2015年临床医学检验中级职称考试考点点评

2015 年临床医学检验中级职称考试考点点评 2015 年临床医学检验中级职称考试的有关考点知识，小张老师通过本文特 梳理这方面的考点内容如下，供广大考生参考复习。 一、溶血空斑形成的试验 经典的溶血斑试验用于检测实验动物抗体形成细胞的功能，其原理是将绵 羊红细胞（SRBC）免疫小鼠，4 天后取出脾细胞，加入 SRBC 及补体，混合在温 热的琼脂溶液中，浇在平皿内或玻片上，使成一蒲层，置 37 温育。 由于脾细胞内的抗体生成细胞可释放抗 SRBC 抗体，使其周围的 SRBC 致敏， 在补体参与下导致 SRBC 溶血，形成一个肉眼可见的圆形透明溶血区而成为溶血 空斑（plaque） 。每一个空斑表示一个抗体形成细胞，空斑大小表示抗体生成细 胞产生抗体的多少。 这种直接法所测至的细胞为 IgM 生成细胞，其它类型 Ig 由于溶血效应较低， 不能直接检测，可用间接检测法，即在小鼠脾细胞和 SRBC 混合时，再加抗鼠 Ig 抗体（如兔抗鼠 Ig） ，使抗体生成细胞所产生的 IgG 或 IgA 与抗 Ig 抗体结合 成复合物，此时能活化补体导致溶血，称间接空斑试验。 但是上述直接和间接空斑形成试验都只能检测抗红细胞抗体的产生细胞， 2 而且需要事先免疫，难以检测人类的抗体产生情况。如果用一定方法将 SRBC 用 其它抗原包被，则可检查与该抗原相应的抗体产生细胞，这种非红细胞抗体溶 血空斑试验称为空斑形成试验，它的应用范围较大。 现在常用的为 SPA-SRBC 溶血空斑试验。SPA 能与人及多数哺乳动物 IgG 的 Fc 段呈非特异性结合，利用这一特征，首先将 SPA 包被 SRBC，然后进行溶血空 斑测定，可提高敏感度和应用范围。在该测试系统中，加入抗人 Ig 抗体，可与 受检细胞产生的免疫球蛋白结合形成复合物，复合物上的 Fc 段可与连接在 SRBC 上的 SPA 结合，同时激活补体，使 SRBC 溶解形成空斑。 此法可用于检测人类外周血中的 IgG 产生细胞，与抗体的特异性无关。用 抗 IgAIgG 或 IgM 抗体包被 SRBC，可测定相应免疫球蛋白的产生细胞，这种 试验称为反相空斑形成试验。 溶血空斑形成试验可用于测定药物和手术等因素对体液免疫功能的影响， 或评价免疫治疗或免疫重建后机体产生抗体的功能。 二、B 细胞增殖能力试验 （一）不同刺激物诱发增殖试验 抗 IgM 抗体和细菌脂多糖均能刺激 B 细胞增殖，培养 13 天以后，加 3H- 医学考试 视频题库押题辅导 考试一次过 3 TdR，与淋巴细胞增殖试验一样，检测细胞内 cpm，计算促有丝分裂原对淋巴细 胞的刺激指数。也可用台盼蓝法计细胞增殖或用 DNA 特异性染色观察胞内 DNA 或 RNA 的分化程度。 （二）葡萄球菌诱导试验 葡萄球菌 Cowen株（SAC）表面富含 SPA.该试验不依赖 T 细胞的参与，操 作原则是将 SAC 与淋巴细胞按一定比例混合，按增殖试验法同样操作和计数 cmp 值。葡萄球菌表面 SPA 含量与激发 B 细胞转化能力成正比。 三、免疫系统的三个生理功能 免疫防御：是机体排斥外来抗原性异物的一种免疫保护功能。该功能正常 时，机体可抵御病原微生物及其毒性产物的感染和损害，即抗感染免疫；异常 情况下，反应过高会引起超敏反应，反应过低或缺失可发生免疫缺陷。 免疫自稳：是机体免疫系统维持内环境稳定的一种生理功能。该功能正常 时，机体可及时清除体内损伤、衰老、变性的细胞和免疫复合物等异物，而对 自身成分保持免疫耐受；该功能失调时，可发生生理功能紊乱或自身免疫性疾 病。 免疫监视：是机体免疫系统及时识别、清除体内突变、畸变细胞和病毒感 4 染细胞的一种生理功能。该功能失调时，有可能导致肿瘤发生，或因病毒不能 清除而出现持续感染。 四、寄生虫感染之后的实验室诊断 1.病原检查 在寄生虫感染中，检查出寄生虫病原体是确诊的依据。根据临床诊断提供 的线索，通过标本的采集、处理、检验、分析等，做出明确结论，为临床治疗 和流行病学调查提供可靠的依据。根据寄生虫的种类、在人体的发育阶段和寄 生部位的不同可采集相应的标本（粪便、血液、阴道分泌物、尿液、痰液、组 织活检或骨髓穿刺等） ，采取不同的检查方法。 对于肉眼可见的大部分蠕虫和节肢动物寄生虫感染之后的实验室诊断，根 据其标本来源和形态特征可作出初步判断，如粪便中的蛔虫、蛲虫、绦虫节片、 组织中的蝇蛆等；对于原虫等肉眼无法见到的小型寄生虫，如阿米巴原虫、阴 道毛滴虫、疟原虫、各种蠕虫的卵、疥螨、蠕形螨等则须借助显微镜观察。 病原体检查的质量取决于检验医生的责任感和对寄生虫的形态、生活史、 致病等基本知识和基本技能的掌握程度。 2.免疫学检查 医学考试 视频题库押题辅导 考试一次过 5 有些寄生虫病难以根据症状或体征及病原检查作出诊断，此时需采取免疫 学方法辅助诊断。在感染早期、轻度感染、单性感染（仅有雄虫） 、隐性感染或 由于特殊的寄生部位而使病原检查十分困难以及在流行病学研究中，免疫诊断 具有突出的优点。所用的抗原包括同种抗原、生活史某期特异性抗原或基因工 程抗原。根据反应原理分为皮内反应和血清学试验（沉淀反应，凝集反应和标 记反应） 。检测物质包括特异性抗体、循环抗原、免疫复合物。 近年来也有学者检测细胞因子以了解机体的免疫状态、抗虫感染的免疫机 制或作为疗效评价的参考寄生虫感染之后的实验室诊断。 此外，嗜酸性粒细胞计数和嗜碱性粒细胞脱颗粒试验也可用于蠕虫感染的 辅助诊断。上世纪 70 年代以来，免疫学及免疫学技术取得了长足的进展。近年 发展起来的蛋白质芯片技术可望为寄生虫感染的免疫诊断带来又一技术突破。 免疫诊断方法应具有高度的特异性（specificity） 、敏感性（sensitivity）和 可重复性（reproducibility） ，同时应具有简便、经济、快速且便于基层社区 实验室操作等优点。此外，理想的免疫学诊断还应具有能够判别现症感染、估 计感染度和疗效考核的价值。 3.分子诊断 检测的靶物质为寄生虫基因组中特异性的 DNA 片段。例如根据碱基互补原 6 理可设计并标记 DNA 探针（probe）进行原位杂交（insituhybridization） ；也 可设计合成引物进行聚合酶链反应（polymerasechainreaction，PCR） ，扩增样 本中微量的 DNA 片段。将免疫检测技术与基因扩增技术嫁接而创立的 PCRELISA，用于疟原虫的检测，最低可测阈值为 0.001%的原虫密度寄生虫感 染之后的实验室诊断。 本世纪之交发展起来的 DNA 微阵列（DNAmicroa