2025年浙教新版选择性必修三生物下册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年浙教新版选择性必修三生物下册月考试卷228考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四总分得分评卷人得分一、选择题(共5题，共10分)1、从红豆杉细胞中提取的紫杉醇是目前最好的抗肿瘤药物之一。为提高红豆杉细胞培养物中紫杉醇的产量；研究人员构建紫杉醇合成关键酶基因（Bapt）的超表达载体，并将其导入红豆杉细胞，具体流程如下图。相关说法正确的是（）

A.过程①和②使用的酶均为DNA聚合酶B.p1303载体上可能含有增强Bapt基因表达的序列C.可使用Bapt基因制成的探针检测过程⑤是否成功D.改造的红豆杉细胞需组织培养至完整植株再进行紫杉醇提取2、利用微生物降解玉米秸秆，可增加土壤碳库储量，实现农业的循环生产。某研究团队通过富集培养从土壤中筛选出4种降解玉米秸秆的复合菌，其实验结果如下表所示。下列相关叙述错误的是（）。处理玉米秸秆降解率（%）2代4代6代8代10代10代地点18．0018．6728．0033．3338．00地点210．0018．0028．6730．0041．33地点318．0026．6741．3344．0058．97地点419．3326．0040．0048．0050．10

A.所选土壤灭菌后接种于固体培养基进行富集培养B.培养基中应添加玉米秸秆提取物作为碳源C.富集培养传代多次有利于提高目的菌的数量D.培养至第10代时玉米秸秆降解率显著提高3、双特异性单克隆抗体是指可同时与癌细胞和药物结合的特异性抗体。下图是科学家设计的生产能同时识别癌胚抗原和长春碱（一种抗癌药物）的双特异性单克隆抗体的部分过程。相关叙述不正确的是（）

A.单克隆抗体的制备需要用到动物细胞融合和动物细胞培养技术B.该过程仅需两次筛选，即可筛选出单克隆杂交—杂交瘤细胞C.过程⑤的目的与过程①的目的都是获得相应的B淋巴细胞D.通过该技术合成的双特异性单克隆抗体的灵敏度更高4、花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。为培育抗黑腐病杂植株，研究者设计如下流程。下列相关叙述正确的是（）

A.过程①需要使用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶来处理两种细胞B.过程②后，显微镜下观察到有叶绿体的细胞即为融合细胞C.过程③的培养基中需加入植物激素来诱导脱分化和再分化D.可借助黑腐病菌接种实验对杂种植株进行鉴定5、美籍华人张明觉首次实现哺乳动物体外受精：从兔子的子宫回收获能的精子在体外同卵子结合，然后根据同步化的原理，将早期胚胎移植到另一只假孕雌兔的子宫中，经过“借体怀胎”繁殖出世界上第一只通过体外受精培育成功的仔兔。下列叙述错误的是（）A.为防止受体对移植的胚胎发生免疫排斥，供体和受体要进行同期发情处理B.体外培养受精卵时需要给予一定量的CO2，以维持培养液pH的相对稳定C.囊胚期透明带会破裂，胚胎从中伸展出来的过程叫孵化D.在囊胚阶段，胚胎的内部开始出现含有液体的腔评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)6、B基因存在于水稻基因组中；其仅在体细胞（2n）和精子中正常表达，但在卵细胞中不转录。为研究B基因表达对卵细胞的影响，设计了如下实验，培育转基因植株。以下鉴定筛选转基因植株的方式正确的是（）

A.将随机断裂的B基因片段制备成探针进行DNA分子杂交B.以Luc基因为模板设计探针进行DNA分子杂交C.以B基因编码蛋白的序列为模板设计探针与从卵细胞提取的mRNA杂交D.检测加入荧光素的卵细胞中是否发出荧光7、在单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞（即瘤细胞和B淋巴细胞的融合细胞）的筛选是必不可少的步骤。筛选杂交瘤细胞所用的HAT培养基成分和细胞增殖时所需的核苷酸的两条形成途径（D途径，S途径）如下表所示。已知融合所用的瘤细胞是经毒性培养基选出的中间合成途径缺失株，即只有起始合成途径，效应B细胞有两条核苷酸合成途径。若仅考虑细胞的两两融合，下列说法错误的是（）。HAT培养基成分水，糖类、无机盐、次黄嘌呤、氨基糖呤（叶酸拮抗剂），胸腺嘧啶脱氧核苷等起始合成途径（D途径）由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，叶酸作为重要的辅酶参与这一过程中间合成途径（S建径）利用次黄嘌呤一鸟嘌呤磷酸核苷转移酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸

A.HAT培养基中瘤细胞可利用氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸B.杂交瘤细胞能被筛选的原因为既具备增殖能力，又可进行S途径C.筛选出来的杂交瘤细胞分泌的均为同一种特异性抗体D.在放入HAT培养基之前的融合细胞的培养液中，有D途径的细胞有3种8、转基因作物的推广种植，大幅度提高了粮食产量，取得了巨大的经济效益和生态效益硕果累累的转基因成果在带给人们喜悦的同时，也促使人们关注转基因生物的安全性问题。下列有关转基因作物的安全性的叙述，正确的是（）A.转入抗性基因的植物可能成为“入侵物种”，影响生态系统的稳定性B.抗性基因可能会随花粉传播到田间近缘野生植物体内，造成基因污染C.若目的基因来自自然界，则培育出的转基因植物不会有安全性问题D.大面积种植抗虫棉，有可能会导致棉铃虫群体中相关抗性基因频率增大9、勤洗手是预防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠状病毒期间推出一款新型免洗洗手凝胶。为衡量该凝胶的清洗效果；研究人员检测了用凝胶洗手前后手部细菌的含量。凝胶洗手前的检测流程见下图。下列叙述错误的是（）

A.统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是平板划线法B.除图中操作外，还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养C.培养基上的一个菌落只可能来源于样品稀释液中的一个活菌D.初步判断培养基上菌种的类型，需要用显微镜观察菌体的形状10、下表为5种限制酶的识别序列及切割位点，下图为某种质粒和目的基因，箭头所指为限制酶酶切位点。现要将图中的目的基因定向插入到质粒中，以制备转基因植株。下列说法正确的是（）。限制酶BamHⅠEcoRⅠHindⅢNheⅠMunⅠ识别序列和切割位点G↓GATCCG↓AATTCA↓AGCTTG↓CTAGCC↓AATTG

A.BamHI和NheI切割形成相同的黏性末端B.用EcoRI和HindⅢ切割质粒，有助于目的基因的定向插入C.在目的基因和NheI的识别位点之间添加EcoRI识别位点，可改变其插入的方向D.通过花粉管通道法可将重组基因导入胚囊11、克隆动物常用的核移植方法主要有细胞质内注射法和透明带下注射法两种。前者是用微型注射针将供体细胞的细胞核吸出注入去核卵母细胞质内；后者是直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内，然后促使两个细胞融合。世界首例体细胞克隆北极狼的供体细胞来自哈尔滨极地公园的一只野生北极狼的皮肤样本，卵母细胞来自一只处于发情期的母犬，代孕母体则是一只比格犬。下列叙述错误的是（）A.克隆北极狼的性状由野生北极狼、发情期的母犬和比格犬的基因共同决定B.相比之下，透明带下注射法对供体细胞核和卵母细胞的损伤更小C.供体细胞注入卵母细胞透明带内后，就可自行进入卵母细胞D.细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程中发生了基因重组12、下列有关动物细胞培养的表述错误的是（）A.培养环境中需要O2，不需要CO2B.细胞要经过脱分化形成愈伤组织C.培养液通常含有糖类，氨基酸，无机盐，维生素和动物血清D.培养瓶中的细胞培养到一定阶段后分瓶后才能继续增殖13、北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述不正确的是（）

A.过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序B.将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白C.过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选D.应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其表达14、2020年5月22日，在世界权威医学期刊《柳叶刀》杂志在线刊登了中国陈薇团队研发的重组腺病毒疫苗I期人体（108位志愿者）试验临床数据结果：安全、能诱导免疫反应。重组腺病毒疫苗是一种重组的基因工程产品，用不会使人体致病的腺病毒作为载体，把克隆出来的编码新冠病毒S蛋白（介导新冠病毒感染细胞的成分）基因装入载体腺病毒，注入人体，进入人体细胞，表达出S蛋白，刺激人体产生针对新冠病毒的免疫应答。相关叙述正确的是（）A.重组腺病毒疫苗包括S蛋白基因、启动子、终止子和标记基因等B.重组腺病毒疫苗只能使人体产生体液免疫C.重组腺病毒疫苗引发的体液免疫中有吞噬细胞、T细胞的参与D.重组腺病毒疫苗引起免疫反应后相应淋巴细胞增多，细胞周期将变长评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)15、微生物________________的方法很多，最常用的是_____________和__________________。16、原核基因采取______获得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。17、在____________的温度范围内，DNA的双螺旋结构解体，双链分开，这过程成为__________。18、概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的______，将它分散成______，然后放在适宜的______中，让这些细胞______。19、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。评卷人得分四、综合题(共4题，共28分)20、琼脂是一种多糖类物质；由于很少有微生物能将其降解而成为配制固体培养基时常用的凝固剂之一；某实验室在处理一批已进行过微生物培养的废弃固体培养基时发现，几乎全部培养基上的微生物都已死亡，但在其中一个培养基上存在一个正常生长的菌落。对此，研究人员做出了以下假说：①此培养基内的营养未被消耗殆尽；②形成此菌落的为自养型微生物；③形成此菌落的微生物能利用琼脂。

（1）从研究人员所作的假说可以推测①所说的“营养”最可能是_____（填“碳源”“氮源”或“无机盐”）。

（2）配制牛肉膏蛋白胨培养基的步骤包括计算、称量、_____、灭菌、倒平板。倒平板所用的培养皿和培养基所用的灭菌方法依次是_____和_____。

（3）为了检验上述假说①是否正确，研究人员分别使用两种培养基对上述微生物进行培养其中一种为牛肉膏蛋白胨培养基（a），则另一培养基b中不能加入下列的_____（填字母）

A．牛肉膏B．蛋白胨C．氯化钠D．琼脂。

（4）用上述a、b培养足够时间，菌落生长情况为_____时；证明假说①正确。

（5）若上述实验否定了假说①，为进一步检验假说②和③，研究人员想要配制一种新的培养基c，并通过b与c上是否出现菌落作为观察指标，则与b相比，c的成分需要做出的变化是_____。21、新型冠状病毒可通过表面的刺突蛋白（S蛋白）与人呼吸道粘膜上皮细胞的ACE2受体结合；侵入人体，引起肺炎。单克隆抗体可阻断病毒的粘附或入侵，故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。下图为筛选；制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图。请据图回答下列问题：

（1）在制备抗S蛋白单克隆抗体的过程中，先用纯化的______对小鼠进行免疫，并从小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞。请完善以小鼠的脾脏为材料制备细胞悬液的主要实验步骤：对新鲜脾脏进行处理，__________________。

（2）将提取的B淋巴细胞与小鼠的______细胞融合，用HAT培养基筛选获得的杂交瘤细胞还需要进行______和______；经多次筛选，获得分泌抗S蛋白单克隆抗体的细胞。

（3）将能分泌抗S蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或______。在体外培养时，除需满足营养条件外，还需要满足的其他条件有__________________（答出两点即可）。

（4）与从动物血清中分离出的抗体相比，抗S蛋白单克隆抗体的优势体现在：________________________（答出两点即可）。22、产脲酶微生物是能分泌脲酶的一类微生物的统称。实验人员筛选获得了一株能耐受酸性环境的产脲酶菌株；该菌株在pH为4.5~5.5的酒中具有活性，可以消除酒中的尿素，以抑制致癌物质——氨基甲酸乙酯的形成。回答下列问题：

(1)产脲酶菌株分泌的脲酶能催化尿素分解生成___________。配制用于筛选产脲酶菌株的培养基时，对培养基灭菌常用的方法是____________，尿素需要在灭菌后加入，原因是__________。

(2)用于鉴别产脲酶菌株的培养基中应加入___________作为指示剂，鉴别的原理是__________。

(3)某同学设计的两种培养基的配方如下表所示。培养基葡萄糖无机盐尿素琼脂水A+++++B+++-+

，其中能用于筛选纯化产脲酶细菌的是培养基__________（填“A”或“B”），判断依据是__________。23、通常工业废水中含有低浓度；高毒性有机物一苯酚。为贯彻国家环保要求，某化工厂对工业废水进行处理后再排放，处理时需将苯酚分解为无害物质。为高效处理苯酚，科研人员采用富集方法（在含有大量苯酚的牛肉膏蛋白胨培养基上培养）从化工厂的污泥中分离能高效降解苯酚的菌株，其实验过程如图所示。请回答下列问题：

(1)科研人员应从____________中取样，过程①～③对样品进行富集培养时应选用液体培养基，原因是__________________。

(2)过程④所用接种方法为__________________。

(3)过程④所用培养基从物理状态角度分析属于____________培养基，从培养目的角度分析属于____________培养基。为证明该培养基的培养目的，可用____________作对照实验。

(4)已知苯酚降解后会在培养基上形成透明圈。为获得目的菌株，科研人员应在⑤中平板上挑选具有____________特征的菌落的进一步纯化。参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、B【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成；

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；

（4）目的基因的检测与鉴定：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：分子水平鉴定用抗原—抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；①为逆转录过程；需要逆转录酶的催化；②为PCR扩增过程，该过程需要使用Taq酶，A错误；

B；根据题干信息“研究人员构建紫杉醇合成关键酶（Bapt）基因的超表达载体来提高紫杉醇产量”可知；p1303载体上可能含有增强子序列，作用是促进Bapt基因的表达，B正确；

C；因为红豆杉细胞中本身存在Bapt基因；不管超表达载体是否成功导入，都能与Bapt基因探针形成杂交分子，因此不能通过Bapt基因探针来检测步骤⑤是否成功，C错误；

D；要获得细胞产物；只需要培养到愈伤组织阶段即可，不需要培育成完整的红豆杉植株，D错误。

故选B。2、A【分析】【分析】

实验室中微生物的筛选；也可以应用同样的原理，即人为提供有利于目的菌生长的条件（包括营养；温度和pH等），同时抑制或阻止其他微生物的生长。由于土壤中细菌的数量庞大，要想得到能分解纤维素的细菌，必须要对土样进行充分稀释，然后再将菌液涂布到制备好的选择培养基上，也就是要采用稀释涂布平板法。

分析题意可知；本实验目的是从土壤中筛选出纤维素分解菌。

【详解】

A；由题意可知；本实验是从土壤中筛选纤维素分解菌，因此所选土壤制成溶液后直接进行富集培养，不可灭菌，A错误；

B；本实验是筛选分解玉米秸秆的复合菌；在培养基中应添加玉米秸秆提取物作为碳源，人为提供有利于目的菌生长的条件，B正确；

C；分析题表可知；人为提供适用目的菌的生长条件，经过富集培养传代多次，可增加目的菌的数量，C正确；

D；分析题表可知；培养至第10代时玉米秸秆降解率显著高于前几代培养，D正确。

故选A。

【点睛】3、B【分析】单克隆抗体的制备过程的细节：（1）二次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。（2）细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体；在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。（3）杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。（4）提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。

【详解】

A；制备单克隆抗体过程中需用到动物细胞融合（骨髓瘤细胞和B淋巴细胞）和动物细胞培养技术；A正确；

B；在单克隆抗体的制备过程中需两类筛选；第一类筛选③是选出出杂交瘤细胞，第二类筛选⑥是选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞群，其中⑥需要多次进行筛选，故该过程中的筛选次数＞2次，B错误；

C；过程⑤的与过程①均是对小鼠注射特定抗原；目的都是获得相应的B淋巴细胞，C正确；

D；该双特异性单克隆抗体能同时识别癌胚抗原和长春碱（一种抗癌药物）；故通过该技术合成的双特异性单克隆抗体的灵敏度更高，D正确。

故选B。4、D【分析】【分析】

1；植物的体细胞杂交就是将同种或不同种的细胞经过一定的诱导方法诱导融合形成一个细胞；再将细胞培育成植株的过程。

2；杂种细胞再生出新的细胞壁是植物原生质体融合的标志；细胞中高尔基体与细胞壁的形成有关。

3；植物体细胞杂交的优点是：克服远缘杂交不亲和的障碍；培育远缘杂种植株。

4；杂种细胞经过植物组织培养的再分化过程；可选择性表达出亲本细胞的相应性状。

5；分析题图：图示为采用植物体细胞杂交技术获得抗黑腐病杂种植株的流程图；其中①表示采用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁的过程；②表示诱导原生质体融合的过程；③是脱分化形成愈伤组织的过程。

【详解】

A；过程①是去除细胞壁；可用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，A错误；

B；过程②表示诱导原生质体融合的过程；显微镜下观察有无叶绿体作为初步筛选的标志，还需要鉴定是否具有抗黑腐病特性来确定融合细胞，B错误；

C；过程③是脱分化形成愈伤组织的过程；没有再分化，C错误；

D；在分子水平上可通过PCR技术对杂种植株进行鉴定；在个体水平上可以通过对杂种植株进行黑腐病菌接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株，D正确。

故选D。5、A【分析】【分析】

同期发情处理目的是使供体与受体出现相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境。动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境：培养液和所有培养用具需要进行灭菌处理，以及在无菌环境下进行操作。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害；②营养：使用合成培养基时，通常需加入血清等一些天然成分；③温度、pH、渗透压：哺乳动物多是36.5℃左右，适宜pH为7.2-7.4；④气体环境：95%空气+5%CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。

【详解】

A；受体子宫不会对移植的胚胎发生免疫排斥；供体和受体要进行同期发情处理目的是使供体与受体出现相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境，A错误；

B、在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还需要提供CO2气体；维持培养液的pH的稳定，B正确；

C；囊胚进一步发育扩大；会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这个过程叫做孵化，C正确；

D；随着胚胎的进一步发育；胚胎内部出现了含有液体的腔即囊胚腔，这时的胚胎叫做囊胚，D正确。

故选A。二、多选题(共9题，共18分)6、B:C:D【分析】【分析】

分析题图：图中①表示将目的基因导入农杆菌；②表示采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞，之后再采用植物组织培养技术获得转基因植株。

【详解】

A；探针是指用放射性同位素（或荧光分子）标记的含有目的基因DNA片段；因此要以B基因编码蛋白的序列为模板设计探针，而不是将随机断裂的B基因片段制备成探针，A错误；

B；可用DNA分子杂交技术；即以Luc基因为模板设计探针进行DNA分子杂交，B正确；

C；用标记的目的基因作探针与mRNA杂交；即以B基因编码蛋白的序列为模板设计探针与从卵细胞提取的mRNA杂交，C正确；

D；检测目的基因是否翻译成蛋白质；由图可知B基因与Luc基因连接形成B-Luc融合基因，因此可通过Luc基因表达，检测加入荧光素的卵细胞中是否发出荧光，D正确。

故选BCD。7、A:C:D【分析】【分析】

诱导植物细胞原生质体融合物理方法包括离心；振动、电激；化学方法用聚乙二醇，诱导动物细胞融合除了以上物理化学方法可用生物方法，即灭活的病毒。

在HAT培养基中；氨甲蝶呤是叶酸的拮抗剂阻断DNA合成的主途径，未融合的瘤细胞；融合的瘤细胞--瘤细胞不能合成次黄嘌呤磷酸核糖转化酶，合成DNA的S途径也不能进行，所以最终死亡。

HAT培养基中筛选出的杂交瘤细胞；经选择性培养在适宜条件下可无限增值，然后进行单克降抗体检测，筛选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞。

【详解】

A；HAT培养基中含叶酸拮抗剂；其中不能进行D途径，A错误；

B；杂交瘤细胞为瘤细胞和B淋巴细胞的融合细胞；既具备增殖能力，又可在HAT培养基中进行S途径，B正确；

C；最终筛选出来的可能有多种杂交瘤细胞；分泌的可能不是同一种特异性抗体，还需进行进一步筛选，C错误；

D；仅考虑细胞的两两融合；在放入HAT培养基之前的融合细胞的培养液中，会有融合的B淋巴细胞—瘤细胞、融合的B淋巴细胞—B淋巴细胞、融合的瘤细胞—瘤细胞、未融合的B淋巴细胞、未融合的瘤细胞等多种形式的细胞，这几种形式的细胞均可进行D途径，D错误。

故选ACD。8、A:B:D【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题包括：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

【详解】

A；转基因生物具有某些特殊性质；他们在某地区的竞争能力较强，可能成为“外来入侵物种”，威胁生态系统中其他生物的存在，从而影响生态系统的稳定性，A正确；

B；转基因作物的基因可以通过花粉传播到田间近缘野生植物体内；该近缘物种在通过授粉会造成基因进一步扩散和污染，B正确；

C；即使目的基因来自自然界；培自出的转基因植物仍然可能会有潜在的安全性向题，C错误；

D；大面积种植转基因抗虫棉；有可能会导致棉铃虫群体中相关抗性基因频率增加，D正确。

故选ABD。9、A:C:D【分析】微生物常见的接种方法（稀释涂布平板法可用于微生物的计数）：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；平板划线无法得知稀释倍数；不能用于活菌计数，故统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是稀释涂布平板法，A错误；

B；除图中操作外；还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养，以验证培养基是否被杂菌污染，B正确；

C；由于当两个或多个细胞连在一起时；平板上显示的只是一个菌落，故培养基上的一个菌落可能来源于样品稀释液中的一个、甚至几个活菌，C错误；

D；由于菌落肉眼可见；故初步判断培养基上菌种的类型，可用肉眼观察菌体的形态特征，D错误。

故选ACD。10、B:D【分析】【分析】

我国科学家采用他们独创的一种方法—花粉管通道法；将Bt基因导入了棉花细胞。花粉管通道法有多种操作方式。例如，可以用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入子房中；可以在植物受粉后的一定时间内，剪去柱头，将DNA溶液滴加在花柱切面上，使目的基因借助花粉管通道进入胚囊。除此之外，将目的基因导入植物细胞常用的方法还有农杆菌转化法。

【详解】

A；根据表格信息；BamHI形成的黏性末端是-GATC-，NheI切割形成的粘性末端是-CTAG-，两者形成的是不同的黏性末端，A错误；

B；用EcoRI和HindⅢ切割质粒；用MunI和HindⅢ切割目的基因，能让目的基因定向插入质粒的启动子和终止子之间，B正确；

C；在目的基因和NheI的识别位点之间添加EcoRI识别位点；EcoRI会破坏目的基因，不能使用EcoRI，C错误；

D；花粉管萌发时；通过花粉管通道法可将重组基因导入胚囊，实现目的基因的导入，D正确。

故选BD。11、A:C:D【分析】【分析】

动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核；移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成为动物个体。

【详解】

A；克隆北极狼的供体细胞来自野生北极狼；卵母细胞来自发情期的母犬，因此性状由野生北极狼、发情期的母犬的基因共同决定，比格犬只是代孕母体，不提供遗传物质，A错误；

B；透明带下注射法不抽取供体细胞的细胞核；操作简单且对供体细胞核损伤小，同时注射的位置是卵母细胞外的透明带，然后诱导两个细胞融合，对卵母细胞的损伤小，B正确；

C；供体细胞注入卵母细胞透明带内后；还需要电融合法等诱导才能使供体细胞进入卵母细胞形成重构胚，C错误；

D；细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程是有丝分裂过程；而基因重组发生在减数分裂过程，D错误。

故选ACD。12、A:B【分析】【分析】

动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度。④气体环境：95%空气+5%CO2。

【详解】

A、动物细胞培养中，培养环境中需要O2，也需要CO2（用来维持培养液的pH）；A错误；

B；动物细胞培养不需要脱分化；植物细胞要经过脱分化才形成愈伤组织，B错误；

C；动物细胞培养中常用含糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清的液体培养基；C正确；

D；动物细胞培养过程中会出现接触抑制现象而停止分裂增殖；故培养瓶中的细胞培养到一定阶段后要用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖，D正确。

故选AB。13、A:C:D【分析】【分析】

分析题图：①表示反转录法获取目的基因的过程；②表示基因表达载体的构建过程；之后采用农杆菌转化法；将目的基因导入番茄组织块；最后采用植物组织培养技术，将导入目的基因的番茄组织细胞培养成抗冻番茄植株。基因表达载体通常由启动子；目的基因、终止子和标记基因构成，其中标记基因的作用是筛选重组质粒，利用农杆菌转化法能将质粒导入受体细胞。

【详解】

A；过程①是通过人工合成法获取的目的基因；由于真核生物体内的基因含有不能编码蛋白质的序列（内含子），导致逆转录合成的目的基因与原基因有较大的差异，因此人工合成的目的基因不能用于比目鱼基因组测序，A错误；

B；抗冻蛋白的11个氨基酸的重复序列重复次数越多；抗冻能力越强，并不是抗冻基因的编码区重复次数越多抗冻能力越强，抗冻基因编码区依次相连形成的新基因已不是原来的抗冻基因，因此不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白，B正确；

C；②是基因表达载体的构建过程；基因表达载体通常由启动子、目的基因、终止子和标记基因构成，其中标记基因的作用是筛选重组质粒，过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，可以通过DNA分子杂交或PCR技术检测受体细胞是否含有目的基因，C错误；

D；利用DNA探针技术检测目的基因是否导入到受体细胞；但表达的产物通常是蛋白质，可利用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否表达出来，D错误。

故选ACD。

【点睛】14、A:C【分析】【分析】

编码新冠病毒的S蛋白不具有感染性；但可以引起机体产生特异性免疫，腺病毒不会使人致病，可将克隆出来的编码新冠病毒S蛋白（介导新冠病毒感染细胞的成分）基因装入载体腺病毒，注入人体，进入人体细胞，表达出S蛋白，刺激人体产生针对新冠病毒的免疫应答。

【详解】

A；基因表达载体的构建是基因工程的核心；一个完整的基因表达载体至少包括目的基因（S蛋白基因）、启动子、终止子和标记基因等，A正确；

B；由于病毒需要寄生在细胞内；且S蛋白是在细胞内合成的，所以重组腺病毒疫苗能使人体产生体液免疫和细胞免疫，B错误；

C；重组腺病毒疫苗引发的体液免疫中有吞噬细胞（处理抗原）、T细胞（释放淋巴因子）的参与；C正确；

D；重组腺病毒疫苗引起免疫反应后相应淋巴细胞增多；细胞周期将变短，D错误。

故选AC。

【点睛】三、填空题(共5题，共10分)15、略

【解析】①.接种②.平板划线法③.稀释涂布平板法16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】直接分离人工合成反转录法化学合成法17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】80—100℃变性18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】组织单个细胞培养基生长和繁殖19、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。四、综合题(共4题，共28分)20、略

【分析】【分析】

实验室常用的灭菌方法：

（1）灼烧灭菌：将微生物的接种工具；如接种环；接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。

（2）干热灭菌：能耐高温的；需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管；培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。

（3）高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内；为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。

【详解】

（1）由三个假说分析可知；三个假说所涉及微生物的碳源是不同的，故①所说的“营养”指的最可能是碳源。

（2）配制牛肉膏蛋白胨培养基的步骤包括计算；称量、溶化、灭菌、倒平板。倒平板所用的培养皿和培养基所用的灭菌方法依次是干热灭菌、高压蒸汽灭菌。

（3）蛋白胨和牛肉膏来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质，通常用来作为培养基中的碳源和氮源。培养基a中已经添加有牛肉膏和蛋白胨，b培养基是为了排出依靠这类物质作为碳源存活的微生物，故b培养基中不能再添加这两类物质；故选AB。

（4）用上述a、b培养足够时间，菌落生长情况为a培养基上长出菌落，b培养基上不长菌落时；证明假说①正确。

（5）由题干信息可知，很少有微生物能将琼脂降解，从而成为配制固体培养基时常用的凝固剂之一，若要通过b与c上是否出现菌落作为观察指标；来判断该微生物是否能利用琼脂作为碳源，则只需要将琼脂换成无机（或不是有机物的）凝固剂即可。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的制作和不同成分对微生物生长的影响，意在考查考生的综合分析能力和信息获取能力。【解析】碳源溶化干热灭菌高压蒸汽灭菌A、Ba上有（或长出或出现）菌落，b上无（或不长或不出现）菌落将琼脂换成无机（或不是有机物的）凝固剂21、略

【分析】【分析】

1；单克隆抗体的制备时动物细胞融合技术的应用之一；此过程中需要先注射抗原，使生物体产生具有免疫能力的B淋巴细胞，再将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，并筛选出能产生特异性抗体和大量增殖的杂交瘤细胞，最后经过体内和体外培养获取单克隆抗体。

2；单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高；并可能大量制备的优点。

【详解】

（1）根据题意“新型冠状病毒可通过表面的刺突蛋白（S蛋白）与人呼吸道粘膜上皮细胞的ACE2受体结合；单克隆抗体可阻断病毒的粘附或入侵”可知，制备抗新冠病毒的单克隆抗体，首先需要给小鼠注射纯化的S蛋白，以获得可生产抗S蛋白的抗体的B淋巴细胞。以小鼠的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤：取小鼠脾脏剪碎，用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶，或机械的方法）处理使其分散成单个细胞，再加入培养液制成单细胞悬液。

（2）用灭活的病毒诱导免疫的淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后；在HAT培养基把杂交瘤细胞选出来，之后还需要进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得能分泌单一抗体的杂交瘤细胞。

（3）该杂交瘤细