罗氏电化学发光项目介绍.ppt

1、罗氏电化学发光部分项目介绍,董元晖; Nov 07, 2011,领先的时代之光,主要内容,罗氏公司及其产品简介 罗氏电化学发光介绍 -传染病系列介绍 -肿瘤标志物系列介绍 -其他项目简介,罗氏集团- 世界财富杂志评定500强之一,1896年成立于瑞士巴塞尔 业务遍布全球五大洲150个国家 2009年实现491亿瑞郎销售额(442亿美元) 2010财富全球五百强排名第153位！ 2010市值全球500强排名第29位! 主营业务:制药及诊断 全球第一位的体外诊断公司 2010年全球第三位的制药公司 全球领先的肿瘤药物及移植药物的供应商 全球病毒学领域的开拓者和领导者,罗氏集团的两大事业部门,药品事

2、业部,诊断事业部,罗氏集团架构,诊断,健康医护部,应用科学部,制药,制药,中外,基因泰克,专业诊断部,分子诊断部,组织诊断部,罗氏诊断覆盖领域,病人,参考实验室,医院,学院、药厂等,病人,专业用户,生命科学,体外诊断,体外诊断,ER/ICU: Emergency Room, Intensive Care Unit,应用科学部,商业实验室,急诊/ICU,诊所,分子诊断部,组织诊断部,专业诊断部,健康医护部,罗氏诊断分布图,应用科学部 总部位于潘茨堡 健康医护部 总部位于曼海姆 分子诊断部 总部位于普莱森 专业诊断部 总部位于洛克鲁茨 组织诊断部 总部位于图森 区域总部,新加坡,东京,印第安纳波利

3、斯,布拉茨伯格,普莱森,图森,巴塞罗那,洛克鲁茨,巴塞尔,曼海姆,潘茨堡,格拉茨,布格多夫,罗氏诊断全球体外诊断行业名列第一,1 Source: company reports, Industry consultants, Roche analysis based on peer sales 2008 (BD, Bayer and Inverness 2007 figures) 2 In vitro diagnostics market; excludes Life Science research market; * Includes Ventana,20081, 2 体外诊断市场占有率,罗

4、氏诊断中国体外诊断行业名列第一,Source: company reports, Industry consultants, Roche analysis based on peer sales 2009,2009 体外诊断市场占有率,Danaher:(包含整合后的BeckmanCoulter, Olympus和RadioMeter）,罗氏诊断产品群,应用科学,分子诊断,实验室诊断,健康医护部,组织诊断,床边诊断,R,总部,罗氏诊断在中国,华南,1,135,651 km2,工程师 : 32,应用支持: 19,华北,5,308,610 km2,工程师 : 42,应用支持: 20,华东/西南,2,

5、598,741 km2,工程师 : 45,应用支持: 30,最庞大、最专业的厂家售后服务网络全国119工程师和69应用支持,截止日期：2010年1月,免费服务热线和专业培训中心,24小时免费售后服务热线: 800-820-8864 400-820-8864 亚太区培训中心（上海） 所有型号仪器、软件均有样机 对外开放,2006,1978,1997,2009,2002,cobas 模块化平台30年的传承与创新,cobas e 411 电化学发光分析系统专注创新，追求卓越,cobas c 311 生化分析仪精准结果，轻松获得,cobas 4000 血清工作站 轻松操作，一切尽在掌握,Modular

6、 模块式血清工作站D2400生化分析仪P800生化分析仪E170电化学发光免疫分析,cobas 6000 罗氏诊断精彩奉献！,cobas 8000 大型血清工作站,cobas 8000 ,Intelligent sample routing optimizing throughput 44;1161-9 （China） Concurrence : 5% 主要结论： 分析了411例慢性肝炎患者， 发现20例同时阳性的结果（该状态稳定12月以上）； 411例患者发现了13例发生了基因变异； 对于是否同时存在Anti-HBs的两组，对于突变没有明显差异 标本中纯化的anti-HBs可以和HBsAg有

7、反应，但是相比较于自然产生的抗体，其活性很弱 由于亚型不同，并不能中和体内同时存在的抗原 没有发现免疫复合物,HBsAg / Anti-HBs同时出现的探讨,一般是处于HBeAg和AntiHBe转换时期，e抗原和e抗体以抗原抗体复合物的状态共存。 Anti-HBe试剂检测时，血样中的抗原抗体复合物也参与到反应，起到了竞争效果。因而血样中存在游离eAg和抗原抗体复合物时，可以检为HBeAg、Anti-HBe同时阳性。,HBeAg / Anti-HBe同时出现的探讨,Anti-HBc阳性率偏高问题,乙型肝炎核心抗体分为Anti-HBc-IgG和Anti-HBc-IgM 在急性期几乎在所有感染个例都

8、可检出Anti-HBc有时是唯一的血清标记物。 无论肝病是否存在或病毒是否已清除，Anti-HBc可持续存在数十年。 HBcAg较HBsAg有更强的免疫原性，因而Anti-HBc较Anti-HBs产生早得多、有高得多的血清水平、长久得多的时间。 国外一些地区以Anti-HBc筛检HBV感染供血，认为是最灵敏的血清学试验。研究表明HBV感染者抗-HBc阳性率在95%以上。 AntiHBc低浓度时作为既往感染的指标，用于乙型肝炎流行病学的调查。 AntiHBc高浓度时作为乙型肝炎病毒感染的指标。 Anti-HBc-IgM出现于新感染早期，是乙型肝炎早期诊断的指标，同时也是乙型肝炎急性感染和复制活跃

9、的指标。 ELISA检测时，样本进行1：30稀释后再检测HBcAb，阳性率约为20%，人为造成部分低浓度血清核心抗体出现假阴性。 使用高敏发光法检测，使用DTT（二硫苏糖醇）去除潜在的干扰；HBcAb阳性率可达到60-70%。 Anti-HBc检测采用竞争法，COI1为有反应性，COI越低浓度越高。,单项HBcAb阳性,(1)急性乙型肝炎病毒感染的“窗口期”，乙型肝炎表面抗原(HBsAg)已被人体免疫清除，或在血中消失，而乙型肝炎表面抗体(抗HBs)尚未产生之时。二对半检查仅可见抗HBc 阳性。 (2)既往的乙型肝炎病毒显性或隐性感染者，由于Anti-HBc比Anti-HBs在体内存在的时间长

10、，因此AntiHBs已消失或 在可检测水平以下时，AntiHBc仍存在。(3)慢性乙型肝炎感染或乙肝病毒无症状携带状态，HBsAg 水平很低。,单项Anti-HBc阳性者，在一般人群的检出率为0.120。 检出率的差别与不同国家、地区的乙型肝炎感染率高低及检测方法不同有关。,Elecsys 第三代AntiHCV,核心肽 rec. NS3-蛋白 NS4-肽 aa 9-48 aa 1192-1457 aa 1689 - 1743,E 1,E 2,核心,RNA,Elecsys抗-HCV测定法 的抗原,Elecsys Anti HCV重组 NS3 抗原,NS3 HCV病毒的最重要的抗原 罗氏试剂通过大

11、肠杆菌成功的表达NS3抗原, 多重折叠以达到高度的免疫活性 高纯度; 易于直接标记,什么是第三代 Anti-HCV 检测,第三代的Anti-HCV 试剂中检测的抗原是个混合抗原,包含core 抗原, NS3和NS4抗原.因为提升了NS3抗原的反应性,使第三代试剂的灵敏度相对于第二代试剂有很大的提高. 在一些试剂中也加入了NS5抗原, 但是目前看来没有证据证明添加了NS5抗原可以提升检测的灵敏度 检测的试剂的灵敏度更加与抗原的质量相关,而不是抗原的数量.,Elecsys Anti-HCV第三代试剂,第三代试剂的灵敏度较第二代试剂更好 因为提升了 NS3 抗原的活性来实现的 Elecsys Ant

12、i-HCV 的 NS3 活性极佳 不再使用NS5 抗原 Abbott Architect 也不使用 ECi 使用NS5抗原 NS5抗原现在被认为会造成特异性问题,但是对于灵敏度没有大的提升.,艾滋病抗原抗体实验室检测HIV抗体检测 -1985年开始，历经4代,第四代,病毒裂解液 重组抗原 HIV-1 / -2 / -O anti-p24 Ab,IgM / IgG 抗体 HIV-1 / -2 / -O p24 抗原,病毒裂解液 重组抗原 HIV-1 / -2 / -O anti-p24 抗体,第四代HIV 同时检测HIV P24抗原和HIV 抗体的试剂临床灵敏度优于三代试剂,定性检测项目结果判读

13、-有反应性和无反应性,定性项目一般以阴阳性作为结果判断的基础。 阴阳性判读基于量化的结果，主观进行阴阳性的定义。 真正的确认的阴阳性需要通过金标准测量方法才能确证。 HCV的确证实验RIBA（重组免疫印迹法） HIV的确证实验Western-Blot（蛋白质印迹法） 感染初期，可能使用确证实验也无法得出准确的阴阳性结论。 检验方法的局限性，使用有反应性和无反应性来评估该样本针对该检测方法的检测结果。 半定量检测，通过病员的动态随访，相隔一定时间再行检测，可通过COI值的变化程度来进行确证。,主要内容,罗氏公司及其产品简介 罗氏电化学发光介绍 -传染病系列介绍 -肿瘤标志物系列介绍 -其他项目简

14、介,肿瘤标志物Tumor Marker,CEA (breast*, cervix*, esophagus*, secondary marker of several other tumors) AFP (germ cell*, liver*) Total PSA (prostate*) Free PSA (prostate, secondary marker) CA 125 (卵巢ovary*) HE4 (人附睾蛋白4-上皮性卵巢癌)注册中 CA 15-3 (乳腺breast*) CA 19-9 (胰腺pancreas*, biliary ducts*) CA 72-4 (胃stomach*)

15、 Cyfra 21-1 (肺bladder*, lung*) NSE (肺lung*) S100 (黑色素瘤malignant melanoma*),* primary marker,甲胎蛋白-AFP肝癌首选肿瘤标志物,胎儿发育期由卵黄囊和肝细胞合成的糖蛋白， 发生于妊娠12个周，出生后下降 几个月-1年内 降至正常水平 临床意义： 原发肝癌 70-95% AFP400ng/ml 病毒性肝炎、肝硬化绝大部分AFP400ng/ml 消化道肿瘤、肺癌、生殖系统肿瘤伴肝转移者AFP可升高，但升高水平不及原发性肝癌患者 非精原胚胎细胞肿瘤晚期患者的AFP水平显著增高 孕妇血清AFP升高提示胎儿脊柱断裂

16、、无脑症或多胎，AFP水平较低（结合孕妇年龄）提示未出生的婴儿有Downs综合症的危险性,癌胚抗原-CEA结直肠癌首选肿瘤标志物,CEA 是一种单体糖蛋白，CEA主要来源于胎儿的胃肠和血 液，正常成人的血液中很难检测出CEA 。 临床意义： CEA作用广谱，消化道肿瘤、肺癌、乳腺癌、生殖系统肿瘤、泌尿系肿瘤有不同程度的升高，主要应用于结直肠癌治疗的监测和随访 与肿瘤的分期相关，分期越晚CEA水平越高 肿瘤的体积越大，CEA水平越高 发生远处转移的患者，CEA水平越高 腺癌最敏感，其次是鳞癌和低分化癌 正常人吸烟者CEA升高 肝硬化、肝炎、肺气肿、肠道憩室、直肠息肉、结肠炎等良性病CEA可升高

17、癌症病人的胸、腹水、消化液、分泌物中的CEA常升高,CEA的优势与局限性结直肠癌首选的肿瘤标志物,优势： CEA是对结直肠癌的预后评估、术后监测和疗效评估的首选指标，配合隐血检查，可对50岁以上无临床症状高危人群进行筛查 局限性： 只在肿瘤的中晚期才有较显著的升高，也不只局限于某一类肿瘤，因此CEA对多数肿瘤的早期发现与鉴别诊断并无帮助 CEA组织特异性不高,CA19-9胰腺癌首选肿瘤标志物,是分子量10，000道尔顿的糖脂，胎儿的胰腺、胆囊、肝脏、肠等组织表达，成年人肺、肝脏、胰腺等组织也有低浓度的表达 检测患者血清CA19-9可作为胰腺癌、胆囊癌等恶性肿瘤的辅助诊断指标，监测病情变化和复发

18、 临床意义： 胰腺癌、胆囊癌、胆管壶腹癌，CA19-9明显升高，尤其胰腺癌晚期的阳性率可达75%，是重要的辅助诊断指标 胃癌的阳性率 50%， 结/直肠癌的阳性率60%，肝癌的阳性率65% 其他恶性肿瘤也有一定的阳性率如：乳腺癌、卵巢癌、肺癌等 某些消化道炎症CA19-9也有不同程度的升高，如：急性胰腺炎、胆囊炎、胆汁淤积性胆管炎、肝炎、肝硬化等,CA15-3乳腺癌首选肿瘤标志物,分子量为400KD的上皮粘蛋白，主要来源于腺体细胞 临床意义： 乳腺癌患者CA15-3升高，乳腺癌初期的敏感性 60%，乳腺癌晚期的敏感性80%，CA15-3适用于乳腺癌的辅助诊断，连续检测可用于II期和III期乳腺

19、癌肿瘤复发的早期诊断，转移性乳腺癌的疗效监测 其他恶性肿瘤也有一定的阳性率，如肺癌、消化道肿瘤、生殖系统肿瘤等 肝脏、胃肠道、肺、乳腺、卵巢等非恶性肿瘤性疾病，阳性率一般10% 某些子宫内膜癌患者的CA15-3升高，提示预后不佳，特别是血清CA15-3和CA125同时增高,CA125卵巢癌首选肿瘤标志物,CA125 是高分子量（200 000D）的糖蛋白 存在于胎儿的体腔上皮来源的组织中，包括腹膜、胸膜和心包膜。正常人输卵管、子宫内膜和子宫颈内膜均有表达 临床意义： 卵巢癌血清CA125升高，诊断的灵敏度为79%（特异性82%） 治疗有效的患者CA125下降，复发CA125升高先于临床症状的出

20、现，CA125是判断卵巢癌疗效和复发的良好指标 其他非卵巢恶性肿瘤也有一定的阳性率，如生殖系统肿瘤、消化道肿瘤、肺癌、 乳腺癌等（广谱） 良性妇科疾病和胸、腹水也不同程度的升高，但阳性率 较低 早期妊娠，CA125也有升高,人类附睾蛋白 -HE4卵巢癌,HE4最早在附睾的上皮细胞发现，后证实在正常卵巢、上呼吸道和胰腺也有低表达 临床意义： CA125的检测是NACB推荐的卵巢癌诊断的首选指标。HE4结合CA125增加诊断卵巢癌敏感性，提高对早期卵巢癌检测能力 HE4和CA125双标志物检测鉴别诊断骨盆腔肿块 的良性盆腔肿瘤和卵巢癌病变 子宫内膜癌的早期诊断,暂未开展,前列腺特异性抗原-PSA前

21、列腺癌首选肿瘤标志物,PSA存在于前列腺上皮细胞的胞浆中，具有组织特异性 PSA的水平与年龄相关，年龄越大，PSA水平越高 临床意义： PSA是目前广泛应用于前列腺癌的肿瘤标志物。血清中的PSA由前列腺上皮和尿道球腺产生，是组织特异性抗原 PSA联合直肠指诊可以对高危人群（家族史和年龄大于50岁）进行筛查 PSA的水平与年龄和前列腺癌的分期呈正相关 监测前列腺癌治疗的疗效和肿瘤的复发,游离的前列腺特异性抗原-fPSA,血清中游离的PSA 单独检测fPSA对于诊断前列腺癌意义较小 当PSA小于10ng/ml时，fPSA/PSA可以增加前列腺癌的诊断的特异度 前列腺癌的fPSA/PSA比值低于正常

22、人和前列腺增生的患者,CA72-4胃癌首选肿瘤标志物,发现于1981年，高分子量的粘蛋白 参考值：2.5U/ml 临床意义： 诊断胃癌的灵敏度为28-80%（特异性95%），CA72-4升高程度与胃癌的分期有关，手术完全切除可迅速下降至正常值，复发的病例CA72-4的升高先于临床诊断，还可用于胃癌的预后评估 对粘液性卵巢癌诊断灵敏度高于CA125，可动态监测卵巢癌的治疗效果 结/直肠癌、胰腺癌、肝癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌也有一定的阳性率,暂未开展,NSE(神经元特异性烯醇化酶)小细胞肺癌标志物Cyfra 21-1(细胞角蛋白19 片段)非小细胞肺癌标志物,肺癌 世界卫生组织（WHO）对肺癌的分

23、型为四种：鳞状细胞癌、腺癌、大细胞及小细胞肺癌。也有简单的分型为小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)和非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)。,在各类肺癌中，小细胞癌的预后最差。 一般起源于较大支气管，大多为中央型肺癌。小细胞癌分化程度低，生长快 ，恶性程度较高，预后凶险。 小细胞肺癌患者自诊断起的中位生存期不足三个月，二年生存率小于1%。,NSE（神经元特异性烯醇化酶）小细胞肺癌首选肿瘤标志物,分子量为80KD的蛋白酶，主要来源于神经细胞核神经内分泌细胞，以及这些细胞引发的肿瘤细胞中 NSE是检测小细胞肺癌的首选的肿

24、瘤标志物 NSE是神经内分泌肿瘤和精原细胞瘤的肿瘤标志物 临床意义： 小细胞肺癌的鉴别诊断、监测疗效和肿瘤的复发 神经母细胞瘤的鉴别诊断、监测病情变化、疗效、复发等，NSE对儿童型神经母细胞瘤阳性率为90 神经内分泌肿瘤 NSE升高，如黑色素瘤、嗜铬细胞瘤、甲状腺髓样癌、胰岛细胞瘤等 精原细胞瘤的诊断，与疾病的临床分期相关,暂未开展,CYFRA21-1（细胞角蛋白片段19）非小细胞肺癌首选肿瘤标志物,血清CYFRA21-1是指细胞角蛋白片段19，角蛋白是构成细胞骨架的一种中间丝状物（上皮细胞的支架蛋白），分子量为30KD 良好的组织特异性，是非小细胞肺癌（NSCLC）首选肿瘤标志物 临床意义：

25、 非小细胞肺癌的诊断和鉴别诊断，与肿瘤的病理组织分型和TNM分期相关 对手术、化疗和放疗的治疗的效果进行监测 对非小细胞肺癌预后进行评估，初始血清高水平显示 预后不良 检测横纹肌浸润性膀胱癌的病程，诊断和随访。,暂未开展,S100黑色素瘤首选肿瘤标志物 / 脑损伤的标志物,S100蛋白分子量为10.5KD的钙结合蛋白 S100A1和S100B是最先发现的成员。由中枢神经系统细胞表达，特别是星形胶质细胞、黑色素瘤细胞和其他一些组织也有表达 临床意义： 恶性黑色素瘤患者，特别是II、III和IV期的患者，血清S100浓度的升高提示疾病的进展，连续检测有助于疗效的评估 多种类型的大脑损伤，脑脊液中S

26、100的浓度会升高，并能 释放到血中，多种疾病导致的脑损伤，如脑外伤、中风和 脑肿瘤的患者血清中能检测出S100,暂未开展,肺癌的实验室诊断,肺癌常用的肿瘤标志物：CYFRA21-1、NSE、CEA、CA125,胃癌的实验室诊断,胃癌是我国消化道肿瘤发病率最高的肿瘤 早期胃癌多无症状或仅有轻微症状，当临床症状明显时，病变已属晚期 胃癌临床常用的标志物 CA72-4、 CEA 、CA19-9,卵巢癌的实验室诊断,卵巢癌是女性生殖系统肿瘤仅次于宫颈癌、宫体癌的第三位妇科肿瘤，居女性恶性肿瘤的第六位，死亡率居妇科恶性肿瘤的第一位。 由于卵巢癌发病率逐年增高以及早、晚期预后差异显著，在临床上缺乏特异性

27、的早期诊断方法，5年生存率仅15%-20%. 临床常用的肿瘤标志物： CA125、HE4、CEA、 其他：HCG、AFP、CA72-4,肿瘤标志物常用检测套餐,男性： AFP，CEA，PSA，fPSA，CA724，CA199，Cyfra211，NSE，CA724，CA125， 女性： AFP，CEA，CA125，HE4，CA153，CA724，CA199， Cyfra211，NSE 肺癌：CYFRA21-1、NSE、CEA、CA125 胃癌： CA72-4、 CEA 、CA19-9 卵巢癌： CA125、CEA、HE4,肿瘤标志物（TM）的合理应用及注意事项,动态记录：建立自身对照： （1）

28、CEA快速增高4ng/mL/6月，表示骨和肝转移。 （2）CEA缓慢增加24ng/mL/6月，表示脑、软组织和皮肤转移。 （3）TM上升，应在1430天重复测定。,了解生物半衰期，选择合理检测时间 例如：CEA T1/2=3天， 若术前CEA 100 ng/mL的患者， 要降至参考范围（3.0 ng/mL ）则需20天左右； 若术前CEA 20 ng/mL的患者， 要降至参考范围（3.0 ng/mL ）则需10天左右，,肿瘤标志物（TM）的合理应用及注意事项,常用肿瘤标志物的生物特性和临床应用,肿瘤标志物的检查频率,合理的肿瘤检测频率： 首次治疗前（手术、放疗、化疗和激素治疗） 各种治疗后：术

29、后2-10天，根据相应的肿瘤标志物的半衰期而定 首次治疗1-2年3个月检查一次，首次治疗后3-5年每6个月检查一次 怀疑有复发或者转移时 肿瘤重新分期和肿瘤标志物明显升高，2-4周内应跟踪检查,肿瘤标志物的临床应用原则中国指南,定期随访原则:治疗后 6 周做首次测定 3 年内每3 月测定一次 35 年每半年一次 57 年每年一次 随访中如发现有明显升高 1 月后复测一次，连续2 次升高，可预示复发或转移 常早于临床症状和体征的出现；对于临床及时处理有极大帮助 联合检测原则: 同一种肿瘤可有一种或几种肿瘤标志物异常 合理选择几项灵敏度、特异性能互补的肿瘤标志物构成最佳组合，进行联合检测 比如肺癌

30、,肿瘤标志物应用注意事项： PSA禁止应用于女性常规检查 CA153仅在男性已确定为乳腺癌时使用 前列腺活检，导尿，膀胱镜等创伤性插管都能使血清PSA水平明显升高。 女性经期检测CA125会升高23倍 妊娠或异位妊娠会使CA125轻度升高，良性腹水CA125明显升高 同一肿瘤可以含有多种肿瘤标志物，不同肿瘤也可能有共同的标志物。,应用注意事项：,化疗可能会使TM一过性升高 肾衰可引起CEA和某些TM异常升高 胆汁淤积可引起CA199显著升高 同一TM在不同的检测系统上检测结果会有差别，甚至相差23倍。 同一的检测系统上TM检测结果升高或降低达25时才认为有临床意义。,肿瘤标志物检测可能的影响因

31、素,罗氏肿瘤标志物临床联合应用,首选指标 辅助指标,罗氏肿瘤标志物的临床指征： 一级标志物，二级标志物和三级标志物,一级标志物-对决策有重要的指导意义 二级标志物-结合首选方案，能起到帮助 三级标志物-结合其他诊断措施，能起到帮助 Roche Elecsys 是目前 唯一能全自动检测CA724、Cyfra211、NSE、S100的系统,主要内容,罗氏公司及其产品简介 罗氏电化学发光介绍 -传染病系列介绍 -肿瘤标志物系列介绍 -其他项目简介,自身免疫检测,Anti-CCP 抗环瓜氨酸肽抗体,风湿病介绍,风湿病：是一种全身性疾病，主要累及结缔组织，大多数病人有关节、肌肉的病变，与机体的免疫学异常

32、有关，属于自身免疫性疾病,骨关节炎,脊柱骨关节病,类风湿关节炎,风湿病,结缔组织病 SLE,血管炎,感染性关节炎,代谢性骨病,关节外风湿病,晶体性关节病,Anti-CCP 介绍,1998年，Anti-CCP在类风湿关节炎患者的关节滑膜液里发现 第一代的抗瓜氨酸肽抗体，采用ELISA法检测，特异性高大于90%，但是敏感性只有30-40% 2002年，采用ELISA法检测（96孔板，手工）的第二代的Anti-CCP产品产生，在保持特异性的情况下，敏感度显著提高达60-80% Elecsys Anti-CCP是采用电化学发光法全自动环瓜氨酸肽第三代检测方法,特异性高达97%，敏感度67%（Cut-o

33、ff值=17 U/mL)。,Anti-CCP抗环瓜氨酸肽抗体,类风湿关节炎(RA)是一种比较常见的自身免疫性疾病 类风湿关节炎(RA)现行的诊断标准： - 临床表现 - X线检查 - 类风湿因子（RF）检测 缺点： 符合此标准时病人常已出现骨关节破坏 RF缺乏特异性，20-30%的患者RF阴性 不利于早期诊断早期干预治疗,2009 ACR/EULAR 联合推荐类风湿关节炎的诊断标准每个范畴取最高值，总分超过6分即可诊断为RA,受累关节 - 1个中到大的关节（0分） - 2-10中大关节（1分） - 1-3小关节（2分） - 4-10小关节（3分） -超过10个小关节（5分） 滑膜炎持续时间 -

34、少于6周（0分） - 6周或更长的时间（1分） 急性期反应物 - C -反应蛋白和红细胞沉降率均正常（0分） C反应蛋白或ESR异常（1分） 血清学 -类风湿因子和抗瓜氨酸合成蛋白抗体阴性（0分） -两个测试至少有之一是低滴度阳性。低滴度定义为超过正常上限，但不高于3倍正常值上限（2分） -至少有一个试验高滴度阳性，如滴度超过3倍正常上限（3分）,ACR(American College of Rheumatology)美国风湿病学院 European League Against Rheumatology（欧洲抗风湿病联盟）,Anti-CCP与RF 比较Anti-CCP特异性更高,1.Kar

35、ayevD, Morris RI, Metzger AL, Rheumatology Diagnostics Laboratory, Los Angeles, CA 2.Schulze-KoopsH et al.Dtsch. Med. Wochenschrift 2006 131 264-271 3.Data Eurodiagnostica,Anti-CCP临床应用,对类风湿关节炎的诊断特异性更高 结合RF诊断类风湿关节炎的灵敏度可达85% 特异性可达98% Anti-CCP有助于类风湿关节炎的早期诊断（3-6个月） Anti-CCP可以提示预后情况,糖尿病标志物Diabetes Marker

36、,C-Peptid （C肽） Insulin,C肽（C-Peptide）,概述： 胰岛素（Insulin）是机体内唯一降低血糖的激素，也是唯一同时促进糖原、脂肪、蛋白质合成的激素。 C肽（C-Peptide）是胰岛细胞的分泌产物，它与胰岛素有一个共同的前体胰岛素原 一个分子的胰岛素原经酶切后，裂解成一个分子的胰岛素和一个分子的C肽 C-肽浓度水平能更好地反映胰岛细胞功能；且不受外源性胰岛素干扰、不与胰岛素抗体反应，不受肝脏酶灭活，半衰期比胰岛素长 治疗用的胰岛素不含C肽，因此，C肽不受外源性胰岛素的影响，这是在研究胰岛B细胞功能方面比胰岛素优越之处，可以用于接受胰岛素治疗的病人。 C肽释放试验

37、在某种意义上可代替胰岛素释放试验。C肽释放试验用于正接受胰岛素治疗的患者。,性激素Fertility Marker / Hormones,ACTH（促肾上腺皮质激素） Cortisol DHEA-S（硫酸脱氢表雄甾酮） Estradiol FSH LH Prolactin Progesterone SHBG（性激素结合蛋白） Testosterone hCG+ (primary tumour marker for chorion) hCG STAT *hGH（人生长激素）,泌乳素（PRL）检测的影响因素,鉴别高泌乳素血症主要需检测小分子有生物活性的PRL， 而巨PRL会干扰到其检测。 巨泌乳素

38、分子可引起高PRL已被确认相当长的时间了， 它是造成高泌乳素血症的常见原因，美国和英国的临床实验室，接近10%的高PRL样本是由巨泌乳素引起的。有25%的样本会因巨泌乳素导致PRL假性升高。 聚乙二醇(PEG)沉淀法样品预处理联合电化学发光法作为巨泌乳素血症的筛检试验，在英国已作为常规的检测，但国内实验室开展较少。,生理性PRL升高：如运动，进食，精神创伤，刺激，紧张等引起的PRL暂时性升高 药物影响：口服避孕药、雌激素治疗、抗多巴胺药物、抗精神抑郁药和胃病药物，均有可能使PRL分泌过多。,ATCH的分泌会影响到肾上腺皮质分泌的糖皮质激素（皮质醇）的分泌。同时皮质醇的分泌也会反过来调节下丘脑和

39、腺垂体的功能，而负反馈的调节ACTH的分泌。临床上可以通过检测皮质醇与ATCH的变化，并将两者结合起来进行相关疾病的鉴别诊断。,Cortisol与ATCH的联合检测,概述：, SHBG的生理作用。 运输性激素的重要载体。 肝脏通过调节SHBG的产生来影响性激素的活性。同样,吸收入血的性激素水平也影响SHBG的浓度。 SHBG的水平被认为是受雌二醇/睾酮（E2/T)的比值调控。 E2/T上升时SHBG的水平也上升 E2/T下降时SHBG的水平也随之下降,SHBG(性激素结合球蛋白),血液中睾酮60%与SHBG结合，38%与白蛋白（ALB）结合，2%为游离状态，结合的无生物活性。具有代谢活性的睾酮

40、仅为2%，其余的与蛋白质结合而运转；,性激素结合球蛋白又称睾酮-雌二醇结合球蛋白,由肝脏合成并释放入血,分子量95KD,由两个亚基组成。,SHBG的应用,性激素结合球蛋白(SHBG )临床应用,女性多毛症及男性化： SHBG水平可较正常水平下降50，游离睾酮增加90。 男性性腺功能减退： 有部分病人，血浆总睾酮水平正常，而性激素结合蛋白水平升高。这些病人检测SHBG很有意义。 针对上述病人推荐进行SHBG、 ALB（白蛋白）、总睾酮(TT)、雌二醇（E2）的联合检测。,甲状腺功能：甲亢病人SHBG水平上升；甲减病人SHBG下降。,肝硬化、慢性肝炎、脂肪肝患者;SHBG水平可升高。 这种升高是由

41、于 E2在肝脏的代谢减少导致E2/T的平衡改变，引起SHBG升高。,SHBG的应用,性激素结合球蛋白(SHBG )临床应用,高胰岛素血症的特异性标志： SHBG可以作为高胰岛素血症的特异性标志，。 胰岛素水平升高可抑制肝脏SHBG 的合成，致血SHBG水平降低，继而使性激素水平发生紊乱，造成糖、脂肪代谢障碍，反之则又进一步降低了胰岛素敏感性，所以SHBG紊乱暗示代谢状态紊乱。 糖尿病的发病和胰岛素抵抗的预测指标 肥胖男性2型糖尿病患者，SHBG水平的降低与肥胖、胰岛素浓度增高以及与胰岛素抵抗具有密切关系。,有必要同时检测: SHBG、 ALB、总睾酮(TT)、雌二醇（E2）、胰岛素（INS）、

42、C肽,SHBG的临床意义,性激素结合球蛋白(SHBG )临床应用,1. SHBG测定有助于性激素变化的研究。 2. SHBG增高见于:男性性腺功能减退、甲亢、服用含E2的避孕药、肝脏疾病。 3. SHBG降低见于:女性多毛症及男性化、多囊卵巢综合症、肥胖、甲状腺机能减退症。,游离睾酮指数的计算和临床应用,计算游离雄激素指数（Free Androgen Index） 比总睾酮值能更准确的反映体内的雄激素活性。,游离睾酮指数（FTI）游离雄激素指数（FAI) 总睾酮（Testosterone)nmol/L 与SHBGnmol/L的比值 Free Testosterone 总睾酮白蛋白结合睾酮SHB

43、G结合睾酮 生物活性睾酮Bioavailable Testosterone =游离睾酮+白蛋白结合睾酮,甲状腺功能Thyroid Marker,TSH fT3 fT4 T3 T4 T-uptake TG (甲状腺球蛋白) Anti-TPO Anti-TG Anti-TSHR（促甲状腺受体抗体）,Anti-TSHR（TRAb）促甲状腺受体抗体,Anti-TSHR是甲状腺细胞膜TSH受体的自身抗体 具有和TSH相似的甲状腺刺激功能 不受负反馈系统的控制，刺激甲状腺功能 TRAb是引起Graves病患者甲亢和甲亢复发的重要原因之一,Graves病毒性弥漫性甲状腺肿,是引起甲状腺功能亢进的主要原因；

44、约85%的甲亢病人属于Graves病 1 有高达71.5%在Graves病患者AntiTSHR检测阳性， 临床表现除甲状腺肿大和高代谢症群外，尚有突眼，粘液性水肿及肢端粗厚等； 【流行病学】 0.25%人群患GD (300 mio，约75万 2 ； 男女发病比例：1：8 3 ； 发病年龄多于20 40岁4 ； 在婴儿，儿童和成年人中也存在；,1. /medlineplus/ency/article/000356.htm (April 2008) 2. /WhatIs.html (April 2008) 3. http

45、:/www.thyroid- (April 2008) 4. /faq/graves.pdf (April 2008),促甲状腺激素受体抗体 Anti-TSHR检测Anti-TSHR的临床意义,促甲状腺激素受体抗体检测,Graves病 辅助诊断,Graves病 治疗监测,第三孕期 风险评估,患者经抗甲状腺药物治疗后； 如TRAb持续阳性， 预示停药后甲亢的复发， TRAb活性越高， 复发就越早。 TRAb阴性， 则提示病情缓解， 对于指导临床治疗有重要意义。,判断该疾病是否通过胎盘引起给胎儿甲状腺疾病,心肌标志物Cardiac Marker,

46、hsTroponin T(超敏肌钙蛋白T） hsTroponin T STAT (超敏肌钙蛋白T急诊） CK-MB CK-MB STAT Myoglobin Myoglobin STAT NT-pro-BNP（ N-端脑钠肽前体） Digoxin地高辛 Digitoxin洋地黄,贫血标志物Anemia Marker,Ferritin (primary tumor marker for tumor related anemias) B12 Folate RBC Folate,骨标志物Bone Marker,-CrossLaps - 胶原降解产物 N-MID Osteocalcin N 端骨钙素

47、Total P1NP总 I 型胶原氨基端前肽 25OH VitD325羟维生素D3 *Total VitD总维生素D PTH,-Crosslaps （- 胶原降解产物）骨吸收标志 I 型胶原在合成的同时也被降解，-Crosslaps是I型胶原降解所产生的特异性产物。在骨 吸收增强时，I 型胶原的降解也增高，-Crosslaps含量随之升高。 total P1NP （总 I 型胶原氨基端前肽）骨合成标志 I 型原骨胶原有N-（氨基）和C-（羧基）延长端，在转变为胶原质期间，它们被蛋白酶 去除，继而形成骨基质。罗氏电化学发光测定的延长端是氨基端，故名I 型胶原氨基端 前肽，它是骨形成的一个特异性标志物。 N-MID Osteocalcin （ N 端骨钙素 ）骨转换标志 在骨合成中，成骨细胞产生骨钙素，完整的骨钙素及大的NMID片断均存在血液中， 前者不稳定，易裂解为后者。,骨标志物检测,高致畸病原体ToRCH,Toxo IgG (quantitative assay) Toxo IgM (qualitative assay) Rubella IgG (quantitative assay) Rubella IgM (qualitative assay) CMV IgG (quantitative assay) CM