血液筛查病毒核酸检测的室间质量评价

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 血液筛查病毒核酸检测的室间质量 评价 【摘要】 目的 对血液筛查病毒 核酸检测的室间质量评价进行分析， 评价本实验室核酸检测结果的准确性。 方法 10 份本年度由卫计委临床检验中 心第一次发放的病毒核酸考核样本， 采用同本室常规核酸标本相同的检测方 式， 分别进行乙型肝炎病毒的脱氧核 糖核酸（HBV-DNA） 、丙型肝炎病毒的 核糖核酸（HCV-RNA） 、人类免疫缺陷 性病毒的核糖核酸（HIV-RNA）三个项 目的混检和单检， 使用本室聚合酶链 式反应（PCR）检测系统， 严格按标 准操作。根据反馈结果与本室检测结果 进行对比， 观察室间质量评价结果， -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 分析本实验室核酸检测结果准确性。结 果 10 份标本的 HBV-DNA、HCV- RNA、 中国论文网 /6/view-13023972.htm HIV-RNA 室间质量评价中， 定 性结果与预期一致， 阳性结果检测 CT 值， 与全国同一检测系统靶值相近。 HBV-DNA 阳性标本分别为样本 11、样 本 13、样本 14、样本 18、样本 19， 混样检测 CT 值结果分别为 37.1、36.6、37.7、37.8、35.5， 而该试 剂混检全国平均 CT 值分别为 35.0、35.4、37.0、37.6、35.3， 单检 CT 值分别为 33.4、32.6、35.7、37.5、34.0， 全国均 值依次为 32.5、32.4、34.4、35.2、32.6。HCV- RNA 检测出阳性结果 1 个， 为样本 15， 混检和单检 CT 值分别为 35.4、31.5；而该样本同一检测试剂的 混检和单检全国平均 CT 值分别为 33.0、30.0。HIV-RNA 阳性结果 2 个， -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 分别为样本 11、样本 17， 本室混检 CT 值分别为 41.8、41.0， 全国均值分 别为 41.0、41.2， 单检 CT 值为 37.2、38.0， 全国均值为 38.0、38.4。 结论 室间质量评价的应用， 可用于实 验室检测体系的性能验证， 有利于提 高和保证实验室工作质量。 【关键词】 血液筛查病毒；核 酸；脱氧核糖核酸；核糖核酸；室间质 量评价 DOI：10.14163/ki.11- 5547/r.2018.13.118 特异性靶核酸序列通常经聚合酶 链式反应， 进行体外高效扩增， 此技 术作为分子生物学检测先进方法， 广 泛应用于多种疾病中， 如乙肝、丙肝、 艾滋病等， 具有独特优势， 但由于此 技术发展时间短， 目前还存在一定应 用局限性， 尤其在供血系统， 部分实 验室采用的是多人份混样检测模式， 故而， 室间质量评价必不可少， 直接 关系着基因扩增检验的准确性、有效性， -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 关系着血液的质量安全1。本文旨在 分析血液筛查病毒核酸检测室间质量评 价结果的应用。现报告如下。 1 材料 与方法 1. 1 材料 1. 1. 1 检测系统 上海浩源核酸 检测系统自动化磁珠操作平台 Chitas 1200， ABI 7500 PCR 扩增仪， 两台 设备均经校准合格， 校准期内运行正 常。 1. 1. 2 检测试剂与耗材 配套使 用上海浩源核酸检测试剂盒， 使用前 均经进货确认并在有效期内使用， 所 用耗材如搅拌棒、PCR 反应管、PCR 耗 材等均由试剂生产商提供， 要求无 DNA 酶， 无 RNA 酶。 1. 1. 3 室内质控血清 使用北京 康彻思坦公司提供的商品化的 HBV- DNA、HCV-RNA、HIV-RNA 核酸检测 标准血清， 浓度分别为 200 IU/ml， 1000 IU/ml， 2000 IU/ml 的核酸|控品， 是试剂最低检出限的 25 倍。 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 1. 1. 4 室间质量评价质控血清样 本 10 支卫计委临床检验中心发放的血 液筛查核酸检测质评样本， 编号分别 为 1120。 1. 2 方法 使用上海浩源核酸样 本处理检测系统 Chitas 1200 进行 PCR 模板的制备：挑取 70 份已经经本室核 酸检测结果阴性的常规核酸标本， 每 7 份分别与 1 份室间质量评价样本进行 混样（8 人份混合检测） ， 并同当日检 测标本一起随机排列， 严格按仪器和 试剂操作说明书进行标本混样、病毒核 酸裂解、提取、纯化， 最后制备出扩 增反应液置于 ABI 7500 扩增仪中扩增 核酸序列， 依据荧光信号的变化表示 扩增结果， 病毒核酸浓度达到检测限 时的扩增循环数以 CT 值表示， CT 值 与病毒含量成反比， 若 CT 值45 则结 果为阴性。室间质量评价于 2017 年 3 月进行， 按照质控中心要求检测日期 范围内检测， 截止日期前实行网络上 报。检测室间质量评价样本数共 10 个， -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 按照 PCR 实验室各项检测标准操作执 行， 收到反馈后对结果进行分析。 1. 3 观察指标 根据反馈结果与 本室检测结果进行对比， 观察室间质 量评价结果， 分析本实验室核酸检测 结果准确性。 2 结果 2. 1 定性检测值比较 HBV-DNA 室间质量评价中， 样品 1120 混检和 单检结果分别为+、- 、+、+ 、-、-、- 、+、+、-， 定性结果与预期一致， 阳性结果检测 CT 值， 与全国同一检测 系统靶值相近。 HCV-RNA 室间质量评价中， 样品 1120 混检和单检结果分别为-、- 、-、-、+、-、-、- 、-、-， 定性结果 与预期一致， 阳性结果检测 CT 值， 与全国同一检测系统靶值相近。 HIV-RNA 室间质量评价中， 样 品 1120 混检和单检结果分别为+、- 、-、-、-、- 、+、- 、-、-， 定性结果 与预期一致， 阳性结果检测 CT 值， 与全国同一检测系统靶值相近。 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 7 2. 2 定量检测 CT 值比较 HBV- DNA 阳性标本分别为样本 11、样本 13、样本 14、样本 18、样本 19， 混样 检测 CT 值结果分别为 37.1、36.6、37.7、37.8、35.5， 而该试 剂混检全国平均 CT 值分别为 35.0、35.4、37.0、37.6、35.3， 单检 CT 值分别为 33.4、32.6、35.7、37.5、34.0， 全国均 值依次为 32.5、32.4、34.4、35.2、32.6。HCV- RNA 检测出阳性结果 1 个， 为样本 15， 混检和单检 CT 值分别为 35.4、31.5；而该样本同一检测试剂的 混检和单检全国平均 CT 值分别为 33.0、30.0。HIV-RNA 阳性结果 2 个， 分别为样本 11、样本 17， 本室混检 CT 值分别为 41.8、41.0， 全国均值分 别为 41.0、41.2， 单检 CT 值为 37.2、38.0， 全国均值为 38.0、38.4。 3 讨论 室间质量评价主要是将通过实验 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 8 室质量考评结果的比对， 对既定项目 检验结果的一致性、准确性进行客观评 价， 了解检测结果差异， 提出针对性 改进措施2 ， 3， 提高实验室检测技 术， 进而促使实验室工作质量趋于一 致， 获得可比性， 具有减少差错、改 进工作、提高工作质量等优势4-6。也 是对检测实验室所开展的项目检测能力 的评价与验证。 本文 10 份考核样本中， HBV- DNA 共检测出 5 个阳性样本， HCV- RNA 共检出 1 个阳性样本， HIV-RNA 共检出 2 个阳性样本， 此次结果中， 定性检查与卫计委临床检验中心反馈的 预期结果完全相符， 定量检测中上述 三个项目本室检测值与全国同一检测系 统平均值基本相符， 精密度较佳， 而 混样检测结果中三个项目的阴性结果与 预期完全符合， 准确性好。在实际工 作中， 样本检出能力差可能是受标本 管