乙型肝炎病毒基因型检测的临床意义

乙型肝炎病毒基因型检测的临床意义 乙型肝炎病毒（HBV）基因型分为 AH 八个型，不同基因型与病情的严重程度、预后、抗 病毒治疗效果等方面都可能有一定的相关性1-3。本文对上海市 165 例乙肝患者的 HBV 基因型 分布及与病情严重程度的关系，进行了初步的研究。另外，HBV 的前 C 区变异会影响抗病毒药 物的选择及治疗的效果，本文就 HBV 基因型与这些变异及病毒的复制能力是否相关，进行了探 讨。 材料与方法 1. 研究对象：165 份血清标本来自上海市传染病医院的住院和门诊乙肝患者，包括 114 例慢 性乙型肝炎（CHB），26 例慢性重型乙型肝炎（CHG），22 例肝硬化（LC），2 例急性乙型肝炎 （AHB），1 例肝癌（HCC）。疾病的诊断依据 2000 年全国病毒性肝炎和肝病会议拟订的方案。 并从上述收集的部分标本进行 HBV 血清学标志物、前 C 区 1896 位变异及 HBV DNA 定量检测。 2. 方法：HBV 基因型检测：以特异性引物套式 PCR 法检测不同的 HBV 基因型4。取部分不 同基因型的扩增产物进行测序分析，证实二种分型方法的结果一致。 前 C 区变异检测：以特异性引物 PCR 法进行检测，部分结果也经测序证实。 HBV DNA 载量测定：以 TaqMan 探针实时荧光 PCR 法定量检测。 3. 统计学处理：用卡方检验分析所得的数据。 结果 1. HBV 感染者的基因型分析结果：从表 1 可以看出，A 型 1 例（0.6%），B 型 55 例 （33.3%），C 型 105 例（63.6%），D 型 2 例（1.2%）A/B 和 B/C 混合型各 1 例（0.6%，0.6%）， 没有发现 E、F、G、H 型及其混合型。基因型在不同临床型患者中的分布情况其总体构成比中， LC 与 CHB 患者的基因型分布有统计学差异， C 型在 CHB 和 LC 患者中所占百分比明显高于 B 型， 分别为 61.4%比 36.8%（P0.01）和 90.9%比 9.1%（P0.001）。 CHG 患者的基因型分布无显著 差异。因 HCC 、AHB 患者病例数少难以进行统计学分析。仅有的 2 例 AHB 患者均为 D 型。 2. 乙肝患者的 HBV 基因型与血清标志物分析结果：在 CHB 中，B 与 C 基因型比较，HBeAg、 抗 HBe 的检出率间的差异在统计学上无显著性，而 HBeAg/抗 HBe 双阳性的检出率 B 型高于 C 基 因型，分别为 9.5%和 4.3%（P0.05）。在 CHG 患者中，B 与 C 基因型相比，HBeAg、抗 HBe 和 HBeAg/抗 HBe 双阳性检出率的差异在统计学上有显著性，前者以 C 基因型为主，后两者以 B 型 为主。LC 患者在 B 型中病例数太少，没有统计意义，结果见表 2。 2 3. 乙肝患者的 HBV 基因型与前 C 区 1896 位变异，及与 HBV DNA 定量分析结果： 我们以 HBV DNA 1105Copies/ml 作为血清 HBV 高、低载量的界限，结果见表 3。B 与 C 基因型相比， 前 C 区野生株（W）阳性所占的百分比 C 型明显高于 B 型（29.1%比 12.5%，P0.05）；野生株 （W）/变异株( V)混合型所占的百分比 B 型明显高于 C 型（72.5%比 53.4%, P0.05），变异株 （V）以及 HBV DNA 定量结果在二个基因型间无显著差异。 讨论 经对上海地区乙型肝炎患者的 HBV 基因型分析，结果显示以 C 型和 B 型为主，偶见 A 型、 D 型、A/B 混合型和 B/C 混合型，未检出 E、F、G、H 及其混合基因型，与 2001 年文献报道稍有 出入5。既往流行病学调查显示我国 HBV 基因型以 C 型和 B 型为主，北方以 C 型为主，南方以 B 型为主，D 型仅见于少数民族地区，无 E 和 F 型6。本文检出的 2 例 D 型患者均为急性乙型 肝炎且有良好转归，在我国 D 型基因型报道较少，这是否与样本选择的偏差有关，因病例少， 不能判定。 多数文献报道基因型与患者病情有一定的相关性，本文也发现乙型肝炎病毒基因型在不同 临床型乙肝患者中的分布有统计学差异，其中 LC 与 CHB 患者的基因型分布差异具有统计学意 义， C 型在 CHB 和 LC 患者中的检出率明显高于 B 型，提示 C 型患者进展为肝硬化的可能性较 大。26 例 CHG 中 B 或 C 型的检出率无显著差异。有文献报道 HCC 患者中 C 型所占比例较高5， 本文所检测的患者中 HCC 仅有 1 例（A 型），因而不能作出分析。 CHB 患者中，B 基因型中的 HBeAg/抗 HBe 双阳性检出率高于 C 基因型（9.5%比 4.3%）；在 CHG 患者中，HBeAg 的检出率以 C 基因型为高，抗 HBe、HBeAg/抗 HBe 双阳性的检出率以 B 型为 3 高，这可能与 B 基因型较多和较早出现的 HBeAg 血清转换有关7。进一步结合前 C 区变异情况 分析，前 C 区野生株/变异株混合型的检出率亦是以 B 型为高（B 型 72.5%比 C 型 53.4%），这 与文献报道的 HBeAg/抗 HBe 双阳性病例中常伴有前 C 区变异一致8。有文献报道基因型与前 C 区和 C 区的变异有很大的相关性9，本文的结果显示，B 基因型前 C 区 1896 位变异率（包括 野生株/变异株混合型）87.5%比 C 基因型 70.9%高。前 C 区变异主要为 1896 位的 G 突变为 A， 这种变异可因 1858 位的多态性而降低，同时 1858 位的多态性常见于 A、C、F 基因型1