肿瘤模型ppt课件

肿瘤疾病动物模型 1 1 分类 1. 自发性肿瘤（spontaneous tumor）动物模型： 指实验动物未经任何有意识的人工处置，在自然情况 下发生的肿瘤所形成的模型。 2. 诱发性肿瘤（induced tumor）动物模型： 是使用致癌因素在实验条件下诱发动物发生肿 瘤的动物模型。 3. 移植性肿瘤（transplant tumor）动物模型： 指将动物或人体肿瘤移植同种或异种动物连续 传代而培养出的模型。 2 2 n分类： 1. 皮下肿瘤模型 2. 原位肿瘤模型 3 3 n实验动物种群中不经有意识的人工实验处置而自然发生 的一类肿瘤称之为自发性肿瘤。自发性肿瘤发生的类型 和发病率可随实验动物的种属、品系及类型的不同而各 有差异。 n某些近交品系动物在一定年龄内，可以发生一定比率的 某种自发性肿瘤。 n肿瘤实验研究中，选用高发病率的实验动物肿瘤模型作 为研究对象，否则就无法进行研究。 n目前已培育了许多种小鼠自发肿瘤，从肿瘤发生学上看 ，这些自发瘤与人体肿瘤相似，进行肿瘤发病学和药物 筛选等实验应属理想。 n但由于不易同时获得大批病程相似的自发瘤动物，又因 这种肿瘤生长较慢，实验周期相对较长，所以一般很少 用于筛药。 自发性肿瘤动物模型 4 4 自发性肿瘤模型优缺点 n自发性肿瘤通常比用实验方法诱发的肿瘤与人类所患 的肿瘤更为相似，有利于将动物实验结果推用到人； n这一类肿瘤发生的条件比较自然，有可能通过细致观 察和统计分析而发现原来没有发现的环境的或其它的 致癌因素，可以着重观察遗传因素在肿瘤发生上的作 用。 n肿瘤的发生情况可能参差不齐，不可能在短时间内获 得大量肿瘤学材料，观察时间可能较长，实验耗费较 大。 5 5 应用举例1AKR小鼠 n应用AKR自发白血病小鼠进行研究，该小鼠出生后一年 半内有高于90%的发病率，曾作为研究人体白血病和 淋巴瘤的模型，它对药物的治疗反应类似儿童急性淋 巴性白血病。 n由于病程较长，已用于综合化疗研究药物诱导缓解和 维持缓解的最适治疗方案。 n此肿瘤可用强的松和长春新碱诱导缓解，也可以环磷 酰胺和甲基-CCNU诱导缓解，再用阿糖胞苷维持缓解， 后者疗效最好。 6 6 AKR白血病的生长规律研究提示，该鼠 出生时即带有致癌的RNA病毒，于鼠龄 613月内，每月小鼠自发瘤的死亡率为 1520%，而伴有增殖能力的瘤细胞常 于诊断前一个月在小鼠胸腺中出现，诊 断后中等生存期为16天，以上规律的阐 明为化疗提供了基础知识。 7 7 应用举例2C3H小鼠 nC3H小鼠出生后有高的乳腺癌发生率，A系小鼠出生后 18个月内有90%的肺癌发生率，AK和C57小鼠有高的 白血病发生率等等，这些肿瘤多发生于体表部位或易 为目前体检新发现的部位。 n当前新药研究中自发瘤模型应用最多的小鼠自发乳癌 ，常用高自发率的C3H小鼠或BALB/C雌鼠与DBA/2雄鼠 杂交的第一代CD2F1小鼠（自发乳癌），它们于生后 10个半月可摸到肿瘤，而后生存2035天死亡，大量 繁殖此类小鼠，自发瘤可高达70%。一般于摸到肿瘤 块后分组给药，观察其平均生存时间的延长率来评价 药物的疗效。 8 8 1.方法： 1) 原位诱发：指将致癌物直接与动物靶组织或靶器官接触 而诱发该组织或器官发生肿瘤，接触方法可通过涂抹、灌 注、喂养或埋置等 。 2) 异位诱发：将与致癌物接触后的动物组织或器官埋置于 该动物或另一正常动物皮下而产生的该组织或器官的肿瘤 。异位诱发肿瘤具有易于观察和取材的优点。 2.诱癌物： 放射线局部照射、化学致癌物（烷化剂、亚硝胺类 、芳香胺类）、生物毒素（黄曲酶毒素）、细菌（幽门螺杆 菌）、肿瘤病毒感染。 2 诱发性肿瘤模型 9 9 致癌物的诱癌过程需时较长，成功率多数达 不到100%，肿瘤发生的潜伏期个体变异较 大，不易同时获得病程或癌块大小较均一的 动物供实验治疗之用，再加之肿瘤细胞的形 态学特征常是多种多样，且致癌多瘤病毒常 诱发多部位肿瘤，故不常用于药物筛选，但 从病因学角度分析，它与人体肿瘤较为近似 ，故此模型常用于特定的深入研究。由于该 类型肿瘤生长较慢，瘤细胞增殖比率低，倍 增时间长，更类似于人肿瘤细胞动力学特征 ，常用于综合化疗或肿瘤预防方面的研究。 2 诱发性肿瘤模型 1010 1. 二乙基亚硝胺(DEN)诱发小鼠肺癌： 采用小鼠皮下注射1DEN水溶液，每周一次，(每次 剂量为56mg/kg体重，总剂量为868mg)。观察时间为 100d左右。此模型诱发率约40%。若将DEN总剂量增到 1176mg时，半年诱发率可达90以上。 2. 亚胺基偶氮甲苯(OAAT)诱发小鼠肝癌： 用lOAAT苯溶液涂于动物两肩胛间皮肤上，隔日1次， 每次23滴、一般涂100次。7个月以上诱发肝肿瘤约55。 3. 黄曲霉素诱发大鼠肝癌： 在大鼠饲料中加入黄曲霉素，含0.011-0.015ppm，喂养 6个月，诱发率达80。 举例： 1111 1. 必须适当选择：致瘤方法、动物种系、致癌 物种类与溶剂、给药剂量与途径及观察时间 等尽量简便可行，有较好的重复性，并有利 于与人肿瘤比较。 2. 方法和种系应对所用致瘤物敏感。 3. 致癌物的剂量应能保证动物存活率较高、诱 发期较短而又可诱发较高频率的肿瘤 注意事项 1212 各类化学致癌剂对动物致癌的特点 n芳香胺及偶氮染料类致癌物的特点 通常需要长期、大量给药才能致癌； 肿瘤多发生于远隔作用部位的器官如膀胱、肝等； 有明显的种属差异； 其本身不是直接致癌物，致癌是由于其某种代谢产物 的作用； 其致癌作用往往受营养或激素的影响，例如，奶黄仅 在以缺少蛋白质和核黄素的饲料喂饲大鼠时才引起肝 癌，而且雄性大鼠较敏感，邻位氨基偶氮甲苯则易起 雌性大鼠的肝癌。 1313 n亚硝胺类的致癌特点是： 致癌性强，小剂量一次给药即可致癌； 对多种动物（包括猴、豚鼠等不易诱发肿瘤的动物 ）的许多器官（包括食管、脑、鼻窦等不易引起癌的 器官）能致癌，甚至可以通过胎盘致癌，如给怀孕大 鼠以二乙基亚硝胺（Diethy lnitrosamine，DEN）可比 较快地引起仔鼠的神经胶质细胞瘤； 具有不同结构的亚硝胺有明显的器官亲和性，例如 二甲基亚硝胺等对称的衍生物常引起肝癌，不对称的 亚硝胺如甲基苄基亚硝胺常诱发食管癌；在大鼠，二 丁基亚硝胺能引起膀胱癌，二戊基亚硝胺能诱发肺癌 ，而N-甲基-N-硝基-N1-亚硝基胍则能引起胃肠癌。 1414 黄曲霉毒素 n黄曲霉毒素的毒性很强，很小剂量（1mg/kg 体重）即可使狗、幼龄大鼠、火鸡或小鸭致 死；其致癌性也极强，最小致癌剂量比亚硝 胺还要小数十倍，是已知化学致癌物中作用 最强者。 n它能诱发多种动物（从鱼到猴）的肝癌，也 可引起肾、胃及结肠的腺癌，滴入气管内可 引起肺鳞状细胞癌；注入皮下可引起局部的 肉瘤，还有报告认为，它可引起泪腺、乳腺 、卵巢等其它部位的肿瘤。 1515 方法： 1. 实体瘤移植： 肿瘤细胞皮下接种7-10d处死荷瘤动物 选择生长良好、无坏死液化的瘤组织2- 3mm3+生理盐水或其它营养液无菌套管针抽 吸接种同种受体动物右前腋窝皮下。 2. 腹水瘤移植： 肿瘤细胞皮下接种7-10d处死荷瘤动物 取腹水含葡萄糖平衡盐水稀释至适当浓度腹 腔注射（腹水瘤）或皮下注射（实体瘤）。 移植性肿瘤模型： 1616 n目前肿瘤化疗所应用的大多数药物，都经动 物移植性肿瘤试验而被发现，因此它是筛选 抗肿瘤新药中最常用的模型。 n其优点是接种一定量瘤细胞或无细胞滤液（ 病毒性肿瘤）后，可以使一群动物带有同样 的肿瘤，生长速率较一致，个体差异较小， 接种存活率近100%。对宿主的影响也类似， 易于客观判断疗效，且可在同种或同品系动 物中连续移植，长期保留供试验之用，试验