钩菊胶囊质量标准研究

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 钩菊胶囊质量标准研究 摘要 目的 建立钩菊胶囊的质 量标准。 方法 薄层色谱法对钩藤、淫 羊藿进行定性鉴别；UV-HPLC 对淫羊 藿苷进行含量测定。采用 Agilent ZORBAX SB-C18 色谱柱（150 mm4.6 mm，5 m） ；流动相：乙腈 -水 （2575） ；流速：1.0 mL/min；柱温： 30；检测波长为 270 nm。 结果 薄层 色谱中斑点清晰，阴性均无干扰；淫羊 藿苷在 15150 g/mL 范围内线性关系 良好（r=0.9996 ） ，平均回收率为 100.9%（RSD=2.77%） 。 结论 本试验 结果准确、简便，易控，可作为钩菊胶 囊的质量标准。 中国论文网 /6/view-12954837.htm -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 关键词 钩菊胶囊；薄层鉴别； 淫羊藿苷；含量测定 中图分类号 R927.2 文献标识 码 A 文章编号 1673-7210（2017） 10（a）-0031-04 Abstract Objective To establish the quality standard of Gouju Capsules. Methods The main ingredients of Ramudus Uncaria Cum Uncis， Epimedium were identified by TLC. Content of icariin was determined by UV- HPLC. The content of the berberine was determined by HPLC； the column of Agilent ZORBAX SB-C18（150 mm4.6 mm， 5 m） was used. The mobile phase was ocetonitrile-water （2575） ， the column temperature of 30， at the flow of 1.0 mL/min and detection wavelength was 270 nm. Results The spots on TLC plates were distinct， without interference. A good linearity of icariin -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 was in the ranges of 15-150 g/mL （r=0.9996） . The average recovery was 100.9% （RSD =2.77%）. Conclusion The results of this experiment are accurate， simple and easy to control. It can be used as a quality standard for Gouju Capsules. Key words Gouju Capsules； TLC； Icariin； Content determination 近年恚 随着人们物质生活水 平的不断提高，高血压的患病率也逐年 升高，因此，开发有效治疗高血压的药 物具有重要意义，临床常用的各类西药 降压药需终生服药，且存在血压易反弹、 波动，毒副作用大等缺点，不利于高血 压患者的康复，对人体具有极大的危害 性，而中药作为民族的瑰宝，在治疗高 血压方面有其优越性。 钩菊胶囊（原名：山菊稳压胶囊） 是根据芜湖市中医医院名老中医郑梅生 主任的临床经验总结的降压稳压方，在 临床运用多年，疗效显著，毒副作用小， -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 降压平稳和缓，得到广大患者的一致好 评；拟将本方研发注册成为医疗机构制 剂，更好地应用于临床，方便患者使用， 本文的质量标准研究作为该制剂研究的 一部分，为该药品的质量提供保证。本 方由野菊花、钩藤、罗布麻叶、淫羊藿 药味组成，具有平肝熄风、清热降火的 作用，症见头胀头痛、面赤、眩晕、烦 躁失眠等。作者对本方中钩藤、淫羊藿 进行了薄层鉴别，以淫羊藿苷为指标性 成分对制剂进行了含量测定。 1 仪器与试药 安捷伦 1200 高效液相色谱仪 （Agilent Technologies） ； KQ-500DB 超 声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司） ；XP-205 电子天平（Metiler Toledo） ； 淫羊藿苷（中国药品生物制品检定研究 院，110737-201516） ；钩藤对照药材 （中国药品生物制品检定研究院，批号 121190-201204） ；淫羊藿对照药材（中 国药品生物制品检定研究院，批号 121632-201502） ；硅胶 G 薄层板（由青 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 岛海洋化工厂提供） ，乙腈 （HPLC/Spectro，Tedia 公司） ；水为超 纯水；其他试剂均为分析纯1。 2 方法与结果 2.1 薄层鉴别 2.1.1 钩藤鉴别 本品 20 粒，取 内容物约 3 g，加 70%乙醇超声，1 h 后， 滤过，蒸干滤液，残渣加乙醇 2 mL， 溶解，得到供试品溶液。另取钩藤对照 药材 1 g，同上法得到对照药材溶液2-5。 取除钩藤外的其他味药材饮片，按钩菊 胶囊的处方工艺制成阴性样品，以与制 备供试品溶液相同的方法制得阴性对照 品液。按照中国药典2015 年版薄层 色谱法，吸取上述三种溶液各 10 L， 点于同一硅胶 G 薄层板上，以三氯甲烷 -甲醇（191）作为展开剂展开，喷以 10%硫酸乙醇溶液，在 105下加热至 斑点清晰。供试品色谱与对照药材色谱 相应的位置上显相同颜色斑点，阴性色 谱相应位置上无此斑点。见图 1。 2.1.2 淫羊藿鉴别 取本品内容物 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 5 g，加入 50 mL 乙醇，超声 30 min， 滤过，将滤液蒸干，所得的残渣加水 60 mL，振摇使其溶解，然后用水饱和的 正丁醇萃取 4 次，每次均为 40 mL，合 并正丁醇萃取液，用 5%氢氧化钠溶液 洗涤 2 次，每次均为 50 mL，再用水洗 涤 2 次，每次均为 30 mL，洗涤后的正 丁醇萃取液水浴下蒸干，剩下的残渣加 入 2 mL 甲醇，使其溶解，即为供试品 溶液。称取淫羊藿苷对照品适量，加入 一定量的甲醇，制成淫羊藿苷浓度为 1 mg/mL 的溶液，作为对照品溶液6-12。 取除淫羊藿外的其他味药材饮片，按照 钩菊胶囊的处方工艺制成阴性样品，用 与制备供试品溶液相同的方法，制得阴 性对照液。按照中国药典2015 年版 薄层色谱法，吸取上述三种溶液各 10 L，分别点于同一硅胶 G 薄层板上， 将三氯甲烷-甲醇- 水（1372）混合， 振摇，放于 10下静置，以该静置液的 下层溶液作为展开剂，展开，喷以 10% 硫酸乙醇液，在 105下加热至斑点清 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 7 晰。供试品色谱与对照药材色谱相应的 位置上显相同颜色斑点，阴性色谱相应 位置上无此斑点。见图 2。 2.2 含量测定 2.2.1 色谱条件 色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18（150 mm4.6 mm，5 m） ；以乙腈- 水（2575 ）为流动相； 检测波长为 270 nm；柱温：30；流速： 1.0 mL/min，理论塔板数按淫羊藿苷峰 计算应不低于 200013-19。 2.2.2 对照品溶液 取淫羊藿苷对 照品适量，精密称定，加入甲醇制成淫 羊藿苷浓度为 30 g/mL 的溶液。 2.2.3 供试品溶液 精密称定 1 g 本品内容物，置锥形瓶中，加入 25 mL 的 50%乙醇溶液，密塞，称定重量，超 声 30 min 后，冷却，再称定重量，用 50%乙醇溶液补足减失的重量，摇匀， 滤过，即得。 2.2.4 阴性对照溶液 按本品制法， 除处方中淫羊藿，制成阴性样品，然后 按照“2.2.3”项下相同的方法制成阴性对 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 8 照溶液。 2.2.5 专属性试验 吸取供试品溶 液，淫羊藿苷对照品溶液和阴性对照溶 液各适量，注入高效液相色谱仪，记录 色谱图，见图 3，结果显示，淫羊藿苷 的峰与其他组分峰的分离度1.5。图谱 显示，阴性对照溶液在相应位置未出现 色谱峰，证明该方法专属性较好，测定 无干扰。 2.2.6 线性关系考察 取淫羊藿苷 对照品适量，精密称定，15.00 mg，置 100 mL 量瓶中，加甲醇溶解定容至刻 度，摇匀，即得 150 g/mL 的对照品溶 液。从对照储备液（150 g/mL）中分 别精密移取对照品各 0.5、1、2、3、4 mL 置 5 mL 容量瓶中，甲醇溶解定容至 刻度，摇匀，配成 6 种浓度的对照品溶 液，分别为 15、30、60、90、120、150 g/mL，取适量，用 0.45 m 微孔滤膜 滤过，进样量 10 L。以进样溶液的浓 度为横坐标（X） ，液相所得的峰面积为 纵坐标（Y） ，绘制标准曲线。回归方程 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 9 为 Y=34.716X-52.024，r2=0.9991，结果 表明淫羊藿苷在 15150 g/ml 范围内 呈现良好的线性关系。 2.2.7 日内精密度试验 精密吸取 供试品溶液 10 L，于 1 d 内连续进样 6 次，测定色谱峰峰面积。结果色谱峰 峰面积的 RSD 值为 0.6%。试验证明日 内精密度良好。 2.2.8 日间精密度试验 精密吸取 供试品溶液 10 L，连续进样 3 d，每天 进样 3 次，测定色谱峰峰面积。结果色 谱峰峰面积的 RSD 值为 0.8%。试验结 果证明该方法的日间精密度良好。 2.2.9 稳定性试验 精密吸取供试 品溶液 10 L，分别于 0、2、4、6、8、10 h 进样，测定色谱 峰峰面积。结果色谱峰峰面积的 RSD 值为 0.6%。试验结果表明该供试品溶 液在 10 h 内稳定。 2.2.10 重复性试验 取同一批次 的钩菊胶囊，按样品测定下的方法测定 样品中淫羊藿苷的含量。结果淫羊藿苷 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 10 含量的平均值（n=6）为 1067.1 g/g，RSD 值为 0.68%。试验证明重复 性良好。 2.2.11 加样回收试验 取装量差 异项下的本品内容物，6 份，各约 0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密 加入 150 g/mL 的淫羊藿苷对照品溶液 3.5 mL，按“2.2.3” 项下方法制得供试品 溶液，精密吸取供试品溶液 10 L，分 别进样，测定淫羊藿苷的含量，计算淫 羊藿苷的加样回收率，试验结果见表 1。结果表明，用本法测定样品中淫羊 藿苷的含量回收率良好。 2.2.12 钩菊胶囊样品的含量测定 取三个不同批次的钩菊胶囊样品各适量， 按“2.2.3”项下的方法，制得供试品溶液， 精密吸取供试品溶液 10 L，分别进样， 计算含量，结果见表 2。 3 讨论 在试验过程中，选用了 Agilent ZORBAX SB-C18（150 mm4.6 mm，5 m）和 Agilent ZORBAX SB-C18（250 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 11 mm4.6 mm，5 m）两种不同色谱柱进 行液相测定，结果均有较好的分离度， 且峰形较好，表明该方法的耐用性良好； 在色谱条件的研究摸索过程中，曾考察 以乙腈-水（2773）为流动相，结果 淫羊藿苷分离度达不到要求；考察以乙 腈-水（ 2773