培养基上的生长情况 形态、大小、边缘、表面构造（湿润度和光滑 度）、隆起度、透明度、颜色等，及在血平板 上的溶血现象（溶血、溶血）。 2、细菌在半固体培养基中的生长现象 有鞭毛的细菌 ，沿穿剌线呈模 糊羽毛状生长。 无鞭毛的细菌 ，沿穿剌线呈清 晰的线状生长。 3、细菌在液体培养基中的生长现象 观察肉汤培养 物的混浊度、管 底沉淀、肉汤表 面菌膜或菌环， 以及有无汽泡等 。 临床标本 预处理增 菌 接种培养基，分离单个菌落 各种鉴定试验 涂片染色 快速诊 断试验 生化试验血清学实验涂片染色药敏试验动物试验 初步诊 断报告 最终诊断报告 第四节 细菌病的一般诊断程序 一、病料的采集、保存及运送 1 1）尽早采集尽早采集 一旦怀疑细菌感染，应及一旦怀疑细菌感染，应及 时采集标本进行细菌学检验，尽早获得时采集标本进行细菌学检验，尽早获得 病原学诊断和抗生素敏感资料，对细菌病原学诊断和抗生素敏感资料，对细菌 感染的治疗具有极其重要意义；感染的治疗具有极其重要意义； 2 2）标本采集尽量在）标本采集尽量在用药前进行用药前进行； 3 3）根据可疑病原菌和实验方法的不同）根据可疑病原菌和实验方法的不同选选 择合适的采集时期择合适的采集时期； 4 4）注意注意无菌操作无菌操作，尽量避免杂菌污染，尽量避免杂菌污染； 5 5）注意采集的注意采集的方法和部位方法和部位； 6 6）标本必须新鲜，）标本必须新鲜，及时运送及时运送； 7 7）标本的）标本的保存、处理要严格。保存、处理要严格。 二、细菌的形态检查 1.单染色法 2.复染色法 革兰氏（G）染色法 革兰氏阳性菌（G+菌）蓝紫色 革兰氏阴性菌（G-菌）红色 细菌的接种培养方法 1.倾注平皿接种法 2.平板划线分离法 3.斜面接种法 4.穿刺接种法 5.液体培养基接种法 三、细菌的分离培养 必须用纯培养物鉴定选用单个菌落 四、细菌的生化试验 1.糖分解试验 2.维-培试验 3.甲基红试验 4.枸橼酸盐利用