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文档简介
1、解决呼吸道感染的病原学诊断的困境:需要你,王辉北京大学人民医院检查课Email:whuibj,.mkt.GM.04.2016.5059,2, 2020/7/2,2,内容,呼吸道感染的病原学困境和可能的破裂之路,2,2020/7/2,thestremothimportinpratincinmedicine,William Osler,theprincipplesan 诊断程序! 诊断程序!medicineisascienceofuncertaintyandanartofprobability .最重要的是,不看远处的模糊,做手头的清楚的事,2020/7/2,4, 欧洲流调: CAP的主要
2、病原体检测率(%) 1996年11月至2008年7月在西班牙进行的CAP流调查纳入3,524例CAP患者(15%门诊患者,85%住院患者),其中1,463例患者病原学上呈阳性反应Cillniz C、et al. Thorax. 2011; 66(4):340-346 .肺炎链球菌和非典型病原体是CAP最主要的病原菌,混合感染占重要地位,n=1463,2020/7/2, 5、我国CAP的主要病原菌、病原体检出率(% )于2003年12月至2004年11月被选为我国7个城市12中心的665例CAP患者,进行病原体检查的2006年,我国CAP的大型流程调查显示,肺炎支原体是我国CAP最主要的病原体,
3、 其次肺炎链球菌1在中国已完成的另两项全国多中心成人CAP调查显示,肺炎支原体感染的比例分别超过20.7%和38.9%,肺炎链球菌(分离率分别超过10.3%和14.8% ), 成人CAP最常见的病原体三混合感染在社区呼吸道感染中占重要地位,细菌和非典型病原体混合感染多1,1 .刘或宁陈民钧赵铁梅等.中华结核和呼吸杂志. 2006; 29.(1)第:3-8段; liuye tal.bmcinectiousdiseases.2009; 93336331.3.taol letal.chinmedj (Engl ).2012; 125(17):2967-2972 .2020/7/2、6,成人病毒性肺炎
4、的发病率虽然高,但长期被忽略,每年新发生病毒性肺炎约200万例,其中成人和儿童分别为100万例的成人CAP综述(合计2910例),以及6:42-8.ruskaneno.lancet 2011; 377:1264-75 .6,2020/7/2,7,北京市成人CAP监测网:病毒性肺炎27.5%,2010-2012年本组领先,北京市12家医院954例成人CAP患者中,病毒性肺炎占27.5%。 重要病毒:流感病毒、鼻病毒、腺病毒、偏肺病毒和呼吸道病毒。 jiuginqu.bmcinectdis 2015在线first,7,2020/7/2,8,2020/7/2,上呼吸道感染标本的采集,9,用雨刷同时擦
5、拭两侧咽扁桃体和咽后壁(35次),咽雨刷的采集方法,2020/9 .咽拭子的采集,正确地取咽拭子的方法,错误地取咽拭子的方法,上呼吸道感染标本的采集,2020/7/2,10,上呼吸道感染标本的采集,11,使患者的头不要动,轻轻地转动雨刷慢慢地插入患者的鼻腔,不要用力遇到阻力后请马上到达鼻咽部,停留几秒钟吸收分泌物,轻轻旋转取出雨刷。 采集、鼻擦子标本、2020/7/2、11、病毒:使用聚酯或人造棉头的塑料花纹的擦子(例如,聚丙烯纤维的头),使用海藻酸钙或木纹的擦子,使病毒失活或抑制PCR反应脱脂棉擦拭器含有荧光物质,选择了影响荧光定量PCR结果的细菌:海藻酸钙擦拭器。 棉擦拭器、尼龙擦拭器抑制
6、百日咳博德菌的生长,用于病毒检查的擦拭器,把擦拭器头浸在含有一定量的样品液的螺母管里,扔掉尾部,拧紧管道盖,如果不能马上送检查的话,暂时保管在4的冰箱里,-20 用于细菌检查的擦拭器插入取样管,或插入适当的输送装置,立即检查,12,上呼吸道感染标本的采集,支原体保存液,病毒取样擦拭器,细菌取样擦拭器,2020/7/2,12,13,下呼吸道下呼吸道标本类型和适应症,14,下呼吸道标本中,痰27 (1):69-86,2020/7/2,21,22,指南强调血液培养至少2套,开始发热保证在抗感染治疗前得到最初的血液培养标本。 同时从两个独立部位提取血液标本的结果比单一部位的血液培养更有临床意义。 除新
7、生儿外,不建议只进行单套血液培养(级)。 48-96 h后评价疗效,再血培养不是一套,必须同时提取两组标本(级)。 但是,怀疑血管内感染时,应该在不同部位静脉穿刺采血,有助于持续性菌血症(级)的诊断。 Crit Care Med 2008 Vol. 36,No. 4; CLSI指南英国的指南,2020/7/2、22、23、每根8-10ml表示“左侧”、“右侧”的无菌体液,例如胸水等,手册中2020/7/2、23、24,痰标本在病原学诊断中面临的困难,CAP患者的标本采集、运输、快速处理、细胞学判断标准的合理应用,无前期抗生素治疗,包括说明技能涂膜革兰染色:最新数据通过革兰染色识别1669名CA
8、P住院患者的合格标本,显示只有14%能识别主要形态类型infectiousdiseasessocietyofamerica.guidelinsonthemanagementofcommunity-acquiredpneumoniainadults 2007:44 (Suppl2),2020/脓痰,黏液样痰,带血痰,2020/7/2,26,26,标本质量评价痰涂片,Garbage in!唾液、2020/7/2、27,小调查显示,我国15家医院2014年痰标本数据,27、2020/7/2、28,痰标本判定标准的比较,28、2020/7/2、29,合格痰标本:吞噬很重要,29,WBC内食:葡萄球菌,
9、2 2,31,痰培养标本质量状况,13所医院,痰标本合格率不到50%,2020/7/2,32,颗粒不足患者肺炎的病原菌,curopinpulsemed 2015,21:-271,2020/7/2,33,确定诊断ia :关于GM的诊断性能21336660-271,2020/7/2,34,粒缺陷肿瘤肺炎:微生物学评价:BAL是好的诊断工具,curopinppullmmed 2015,21333660-271,2020/7/2, 35、恶性粒细胞减少患者的肺炎诊断临床评价微生物学评价:可靠性最高:从无菌部位分离or呼吸道分泌物中的非共生菌BAL是优先下呼吸道标本,越快采集,特别是在使用抗生素前,不可
10、延误治疗支气管活检(TBBX ) 可以揭示血流感染,但培养不优于BAL的恶性粒细胞减少二次血小板减少,并发症风险高分子方法:半乳糖甘露聚糖分子试验侵袭性曲霉病(FDA认可),scotte.evans和davide.ost, pneumoniaintheneutroeniccancerpatient infectious diseases,2015,21 (3) :261-271,2020/7/2,36,日平均痰标本与BAL运送检查的比较,36,2020/7 分3-5份进行(标准分200-240ml,4份进行)好的BAL标本至少30%的注入液回收的30%的回收率被视为不合格,需要重新采集(特别是
11、10个菌落培养后的菌落数:相同形态的菌落数103CFU/mL 、, 但是,用l棒涂平板计数,定量培养结果更准确,2020/7/2,40,肺泡冲洗液涂革染色,适量的BALF标本进行细胞离心,自然干燥,甲醇固定或火焰快速固定3次, 革兰氏染色标本的质量以扁平扁平扁平扁平上皮细胞在所有细胞中所占的比例的1%判断合格标本的灵敏度为104细胞/mL,如果在显微镜视野中看到一个或多个细菌,报告了革兰氏染色形态和白细胞结果,提示该菌与活动性肺炎有关。40、帕特里克RM.manualofclinicalmicrobiogy.9 the d.us : ASM press, 2005352535253525352
12、535253535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353535353 超过535-35-35-35-35-35-35-35-35-35 真菌性感染,目前没有BAL的诊断阈值。 丝状菌也没有阈值。 然而,丝状菌呼吸道分泌物的价值远高于酵母菌属。 这种菌在EORTC /MSG指南中有“临床诊断”的价值, 41 1.a指南toutilizationofthemicrobiogylaboratoryfordi
13、agnosisofinfectiousdiseases 33602013 recommendandsbytheinfectiousdiseasso andtheamericansocietyformicrobiogy (ASM ),201:57 (15 August )2. eortc/msg,2020/7/2,42,培养和涂膜结果不一致:复习,中华结核和呼吸杂志2011, 哮喘患者:结晶和克鲁斯曼螺旋体,2020/7/2,44,显着的细菌浓度值(CFU/ml ),标本,显着的浓度CFU/ml,自然咳痰,107,诱导痰,不确定,气管内吸引物,106,支气管肺泡清洗液,104,保护刷,103,
14、不进行支气管洗涤液培养,2020/7/2,FilmArray Respiratory Panel,首先用单个标本同时检测病毒和细菌性呼吸道感染的测试为2min正常时间,1h旋转时间为300l样品(用鼻咽刮水器即可) http:/news events/news room/press announcements/UCM 3 采血吧! 我们竭尽全力寻找解决事件的证据(病原菌)。 如果你提供一个好的事件现场(合格标本),面对感染患者的时候,微生物室以与你零距离为前提,不要忘记病毒不使用抗生素,想起培养,46,2020/7/2,47,2020/7/2,药物敏感性报告的共识的药敏试验的意义和基本原则具体
15、的专业要求特殊的耐药性和耐药性表型的审查要点报告形式,48,2020/7/2,药敏试验的基本原则药敏试验的前提条件实验室的人员能力和客观条件检查环节的规范标准,信任结果的说明能力, 可以提供临床会诊分离株的临床意义,49,检测结果应正确遵循CLSI文件的质量控制,定期参加房间比较保留株,2020/7/2,标本类型脑脊液不报告:不能通过血液脑屏障的口服剂型抗菌药,一二代头孢菌素系克林霉素系、大环内酯系、喹诺酮系尿仅用尿检体报告的药:沙星未报告:氯霉素呼吸器不报告:赤霉素、50、2020/7/2、 标本类型:粪便x,鹌鹑肠球菌,51 2020/7/2,药敏方法的选择和判定标准的规范,按照CLSI的要求,采用近两年的折点每年审查本室药敏折点范围,采用新折点前,不能进行临床验证采用新折点,相CLSI M100未给予折断药物,国内外专家的共识,权威文献,52,2020/7/2,普通测试和报告药物的选择,最重要的依据: CLSI M100-S25 M45 )菌种/药物检测报告的组合结合当地病原光谱、代表药、临床需求、实验室条件,充分听取临床课的意见自动化药物敏感性板:手动不能满足的重要药物连续性和灵活性:不同时期药物的对比性,满足临床需要的选择性报告:多种敏感药,A/B/C/同时报告u类药物意义中国大陆最
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