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文档简介
PAGE6-土壤中分解尿素的细菌的分别与计数[基础对点]学问点一筛选微生物的探讨思路1.土壤中的细菌能分解尿素,是因为它们能合成()A.尿素酶 B.脲酶C.蛋白酶 D.肽酶答案B解析能够分解利用尿素的细菌,其细胞内含有脲酶,可以把尿素分解成氨,然后进一步利用,B正确。2.分别土壤中分解尿素的细菌时,对培育基的要求是()①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐A.①③⑤⑦ B.②④⑥⑧C.①③⑤⑧ D.①④⑥⑦答案C解析土壤中分解尿素的细菌能够合成脲酶,将尿素分解生成氨,利用尿素中的氮合成自身有机物,①符合要求;培育基中尿素作为唯一氮源,分解尿素的细菌能生长,其他微生物不能生长,⑧符合要求;分别微生物要用固体培育基,须要加琼脂,③符合要求;土壤中分解尿素的细菌属于异养微生物,须要加葡萄糖作为碳源,⑤符合要求。3.选择培育基可以从混杂的微生物群体中分别出所需的微生物,通过不含有机物的培育基、缺氮培育基、含尿素(不含其他氮源)的培育基,可从土壤中分别出的微生物依次是()A.硝化细菌、放线菌、根瘤菌B.根瘤菌、青霉菌、固氮菌C.异养型细菌、放线菌、硝化细菌D.自养型细菌、固氮菌、分解尿素的细菌答案D解析选择培育基可以依据不同微生物的代谢特点,通过变更培育基的成分,以达到选择某种微生物的目的。不含有机物的培育基可以分别出自养型微生物;缺少氮元素的培育基可以培育固氮微生物;含尿素(不含其他氮源)的培育基可以分别出能分解尿素的微生物,D正确。4.用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目,其结果与实际值相比最可能是()A.比实际值高B.比实际值低C.和实际值一样D.比实际值可能高也可能低答案B解析在涂布时,有可能两个或两个以上的细胞连在一起,使平板上视察到的只是一个菌落。学问点二试验设计及操作5.关于土壤中细菌的分别,下列正确的操作步骤是()①土壤取样②称取10g土壤,加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中③吸取0.1mL进行平板涂布④依次稀释至103、104、105、106、107倍A.①→②→③→④ B.①→③→②→④C.①→②→④→③ D.①→④→②→③答案C解析在分别土壤中某种细菌时,应先选取土样(10g),然后加入到盛有无菌水的锥形瓶中获得土壤浸出液,并进行不同倍数稀释,最终将稀释液涂布到培育基表面进行培育,并分别和计数,C正确。6.下列操作须要在火焰旁进行的是()①土壤取样②称取土壤③稀释土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培育A.①②③④⑤ B.②③④⑤C.③④⑤ D.②③④答案D解析试验操作过程要进行严格的无菌操作,除试验空间必需消毒外,每个操作步骤都必需在无菌区进行。土壤的称取、土壤溶液的稀释、涂布平板都须要在酒精灯火焰旁的无菌区完成,以防止杂菌污染,D正确。7.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是()A.以尿素为唯一氮源的培育基中加入酚红指示剂B.以尿素为唯一氮源的培育基中加入二苯胺试剂C.以尿素为唯一氮源的培育基中加入苏丹Ⅲ试剂D.以尿素为唯一氮源的培育基中加入双缩脲试剂答案A解析细菌将尿素分解后,培育基中pH上升,使酚红指示剂变红,A正确。8.用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目,为了提高试验结果的可信度,往往要设置比照试验,对于比照组的要求不包括()A.比照组培育基也严格灭菌,且不接种任何微生物B.倒平板时,培育基的用量与试验组必需完全相同C.所用培育基成分及pH大小与试验组保持一样D.比照组和试验组均放在相同且相宜的条件下培育答案B解析比照组培育基也要严格灭菌,且不接种任何微生物,为空白比照,A正确;比照组培育基用量的大小与试验组基本相同即可,不肯定肯定相同,B错误;比照组所用培育基的成分及pH应与试验组完全一样,C正确;比照组和试验组的培育基都要置于相同条件下培育,以保证单一变量,D正确。9.下列关于微生物培育的叙述,错误的是()A.因为土壤中各类微生物的数量不同,所以,为获得不同类型的微生物一般要按不同的稀释倍数进行分别B.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围不同C.利用稀释涂布平板法只能分别微生物不能对微生物进行计数D.接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落答案C解析土壤中各种微生物数量不同,大约70%~90%为细菌,放线菌和真菌较少,故不同类型微生物,一般要按不同稀释倍数进行分别,A正确;由A可知,测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,须要选用的稀释范围不同,B正确;稀释涂布平板法能用于微生物的计数,C错误;接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落,D正确。[实力提升]10.关于土壤中分解尿素的细菌的分别与计数试验的叙述正确的是()A.培育基应以尿素为唯一氮源,该细菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的B.选择菌落数在30~300间的全部平板进行计数,以平均数为试验结果C.对10mL土样稀释106倍后,取0.1mL该溶液进行重复的涂布试验,测得的菌落数分别为18、234、276,则该10mL土样中分解尿素的细菌数为2.55×108个D.应当设置比照以解除非测试因素对试验结果的干扰,提高可信度答案D解析土壤中分解尿素的细菌为异养菌,硝化细菌是自养菌,二者利用的碳源不同,A错误;选择菌落数在30~300间的平板进行计数,舍去数据相差较大的数据,以平均数为试验结果,B错误;对10mL土样稀释106倍后,取0.1mL该溶液进行重复的涂布试验,测得的菌落数分别为18、234、276,应选择菌落数在30~300间的平板进行计数,则应舍弃菌落数为18的平板,那么该10mL土样中分解尿素的细菌数为(234+276)/2÷0.1×10×106=2.55×1010(个),C错误;分别微生物时,须要设置不接种的培育基与试验组一起培育做空白比照,设置比照的目的是解除试验组中非测试因素对试验结果的干扰,D正确。11.甲、乙、丙是三种微生物,表中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培育微生物的三种培育基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖;甲能在Ⅰ中正常生长繁殖,而乙和丙都不能;乙能在Ⅱ中正常生长繁殖,甲、丙都不能。下列说法正确的是()ⅠⅡⅢ粉状硫10g+++K2HPO44g+++FeSO40.5g+++蔗糖10g+-+(NH4)2SO40.4g-++H2O100mL+++MgSO49.25g+++CaCl20.5g+++注:“+”表示培育基中加入了这种物质,“-”表示培育基中没有加入这种物质。A.甲、乙、丙都是异养型微生物B.甲、乙都是自养型微生物,丙是异养型微生物C.甲是异养型微生物,乙是固氮微生物,丙是自养型微生物D.甲是固氮微生物,乙是自养型微生物,丙是异养型微生物答案D解析Ⅰ培育基缺少氮源,Ⅱ培育基缺少碳源,Ⅲ培育基养分全面。甲能在Ⅰ上生长繁殖,而乙、丙都不能,说明甲是能够固氮的微生物;乙能在Ⅱ中生长繁殖,甲、丙不能,说明乙不须要培育基为它的正常生命活动供应碳源物质,乙肯定为自养型微生物;丙只能在Ⅲ上生长繁殖,为异养型微生物。12.土壤是“微生物的自然培育基”,下面是有关土壤中分解尿素的细菌分别和计数的试验过程,请据图回答相关问题:(1)能分解尿素的细菌代谢类型为________,为获得该种细菌,应从富含有机质的土壤表层取土样。(2)为分别出土壤中分解尿素的细菌,应当用________________的培育基进行分别,并加入________指示剂进行鉴别。(3)因土壤中细菌密度很大,须要不断加以稀释,配制成如图所示的不同浓度的土壤溶液。取样稀释前,肯定要________以削减误差。将103~107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培育基上,用________将菌液铺平,这种接种方法称为________________。(4)将接种的培育皿放置在37℃恒温培育箱中培育24~48h,视察并统计具有________(现象)的菌落数,结果如下表,其中________倍的稀释比较合适。稀释倍数103104105106107菌落数(个)5003672483618答案(1)异养型(2)以尿素为唯一氮源'酚红(3)摇匀'涂布器'稀释涂布平板法(4)红色环带'105和106解析(1)能分解尿素的细菌可将尿素分解成氨,代谢类型为异养型。(2)分别土壤中分解尿素的细菌,应当用以尿素为唯一氮源的培育基进行分别,分解尿素的细菌在分解尿素时产生氨,使酚红指示剂显红色,所以要加入酚红指示剂进行鉴别。(3)取样稀释前,肯定要将菌液摇匀以削减误差;将103~107倍的稀释液分别吸取0.1mL加入到固体培育基上,用稀释涂布平板法进行接种,须要将菌液用涂布器涂布到固体培育基上。(4)将接种的培育皿放置在37℃恒温培育箱中培育24~48h,具有红色环带的菌落即是分解尿素的细菌的菌落。估算样品中的活菌数时,往往选取菌落数在30到300之间的平板,分析表格数据可知,105和106的稀释度下菌落数在这一范围。13.在调查某湖水中H细菌指数(1升水中含有的H细菌个数)的试验中,先将5升湖水水样浓缩至5毫升,然后各取浓缩水样1毫升,涂布到4个培育皿中培育,培育后统计的菌落数分别是42、38、55、18。请回答:(1)培育基中的蛋白胨和淀粉分别为细菌生长供应了____________________、________。(2)为了尽快视察到细菌培育的试验结果,应将接种了湖水水样的平板置于____________中培育,培育的温度设定在37℃。要使该试验所得结果牢靠,还应当同时在另一平板上接种____________作为比照。(3)细菌培育产生的单个菌落在生态学中称为__________。依据上述结果计算,被检样的H细菌指数为________。用这种方法测定密度,实际活菌数目要比测得的数目________,缘由是__________________________。(4)为了纯化获得的H细菌,在微生物的试验室培育过程中,关键是________,而试验结束后,运用过的培育基应当进行________处理后才能倒掉。答案(1)氮源、碳源和维生素碳源(2)恒温培育箱等量无菌水(3)种群45多当两个或多个细胞连在一起时在平板上视察到的是一个菌落(4)防止杂菌污染灭菌解析(1)蛋白胨通常为微生物供应氮源、碳源和维生素,淀粉通常作为碳源。(2)恒温培育箱能够保证细菌生长最适温度,故细菌数量增长较快。在另一平板上接种等量无菌水作为比照,推断平板上是否灭菌彻底。(3)细菌培育产生的单个肉眼可见的子细胞群体称为菌落,生态系统中称为种群。计算时应去掉18这个偏差较大组,其他3组(42、38、55)取平均值为45。用稀释涂布平板法进行微生物计数时,由于两个或多个细胞连在一起时在平板上视察到的是一个菌落,所以实际活菌数目要比测得的数目多。(4)为了纯化获得的H细菌,在微生物的试验室培育过程中,关键是防止杂菌污染;试验结束,为避开微生物污染环境和感染操作者,运用过的培育基应当进行灭菌后才能倒掉。14.临床运用抗生素前,有时须要做细菌耐药试验。试验时,首先要从病人身上获得少量样本,然后依据肯定的试验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题:(1)为了从样本中获得致病菌单菌落,可用________法或______________法将样本接种于固体培育基表面,经过选择培育、鉴别等步骤获得。(2)取该单菌落适当稀释,用______________法接种于固体培育基表面,在37℃培育箱中培育24h,使其匀称生长,布满平板。(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片匀称置于该平板上的不同位置,培育一段时间后,含A的滤纸片四周出现透亮圈,说明该致病菌对抗生素A________;含B的滤纸片四周没有出现透亮圈,说明该致病菌对抗生素B______;含C的滤纸片四周的透亮圈比含A的小,说明__________________________;含D的滤纸片四周的透亮圈也比含A的小,且透亮圈中出现了一个菌落,在解除杂菌污染的状况下,此菌落很可能是抗生素D的________。(4)依据上述试验结果,为达到抗菌目的,最好应选用抗生素________。答案(1)平板划线稀释涂布平板(2)稀释涂布平板(3)敏感不敏感该致病菌对C的敏感性比对A的弱耐药菌(4)A解析(1)将细菌接种到固体培育基上的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。(2)为了使该致病菌匀称布满平板,须要将
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