脑脊液及浆膜腔积液检查ppt课件

1 脑脊液及浆膜腔积液检验 2 脑脊液检验 3 脑脊液（ cerebrospinal fluid, CSF ） 概 述 l分布于脑室系统和蛛网膜下腔 l比重为 1.006 _ 1.008 无色透明细胞外液 l成人总量为 120180ml(平均 160ml) l主要由血循环经脑脉络膜丛和脑内毛细血管内皮细胞滤过 而生成的血浆超滤液 (95在侧脑室形成 ) l与血浆相比，其蛋白、脂质与钙含量较低，而氯化物、叶 酸与镁的含量较高 l血、脑脊液、脑之间 _ 血 -脑屏障 (blood-brain barrier,BBB) 4 一 .标本采集 由临床医师进行腰椎穿刺采集，必要时可 从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得。 标本要求：将脑脊液分别收集于 3个无菌试 管中，第一管作细菌培养，第二管作化学 分析和免疫学检查，第三管作一般性状及 显微镜检查。 采集后申请单上注明时间、日期 每管收集 1-2毫升。 遇高蛋白标本时可采用 EDTA K2抗凝。 5 标本采集 三管 细菌培养 化学分析和免疫学检查 一般性状及显微镜细胞计数检查 &每管收集 1-2毫升 及时送检 6 标本送检 标本储存： 立即送检，一般不能超过 1小时 。 标本运输： 室温运输。 标本拒收标准： 污染，久置标本。 7 易被污染而影响结果的准确性 细胞破坏、变形、消失，纤维蛋白凝结，影响 计数及细胞学检查 糖因细胞、微生物等耗解而降低 致病菌如隐球菌、脑膜炎双球菌等可溶解死亡 腰穿后脑脊液应立即送检，放置过久会造成 8 二 检查内容 一、一般性状检查 1 . 颜色（ color） 2 . 透明度（ CSF clarity） 3 . 凝块或薄膜（ pellicle formation and clot） 4 .蛋白定性 二、显微镜检查 三、化学检验 1. 蛋白质（ protein） 2. 葡萄糖（ glucose） 3. 氯化物 （ chloride） 4. 酶类 (enzymes) 四、 病原体检查 9 1. 一般性状检查 颜色 透明度 凝固物 蛋白定性 10 颜色 正常脑脊液为无色透明水样液体，除人为正常脑脊液为无色透明水样液体，除人为 穿刺外伤引起的血性脑脊液外，脑脊液出穿刺外伤引起的血性脑脊液外，脑脊液出 观任何颜色或透明度异常均应视为观任何颜色或透明度异常均应视为 病理性病理性 ，但新生儿脑脊液黄色可为生理性，但新生儿脑脊液黄色可为生理性 11 主要与穿刺损伤性出血鉴别 如为蛛网膜下腔出血，三管试验均匀血性，静置不凝固，离 心后上液黄色，因含铁质上液潜血联苯胺试验 (+)，镜下多见 皱缩红细胞 如为损伤性出血，三管试验初为血性，逐渐变淡转为无色透 明，离心后上清为透明水样，因无铁质上液潜血联苯胺试验 ( - )，镜下红细胞形态完整 报告时填写：脑脊液颜色及离心后上清颜色及沉淀物 性质 红 色 12 项 目 新 鲜 性出血 陈 旧性出血 外 观 浑浊 清晰、透明 易凝性 易凝 不易凝 离心后上清液 无色、透明 红 色、黄褐色或 柠 檬色 红细 胞形 态 无 变 化 皱缩 上清液 OB试验 阴性 阳性 白 细 胞 不增高 继发 性或反 应 性增高 脑脊液新鲜性出血与陈旧性出血的鉴别 13 脑或蛛网膜下腔出血 5 6小时红细胞破坏可逐渐产生黄变， 48小 时明显， 3周后消失 由于椎管阻塞或癌肿浸润致脑脊液蛋白增高，产生梗阻性和郁滞 性黄变症，与出血性黄变症不同点在于蛋白量极高，当脑脊液蛋白 量超过 1500mg/L时，腰穿采集脑脊液可以发生自发性凝固，称为 Froin氏现象 严重黄疸（血清胆红素 150mg/L）或来自血液中的其他黄色物质 如胡萝卜素、脂色素等由于血脑屏障的病理性改变（如脑膜炎）弥 散入脑脊液的影响 黄 色 14 主要见于中枢神经系统脑膜黑色素瘤 的侵犯 褐色或褐色或 黑色 15 乳白色 见于脑膜炎球菌、肺炎球菌、溶血性链球 菌引起的化脓性脑膜炎 16 透明度 清澈透明：正常 微浊：病毒性脑（膜）炎等 毛玻璃样浑浊：结核性脑膜炎 乳白色浑浊：化脓性脑膜炎 黑色或白色背景下观察 报告时填写： “清澈透明 ”“微浊 ”“浑浊 ” 17 凝固物 液面薄膜形成：结核性脑膜炎 疑为结核性脑膜炎时在 2- 4度环境中静置 12-24小时，在观察表面有无薄膜形成 凝块或沉淀物：化脓性脑膜炎 黄色胶冻状物：蛛网膜下腔阻塞 报告时填写： “无凝块 ”“有凝块 ”“有薄膜 ”“胶冻 状 ”描述 18 蛋白定性 蛋白定性试验 (潘氏法 )： 实验原理：脑脊液中球蛋白与苯酚结合，可形成不溶性蛋白盐而下沉 ，产生白色浑浊或沉淀。 试验方法：取潘氏试剂 2-3ml于小试管内，用毛细滴管滴入脑脊液 (上 清液 ) 1-2滴，衬以黑背景，立即观察结果。 结果判断： 阴性：清晰透明，不显雾状； 极弱阳性（ ）：微呈白雾状，在黑色背景下才能看到； 弱阳性（ +）：灰白色云雾状； 阳性（ +）：白色浑浊； 强阳性（ 3+）：白色浓絮状沉淀； 最强阳性（ 4+）：白色凝块； 19 临床意义： 1脑脊液蛋白明显增高 (+以上 )：常见于化脓性脑膜炎 、结核性脑膜炎、脊髓腔等中枢神经系统恶性肿瘤及其转 移癌、脑出血、蛛网膜下腔出血及梗阻等。 2脑脊液蛋白轻度增高 (+ - +)：常见于病毒性脑膜 炎、霉菌性脑膜性、乙型脑炎、脊髓灰质炎、脑膜血管梅 毒、麻痹性痴呆、脑血栓形成等。 20 2、 显微镜检查 21 牛鲍氏计数板 计数公式 : 白细胞总数 = 4个大方格数（ N ） /4*10*稀释倍 数 *106 22 白细胞数： 直接计数法 ：适用于细胞总数不 高，非血性或微混的标本。小试管 内放入冰乙酸 1-2滴，转动试管， 使内壁沾有冰乙酸后倾去之，然后 滴加混匀的脑脊液 3-4滴，数分钟 后，混匀充入计数池，按白细胞计 数法计数 10个大方格细胞数。 23 稀释计数法： 适用于白细胞数较高、浑浊的标本。根据浑 浊程度不同，将混匀的脑脊液用白细胞稀释液进行不同倍 数稀释后进行计数。 血性标本： &当穿刺损伤血管导致血性脑脊液或出血性脑 血管病时，计数白细胞总数已无意义，白细胞数须经校正 为剔除因出血而来的白细胞数，用下式进行校正。 每 l脑脊液内白细胞校正数： 每 l 脑脊液内红细胞数 每 l白细胞数 =每 l脑脊液内白细胞未校正数 每 l血液内红细胞数 24 参考值： 成人脑脊液内无红细胞，白细胞极少，其参考范 围： 成人为（ 0-10） 106/L； 儿童为（ 0-15） 106/L， 新生儿为（ 0-30） 106/L。 如白细胞达 （ 10-50） 106/L为轻度增加， （ 50-100） 106/L为中度增加， 200106/L以上显著增加。 25 临床意义 1细胞数明显增高 (200106/L)：常见于化 脓性脑膜炎、流行性脑脊髓膜炎。 2中度增高 (500106/L 临界值 (300 500） 106/L 返返 回回 66 2.细胞分类 直接和涂片分类法 细胞数小于 150不用分类计数 直接分类法 直接在高倍镜下分类计数 100个细 胞包括单个核细胞和多个核细胞以百分率表示 染色分类法 涂片作瑞特染色或瑞 -吉姆萨染色 后油镜进行分类，如需检查肿瘤细胞应用巴氏染 色或 HE染色 返返 回回 67 3. 临床意义 : 漏出液 细胞少，淋巴细胞为主，少量间皮细胞 ； 渗出液 细胞较多 积液中各种细胞增多时意义 ： 中性粒细胞 化脓性炎症、早期结核性炎症等 淋巴细胞 慢性炎症如结核、病毒感染、肿瘤 等 嗜酸性粒细胞 变态反应、寄生虫感染等 组织细胞 炎症、淤血、 恶性肿瘤 返返 回回 68 七、化学 检查 1.蛋白 质 定量 测 定方法与血清蛋白定量相同 渗出液蛋白 质 30g/L ；积液总蛋白 /血清总蛋白比值 0.5； 漏出液 蛋白质 200U/L， 积 液 LDH/血清 LDH比值 0.6可作 为渗出液的指标。在各类渗出液中 化脓性感染积液 LDH活性 癌性 结核性 正常 。 5.腺苷脱氢酶 （ adenosine deaminase,ADA）： ADA大于 45U/L应考虑为结核性， 结核性 癌性 非炎症性积液 ， 当抗 结核药物治疗有效时，其胸腹炎内 ADA也应随之下降，因此也能作为抗结 核治疗效观察指标。 72 6.溶菌 酶 （ lysozyme,LZM）： 结核性 积液中溶菌酶含量超过 30mg/L，积液和血清中溶菌酶比值 1.0， 明显高于癌性积液、结缔组织病。因此测定积液中溶菌酶对结核性胸膜炎 的诊断有帮助，连续观察可估计预后。 而 癌细胞不含溶酶体，无 LZM产生 ，故 癌性 积 液 LZM无增高 。 7。 淀粉酶 （ amylase,AMY）： 参考值： 0-300U/L 大多数 胰腺炎 患者其胰腺创伤所致腹腔积液中淀粉酶活性 /血清淀粉酶 1 。 当 食道破裂 时唾液经食道穿孔处流进胸腔，此时胸腔积液淀粉酶也升高， 73 8、 碱性磷酸酶 （ alkaline phoephatase,ALP）： 积液中因肿瘤细胞释放大量 ALP，使积液 ALP/血清 ALP比值 1，而其他 性质积液 ALP/血清 ALP比值 10mg/L为渗出 液。 75 10.肿瘤标志物测定 癌胚抗原（ carcinoembryonicantigen， CEA ） ：当 积 液中 CEA20g/L ， 积 液 CEA/血清 CEA比 值 1时 ， 应 高度 怀 疑 为 癌性 积 液。 甲胎蛋白（ alpha-fetoprotein， AFP ） ：血清 AFP作 为 原 发 性肝癌的 标 志 物。腹水中 AFP检测结 果与血清 AFP呈正相关。 检测 腹水中 AFP25g/L 时 对诊 断原 发 性肝癌引起的腹水是有价 值 的。 CA125：腹水中 CA1251000u/ml常作为卵巢癌转移的指标，在胃癌、结 直肠癌、肝癌和胰腺癌中也有较高的阳性检出率； CA199是胰腺癌和结、直肠癌的标志物； 76 胸腹水生化检验项目 蛋白 TP 葡萄糖 GLU 脂类 TC 、 TG 酶类 LDH ADA AMY ALP CRP 77 八、微生物 检查 如 标 本通 过 一般性状 、 显 微 镜 以及 化学 检查 已肯定 为 漏出 液 ，一般 则 无 检查细 菌的必要 ； 如肯定 为 或疑 为 渗出液， 则应经 无菌操作离心沉淀，取沉淀 物作涂片染色 （ 革 兰 氏染色 、抗酸染色、 真 菌） 检查 及 细 菌 培养 。 作涂片 时应 用油 镜 仔 细观 察，如 见 有 细 菌或真 菌 应 及 时报 告 临 床医 师 ， 细 菌 检验 必 须认 真 负责 ，因 细 菌感染的胸膜 炎可同 时 由多种 细 菌引起的， 应 从 实验 室角度分清主次。一 旦 培养阳性 应 做药物 敏感 试验 供 临 床用 药 参考。 78 质量控制 ：浆膜腔积液 检验的质量控制包括检验前、检验中 、检验后三方面内容。 标 本的合理采集和及 时 送 检 是 分析前 质 量控制的关 键 ，不合格的 标 本 应 予以拒 检 建立 实验 室 规 范化的操作 规 程是 分析中 质 量控制的保 证 ，由于目前尚缺 乏 专 一的 浆 膜腔液 质 控物， 临 床上只能 请 有 经验 的技 术 人 员 抽 检标 本 进 行双盲复 检 ，也能达到 监 控的目的 结 合 临 床， 认 真分析 检验结 果， 严 把 审 核关，是 分析后 质 量控制不可 缺少的。 其中以检验中质量控制尤为重要。检验中项目的选择和方法的 选择是检验质量的保证。 五、 浆膜腔积液检验的质量控制 79 常规操作流程 观察外观 计数 离心 稀释 生化检验 细胞分类 上清液 沉淀 细胞数多 RIVALTA 漏出液