2025年浙教版选择性必修3生物下册月考试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年浙教版选择性必修3生物下册月考试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共6题，共12分)1、下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是（）A.其原理是细胞的全能性B.必须在无菌条件下进行C.再分化的过程中需要一定光照D.一般需用培养液进行培养2、下面是四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示一种限制性核酸内切酶的酶切位点。若要得到一个能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组DNA的细胞，应选用的质粒是A.B.C.D.3、下图是科研人员将药物与单克隆抗体连接形成的抗体一药物偶联物（ADC）的示意图；它由抗体；接头和小分子药物三部分组成，能实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。例如用于治疗乳腺癌的Kadcyla是由阿多曲妥珠单抗和药物美坦新偶联的ADC。叙述错误的是（）

A.单克隆抗体从免疫过的B淋巴细胞释放，体现了生物膜的流动性B.Kadcyla兼具有靶向投递和抗肿瘤的作用C.ADC实现精准杀伤肿瘤细胞的基础是抗体与抗原特异性结合D.ADC中接头稳定性偏低会导致其在循环过程中药物分子脱落造成“脱靶毒性”4、有关PCR技术，下列叙述不正确的是（）A.是聚合酶链式反应，是以DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术B.在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似C.PCR反应只需在一定的缓冲溶液中提供DNA模板以及四种脱氧核苷酸D.PCR一般经历三十多次循环，每次循环分为变性、复性、延伸5、新型冠状病毒可通过表面的刺突蛋白（S蛋白）与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合；侵入人体，引起肺炎。单克隆抗体可阻断病毒对细胞的粘附或入侵，故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。图为筛选；制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图。下列相关叙述，不正确的是（）

A.给图中小鼠注射S蛋白，一段时间后从小鼠的脾脏中提取B细胞，与骨髓瘤细胞融合B.经HAT培养筛选出来的杂交瘤细胞在体外扩大培养，便可大量生产出抗S蛋白单克隆抗体C.单克隆抗体可以制成诊断盒，用于疾病的诊断D.与血清抗体相比，该方法制备的单克隆抗体灵敏度更高6、1958年，美国科学家斯图尔德应用植物组织培养技术，将二倍体胡萝卜韧皮部的一些细胞进行离体培养，最终发育成完整的新植株（如图）。关于这一科学事实，下列叙述中错误的是（）

①实验需要无菌和人工控制的条件②培养基中需添加植物激素、无机盐、糖类等物质③取胡萝卜的其他部分（如茎、叶、花）不能培养成小植株④图中培养瓶1和试管2中的成分相同A.①②B.③④C.②③D.①④评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)7、下图1表示的是某DNA分子上的一些限制性内切酶的酶切位点。用XhoI和SalI两种限制酶分别处理该DNA分子；经电泳分离结果如图2。以下叙述正确的是（）

A.所用两种限制性核酸内切酶识别的核苷酸序列可能相同B.限制酶通过作用于磷酸二酯键和氢键得到相应产物C.根据泳道②电泳示意图可知使用的限制性内切酶为XhoID.用两种限制酶同时处理后进行电泳，条带可多于6条8、根据某基因上游和下游的碱基序列；设计合成了用于该基因PCR的两段引物（单链DNA）。引物与该基因变性DNA（单链DNA）结合为双链DNA的过程称为复性。下图是两引物的Tm（引物熔解温度，即50%的引物与其互补序列形成双链DNA分子时的温度）测定结果，以下分析正确的是（）

A.两引物分别与DNA的两条互补单链结合，是子链延伸的起点B.PCR过程中，复性温度应低于引物的Tm值以提高PCR效率C.若两引物的脱氧核苷酸数相同，推测引物2的（G＋C）含量较高D.适当减少引物2的脱氧核苷酸数，可使其Tm值接近引物19、大多数哺乳动物的早期胚胎具有调节发育的功能，去掉早期胚胎的一半，仍可以发育成一个完整的胎儿，调节能力随着发育进程逐渐减弱甚至消失。晚期桑椹胚分割后分离的卵裂球仍具有调整发育的能力，重新致密化使卵裂球重新分布而发育至囊胚。下列说法正确的是（）A.桑椹胚的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能B.桑椹胚不同部位的细胞致密化程度不同C.胚胎分割属于无性繁殖或克隆的范畴D.胚胎发育到原肠胚阶段，可将其取出向受体移植10、下列有关动物细胞培养的叙述正确的是（）A.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织B.将所取的组织先用胃蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞C.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液D.动物细胞培养只能传50代左右，所培养的细胞全部衰老死亡11、下列关于土壤中纤维素分解菌的分离与计数，叙述正确的是（）A.可从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌B.培养基中应含大量的葡萄糖或蔗糖提供生长营养C.培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌D.菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基12、理垃圾的有效方法之一是用微生物对其进行降解，下图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。下列叙述错误的是（）

A.图中培养基应以淀粉为唯一碳源，将菌液接种到培养基应使用平板划线法B.菌落①与②周围透明圈的大小不同原因可能是两个菌群对碘液分解能力不同C.若菌落①与②分属细菌和真菌，则二者结构上最主要区别是有无核膜包被的细胞核D.实验结束后，为防止造成环境污染，使用过的培养基应灭菌处理后再倒掉13、克隆动物常用的核移植方法主要有细胞质内注射法和透明带下注射法两种。前者是用微型注射针将供体细胞的细胞核吸出注入去核卵母细胞质内；后者是直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内，然后促使两个细胞融合。世界首例体细胞克隆北极狼的供体细胞来自哈尔滨极地公园的一只野生北极狼的皮肤样本，卵母细胞来自一只处于发情期的母犬，代孕母体则是一只比格犬。下列叙述错误的是（）A.克隆北极狼的性状由野生北极狼、发情期的母犬和比格犬的基因共同决定B.相比之下，透明带下注射法对供体细胞核和卵母细胞的损伤更小C.供体细胞注入卵母细胞透明带内后，就可自行进入卵母细胞D.细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程中发生了基因重组14、下列关于现代生物技术的叙述正确的是（）A.从酵母菌细胞中提取到人干扰素说明相应的目的基因完成了在受体细胞中的表达B.在植物细胞与组织培养中，花药不能作为组织培养的材料C.在动物细胞培养中，用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞D.多种显微操作和处理技术使体外受精、胚胎移植和胚胎分割成为可能15、2019年，中国科学院神经科学研究所利用CRISPR—Cas9基因编辑技术，用基因敲除的猴的体细胞通过克隆技术培育出5只克隆疾病猴。下列相关叙述错误的是（）A.克隆猴基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰B.受精卵经基因编辑后形成的胚胎都成功发育为克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物D.可以运用该基因编辑技术进行生殖性克隆人的研究评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)16、动物细胞融合的意义：克服了______，成为研究_____、_____、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。17、利用DNA和蛋白质等其它成分在___________中的溶解度不同，选择适当的盐浓度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。18、沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌；被感染了沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染的食品，会使人发生食物中毒。沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死。肉桂精油是从肉桂树中提炼获得的，具有不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发的特性，能抑制沙门氏菌的繁殖。回答下列问题：

（1）培养沙门氏菌时要进行无菌操作，常用的灭菌方法有________（答出两种）。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板________（填“倒置”或“正置”）。单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是________。

（2）从鸡粪便取样，经选择培养后需要经过一系列________才能将样品涂布到鉴别培养基上。对获得的沙门氏菌常采用________的方法长期保存。

（3）根据题干信息，为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中储存、加工食品的方法是________。

（4）根据肉桂精油的化学特性，可采用________法来提取，提取过程中影响精油品质的因素有________。19、细胞产物的工厂化生产。

组织培养技术除了在农业上的应用外，还广泛应用于另一个重要的领域，即______。20、今年年初；爆发了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠状病毒通过其表面的S-蛋白与人细胞膜上的ACE2相互识别，感染人的呼吸道上皮细胞。请分析回答问题：

（1）新型冠状病毒表面的S-蛋白作为_________剌激淋巴细胞，使机体产生_________性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是_________。

（2）感染病毒后，免疫系统对肺细胞强烈攻击引发肺炎，此时可通过适度使用_________对病人进行治疗；使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）科学家采集了感染新型冠状病毒并已康复的甲、乙两人的血液，检测相关抗体的水平，结果如图1。据此分析，应选取_________的B淋巴细胞用以制备单克隆抗体（单抗）。

（4）将制备的多种单抗分别与病毒混合，然后检测病毒对宿主细胞的感染率，结果如图2。据此分析，对病毒抑制效果最好的单抗是__________号。

（5）患者康复后一段时间，若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的__________细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。评卷人得分四、实验题(共4题，共28分)21、某化工厂为了处理排出污水中的一种有害的；难以降解的有机化合物A；其研究团队用化合物A、磷酸盐镁盐和微量元素等配制了培养基，成功地筛选出能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示，请分析回答问题。

（1）在培养基中加入化合物A的目的是______________，这种培养基属于____________培养基。

（2）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量__________的培养液，接入新的培养液中连续培养，使目的菌的数量____________。

（3）若要研究目的菌的生长规律，可挑取单个菌落进行液体培养，再采用______方法进行计数。请你预测目的菌的种群数量会发生怎样的变化。

（4）将目的菌用于环境保护实践时，还有哪些问题需要解决？_______

（5）有人提出，可以通过改造细菌的基因来获得能够降解化合物A的细菌，请分析这种方法是否可行。_______22、丙肝病毒引起的丙型肝炎可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化；部分患者可能发展为肝硬化甚至肝癌。为研制丙肝病毒的单克隆抗体，某研究者以小鼠为实验材料设计了以下实验流程。回答下列问题：

(1)为使单细胞悬液中的B淋巴细胞产生的抗体中一定含有能与丙肝病毒结合的抗体，需要进行的操作是______。融合之前的两种细胞中，能通过动物细胞培养大量增加数量的是____

(2)诱导细跑融合时利用的病毒表面含有的糖蛋白和一些酶，能够与细胞膜上的______（填化学本质）发生作用，使得细胞互相凝聚，细胞膜上的______重新排布，细胞发生融合。筛选1利用______进行筛选，而筛选2通过多次的_______来完成。

(3)得到大量丙肝病毒单克隆抗体的方法之一是将杂交瘤细胞在体外培养液中进行培养，接入培养液中杂交瘤细胞的量是单克隆抗体产量的重要影响因素之一，为探究一定培养液中接种杂交瘤细胞的最佳数量，实验思路为_______。23、玉米是重要的粮食作物；其叶片细胞中的P蛋白是一种水通道蛋白，由P基因编码，在植物生长发育过程中对水分的吸收具有重要的调节功能。科研人员成功培育出超量表达P蛋白转基因玉米，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图所示，请回答下列问题：

(1)强启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被_______识别并结合，驱动基因的持续转录，如将强启动子插入到玉米叶绿体某基因内部，可获得该基因_______突变株。为使P基因在玉米植株中超量表达，应优先选用_______酶组合，将Ti质粒切开后构建重组表达载体。T-DNA在该实验中的作用是_______。

(2)将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌后进行组织培养，培养基中需加入_______进行筛选，此物质属于氨基糖苷类抗生素，它能抑制蛋白质在叶绿体和线粒体中合成，使植物的光合作用和_______受到干扰；从而引起植物细胞死亡。

(3)愈伤组织是一种相对没有分化的_______团，经液体悬浮培养叮以分散成胚性细胞，在适宜的培养基中，这种单细胞可以发育成_______；再继续发育成转基因玉米株系。

(4)影响玉米愈伤组织能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈伤组织继代次数以及_______等。目前，组织培养过程中培养瓶常用透气封口膜封口，目的是_______。24、下图是某同学设计的传统发酵装置示意图。比较传统发酵技术与现代发酵工程；回答下列问题：

(1)传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒的原理是______。请设计简单的实验验证发酵过程中产生了酒精（不考虑发酵液中葡萄糖的影响），写出实验思路并预期实验结果与结论______。

(2)传统发酵技术一般以天然存在的______发酵，品质不一，现代工业发酵一般为单一菌种发酵，品质较高。自制的果酒并非商品意义上的产品，在实际生产中还需要经过______装瓶等过程才能获得成品酒。

(3)若要测定发酵罐中酵母菌的种群密度，取10mL发酵液稀释1000倍，利用25×16的血细胞计数板，观察并统计到中方格中的酵母菌平均数为9个，则每毫升发酵液中酵母菌数量约是______个。

(4)利用上图中装置酿酒与酿醋时，操作上的最主要的区别是______。评卷人得分五、综合题(共4题，共28分)25、为了研究低温诱导对某基因的启动子P活性的影响；科研人员进行了启动子P的PCR提取；特定表达载体的构建和转基因烟草的功能鉴定。该基因及其启动子P的结构及相应限制酶的切割位点如下图所示，图中灰色区域碱基序列是已知的，启动子P（图中黑色区域）及上游碱基序列未知，片段I和片段II中的字母A~F均表示引物。请回答下列问题。

（1）启动子是_________的位点。不能直接根据片段I扩增启动子P的原因是_________。

（2）为了能扩增正常启动子P，科研人员先用_________酶处理上图中的片段I，使片段I成为环状DNA；再将环状DNA用_________（填“酶1”或“酶2”）处理得到了片段II，如下图所示。根据片段II能不能扩增出启动子P？若能，请写出可选用的引物组合（用C、D、E、F表示），若不能请说明理由_________。

（3）已知卡那霉素可抑制烟草细胞的生长，基因M可在烟草的根部正常表达，其表达产物可将X－Gluc水解生成蓝色物质。将启动子P和基因M结合并与含有卡那霉素抗性基因的Ti－质粒重组构建基因表达载体。将表达载体和酚类物质混合后加人含有烟草细胞的培养基中，酚类物质的作用是________。再用含有________的培养基筛选出所需的烟草细胞，然后经过________获得转基因烟草植株。

（4）将上述转基因烟草植株分为A、B两组，A组在常温（25℃，对照组）下培养，B组在低温（4℃，实验组）下培养，一段时间后取A、B的幼根，浸入适量________溶液中，观察烟草细胞中基因M的表达情况（表达强度越大，细胞表现的蓝色越深）。若A、B组的结果分别为________，则说明低温抑制启动子P的功能。26、胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。图1是该方法所用的基因表达载体,图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程(融合蛋白A、B分别表示-半乳糖苷酶与胰岛素A；B链融合的蛋白)。请回答下列问题:

(1)图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是______________。

(2)图1中启动子是_________酶识别和结合的部位，有了它才能启动目的基因的表达；氨苄青霉素抗性基因的作用是__________________。

(3)构建基因表达载体时必需的工具酶有___________________。

(4)β-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部,其意义在于_____________________________________。

(5)溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键,用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链,且-半乳糖苷酶被切成多个肽段,这是因为___________________________________。

(6)根据图2中胰岛素的结构,请推测每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量。你的推测结果是_____,理由是____。27、回答下列问题：

（1）取少量酸奶，用无菌蒸馏水稀释后，再用______蘸取少量的稀释液，在MRS乳酸菌专用培养基的平板上划线，以获得乳酸菌单菌落。如图所示的划线分离操作，正确的是______。

（2）国标规定牛奶中的细菌含量不能超过200万个/mL。牛奶罐装时需要实时检测其中的细菌含量，此时不宜采用稀释涂布平板法接种来计数菌落，原因是______。

（3）制作馒头时；可以先用酵母菌和面，随后放置约1h，而发了之后再揉面并制成馒头剂子，将馒头剂子放置约10min，然后将馒头剂子置于蒸锅中蒸。

①面发了之后体积会增大，原因是______。

②小明制作的馒头经常会发酸，推测馒头中的酸味可能是醋酸杆菌或乳酸菌等产酸的微生物所导致的。小明用保鲜膜将发面的容器密封起来，馒头剂子也用保鲜膜涂油覆盖，结果馒头就不酸了。据此判断导致馒头发酸的微生物主要是______，判断的依据是______。28、研究发现，实体肿瘤内部通常是缺氧的环境，蓖麻毒素蛋白（RTA）可作用于核糖体，使蛋白合成受阻，从而引起细胞死亡。TAT是一种短肽，可转导蛋白进入细胞，含有氧依赖性降解区域ODD（多肽）的融合蛋白可以适应低氧条件稳定存在，但在常氧条件下会被蛋白酶降解。科研人员以RTA作为抑制肿瘤细胞增殖的活性分子，利用TAT的作用将融合蛋白转运进入肿瘤细胞，并利用ODD的作用减轻RTA对正常细胞的毒性，分别构建了含TAT-RTA（660bp）和TAT-RTA-ODD（870bp）融合基因的表达载体；并成功得到相关融合蛋白。

(1)可采用PCR的方法获取融合基因TAT-RTA，需要根据TAT和RTA基因设计引物，引物的作用是____________。已知RTA基因和欲得到的TAT-RTA融合基因的结构如图1所示，TAT基因编码链序列5'ATGAGCTACGGCCGTAAAAAGAGACGCCAACGTAGA3′，为顺利构建表达载体，需要在引物1的5′端加入____________酶切位点，引物2的5′端加入____________酶切位点，利用TAT和RTA核酸序列设计引物时，要求在RTA蛋白的前端引人TAT短肽，请根据要求写出引物1____________（写出引物5′端的12个碱基即可）。

(2)载体的部分结构如图2所示，His标签由连续的6个组氨酸构成，可用于对重组融合蛋白进行分离纯化，将PCR得到的TAT-RTA融合基因和载体双酶切后，再用____________酶连接。但是在研究时，发现融合蛋白中没有His标签蛋白，据图分析原因是____________。可通过引物2的特殊设计使His标签正常表达，请结合图1和图2写出引物2____________（引物中如需添加碱基补足对应的密码子；可以添加任意碱基）。

(3)科研人员将得到的重组融合蛋白经腹腔给药荷瘤小鼠（患实体肿瘤的小鼠称为荷瘤小鼠）；研究荷瘤小鼠肿瘤体积变化，结果如图3所示；

请写出本实验的结果____________。

产生该实验结果的原因是____________。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、D【分析】【分析】

1；植物组织培养的原理：植物细胞具有全能性。

2；植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例；特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，被称为“激素杠杆”。

【详解】

A；植物组织培养所依据的原理是细胞的全能性；A正确；

B；为保证实验成功；植物组织培养技术必须在无菌条件下进行，B正确；

C；由愈伤组织再分化过程中需要光照；原因是叶肉细胞中的叶绿素的合成需要光照，C正确；

D；植物组织培养一般需要用MS的固体培养基；D错误。

故选D。2、C【分析】【分析】

基因表达载体的元件：复制原点；启动子、终止子、目的基因和标记基因。

【详解】

质粒中amp和tet均为标记基因；若要得到一个能在四环素培养基上生长而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组DNA的细胞，目的基因应该插入到amp上，破坏amp，保证tet的完整性。综上所述，ABD不符合题意，C符合题意。故选C。

【点睛】

标记基因的作用：为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来，如amp和tet。3、A【分析】【分析】

由于单克隆抗体的特异性强；能特异性识别抗原，因此可以把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素；药物等相结合，制成“生物导弹”，借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞，疗效高，副作用小，位置准确。

【详解】

A；单克隆抗体由免疫过的B淋巴细胞（浆细胞）与瘤细胞形成的杂交瘤细胞合成并分泌；分泌过程为胞吐过程，体现了生物膜的流动性，A错误；

B；Kadcyla中的抗体能实现靶向投递（浓缩效应）；药物能实现抗肿瘤的作用，B正确；

C；ADC是采用特定技术将具有生物活性的小分子药物连接到单克隆抗体上；实现对肿瘤细胞精准的选择性杀伤，ADC实现精准杀伤肿瘤细胞的基础是抗体与抗原特异性结合，C正确；

D；由图可知；ADC中接头的作用是连接药物分子，其稳定性偏低可能会导致药物分子脱落，进而与正常细胞接触，造成“脱靶毒性”，D正确。

故选A。4、C【分析】【分析】

PCR技术：

1；概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

2；原理：DNA复制。

3；前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。

4；条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；

5；过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶；高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

A；聚合酶链式反应；是用DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术，A正确；

B；在用PCR技术扩增DNA时；DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似，B正确；

C；PCR反应需在一定的缓冲溶液中进行；需提供DNA模板、一对引物、四种脱氧核苷酸及热稳定DNA聚合酶等，C错误；

D；PCR一般经历三十多次循环；每次循环均分为变性、复性和延伸三个阶段，D正确。

故选C。

【点睛】5、B【分析】【分析】

单克隆抗体的制备时动物细胞融合技术的应用之一；此过程中需要先注射抗原，使生物体产生具有免疫能力的B淋巴细胞，再将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，并筛选出能产生特异性抗体和大量增殖的杂交瘤细胞，最后经过体内和体外培养获取单克隆抗体。单克隆抗体具有特异性强；灵敏度高，并可能大量制备的优点。

【详解】

A；给图中小鼠注射S蛋白；检测到小鼠血清出现S蛋白抗体之后，说明小鼠已经产生了相应的体液免疫过程，这时从脾脏中获得相应B淋巴细胞，并诱导其与骨髓瘤细胞融合，A正确；

B；经HAT培养基筛选得到杂交瘤细胞经克隆化培养后还需进行抗体检测才能用于单克隆抗体的生产；B错误；

C；根据抗原-抗体特异性结合的原理；将单克隆抗体制成诊断盒，用于疾病的诊断，C正确；

D；一般抗血清中的抗体是一群识别不同抗原部位的抗体混合物；而单克隆抗体识别抗原部位具有专一性，所以单克隆抗体比血清抗体的灵敏度更高，D正确。

故选B。

【点睛】6、B【分析】【分析】

植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下；将离体的植物器官；组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。

【详解】

①植物组织培养需要在无菌；无毒的条件下进行；培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，①正确；

②培养基中需添加植物激素（主要是生长素和细胞分裂素）调节生命活动；无机盐、蔗糖等营养物质满足植物代谢的需求；②正确；

③植物组织培养利用植物细胞的全能性；胡萝卜的其他部分（如茎；叶、花）也具有全能性，因此能培养成小植株，③错误；

④图中培养瓶1中进行的是脱分化过程；而试管2中是再分化过程，因此二者的成分不完全相同，④错误。

③④错误。

故选B。二、多选题(共9题，共18分)7、C:D【分析】【分析】

题图分析：限制酶SalⅠ有三处切割位点；切割后产生4个DNA片段，泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物；限制酶XhoⅠ有2处切割位点，切割后产生3个DNA片段，泳道②中是用XhoⅠ处理得到的酶切产物。

【详解】

A；酶具有专一性；不同的限制酶识别并切割不同的核苷酸序列，A错误；

B；限制酶通过作用于磷酸二酯键得到相应产物；B错误；

C；分析图1；限制酶XhoⅠ有2处切割位点，切割后产生3个DNA片段，泳道②中是用XhoⅠ处理得到的酶切产物，C正确；

D；用两种限制酶同时处理后进行电泳；若某些位点未被切割，则条带可多于6条，D正确。

故选CD。8、A:B:C:D【分析】【分析】

分析曲线图：引物2的Tm高于引物1；说明引物2的热稳定性较高。

【详解】

A；PCR过程是目的基因DNA受热变性后解链为单链；引物与单链互补结合，合成的子链在Taq聚合酶的作用下进行延伸，所以两引物分别与DNA的两条互补单链结合，是子链延伸的起点，A正确；

B；PCR过程中；复性温度应低于引物的Tm值以提高PCR效率，B正确；

C；DNA含有的氢键数越多；其热稳定性越高，而A和T碱基对间有两个氢键，C和G碱基对间有三个氢键，曲线图显示：引物2的Tm高于引物1，说明引物2的热稳定性较高，因此若两引物的脱氧核苷酸数相同，推测引物2的（G＋C）含量较高，C正确；

D；适当减少引物2的脱氧核苷酸数；会降低引物2的热稳定性，可使其Tm值接近引物1，D正确。

故选ABCD。9、A:C【分析】【分析】

当胚胎细胞数目达到32个左右时；胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹，叫做桑椹胚；实验证实，这一阶段前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，属于全能细胞，这些细胞都是由受精卵经有丝分裂产生的。

【详解】

A；桑椹胚前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能；属于全能细胞，A正确；

B；囊胚期细胞可分化内细胞团和滋养层两部分；不同部位的细胞致密化程度有差异，桑椹胚不同部位的细胞致密化程度相同，B错误；

C；胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等；经移植获得同卵双胚或多胚的技术，胚胎分割属于无性繁殖或克隆的范畴，C正确；

D；胚胎移植一般选择桑椹胚或囊胚期进行；D错误。

故选AC。10、A:C【分析】【分析】

动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。

【详解】

A；用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织；因为胚胎或幼龄动物的器官或组织分裂能力旺盛，A正确；

B；动物细胞培养中需先用胰蛋白酶使所取的组织分散成单个细胞；胃蛋白酶的最适pH值呈酸性，而细胞培养液的pH大多数是7.2-7.4，B错误；

C；细胞存在接触抑制；因此在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液进行传代培养，C正确；

D；动物细胞培养传到50左右不能再继续传代；部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点，可以在培养条件下无限制的传代下去，D错误。

故选AC。

【点睛】11、A:D【分析】【分析】

纤维素分解菌能合成和分泌纤维素酶，纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶；前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。用以纤维素为唯一碳源的培养基可以筛选出纤维素分解菌。

【详解】

A；木材、秸秆中富含纤维素；故可以从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌，A正确；

B；应该用以纤维素为唯一碳源的培养基筛选纤维素分解菌；只有纤维素分解菌能够存活，B错误；

C；接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理；接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基用高压蒸汽灭菌法处理，C错误；

D；菌落只能在固体培养基中形成；菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基，D正确。

故选AD。12、A:B【分析】【分析】

1.微生物接种常用的两种方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落。

2.选择培养基中培养基中加入某种化学成分；根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学；物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率。

【详解】

A；筛选高效降解淀粉的菌种；则选择培养基中的碳源应为淀粉，根据图示可知，图中菌株采用稀释涂布平板法进行接种，目的是使菌落分布较均匀，然后放在相同且适宜条件下培养，A错误；

B；高效降解淀粉的菌种可以产生淀粉酶将培养基中的淀粉水解；因此可以用碘液鉴定培养基中淀粉的分解情况，菌落形成后加入碘液染色，比较菌株菌落周围透明圈的大小。产生的淀粉酶活性越高，淀粉分解量越多，培养基中筛选菌落周围透明圈越大，因此图中菌落①与菌落②周围透明圈的大小不同，说明分泌的淀粉酶活性不同，B错误；

C；①②分别属于真菌和细菌；真菌属于真核生物，有以核膜为界限的细胞核，细菌属于原核生物，没有以核膜为界限的细胞核，只有拟核，C正确；

D；实验结束后；对使用过的培养基要灭菌处理后再倒掉，以防止杂菌污染环境，D正确。

故选AB。13、A:C:D【分析】【分析】

动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核；移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成为动物个体。

【详解】

A；克隆北极狼的供体细胞来自野生北极狼；卵母细胞来自发情期的母犬，因此性状由野生北极狼、发情期的母犬的基因共同决定，比格犬只是代孕母体，不提供遗传物质，A错误；

B；透明带下注射法不抽取供体细胞的细胞核；操作简单且对供体细胞核损伤小，同时注射的位置是卵母细胞外的透明带，然后诱导两个细胞融合，对卵母细胞的损伤小，B正确；

C；供体细胞注入卵母细胞透明带内后；还需要电融合法等诱导才能使供体细胞进入卵母细胞形成重构胚，C错误；

D；细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程是有丝分裂过程；而基因重组发生在减数分裂过程，D错误。

故选ACD。14、A:C:D【分析】【分析】

1；动物细胞培养过程：取动物组织块--剪碎组织--用胰蛋白酶处理分散成单个细胞--制成细胞悬液--转入培养液中（原代培养）--放入二氧化碳培养箱培养--贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞；制成细胞悬液--转入培养液（传代培养）--放入二氧化碳培养箱培养。

2；胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术；如体外受精、胚胎分割、胚胎移植、胚胎干细胞培养等技术。

【详解】

A；干扰素是人体的蛋白质；故从酵母菌细胞中提取到人的干扰素，说明目的基因已经完成了在受体细胞中的表达，A正确；

B；在植物细胞和组织培养中；花药可以进行离体培养成单倍体植株，B错误；

C；使用酶解法可以获得单个细胞；故在动物细胞培养中，用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞，C正确；

D；对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术；使体外受精、胚胎移植和胚胎分割成为可能，D正确。

故选ACD。

【点睛】15、B:D【分析】【分析】

动物细胞核移植技术是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

【详解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的体细胞通过克隆技术（属于无性繁殖）获得的；所以其基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰，A正确；

B；经基因编辑后形成的胚胎不一定都能发育成克隆疾病猴；B错误；

C；克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物；C正确；

D；不能利用该技术进行克隆人的研究；D错误。

故选BD。

【点睛】三、填空题(共5题，共10分)16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】远缘杂交的不亲和性细胞遗传细胞免疫、17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】不同浓度的NaCL溶液DNA杂质18、略

【分析】【分析】

微生物实验中常用的灭菌方法有干热灭菌；高压蒸汽灭菌和灼烧灭菌；其中对于培养基一般用高压蒸汽灭菌，对于接种环一般用灼烧灭菌，对于培养皿等可以用干热灭菌。培养基放入培养箱中需要倒置培养，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，即将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养，当菌落长成后将试管放入4℃的冰箱中保藏，以后每3-6个月都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上；对于需要长期保存的菌种可以采用甘油管藏法，在3mL的甘油瓶中装入1mL甘油后灭菌，将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后放在-20℃的冷冻箱中保存。植物有效成分的提取方法主要有蒸馏法、压榨法和萃取法，如玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏，常采用蒸馏法提取；对于如橘皮精油，其主要储存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，又会产生原料焦糊问题，所以一般采用压榨法提取。

【详解】

（1）微生物培养中常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌法；灼烧灭菌法、干热灭菌法等。用平板培养沙门氏菌时一般需要将平板倒置；可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征，因此单个细菌在平板上会形成菌落，通常可根据菌落的形状、大小和颜色等特征来初步区分不同种的微生物。

（2）从鸡粪便取样；经选择培养后，如果要将样品涂布到鉴别培养基上，需要经过一系列梯度稀释。对获得的沙门氏菌进行长期保存常采用甘油管藏法。

（3）根据题干信息；沙门氏菌的最适繁殖温度为37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其对热抵抗力不强，在60℃的条件下15min就能被杀死，因此为避免食用被沙门氏菌污染的食品而引发的食物中毒，家庭中可采取低温储存；高温加工方法进行处理。

（4）根据题意；肉桂精油不溶于水；易溶于有机溶剂且易挥发，故可采用水蒸气蒸馏法进行提取，提取过程中蒸馏的温度、时间都会影响精油品质。

【点睛】

本题主要考查现代生物科技的原理和运用，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力，能运用所学知识，准确判断问题的能力。【解析】灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法倒置在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征梯度稀释甘油管藏低温储存、高温加工水蒸气蒸馏蒸馏的温度、时间19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】细胞产物的工厂化生产。20、略

【分析】【分析】

分析图1：表示多年前感染EV并已康复的甲；乙两人的血液中抗EV-GP抗体的水平。根据曲线图可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组。

分析图2：表示单抗与病毒混合后病毒对宿主细胞的感染率。根据柱形图可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒对宿主细胞的感染率明显低于其他组别。

【详解】

（1）由题意可知；新型冠状病毒表面的S-蛋白作为抗原刺激淋巴细胞，使机体产生特异性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是蛋白质。

（2）免疫系统对被新冠病毒感染后肺细胞强烈攻击引发肺炎；此时可通过适度使用免疫抑制剂对病人进行治疗，使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）由图1可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组，故应选取甲的B细胞用以制备单克隆抗体。

（4）由图2可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ后，病毒对宿主细胞的感染率较低。因此抑制效果最好的单抗是Ⅲ。

（5）患者康复后一段时间；若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的记忆细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。

【点睛】

本题结合图解，考查病毒、单克隆抗体的制备等，要求考生识记病毒的结构，明确病毒没有细胞结构；识记单克隆抗体的制备过程，掌握其优点及相关应用，能结合图中信息准确答题【解析】①.抗原②.特异③.糖蛋白（或蛋白质）④.免疫抑制剂⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.记忆四、实验题(共4题，共28分)21、略

【分析】【分析】

分析题干信息；该实验的目的是筛选出高效降解化合物A的细菌，在以化合物A为唯一碳源的培养基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A为碳源和氮源生长繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，无法生长繁殖。

【详解】

（1）由题意可知；本实验是分离出降解的有机化合物A的菌种，所以培养基中加入化合物A的目的是筛选降解的有机化合物A的菌种，这种培养基属于选择培养基。

（2）由于“目的菌”有降解的有机化合物A的作用；所以培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量低的培养基，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量进一步增加。

（3）若研究“目的菌”的群体生长规律；将单个菌落进行液体培养，再采用稀释涂布平板方法进行计数。培养液中目的菌的种群数量在开始一段时间范围内，由于营养充分；空间充裕，种群数量类似于“J”形增长，随着营养物质的消耗，种群增长速率逐渐下降，最终会达到K值，继续培养，由于营养物质缺乏、有害代谢物积累、pH改变等，种群数量将会下降。

（4）将目的菌用于环境保护实践之前；还要对目的菌进行研究，检测其是否会产生对环境有害的代谢物；当使用大量目的菌时会不会使目的菌成为优势菌群，对其他微生物的生存构成威胁，从而打破微生物菌群的平衡等。

（5）可以利用基因工程的方法；将能降解化合物A的基因导入受体菌中来实现。但在使用之前要检验其安全性。

【点睛】

本题考查了微生物分离与培养的有关知识，要求考生能够识记培养基的成分和培养条件，掌握微生物分离与纯化的方法与步骤，再结合所学知识准确判断。【解析】筛选出能降解化合物A的细菌选择低增多稀释涂布平板培养液中目的菌的种群数量在开始一段时间范围内，由于营养充分、空间充裕，种群数量类似于“J”形增长，随着营养物质的消耗，种群增长速率逐渐下降，最终会达到K值，继续培养，由于营养物质缺乏、有害代谢物积累、pH改变等，种群数量将会下降将目的菌用于环境保护实践之前，还要对目的菌进行研究，检测其是否会产生对环境有害的代谢物；当使用大量目的菌时会不会使目的菌成为优势菌群，对其他微生物的生存构成威胁，从而打破微生物菌群的平衡等可以利用基因工程的方法，将能降解化合物A的基因导入受体菌中来实现。但在使用之前要检验其安全性22、略

【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原；然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。

【详解】

（1）用丙肝病毒对小鼠进行免疫后；小鼠的B淋巴细胞能产生抗丙肝病毒的抗体，从该小鼠的脾细胞中能获得产生该抗体的B淋巴细胞。B淋巴细胞在体外培养条件下不能无限增殖，而骨髓瘤细胞能无限增殖，故融合之前的两种细胞中，能通过动物细胞培养大量增加数量的是骨髓瘤细胞。

（2）诱导细胞融合的病毒表面含有的糖蛋白和一些酶；能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使得细胞互相凝聚，细胞膜具有一定的流动性，在灭活病毒的诱导下，其上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜会发生融合。细胞融合后产生的融合细胞有B细胞间的融合；骨髓瘤细胞间的融合及B细胞和骨髓瘤细胞的融合，会产生三类细胞。筛选1是指利用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。由于杂交瘤细胞产生的抗体除了抗丙肝病毒的抗体外，还可能有其他类型，故筛选2是指进行多次的克隆化培养和专一性抗体检测，以得到能产生所需抗体的杂交瘤细胞。

（3）实验的自变量是培养液中接种杂交瘤细胞的数量，因变量为一定时间内抗丙肝病毒抗体的数量，除自变量外，其他条件要相同且适宜。所以实验思路为：将适宜的动物细胞培养液分为体积相同的几组（可自设组数）。在不同组别中接种不同量的能产生丙肝病毒的单克隆抗体的杂交瘤细胞，一定时间后测定培养液中的抗体含量。【解析】(1)给小鼠注射丙肝病毒使小鼠产生免疫反应骨髓瘤细胞。

(2)糖蛋白蛋白质分子和脂质分子选择培养基克隆化培养和抗体检测。

(3)将适宜的动物细胞培养液分为体积相同的几组（可自设组数）。在不同组别中接种不同量的能产生丙肝病毒的单克隆抗体的杂交瘤细胞，一定时间后测定培养液中的抗体含量23、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原—抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点；能驱动基因的转录；如将强启动子插入到玉米叶绿体某基因内部，则会破坏该基因，获得该基因沉默（失活）突变株。为使P基因在玉米植株中超量表达，则需要强启动子和P基因不被破坏，因此应优先选用BamHⅠ和SacⅠ酶组合，将Ti质粒切开后构建重组表达载体。农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，因此T-DNA在该实验中的作用是将强启动子和P基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞染色体DNA上。

（2）由图可知；G418抗性基因位于Ti质粒的T-DNA上，随T-DNA一起整合到玉米细胞染色体DNA上，因此将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌后进行植物组织培养，培养基中需加入G418进行筛选，此物质属于氨基糖苷类抗生素，它能抑制蛋白质在叶绿体和线粒体中合成，其中叶绿体是光合作用的场所，线粒体是细胞有氧呼吸的主要场所，因此可使植物的光合作用和呼吸作用（能量代谢）受到干扰，从而引起植物细胞死亡。

（3）愈伤组织是一种相对没有分化的薄壁细胞团；经液体悬浮培养可以分散成胚性单细胞，在适宜的培养基中，这种单细胞可以发育成胚状体，再继续发育成转基因玉米株系。

（4）影响玉米愈伤组织能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈伤组织继代次数以及玉米的基因型等。目前，组织培养过程中培养瓶常用透气封口膜封口，目的是防止杂菌污染。【解析】(1)RNA聚合酶沉默##失活BamH和SacⅠ酶将强启动子和P基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞的染色体DNA上。

(2)G418呼吸作用##能量代谢

(3)薄壁细胞胚状体。

(4)玉米的基因型防止杂菌污染24、略

【分析】【分析】

参与果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陈代谢的类型为异养兼性厌氧型，较适宜的发酵温度为18~30℃。在无氧的环境中酵母菌把糖类分解为酒精和二氧化碳。在果酒制作过程中检测发酵液是否含有酒精，取样后滴加适量酸性重铬酸钾溶液并振荡，若观察到溶液颜色的变化是橙色变成灰绿色，则说明发酵液中含有酒精。

【详解】

（1）传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒都是利用了酵母菌的无氧呼吸。酵母菌属于真核生物；其代谢类型是兼性厌氧型，在有氧条件下进行大量增殖，在无氧条件下将葡萄糖分解为酒精。

橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与乙醇（即酒精）发生化学反应；变成灰绿色，该实验目的是验证发酵过程中产生了酒精，因此实验自变量是是否加入发酵液，因变量为溶液颜色变化。对照组中应加入酒精作为阳性对照。实验过程中应遵循等量原则；单一变量原则等，因此实验思路是：取两支试管分别标号A、B，A试管中各加入2ml发酵液，作为实验组，B试管中各加入2ml酒精，作为对照组，两试管中都加入适量酸性重铬酸钾，振荡后观察试管中颜色变化，AB两试管都变为灰绿色，即可验证发酵过程中产生了酒精。

（2）传统发酵技术一般不进行严格灭菌操作；因此其发酵菌种为天然的混合菌种。现代工业发酵酿制果酒不同于自制果酒，需要经过沉淀；过滤、灭菌、装瓶等过程才能获得成品酒。

（3）25×16型的血细胞计数板计算公式：酵母细胞个数/1mL=1个中方格中酵母菌数×25×10000×稀释倍数，因此该实验中每毫升发酵液中酵母菌数量=9×25×10000×1000=2.25×109。

（4）酿酒利用酵母菌的无氧呼吸，需要关闭充气口，酿醋利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充气孔中充入无菌空气。【解析】(1)酵母菌是兼性厌氧微生物；在无氧条件下将葡萄糖分解为酒精实验思路：取两支试管分别标号A；B，向A试管中各加入2ml发酵液，向B试管中各加入2ml酒精，向AB两试管各滴加0．5ml溶有0．1g重铬酸钾的浓硫酸溶液（或酸性重铬酸钾），并轻轻震荡，观察试管中溶液颜色变化。

(2)混合菌种沉淀；过滤、灭菌。

(3)2.25×109

(4)酿酒时需关闭充气口，酿醋时则需向充气孔中充入无菌空气五、综合题(共4题，共28分)25、略

【分析】【分析】

1；PCR扩增目的基因需要有一段已知的碱基序列。

2；分析题图；启动子P左右两端都有酶1切割位点，可用酶1切割片段I使切割后的片段I首尾两端产生相同的末端，在用DNA连接酶处理片段Ⅰ形成环状DNA分子。用酶2切割环状DNA可获得片段II。由于子链合成方向是从子链的5'-3'，用引物D和E可扩增出启动子P。

3；将目的基因导入植物细胞的农杆菌转化法；其依据主要是：当植物受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物，吸引农杆菌移向这些细胞，这时农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。

【详解】

（1）启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点；不能直接根据片段Ⅰ扩增启动子的原因是启动子P左侧序列未知。

（2）图中的片段I在启动子P的左右两端各有一个酶1的切割位点；酶1可切割启动子P的左右两端产生相同的末端，再用DNA连接酶连接可形成环状DNA的片段I；片段II的首尾两端都有灰色区域，结合题图分析可知，片段II是用酶2切割处理环状DNA产生的。子链合成方向是从子链的5'-3'，所以可以用引物D和E扩增出启动子P。

（3）在培养基中添加酚类物质的目的是吸引农杆菌侵染烟草细胞；有利于启动子P和M基因成功转化。用含有卡那霉素和X-Gluc的培养基可筛选出所需的烟草细胞，在卡那霉素中能存活说明获得了质粒，能将X-Gluc水解成蓝色说明获得了基因M，筛选出的烟草细胞经过植物组织培养可获得转基因植株。

（4）由题意可知；基因M可在烟草的根部正常表达，其表达产物可将X－Gluc水解生成蓝色物质，故可用适量X－Gluc溶液检测A；B的幼根细胞中基因M的表达情况；表达强度越大，细胞表现的蓝色越深。若A组蓝色深而B组蓝色较浅，则说明B组低温使启动子P受抑制，表达的产物少。

【点睛】

本题考查基因工程的相关知识，解答本题的关键是分析题图，明确基因工程的基本步骤和工具，并根据限制酶的切割位点判断引物应该设计的碱基序列，结合题意明确检测基因表达载体的方法。【解析】RNA聚合酶识别并结合启动子P及左侧的序列未知，无法合成PCR所需要的引物酶1和DNA连接酶2能，可选用的引物组合是D和E吸引农杆菌感染烟草细胞卡那霉素组织培养X－GlucA蓝色较深、B蓝色较浅26、略

【分析】【详解】

（1）基因表达载体包括复制原点；启动子、终止子、标记基因和目的基因；图1基因表达载体缺少终止子。

（2）启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位；使目的基因转录；氨苄青霉素抗性基因是标记基因，能够将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来。

（3）构建基因表达载体需要的工具酶是限制酶和DNA连接酶。

（4）将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部；可防止胰岛素的A；B链被菌体内蛋白酶降解。

（5）由于β-半乳糖苷酶中含多个甲硫氨酸；而胰岛素A；B链中不含甲硫