2.2.2动物细胞工程第2课时课件-高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

第二节动物细胞工程

动物细胞融合技术与单克隆抗体单克隆抗体1.动物细胞融合技术2.设计单克隆抗体制备的实验方案本节主要解决的困惑单克隆抗体困惑点一：动物细胞融合技术合作探究要求：

1.请对比植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术，尝试比较两者之间的异同点

2.先独立思考，然后小组合作，派代表分享，时间2min。比较项目植物体细胞杂交技术动物细胞融合技术意义杂种植株细胞膜的流动性细胞增殖细胞膜的流动性植物细胞的全能性去除细胞壁使细胞分散物理（离心、振荡、电激）化学（PEG）物理、化学方法（PEG）、灭活的病毒制备单克隆抗体原理融合前处理诱导融合的方法用途原理方法技术过程应用突破远缘杂交不亲和的障碍，打破生殖隔离点拨提升1为什么植物体细胞杂交技术不能用灭活的病毒作诱导剂？灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面病毒表面糖蛋白和细胞膜上的糖蛋白发生作用细胞融合，形成杂交细胞蛋白质、脂质分子重排，细胞膜打开单克隆抗体1、下列关于动物细胞融合的说法,错误的是()A.细胞融合前要用酶解法将组织分散成单个细胞B.细胞融合的原理是细胞膜的流动性C.融合后得到的杂交细胞具有两个或多个亲本细胞的遗传信息D.融合后得到的杂交细胞具有两个细胞核D学以致用1单克隆抗体

2.(2018江苏单科,22,3分)如图为细胞融合的示意图,下列叙述正确的是(不定项) ()A.若a细胞和b细胞是植物细胞,需先去分化再诱导融合B.a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现C.c细胞的形成与a、b细胞膜的流动性都有关D.c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因BC学以致用1单克隆抗体困惑点二：设计制备单克隆抗体的方案合作探究要求：1.阅读以下资料,设计制备治疗新冠的单克隆抗体实验方案，可用简单文字和箭头表示，完成后拍照上传，小组长上传即可。2.请先独立思考，然后小组合作交流，派代表展示成果，时间4min。

资料：人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。

骨髓瘤细胞能无限增殖。单克隆抗体的制备过程123456789101111BB、B瘤、瘤瘤（一筛）：利用选择培养基获得杂交瘤细胞（二筛）：获得能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞腹腔中有易于培养杂交瘤细胞的条件单克隆抗体灭活新冠病毒获得产生抗新冠病毒抗体的B淋巴细胞知识拓展：HAT培养基原理杂交瘤细胞是异源四倍体细胞，遗传性质不稳定，在培养过程中会有染色体丢失现象，直到细胞呈现稳定状态为止。因此在建立杂交瘤细胞系过程中要经常检查抗体效价。1.细胞合成DNA通常有2条途径：第1条途径是利用糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA；第2条途径是通过HGPRT利用核苷酸的前体合成核苷酸，进而合成DNA，HAT培养基是基本培养基添加了次黄嘌呤(H)、甲氨蝶呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)，A可以阻断DNA合成的第1条途径，H和T则是第2条途径中合成核苷酸的原料。HAT培养基可以用于单克隆抗体制备杂交瘤细胞的选择，小鼠骨髓瘤细胞是一类HGPRT代谢缺陷型细胞。说法正确的是(

)

A.小鼠免疫B细胞和骨髓瘤细胞融合后，培养基上会有3种类型的细胞 B.HAT培养基中未融合的骨髓瘤细胞在A的阻遏下因不能合成DNA而死亡 C.HAT培养基中未融合的免疫B细胞仍具有增殖能力而持续进行细胞分裂 D.HAT培养基中选择出的杂交瘤细胞都能无限增殖和产生所需抗体B学以致用22.(2019·江苏卷)如图为杂交瘤细胞制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT-），在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长。下列叙述正确的是（）A.骨髓瘤细胞和免疫B细胞可用仙台病毒诱导融合B.骨髓瘤细胞在HAT筛选培养液中能正常增殖C.免疫B细胞的种类不唯一，所以杂交瘤细胞仍需进一步筛选D.筛选出的杂交瘤细胞体外培养时需添加抗生素防止真菌污染C学以致用2单克隆抗体3.（2021泰安期中）为了解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞染色体丢失的问题，研究者在单克隆抗体的制备过程中增加了一个步骤，如下图所示。除了抗原刺激之外，用EBV（一种病毒颗粒）感染动物B淋巴细胞，并使之成为“染色体核型稳定”的细胞株。这样的细胞株能够在HAT培养基中存活，但对乌本苷（Oua）敏感。下列相关分析不合理的是（）A.杂交瘤细胞染色体丢失可能导致抗体产生能力下降B.杂交瘤细胞还需要经过克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选，才能获得所需细胞C.骨髓瘤细胞应该无法在HAT选择培养基中存活D.杂交瘤细胞具有持续产生抗EBV抗体的能力D学以致用2知识拓展注射到病人体内后，病人体内的免疫系统产生了针对这些抗体的抗体(抗抗体，或称为人抗鼠抗体，humananti-mouseantibody,HAMA),迅速将这些单克隆抗体中和掉了。D1.(2022·山东卷，15)如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是(

)A.双抗可同时与2种抗原结合B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原D.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞学以致用3知识拓展——免疫偶联物（ADC）2.抗体—药物偶联物(ADC)通过将细胞毒素与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，过程如图所示。下列表述正确的是(

)CA.ADC可通过主动运输进入肿瘤细胞B.抗体进入细胞后激活溶酶体酶，导致细胞凋亡C.单克隆抗体携带细胞毒素与肿瘤细胞特异性结合D.肿瘤细胞凋亡是细胞主动死亡的过程，所以不会产生新的蛋白质学以致用4知识拓展——CAR-T技术CAR能够特异性地识别并结合肿瘤细胞表面的特定抗原学以致用5细胞毒性T细胞表面的抗原受体(CAR)与B细胞淋巴瘤(MCL)细胞表面的抗原特异性结合（不定项）CD19是一种抗原，广泛表达于B细胞系时细胞膜上，包括属要的B细胞。CD19与B淋已细胞的增殖、分化、活化以及抗体的产生有关，也是诊浙B细胞系肿瘤的重要统志物。CARI疗法是对B细胞系肿瘤的一种免疫疗法，其操作是从患者血液提取T细胞并对其进行基因改造，使其表面产生能够识别CD19的讓嵌抗原受体(CAR)，将改造后的T细胞大量扩增后输回患者体内可以清除瘟细胞。下列说法正确的是()A.CD19基因突变患者存在严重的体液免疫和细胞免缺陷B.CAR-T疗法可能会使患者出现细胞因子风暴的不良反应C，输回患者体内的CAR-T细胞一般不会引发免疫排斥反应D，肿瘤细胞的CD19表达量减少会导致CAR-T疗法的治疗效果降低学以致用5BCD单克隆抗体制备过程的“123”1次融合

一种诱导细胞融合的新方法－－一种新细胞－－一个新优势－－三个“新”灭活病毒杂交瘤细胞特异性强、灵敏度高、大量制备点拨提升22次筛选3次培养

（B细胞与骨髓瘤细胞）（选杂交瘤细胞、选产生特定抗体的杂交瘤细胞）（骨髓瘤细胞、杂交瘤细胞、产生特定抗体的杂交瘤细胞）单克隆抗体1.诊断试剂抗人绒毛促性腺激素单克隆抗体艾滋病检测试剂乙肝测定试剂与生活的联系如：单克隆抗体+药物=“生物导弹”可用于治疗癌症2.治疗疾病和运载药物单克隆抗体3.目前市售的“早早孕试纸”是通过孕妇妊娠早期尿液检验HCG（人绒毛膜促性腺激素），其原理如下图：(1)若“早早孕试纸”产品质量合格，使用时__________（填“C”或“T”或“C和T”）线一定要显色，若该线显色，则表明待测样品从样品垫顺利到达吸水垫。若使用该试纸检测时结果表明妊娠，则图中_________（填“C”或“T”或“C和T”）线显色，且发生了_________种抗原—抗体杂交。(2)试纸中用到的抗体一般采用单克隆抗体技术制备，如抗鼠IgG抗体的制备过程为：先将_________注入到小鼠体内，从小鼠的_________中获取B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，并筛选出杂交瘤细胞，再进行_________，即可获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。注：胶体金：可与蛋白质牢固结合，大量聚集时肉眼可