2025届辽宁省阜蒙县第二高级中学高三毕业班联考（二）生物试题试卷含解析

2025届辽宁省阜蒙县第二高级中学高三毕业班联考（二）生物试题试卷请考生注意：1．请用2B铅笔将选择题答案涂填在答题纸相应位置上，请用0．5毫米及以上黑色字迹的钢笔或签字笔将主观题的答案写在答题纸相应的答题区内。写在试题卷、草稿纸上均无效。2．答题前，认真阅读答题纸上的《注意事项》，按规定答题。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．某生态系统中，除分解者外，仅有甲、乙、丙、丁、戊5个种群。调查得知，该生态系统有4个营养级，相邻营养级之间的能量传递效率为3%~24%，且每个种群只处于一个营养级。一年内输入各种群的能量数值如表所示，表中能量数值的单位相同。下列叙述正确的是（）种群甲乙丙丁戊能量1．562．843．34．485．54A．表中所示的能量总和是流经该生态系统的总能量B．若土壤中含有一定浓度的重金属铬，则甲生物比乙生物体内污染物浓度铬含量低C．该生态系统中第二营养级与第三营养级之间的能量传递效率约为6．4%D．该生态系统内实现了物质循环，碳元素在各种群间循环的主要存在形式是CO22．储存在真核细胞囊泡中的某些分泌蛋白只有在受到特定信号（催分泌剂）剌激时才被分泌到细胞外。下列表示细胞中某种消化酶的“浓缩”和运输过程，相关推测不合理的是（）A．“浓缩”过程有利于集中释放分泌蛋白B．催分泌剂作用后，囊泡会与细胞膜融合C．膜的再循环途径保证了细胞器膜含量的相对稳定D．消化酶分泌到细胞外是依靠细胞膜上的载体的帮助来完成的3．已知Y受体的致效剂S可以显著降低血液中三酸甘油酯的浓度，从而降低心脏病的危险。现用小鼠作为材料来证明“S的作用是专一性地通过Y受体达成”，下列哪个设计方案是正确的（）A．可以通过活化Y受体的基因使小鼠大量表达Y受体B．可以通过剔除Y受体基因使小鼠不表达Y受体C．在小鼠体内注射大量的S从而增强Y受体的作用D．在小鼠体内注射针对S的抗体从而把血液中的S清除4．研究发现，鹰对不同种群数量的鸽群发起攻击的成功率是不同的（见下图），下列说法正确的是（）A．此图说明捕食者数量会随着被捕食者数量的增加而增加B．二者为捕食关系，如果鹰的数量下降，鸽的种群数量将持续上升C．此图说明鹰的捕食量与鸽的种群数量是一种负相关的关系D．鹰的攻击成功率降低可能是由于鸽群的种内互助及时发现天敌所致5．下列有关“用高倍镜观察线粒体和叶绿体”实验的叙述，正确的是（）A．可用菠菜叶稍带些叶肉的下表皮观察叶绿体B．健那绿染液可将活细胞的细胞质染成蓝绿色C．可观察到叶绿体和线粒体都具有双层膜结构D．可以使用同种材料同时观察线粒体和叶绿体6．海带中含有植物生长素（IAA）和脱落酸（ABA）等激素，为研究激素对海带生长的影响，某研究组开展了系列实验，实验结果如图所示。下列叙述正确的是（）A．海带增长率与IAA含量呈负相关B．海带宽度的增长率与ABA含量呈正相关C．两种激素的变化对海带长度的影响大于对宽度的影响D．海带在后期生长缓慢，原因是IAA降低而ABA增高二、综合题：本大题共4小题7．（9分）研究小组探究不同浓度的IAA、乙烯利及二者的混合溶液对大豆下胚轴不定根形成的影响，结果如下。组别A组B组C组A0A1A2A3B0B1B2B3C0C1C2C3IAA010501000105010001050100乙烯利00001010101050505050不定根平均数量（条）12213228101928357161936请回答：（1）对大豆的下胚轴进行激素处理时常用浸泡法，这种处理方法对激素浓度和处理时间的要求是____________。（2）A组实验中IAA对大豆下胚轴生根的作用____________（表现/未表现）出两重性，判断的理由是__________。（3）本实验表明不同浓度的IAA和乙烯利混合溶液共同作用时乙烯对植物不定根形成过程中有促进和抑制两种相反的调控作用。①支持乙烯对不定根形成有抑制作用的证据是___________；②支持乙烯对不定根形成有促进作用的证据是_____________。（4）进一步研究发现生长素能调控不定根发育的相关基因的表达，说明激素在植物体内起作用的方式是_______________________。8．（10分）已知某种动物灰身（A）对黑身（a）为显性，有眼（B）对无眼（b）为显性。控制有眼、无眼的基因位于常染色体上。为了研究A、a与B、b的位置关系，选取一对表现型为灰身有眼的雄性个体和黑身无眼的雌性个体进行杂交实验，所得F1雌、雄个体中均出现四种表现型：灰身有眼、黑身有眼、灰身无眼、黑身无眼。分析回答问题。（1）如果F1中四种表现型的比例为1：1：1：1，则基因A、a和B、b的遗传符合________定律；且控制灰身、黑身的基因位于______（填常或x”）染色体上，依据是________________________。若要证明上述推测，可选取F1中______________交配，统计子代雌雄个体的表现型及比例。若只考虑题干中的两对等位基因，预测其子代所有灰身个体中纯合子所占的比例为_____________________________。（2）如果F1的四种表现型中，亲本类型偏多，重组类型偏少，则F1同时出现上述四种表现型的原因最可能是________________________________________。9．（10分）下图1为某地区苹果种植户发展生态果园模式图，图2是该生态系统内能量流动的示意图。据图回答下列问题：（1）该生态果园中的所有生物构成______________，食用菌属于生态系统成分中的______________，图1中属于第二营养级的有______________。（2）果园中花天牛以果树的花和叶为食，肿腿蜂可以将卵产在花天牛幼虫的体表，吸取幼虫的营养，肿腿蜂和花天牛的种间关系是______________。（3）从物质循环角度分析，碳元素在该生物群落内部以______________形式传递。（4）图2中的A代表______________，能量从生产者传递到植食动物的效率为______________。（5）与森林生态系统相比较，农业生态系统的抵抗力稳定性较低，主要原因是______________。10．（10分）新型冠状病毒（2019-nCoV）肺炎疫情，对我国民生健康和经济造成极大影响。新型冠状病毒相关的实验室检测技术，对新型冠状病毒的诊断与防控尤为重要。新型冠状病毒的检测最常见方法的是荧光定量RT-PCR（逆转录聚合酶链式反应），RT-PCR的具体过程如图。回答下列向题：（1）过程Ⅰ和Ⅱ都需要加入缓冲液、原料、酶和引物等，其中加入的酶分别是_______________，________________。（2）RT-PCR过程通过对_____________的控制影响确的活性和DNA分子结构，从而使得整个反应过程有序地进行。（3）过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上需要_______个引物B。（4）新型冠状病毒的检测方法还可采用病毒抗原检测、病毒抗体检测，这些检测方法的原理是_____________。检测到新冠病毒感染者抗体滞后于病毒核酸和抗原的理由是____________________________________，因此__________检测对传染性极高的新型冠状病毒（2019-nCoV）疑似患者早期确诊意义不大。11．（15分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、C【解析】

根据相邻两个营养级之间能量的传递效率为3%～24%以及表格中的数据，可写出相应的食物网：。【详解】A、表中生产者固定的太阳能总量，表示流经该生态系统的总能量，A错误；B、根据生物富集的特点，有害物质在食物链中随着营养级别的升高含量逐渐升高，若土壤中含有一定浓度的重金属铬，则甲生物比乙生物体内污染物浓度铬含量高，B错误；C、该生态系统中第二营养级同化总量是2.8+3.1=21.1，第三营养级同化总量是1.56，故第二营养级与第三营养级之间的能量传递效率为1.56÷21.1×34%=6．4%，C正确；D、该生态系统内实现了物质循环，碳元素在各种群间循环的主要存在形式是含碳有机物，D错误。故选C。2、D【解析】

分析题图：图示表示细胞中某种消化酶的“浓缩”和运输过程，首先由内质网进行粗步加工，其次由高尔基体进行再加工和分泌，最后由细胞膜胞吐出细胞。【详解】A、由图可知，“浓缩"过程有利于集中释放分泌蛋白，A正确；B、根据题干信息“储存在真核细胞囊泡中的某些分泌蛋白只有在受到特定信号（催分泌剂）刺激时才被分泌到细胞外”可推知催分泌剂作用后，分泌小泡会与细胞膜融合，B正确；C、膜的再循环途径保证了细胞器膜的含量相对稳定，C正确；D、消化酶分泌到细胞外的方式是胞吐，不需要载体协助，D错误。故选D。3、B【解析】

题意分析：为了证明“专一性”，应该彻底敲除Y受体基因，达到有和无的对照。【详解】A、活化Y受体的基因来使小鼠大量表达Y受体，增加了Y受体的含量，只是多少的对照不是有无的对照，A错误；B、可以通过敲除Y受体基因来使小鼠不表达Y受体，起到了有和无的对照，B正确；C、Y受体的作用是有一定限度的，注射大量的致效剂S只是多少的对照不是有无的对照，C错误；D、向老鼠体内注射针对S的抗体从而把血液中的S移除，不能确定S的专一性，D错误。故选B。4、D【解析】

据图分析：（1）当鸽的种群数量为2～10只时，鹰攻击的成功率为大约75%；（2）当鸽的种群数量为11～50只时，鹰攻击的成功率为大约40%；（3）当鸽的种群数量为750只时，鹰攻击的成功率为大约15%。柱状图表明随着鸽的种群数量增加，鹰的攻击成功率下降，说明种内互助有利于种群的繁衍。【详解】A、此图说明鸽的捕食者鹰的数量会随着被捕食者鸽的增加而减少，A错误；B、鹰和鸽的种间关系是捕食，如果鹰的数量下降，鸽的种群数量先增加后减少，之后会趋于相对稳定，B错误；C、鸽的种群数量增加，鹰的攻击成功率下降，说明鹰的攻击成功率与鸽的种群数量是一种负相关的关系，C错误；D、柱状图表明随着鸽的种群数量增加，鹰的攻击成功率下降，说明鸽群内部存在种内互助，便于及时发现天敌，D正确。故选D。本题考查种间关系和种内关系、食物链的组成、特别考查柱状图的解读，要根据图形的信息提取图形的含义，分析捕食和种内互助对种群数量变化的影响。5、A【解析】

健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色。叶肉细胞中的叶绿体，散布于细胞质中，呈绿色、扁平的椭球形。可以在高倍显微镜下观察它的形态和分布。【详解】A、菠菜叶稍带些叶肉的下表皮部位叶绿体大而稀疏，适合作为实验对象观察，A正确；B、健那绿染液可将活细胞的线粒体染成蓝绿色，B错误；C、叶绿体和线粒体都具有双层膜结构属于亚显微结构，在光学显微镜下观察不到，C错误；D、叶肉细胞可用于观察叶绿体而不能用于观察线粒体，因为叶绿体的绿色会掩盖健那绿的染色效果，影响实验观察，D错误。故选A。本题考查观察线粒体和叶绿体实验，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验选择的材料是否合理、实验采用的试剂及试剂的作用、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。6、D【解析】

植物激素亦称植物天然激素或植物内源激素，是指植物体内产生的一些微量而能调节（促进、抑制）自身生理过程的有机化合物。已知植物体内产生的激素有五大类，即生长素、赤霉素、细胞分裂素、脱落酸、乙烯。它们都是些简单的小分子有机化合物，但它们的生理效应却非常复杂、多样。从影响细胞的分裂、伸长、分化到影响植物发芽、生根、开花、结实、性别决定、休眠和脱落等。所以，植物激素对植物的生长发育有重要的调控作用。生长素、赤霉素、细胞分裂素能促进植物生长和发育过程，而脱落酸和乙烯的作用则是抑制植物生长，促进成熟和衰老。【详解】A、从图中可知，生长素含量越高，海带月增长率大，说明海带增长率与IAA含量呈正相关，A错误；B、从图中可知，生长素含量越高，海带宽度的增长率越小，说明海带增长率与ABA含量呈负相关，B错误；C、从增长率的幅度来看，两种激素的变化对海带长度的影响小于对宽度的影响，C错误；D、IAA促进生长，ABA抑制生长，结合图可知，海带在后期生长缓慢，原因是IAA降低而ABA增高，D正确。故选D。二、综合题：本大题共4小题7、配制较低浓度的激素溶液，处理时间需几小时至一天未表现A1、A2、A3组的不定根均数量大于A0组，说明实验组的IAA对大豆下胚轴的生根都有促进作用，没有体现抑制作用B1、C1组的不定根平均数量小于A1组（或：B2、C2组的不定根平均数量小于A2组或：当IAA浓度为10或50时，随着乙烯利浓度的增加，不定根平均数量减少）B3、C3组的不定根平均数量大于A3组（或：当IAA浓度为100时，随着乙烯利浓度的增加，不定根平均数增加）为信息分子，调节植物的生长发育（或：给细胞传达一种调节代谢的信息）【解析】

激素调节与植物生命活动的关系：激素调节在植物的生长发育和对环境的适应过程中发挥着重要作用，但是，激素调节只是植物生命活动调节的一部分。植物的生长发育过程，在根本上是基因组在一定时间和空间上程序性表达的结果。光照、温度等环境因子的变化，会引起植物体内产生包括植物激素合成在内的多种变化，进而对基因组的表达进行调节。【详解】（1）用激素处理大豆下胚轴可以用沾蘸法或浸泡法，前者通常使用高浓度的激素处理很短的时间，如3~5s；后者需要的激素浓度低，通常是处理几小时至一天，本实验中用浸泡法处理，具体做法是配制较低浓度的激素溶液，对大豆的下胚轴处理几小时至一天。（2）A组实验中A1、A2、A3组的不定根数量均大于A0组，说明实验组的IAA对大豆下胚轴的生根都有促进作用，没有体现抑制作用，故此可知实验中IAA对大豆下胚轴生根的作用未表现出两重性。（3）①实验中B1、C1组的不定根平均数量小于A1组（或：B2、C2组的不定根平均数量小于A2组或：当IAA浓度为10或50时，随着乙烯利浓度的增加，不定根平均数量减少），由此实验结果可得出乙烯对不定根形成有抑制作用的结论；②根据实验结果中B3、C3组的不定根半均数量大于A3组，可以得出乙烯对不定根形成有促进作用的的结论。（4）进一步研究发现生长素能调控不定根发育的相关基因的表达，据此可知激素作为信息分子，传递了一种调节植物的生长发育的信息。运用单一变量原则对题目中的实验结果进行合理的分析、比较是正确解题的关键！8、自由组合常黑身雌性个体与灰身雄性个体杂交，F1未出现交叉遗传现象灰身有眼雌雄个体1/6两对等位基因位于一对常染色体上，灰身有眼个体减数分裂时，同源染色体的非姐妹染色单体之间发生交叉互换【解析】

基因的自由组合定律是指控制不同性状的遗传因子的分离和组合是互不干扰的，在形成配子时，决定同一性状的成对的遗传因子彼此分离，决定不同性状的遗传因子自由组合。该题主要考察了基因的自由组合定律、伴性遗传和连锁定律的遗传特点。【详解】（1）实验中选取一对表现型为灰身有眼的雄性个体和黑身无眼的雌性个体进行杂交实验，所得F1雌、雄个体中均出现四种表现型：灰身有眼、黑身有眼、灰身无眼、黑身无眼，且四种表现型的比例为1:1:1:1，符合两对基因自由组合定律中的测交实验的比例，因此说明基因A、a和B、b位于两对同源染色体上，遵循基因的自由组合定律；雌雄个体中表现型的比例相等，没有表现出性别上的差异，更没有表现出交叉遗传的特点，因此位于常染色体上；若要验证其位于常染色体且遵循自由组合定律，可选择让杂合子自交来进行验证，子代中的灰身有眼的雌雄个体基因型为AaBb，观察其杂交后代的比例是否为9:3:3:1即可；AaBb个体自由交配，子代中灰身个体的基因型为A_B_和A_bb，因此纯合子占其中的比例为（1+1）/（9+3）=1/6；（2）灰身有眼的雄性个体和黑身无眼的个体杂交，所得的四种表现型中亲本类型偏多，重组类型偏少，证明其并不遵循自由组合定律，两对基因应该位于同一对同源染色体上，之所以出现四种表现型，应该是灰身有眼个体减数分裂时，同源染色体的非姐妹染色单体之间发生交叉互换产生了少量的重组配子。该题的难点在于自由组合定律的判定，识记各杂交、自交和测交实验的比例是本题的突破点，需要学生从灰身有眼个体与黑身无眼个体的杂交后代分离比，联想到测交分离比，以此为突破分析两对基因的位置关系。9、群落分解者害虫、鸡、鸭寄生（含碳）有机物呼吸作用散失的热能1．7%物种数量较少，营养结构简单，自我调节能力差【解析】

生态系统的结构包括两方面的内容：生态系统的成分，食物链和食物网。生态系统的成分包含生物成分（生产者、消费者、分解者）和非生物成分（气候、能源、无机物、有机物）。生态系统各生物之间通过一系列的取食与被取食关系，不断传递着生产者所固定的能量，这种单方向的营养关系，叫做食物链。在一个生态系统中，许多食物链彼此相互交错，连接的复杂营养关系叫做食物网，食物网越复杂，生态系统抵抗外界干扰的能力就越强。【详解】（1）群落是指在一定空间内所有生物种群的集合体，该生态果园中的所有生物构成群落。食用菌属于真菌，属于生态系统成分中的分解者。图1中果树、杂草属于第一营养级，属于第二营养级的有害虫、鸡、鸭。（2）肿腿蜂可以将卵产在天牛幼虫的体表，吸取幼虫的营养，则可推知肿腿蜂和花天牛的种间关系是寄生关系。（3）从物质循环角度分析，碳元素在该生物群落内部以有机物形式（取食和被取食）传递。（4）各营养级（顶级除外）的能量有4个去向：①该生物呼吸作用散失；②流入下一营养级；③流入分解者；④暂未被利用。图2中的A代表呼吸作用散失的热能。植食动物流向肉食动物的能量为：5.1+2.1+0.25+0.05-5=2.5，生产者流向植食动物的能量为：2.5+0.5+9+4-2=14，生产者的同化量为：14+3+70+23=110，能量从生产者传递到植食动物的效率,14÷110=1.7%。（5）与森林生态系统相比较，农业生态系统物种数量较少，营养结构简单，自我调节能力差，因此抵抗力稳定性较低。熟悉生态系统的结构、功能、能量流动的计算是解答本题的关键。10、逆（反）转录酶热稳定性高的DNA聚合酶（Taq酶）温度（或温度、pH）2n-1抗原和抗体发生特异性结合病毒进入人体后，刺激人体免疫系统产生相应的抗体需要一段时间病毒抗体【解析】

1、分析图示，过程I是由mRNA形成cDNA的过程，表示逆转录。过程Ⅱ先使mRNA-cDNA杂合双链解开，再以单链的DNA合成双链的DNA，最后利用RCR技术进行DNA复制。2、PCR技术的原理是模拟生物体内DNA分子复制的过程，利用DNA分子热变形原理，通过控制温度控制控制DNA分子的解聚和结合，DNA分子体内复制过程DNA的解旋是在解旋酶的作用下实现的；PCR扩增DNA片段过程最高经过n次扩增，形成的DNA分子数是2n个，其中只有2条单链不含有引物。【详解】（1）过程I是由mRNA形成cDNA的过程，表示逆转录过程，需要加入逆转录酶，过程Ⅱ是PCR过程，需要加入热稳定性高的DNA聚合酶（Taq酶）。（2）RT-PCR过程通过对温度的控制影响确的活性和DNA分子结构，从而使得整个反应过程有序地进行。（3）过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，根据DNA分子半保留复制特点可知，该过程理论上至少需要2n-1个引物B。（4）新型冠状病毒的检测方法还可采用病毒抗原-抗体检测，其原理是抗原和抗体发生特异性结合。病毒进入人体后，刺激人体免疫系统产生相应的抗体需要一段时间，故检测到新冠病毒感染者抗体滞后于病毒核酸和抗原，因此病毒抗体检测对传染性极高的新型冠状病毒疑似患者早期确诊意义不大。本题考查了基因工程和PCR技术及其应用过程，对于RNA的逆转录、DNA分子复制、多聚酶链式反应扩增DNA片的理解把握知识点间的内在联系及碱基互补配对原则的应用是解题的关键。11、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农