动物细胞融合与单克隆抗体

细胞工程

第2节动物细胞工程第2课时动物细胞融合与单克隆抗体12预习提纲一、动物细胞融合1．概念：指①____或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，又叫②____。2．过程：含有不同③____的两个细胞→④____细胞。3．意义：克服了⑤____杂交不亲和的障碍。①两个②细胞杂交③遗传信息④杂交⑤远缘3二、单克隆抗体1．浆细胞特点：一个浆细胞分泌⑥____种特异性抗体；体外培养条件下，浆细胞⑦____无限增殖。2．制备3．应用：最广泛的用途是用作⑩；用于⑪

；制成“生物导弹”，定向运载药物。一不能体外诊断试剂治疗疾病杂交瘤细胞能分泌所需抗体的杂交瘤细胞——————⑧⑨4自主检测1．诱导动物体细胞融合的方法中，一般不用于植物的是(

)A．电刺激B．离心C．聚乙二醇D．病毒2．植物体细胞与动物体细胞融合的过程中，不同之处在于(

)A．前者利用膜的结构特点，后者不是B．后者利用膜的结构特点，前者不是C．两者都利用膜的结构特点，但前者需要先去掉细胞壁D．以上都不对DC53．要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的浆细胞进行无性繁殖，形成细胞群，其原因是(

)A．在体外培养条件下浆细胞可以无限增殖B．在动物体内浆细胞可产生多达百万种以上的抗体C．每一个浆细胞都参与特异性免疫反应D．每一个浆细胞只分泌一种特异性抗体D64．单克隆抗体是指(

)A．单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体B．单个B细胞增殖产生的抗体C．单个杂交瘤细胞增殖产生的高度单一的抗体D．单个抗体通过克隆化，产生大量抗体5．下列哪项是人类研究单克隆抗体的目的(

)①诊断疾病②为烧伤病人进行的自身皮肤细胞的移植③研制生物导弹，治疗癌症④基因诊断A．①③

B．②④

C．①④

D．③④CA76．“生物导弹”是指(

)A．单克隆抗体B．杂交瘤细胞C．产生特定抗体的B淋巴细胞D．在单克隆抗体上连接上抗癌药物D8大家学习辛苦了，还是要坚持继续保持安静910动物细胞融合1．概念：是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，又称细胞杂交。2．原理：细胞膜的流动性。3．诱导方法：物理法——离心、振动、电激；化学法——聚乙二醇；生物方法——灭活的病毒。4．动物细胞融合的过程(如下图所示)115．优点：动物细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。6．植物、动物细胞融合的比较127.已成功的动物细胞融合实例13

动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是(

)A．诱导融合的方法完全相同B．所用的技术手段完全相同C．所采用的原理完全相同D．都能形成杂种细胞14解析：首先两种细胞工程技术中都要进行细胞融合，且融合的技术基本相同；第二，诱导的方法，除动物细胞的融合常用灭活的病毒做诱导剂外，其他的二者基本相同；第三，二者采用的原理不完全相同，动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，最终形成的是杂种细胞，植物体细胞杂交除细胞膜的流动性外，还有细胞的全能性，最终杂种细胞形成的是杂种植株。答案：D15变式迁移1．以下四种细胞工程技术中，培育出的新个体(或细胞)同时具有两个亲本遗传特性的是(

)①植物组织培养②植物体细胞杂交③动物细胞融合④核移植A．①②③B．①②④C．②③④D．①③④解析：考查几种细胞工程。①是通过细胞脱分化、再分化和有丝分裂形成新个体的过程，只具有一个亲本遗传特性。②③④不同程度地都具有双亲遗传特性。答案：C16点评：动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较17单克隆抗体1．概念：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。2．特点：化学性质单一，特异性强，灵敏度高，可大量制备。3．制备过程(如下图所示)18在制备单克隆抗体时，需经两次筛选，但目的不同。(1)第一次筛选是在B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合之后，因为有三种融合情况：B淋巴细胞与B淋巴细胞融合、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合、B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，而只是B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合细胞才是需要的杂种细胞。(2)第二次筛选需先在多孔培养皿上培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。由于该细胞群是由单个杂交瘤细胞克隆来的，所以产生的抗体一定是化学性质单一、特异性强的单克隆抗体。194．应用(1)诊断疾病：诊断病毒引起的疾病和用癌细胞抗原制备的单克隆抗体定位诊断。(2)用于治疗疾病和运载药物：运用药物与单克隆抗体连接在一起制成“生物导弹”。(3)分离和纯化抗原分子。20

下列关于单克隆抗体制备过程的叙述，正确的是(

)A．制备过程中不需要动物细胞培养技术B．杂交瘤细胞具有浆细胞与癌细胞的所有特点C．经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产D．单克隆抗体制备过程中的细胞两两融合得到三种融合细胞21解析：单克隆抗体的制备是将骨髓瘤细胞与效应B细胞(浆细胞)结合，得到杂交瘤细胞经过选择培养基的筛选并经单一抗体检测后，培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞即可得单克隆抗体。杂交瘤细胞能无限繁殖但不具有癌细胞的转移能力。经过免疫的效应B细胞和骨髓瘤细胞杂交获得三种细胞：效应B细胞与效应B细胞融合形成的融合细胞、效应B细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合形成的融合细胞。答案：D222．用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是(

)A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D．筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体变式迁移23解析：酶具有专一性，纤维素酶只能分解纤维素，用纤维素酶处理植物细胞是植物细胞工程中用来除去细胞壁获得原生质体的方法，与动物细胞工程无关。B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞无纤维素。答案：B点评：(1)教材中提及的B淋巴细胞实际上是经过免疫的B淋巴细胞，即浆细胞。(2)两次筛选的手段与目的均不相同。(3)诱导融合处理后，培养液中至少有5种细胞。(4)注意已涉及的病毒的用途：疫苗、载体、促融等。2425基础巩固1.关于动物细胞融合的说法，不正确的是()

A.动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程B.动物细胞融合后形成的具有两个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞C．常用的诱导动物细胞融合的方法有：聚乙二醇、灭活的病毒、电激、紫外线照射等D．细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能C262．下图是单克隆抗体制备过程示意图，图中A过程中从小鼠的脾脏中取得的细胞和从小鼠体内提取该细胞之前应给小鼠体内注射的物质分别是(

)A．效应T淋巴细胞，抗体B．效应T淋巴细胞，抗原C．效应B淋巴细胞，抗体D．效应B淋巴细胞，抗原27解析：抗体主要是在特定抗原的刺激下B淋巴细胞转化为效应B细胞而产生的，单克隆抗体也应当如此。答案：D283.研究单克隆抗体治疗癌症的思路是（）A.利用单一抗体特异性地对抗癌细胞B.以抗癌抗体作抗癌药物杀死癌细胞C.抗癌药物在克隆细胞中大量合成D.抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合29解析：本题考查单克隆抗体的制备技术在日常生活中的应用。因为抗原能够特异性与相应的抗体结合，因此如果将对抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合，制成“生物导弹”注入体内，借助单克隆抗体的导向作用，将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位即可杀死癌细胞。答案：D304.下列哪一项属于克隆（）A.将鸡的某个DNA分子片段整合到小鼠的DNA分子上B.将抗药菌的某个基因引入草履虫的细胞内C.将鼠骨髓癌细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂