实验一抗原抗体反应--凝集反应

西南民族大学西南民族大学抗原抗体反应免疫学西南民族大学西南民族大学 抗原与相应抗体的特异性结合反应称为抗原抗体反应 (antigen-antibody reaction)。 抗原抗体反应西南民族大学西南民族大学抗原抗体反应原理 抗原抗体结合反应是 抗原决定簇 和 抗体分子超变区 之间的相互作用，是一种分子表面的特异的可逆的弱结合力。这些弱结合力只能在极短距离内才能发生效应。西南民族大学西南民族大学抗原抗体结合力抗原和抗体的结合虽然是互补性，非共价键，特异性结合，抗原与抗体这种弱的结合力涉及下列几种分子间的作用力。 l. 静电引力2.范德华引力3.氢键结合力4.疏水作用力西南民族大学西南民族大学西南民族大学西南民族大学亲水胶体转化为疏水胶体示意图亲水胶体 疏水胶体转化 NaCl可见反应西南民族大学西南民族大学抗原抗体反特点 比例性可逆性敏感性特异性西南民族大学西南民族大学特异性示意图 西南民族大学西南民族大学比例性示意图抗体过量 比例合适抗原的量抗原过量抗体沉淀的量前带 等价带 后带西南民族大学西南民族大学抗原抗体反应比例性的机制，可用网格学说加以说明。因为天然抗原大多是多价的，抗体至少为两价，当抗原与抗体在等价带结合时，相互交叉连接成具有立体结构的网格状复合体，形成肉眼可见的沉淀物。当抗原或抗体过剩时，由于过剩方的结合价得不到饱和，只能形成小网格复合物。但是，当抗原或抗体为单价，不管抗原与抗体的量比关系是否合适，均不能出现可见反应现象。 西南民族大学西南民族大学西南民族大学西南民族大学抗体混有SPAg抗体 -SPAg抗体 -SPAg分离剂一、抗原抗体结合 二、分离抗体可逆性示意图抗体西南民族大学西南民族大学抗原抗体反应影响因素 1.抗原、抗体的自身因素的影响 ;2.电解质、酸碱度、温度及时间等实验环境因素的影响。西南民族大学西南民族大学第四节 抗原抗体类型1.可溶性抗原与相应抗体结合所产生的 沉淀反应2.颗粒性抗原与相应抗体结合所发生的 凝集反应 3.抗原抗体结合后激活补体所致的 细胞溶解反应 4.细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的 中和反应 5.免疫标记 的抗原抗体反应 。西南民族大学西南民族大学凝集反应 类型： 直接凝集反应 间接凝集反应 间接凝集抑制试验 协同凝集试验西南民族大学西南民族大学1.凝集反应直接凝集试验： 颗粒 性 抗原在有电解质的参与下，直接与相应抗体结合出现的凝集现象。西南民族大学西南民族大学间接凝集试验： 用人工方法将可溶性抗原 (或抗体）吸附或偶联于载体上，使之成为致敏载体颗粒，再与相应抗体（或抗原）作用，在适宜电解质的参与下，出现的凝集现象。西南民族大学西南民族大学载体 可溶性抗原致敏致敏颗粒NS凝集颗粒（正向）间接凝集试验用 特异性抗原致敏载体，检测标本中的相应 抗体 的方法。待测抗体西南民族大学西南民族大学 反向间接凝集试验用 特异性抗体致敏载体，检测标本中的相应 抗原 的方法。载体 已知抗体致敏致敏颗粒NS凝集颗粒待测抗原西南民族大学西南民族大学 间接凝集抑制试验待测抗原 已知抗体 特异结合抗原抗体复合物NS致敏颗粒用 抗原致敏载体及相应抗体作为诊断试剂，用于检测标本中是否存在与致敏载体相同的抗原。 无凝集颗粒为 阳性阳性西南民族大学西南民族大学间接凝集抑制试验待测抗原 已知抗体无结合抗原抗体分散NS致敏颗粒有凝集颗粒为 阴性阴性西南民族大学西南民族大学 原理抗球蛋白试验 (Coombs试验 )机体受某些抗原刺激后产生 “ 不完全抗体 ”，其与相应抗原结合后不出现可见的凝集现象，但能封闭抗原决定簇，使其不能再与完全抗体结合。类型西南民族大学西南民族大学 原理协同凝集 试验SPA能与血清中的 IgG类抗体的 Fc段非 特异性结合，而两个 Fab段暴露在葡萄球菌菌体表面，仍然保持正常的抗体活性，与特异性抗原相遇时，能出现特异的凝集现象。西南民族大学西南民族大学原理图IgGSPASPA- IgG待测抗原SPA- IgG-待测抗原凝集颗粒混合加入西南民族大学西南民族大学实验材料1.待测