电解质与药物对离体蛙心活动的影响

1、电解质与药物 对离体蛙心活动的影响,授课教师：林海英,【实验目的】,掌握Straub离体蛙心的灌流方法 观察高钾、低钙、高钙、肾上腺素、乙酰胆碱与酸、碱等对离体心脏活动的影响,蛙心起搏点：静脉窦 蛙心的正常节律活动的维持需要一个适宜的理化性质：任氏液 心脏的正常活动有赖于内环境的相对稳定，改变灌流液的成分可引起其活动的改变。 心肌生理特性：兴奋性、自律性、传导性、收缩性,【实验原理】,影响心肌生理特性的主要因素 1. 兴奋性：静息电位与阈电位的差距；Na+通道的性状 2. 自律性：最大复极电位与阈电位的差距；4期自动去极的速度 3. 传导性：动作电位0期去极的速度和幅度 4. 收缩性：细胞外钙

2、离子浓度,对心肌活动的影响： （1）离子：K+、Ca2+ （2）肾上腺素（adr）和乙酰胆碱（ACh） （3）酸和碱：,1.离体蛙心的制备 2.离体蛙心固定 3.加样及观察记录,【实验方法与步骤】,（1）记录正常蛙心波动曲线（幅度、频率） （2）更换为无钙任氏液（0.65%NaCl ） （3）加2%CaCl2 12滴 （4）加1%KCl 12滴 （5）加1:10000的adr 12滴 （6）加1:100000的ACh 12滴 （7）加2.5%的NaHCO312滴，有变化后加3%的乳酸半滴，待效应明显后，再加12滴2.5NaHCO3，,【注意事项】,1.蛙心插管一定要插入心室，勿用力过大损伤心肌

3、 2.结扎静脉时，要远离静脉窦 3.换能器头端应向下倾斜以免液体进入换能器 4. 实验各项目，一旦出现变化就应立即用任氏液换洗（冲洗3次）；必须待心功能恢复正常后方能进行下一步实验 5.蛙心插管液面应保持恒定以保证心脏固定的负荷,6.随时滴加任氏液在心脏表面使之保持湿润 7.滴加药品和换取任氏液须及时标记，以便观察分析 8.吸任氏液和吸蛙心插管内废液的滴管应区分专用，不可混淆使用，以免影响实验结果 9.药物作用不明显时，可适量增加，密切观察药物剂量添加后的实验结果,【注意事项】,【实验结果】,【讨论】,1.无钙 任氏液,无钙任氏液灌流,细胞外液Ca2+ ,心肌细胞动作电位期间 Ca2+ 内流,

4、心肌细胞胞浆Ca2+ ,心肌收缩力收缩 ,细胞外液Ca2浓度升高,工作细胞动作电位期间Ca2内流增加,肌浆Ca2浓度增加,兴奋收缩耦联增强,心肌收缩力增强,2. 3%CaCl2,细胞外液K浓度升高,3. 1%KCl,如果任氏液中钾离子浓度明显增高，蛙心会处于什么状态？,当细胞外显著高钾时，细胞膜内外钾浓度梯度减小，使得静息电位绝对值减小至55mv，使得钠通道失活，从而使心肌细胞兴奋性丧失，心脏可停搏在舒张状态,（当细胞外轻度高钾时，膜内外K浓度梯度，静息电位， RP与TP的差，兴奋性）,心肌细胞膜1受体结合,adr,肌浆网对Ca2通透性,动作电位期间 Ca2内流性,收缩力,4.肾上腺素（adr）,心肌细胞膜M受体结合,细胞膜对K 通透性增加,自律性降低 心率减慢,细胞膜对Ca2通透性下降,动作电位期间Ca2内流减少,心肌收缩力降低,窦房结细胞最大复极电位绝对值增大 4期K+外流增加,ACh,抑制钙通道,5. 乙酰胆碱 （Ach）,6.酸和碱,乳酸和2.5%NaHCO3：H+进入心肌内膜后，可降低钙离子与肌钙蛋白的亲和力，促使钙离子的解离，收缩力。 NaHCO3中和了乳酸，解除了钙离子与肌钙蛋白亲和力的抑制，收