《胚胎工程上》PPT课件.ppt

1、胚胎移植技术,陈庆莲 副教授 山东牧院畜牧系 Email: 2009-05-05,第一节 胚胎移植,胚胎移植的概念 胚胎移植的发展历史 胚胎移植的意义 胚胎移植的生理学基础和基本原则 胚胎移植的技术程序,胚胎移植的概念,胚胎移植：就是将良种母畜的早期胚胎取出（或者是由体外受精及其他方式获得的胚胎），移植到同种的生理状态相同的母畜体内，使之继续发育成为新个体。 供体：提供胚胎的母畜称为供体。 受体：接受胚胎的母畜称为受体。,胚胎移植的发展历史,人们研究胚胎移植已有一百多年的历史。英国剑桥大学的alter Heape 1890年首次在家兔成功。 胚胎移植在家畜上的实验最早是20世纪30年代。绵羊（

2、1934）、山羊（1949）、猪（1951）、牛（1951）、和马（1970）都相继获得胚胎移植个体。 我国胚胎移植始于1964年，到20世纪70年代后期我国开始将胚胎移植应用到畜牧业上，并在绵羊（1974）、牛（1978）等家畜上相继获得成功，并逐步在生产上推广应用。,胚胎移植的意义,胚胎移植充分发挥优秀母畜的繁殖潜力。 胚胎移植是家畜育种的重要手段。 胚胎移植技术可提高肉畜的双胎率。 胚胎移植可代替种畜的引进。 胚胎移植可用于保存品种、物种资源。 胚胎移植防止疫病克服不孕。 胚胎移植是研究其它配子、胚胎工程技术的基础环节。,胚胎移植的生物学基础,母畜发情后生殖器官的孕向发育 早期胚胎的游离

3、状态 胚胎移植与免疫排斥的影响 胚胎的遗传特性,胚胎移植的基本原则,胚胎移植前后所处环境的同一性 供体和受体在分类学上的相同属性（即同一物种） 生理上的一致性（即同一时间发情） 解剖部位的一致性（空间环境相似） 胚胎收集的期限 在受体母畜周期黄体退化之前进行，通常在供体发情配种后38天内收集。 胚胎质量的保证 在移植全过程中，胚胎不应受到任何不良因素的影响而降低生活力,胚胎移植的技术程序,供体和受体的准备 供体超数排卵处理 供体的配种 胚胎的收集 胚胎的检查 胚胎的培养和保存 胚胎的移植,供体和受体的准备,供体的选择：必须是健康、具有较高的育种价值、生殖机能正常、对超排反应好的母畜。 受体的选

4、择：可选本地品种，每头供体需要准备多头受体，要健康、繁殖性能良好，体型在中等以上。 供体、受体的同期发情：发情时间相差不超过一天。,供体超数排卵处理,意义：每个供体提供更多的胚胎 处理时间： 牛：预计自然发情时间的前4天，或发情周期的第9-13天,应用FSH+PG处理。 羊：发情周期的第12-13天，应用FSH+PG处理。 例：羊的同期发情及超数排卵的程序（如下表）,羊的同期发情及超数排卵的程序,供体的配种,本交：必须用优秀的种公畜进行多次配种，一般隔8-12小时进行一次配种，直到发情结束。 人工授精：配种前应对种公畜的精液进行质量检查，需要精液密度大，活力高的精液输精。 注：可优秀种公畜不足

5、时，考虑首次采用本交，以后采用人工授精，也可以全部采用人工授精。,胚胎的收集,手术法：适合所有家畜 胚胎在输卵管内 牛、羊、兔适用于上行法（图1） 猪、马适用于下行法（图2） 胚胎在子宫角内（图3） 非手术法：适合于大家畜而且胚胎在子宫角内 二路导管法 三路导管法（图4） 冲洗液：多采用杜氏磷酸盐缓冲液（PBS）,手术取胚的三种方法,非手术取胚的方法,胚胎的检查,将收集到的冲卵液静置10分钟，等胚胎下沉后移去上层液，直接或吸取底部液体，置于实体显微镜下，在25-37的恒温条件下进行检查。,二至四个细胞正常胚胎示意图,正常胚胎示意图,胚胎的培养和保存,常温短期保存（在15-25条件下） 低温保存（0-5条件下） 冷冻保存（-80以下）,胚胎装管示意图,胚胎的移植,手术法：适合所有家畜 非手术法：只适合大家畜（方法与输精相同只是部位深） 原则：胚胎收集与移植的部位