乳粉中亚硝酸盐含量测定精.ppt

1、,乳粉中亚硝酸盐含量测定,学习目标,知识目标： 1. 能解释测定亚硝酸含量原理，写出测定亚硝酸盐含量的流程和注意事项。 技能目标： 1.会正确使用分光光度计； 2.能正确绘制标准曲线； 3. 能准确报告检测结果，评价亚硝酸盐含量是否符合标准。 素质目标： 1.培养学生严谨、务实的学习精神； 2.培养学生开拓创新、团结协作的职业素质。,检测依据,乳及乳制品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定,离子色谱法,分光光度法,1,2,3,GB 5009.33-2010,乳及乳制品中亚硝酸盐的测定,GB 5009.33-2010-第三法,测定原理,试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在滤液中，加入磺胺和N-1-萘基-乙二胺二

2、盐酸盐，使其显粉红色，然后用分光光度计在538 nm波长下测其吸光度。 将测得的吸光度与亚硝酸钠标准系列溶液的吸光度进行比较，就可计算出样品中的亚硝酸盐含量。,具体工作任务分解,任务一：仪器设备及试剂的准备,仪器 所有玻璃仪器都要用蒸馏水冲洗，以保证不带有亚硝酸盐。 天平：感量为0.1 mg和1 mg。 烧杯：100 mL。 锥形瓶：250 mL，500 mL。 比色管：50 mL。 移液管：1 mL、2 mL、5 mL和10 mL。 量筒：根据需要选取。 玻璃漏斗：直径约9 cm，短颈。 定性滤纸：直径约18 cm。 分光光度计：测定波长538 nm，使用1 cm2 cm光程的比色皿。,任务

3、一：仪器设备及试剂的准备,试剂：测定用水应是不含亚硝酸盐的蒸馏水或去离子水。 盐酸-氨水缓冲溶液：pH 9.609.70。 硫酸锌溶液 亚铁氰化钾溶液 显色液1：体积比为450:550的盐酸。 显色液2：5 g/L的磺胺溶液。 显色液3：1g/L盐酸萘乙二胺溶液 亚硝酸钠标准溶液：相当于亚硝酸根的浓度为1.00g /mL。 将亚硝酸钠在110120的范围内干燥至恒重。冷却后称取0.150 g，溶于1000 mL容量瓶中，用水定容。在使用的当天配制该溶液。取10 mL上述溶液和20 mL缓冲溶液于1000 mL容量瓶中，用水定容。每1 mL该标准溶液中含1.00g的NO2。,分光光度计的使用,（

4、1）预热仪器 将选择开关置于“T”，打开电源开关，使仪器预热20分钟。 为了防止光电管疲劳，不要连续光照，预热仪器时和不测定时应将试样室盖打开，使光路切断。 （2）选定波长 根据实验要求，转动波长手轮，调至所需要的单色波长。,（3）调节T=0% 轻轻旋动“0%”旋钮，使数字显示为“00.0”（此时试样室是打开的）。 （4）调节T=100% 将盛蒸馏水（或空白溶液，或纯溶剂）的比色皿放入比色皿座架中的第一格内，并对准光路，把试样室盖子轻轻盖上，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示正好为“100.0”。,（5）吸光度的测定 将选择开关置于“A”，盖上试样室盖子，将空白液置于光路中，调节吸光度调节

5、旋钮，使数字显示为“.000”。将盛有待测溶液的比色皿放入比色皿座架中的其它格内，盖上试样室盖，轻轻拉动试样架拉手，使待测溶液进入光路，此时数字显示值即为该待测溶液的吸光度值。读数后，打开试样室盖，切断光路。重复上述测定操作12次，读取相应的吸光度值，取平均值。 （6）关机 实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比色皿座架用软纸擦净。,注意事项,（1）为了防止光电管疲劳，不测定时必须将试样室盖打开，使光路切断，以延长光电管的使用寿命。 （2）取拿比色皿时，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，而不能碰比色皿的光学表面。 （3）比色皿不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗涤，也不能用毛刷清洗。比色皿外壁附

6、着的水或溶液应用擦镜纸或细而软的吸水纸吸干，不要擦拭，以免损伤它的光学表面。,任务二：样品预处理,一、样品的称取和溶解： 在100 mL烧杯中称取10 g样品，准确至0.001 g。用112 mL 5055的水将样品洗入500 mL锥形瓶中，混匀。 二、脂肪和蛋白的去除： 按顺序加入24 mL硫酸锌溶液、24 mL亚铁氰化钾溶液和40 mL缓冲溶液，加入时要边加边摇，每加完一种溶液都要充分摇匀。静置15 min1 h。然后用滤纸过滤，滤液用250 mL锥形瓶收集。,任务三：乳粉亚硝酸盐含量测定,移取:20 mL滤液于50 mL比色管中，加水至约30 mL。 在每个比色管中先加入3 mL显色液1

7、，边加边混；再加入2.5 mL显色液2。小心混合溶液，使其在室温下静置5 min，避免直射阳光。加入1mL显色液3，小心混合，使其在室温下静置5 min，避免直射阳光。用水定容至刻度，混匀。 在15 min内用538 nm波长，以空白试验液体为对照测定上述样品溶液的吸光度。,标准曲线的制作,分别移取0 mL、1mL、2mL、3 mL、4 mL、5 mL、6 mL、8 mL和10 mL亚硝酸钠标准溶液于9个50 mL比色管中。在每个比色管中加水，使其体积约为30 mL。 在每个比色管中先加入3 mL显色液1，边加边混；再加入2.5 mL显色液2。小心混合溶液，使其在室温下静置5 min，避免直射阳光。加入1mL显色液3，小心混合，使其在室温下静置5 min，避免直射阳光。用水定容至刻度，混匀。在15 min内，用538 nm波长，以第一个溶液（不含亚硝酸钠）为对照测定另外八个溶液的吸光度。 将测得的吸光度对亚硝酸盐质量浓度作图。亚硝酸根的质量浓度为横坐标，吸光度为纵坐标。亚硝酸根的质量浓度以g/100 mL表示。,亚硝酸盐含量计算,式中： X样品中亚硝酸根含量，mg/kg； c根据滤液的吸光度，从标准曲线上读取的NO2的浓度，g/100mL； m样品的质量，g； V所取滤液的体积，mL。 样品中以亚硝酸钠表示的亚硝酸盐含量，按式计算：