2025年外研版选修1生物上册月考试卷含答案

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A.若五种物质为蛋白质，则用凝胶色谱柱分离时，甲的移动速度最快B.将样品装入透析袋中透析12h，若分子乙保留在袋内，则分子甲也保留在袋内C.将样品以2000r/min的速度离心10min，若分子戊存在于沉淀中，则分子丙也存在于沉淀中D.若五种物质为蛋白质，用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则分子甲和分子戊形成的电泳带相距最近2、下列依次表示倒平板、接种的位置，以及划线法接种的路径示意图，其中错误的是()A.B.C.D.3、科学家以PLRV（马铃薯卷叶病毒）感染的马铃薯试管苗为实验材料；对不同大小的茎尖超低温处理后，用植物组织培养技术进行再生培养。选取培养18周的20棵植株进行检测并获得病毒保存率，实验结果如下表所示。下列叙述正确的是（）

。病毒感染类型茎尖大小/（mm）病毒保存率/（%）PLRV0．50（0/20）1．535（7/20）35（7/20）注：括号内数字表示检测阳性样本量/检测总样本量。A.超低温处理后再生培养时培养基中应加人有机碳源和激素等B.茎尖脱分化培养获得愈伤组织包裹人工种皮可获得人工种子C.该技术能克服不同生物远缘杂交不亲和障碍从而培育出新品种D.1．5mm的茎尖超低温脱毒效果优于0．5mm的茎尖超低温脱毒效果4、下列关于高中生物实验方法和选材的表述，正确的是（）A.可用斐林试剂鉴定橙汁中还原糖的含量B.稀释涂布平板法可用于测定土壤中细菌、霉菌的种类和数量C.哺乳动物血液和植物菜花都不宜作为DNA粗提取的实验材料D.洋葱鳞片叶内表皮没有颜色干扰，适宜用于观察染色体数目5、能够测定样品活菌数的方法是A.稀释涂布平板法B.重量法C.直接计数法D.比浊法6、如图表示在最适温度条件下探究果胶酶用量的实验结果；叙述正确的是（）

A.在BC段限制反应速率的因素是温度、pH或酶催化反应的时间等B.在AB段增加酶的用量或反应物的浓度，可以明显加快反应速率C.增加酶的用量，反应速率没有增加可能是苹果泥用量少导致的D.在该实验给定的条件下，果胶酶的最佳用量是C点对应的值7、在植物组织培养过程中，容易获得突变体的主要原因是（）A.培养的细胞一直处于不断的分生状态B.培养基营养丰富，易于植物生长C.纺锤丝的形成容易受抑制D.DNA复制容易受抑制8、下面说法不正确的是（）A.凝胶色谱分离法分离蛋白质时，利用凝胶改变蛋白质分子通过的路径B.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程C.洗涤红细胞时，离心所采用的方法是低速长时间离心D.在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变9、下列用蒸馏法提取玫瑰精油的有关叙述中，正确的是()A.蒸馏温度高，水和玫瑰精油挥发得就容易，所以在高温下蒸馏效果好一些B.在适当的温度下延长蒸馏时间，可提高玫瑰精油的品质C.在乳浊液分层的时候，为了有利于水和油层的分开，向乳浊液中加无水硫酸钠D.蒸馏之前应用石灰水对实验材料浸泡10h以上，以提高出油率评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)10、图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作；图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图。下列叙述正确的是。

A.刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液B.图1中X溶液为CaCl2溶液，其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠C.图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触D.图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中11、尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。下列有关土壤中尿素分解菌的分离和培养的叙述，正确的是（）A.培养基中加入尿素作为唯一碳源，该培养基是鉴别培养基B.微生物培养常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法C.细菌合成的脲酶能将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高D.若上述培养基被杂菌污染，则培养基上会有多种杂菌菌落出现12、在制作发酵食品的学生实践中，控制发酵条件至关重要。下列相关叙述错误的有（）A.泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气B.制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，制作泡菜的盐水要淹没全部菜料C.葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后，可直接通入无菌空气制作葡萄醋D.果酒与果醋发酵时温度宜控制在18-25℃，泡菜发酵时温度宜控制在30-35℃13、关于实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作，下列说法错误的是（）A.配制培养基、倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行B.倒平板时，打开培养皿盖，倒放于超净实验台上，将锥形瓶中的培养基倒入培养皿C.倒入培养基后立即将平板倒置，防止培养基污染D.用平板划线法划完线后，要在培养皿皿底上做好标记14、黄粉虫可以吞食；降解塑料；利用黄粉虫肠道微生物对白色污染进行生物降解，是一种绿色环保的处理工艺。下图是从黄粉虫肠道中分离、纯化目的微生物的过程，相关叙述正确的是（）

A.富集培养基中含有酵母膏、蛋白胨、琼脂等，蛋白胨能提供所需的碳源、氮源和维生素B.分离、纯化目的微生物的选择培养基中需加入PVC塑料膜作为唯一碳源C.将转接至固体斜面培养基上的不同菌落置于4℃的冰箱长期保存D.与传统填埋、焚烧相比，黄粉虫肠道微生物对白色污染的降解不会造成二次污染15、厨余垃圾是指居民日常生活及食品加工、饮食服务、单位供餐等活动中产生的垃圾。废液中的淀粉、蛋白质、脂肪等微溶性物质，易腐烂变质，滋生病原微生物等。若处理不当，可能造成严重的污染。圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌组合可以将有机厨余垃圾迅速分解成水和二氧化碳，减轻环境污染。为制备分解有机厨余垃圾的微生物菌剂，某科研小组对两菌种进行了最佳接种量比的探究实验，并得出下图的实验结果。下面叙述错误的是（）

A.巨大芽孢杆菌生长过程中需要氮源，圆褐固氮菌生长过程中不需要氮源B.要统计活菌数量可采用平板划线法和稀释涂布平板法C.将1mL菌液稀释100倍，在3个平板上分别接0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、39和36。据此可得出每升菌液中的活菌数为3．9×105D.处理该类厨余垃圾废液，两菌种的最佳接种量比为1：116、科研人员研究了不同洗涤浓度（单位体积的水中加入洗衣粉的量）的两种加酶洗衣粉的去污力（%）；结果如下表。下列说法错误的是（）

。洗涤浓度。

去污力（%）

洗衣粉品种。

0.2%0.4%0.6%0.8%加酶洗衣粉甲71.578.980.079.9加酶洗衣粉乙69.580.480.680.5A.加酶洗衣粉中的酶制剂是通过基因工程生产出来的，并使用了包埋法固定B.若洗涤的是相同污布，则两种加酶洗衣粉的洗涤效果相似C.相同pH时，加酶洗衣粉洗涤效果比普通洗衣粉好D.所有加酶洗衣粉最适洗涤浓度都为0．4%，浓度过大是不必要的17、下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述中不正确的是（）A.果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同B.制作果酒和果醋时都应用70％的酒精对发酵瓶消毒C.变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落D.果酒和果醋的制作可用同一装置，但需控制不同发酵条件18、下列关于植物组织培养的叙述，错误的是（）A.进行植物组织培养时，操作者的双手和工作台要进行灭菌处理B.用二倍体植株进行花药离体培养后得到的植株高度不育C.植物组织培养过程中发生了基因重组和染色体数目变异D.外植体在诱导形成愈伤组织期间，每天必须进行适当时间和强度的光照评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)19、蛋白质的分离。

分离过程中，仔细观察________在洗脱过程中的移动情况。如果色谱柱装填成功、分离操作正确，能清楚地看到红色区带狭窄、平整、均匀一致地随着洗脱液缓慢移动；如果红色区带歪曲、散乱、变宽，说明分离效果不好，与______________有关。20、纯度鉴定——SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳。

判断________的蛋白质是否达到要求，需要进行蛋白质纯度的鉴定。鉴定方法中使用最多的是____________。21、蛋白质的提取和分离一般分为四步：________、粗分离、______和________。22、回答下列与生物技术有关的问题：

（1）提取玫瑰精油常用_________________法；而橘皮精油常用____________法提取。

（2）胡萝卜素是_________色结晶；易溶于___________，其提取可用萃取法，其萃取的效率主要取决于______________。

（3）蛋白质的提取和分离一般要经过样品处理、___________、_________以及纯度鉴定四个步骤。分离血红蛋白时用_________法。23、植物芳香油不仅挥发性强，而且易溶____________，如石油醚、酒精、乙醚和戊烷等。不适于用水蒸气蒸馏的原料，可以考虑使用____________法。24、（1）微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和____，平板划线前要对接种环进行灼烧，原因是为了__________。

（2）用培养基培养微生物时，培养基中应有碳源、________、__________和_______等营养，同时还必须满足微生物生长对特殊营养物质、__________、__________的要求。

（3）用唯一碳源培养基分离微生物的主要操作步骤为①原料称量、溶解②调节pH③分装、包扎④灭菌⑤倒平板⑥__________⑦培养。25、默写：制作果酒和果醋实验流程示意图_________26、将豆腐块平放在笼屉内，将笼屉中的温度控制在___________________C。27、透析袋一般是用硝酸纤维素（又称玻璃纸）制成的，能使______自由进出，而将______保留在袋内。透析可以去除样品中相对分子量较____的杂质，或用于更换样品的______。评卷人得分四、实验题(共2题，共20分)28、某化工厂的污水池中；含有一种有害的；难于降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)实验的主要步骤如下图所示。请分析回答问题。

(1)接种前需要对培养基及培养皿等进行灭菌；常用的灭菌方法是____________。培养基中加入化合物A的目的是筛选________。

(2)实验需要振荡培养；由此推测“目的菌”的代谢类型是____________。

(3)培养若干天后；应选择培养瓶中化合物A含量________的培养液。

(4)转为固体培养时；为获得单菌落进行继续筛选，常采用平板划线法或____________法，接种后，应将培养皿________(填“正放”或“倒置”)

(5)下列有关平板划线操作的叙述，错误的是（____）。A．在操作的第一步以及每次划线之前都要将接种环放在火焰上灼烧B．将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液C．蘸取菌液和划线要在火焰旁进行D．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连(6)实验结束时，使用过的培养基应该进行________处理后，才能倒掉。29、某同学进行苹果汁制作实验；工艺如图所示。

(1)图中用KMn04的溶液浸泡苹果的目的是________。黑曲霉提取液中含有的___可水解果胶，从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过____方式将酶固定化，酶被固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去____。

(2)实验中，操作流程A和B的先后顺序为______。在苹果汁澄清过程中，应关闭的流速调节阀是_____。为使果胶完全水解，应将流速调______。

(3)试验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被___________使用。评卷人得分五、非选择题(共3题，共27分)30、利用不同微生物的发酵作用来制作果酒；果醋、腐乳和酸奶等食品的历史悠久；遍布民间，一般称作传统发酵技术。根据传统发酵技术的相关知识，回答以下问题。

（1）在泡菜腌制的过程中；要注意控制腌制的时间；_______和_________；最后要向坛盖边沿的水槽中注满水，这一操作的目的是保证坛内乳酸菌发酵所需的__________________。泡菜坛内有时会长一层白膜，这层白膜是由于__________的繁殖形成的。用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是________。

（2）在制作腐乳过程中；所需的微生物来源于____________；而现代的腐乳生产是在_____________条件下，将优良的菌种直接接种在豆腐上，这样可以避免其他菌种的污染。腐乳在酿造后期发酵中添加适量酒液的目的是________________(填序号）。

①防腐②与有机酸结合形成脂③利于后期发酵④满足饮酒需要。

（3）在蓝莓果酒制作过程中，在变酸的酒的表面观察到的菌膜是由__________大量繁殖而形成的，其可在缺少糖源时将乙醇变为乙醛，然后变为醋酸。31、乳酸菌等微生物与我们生活息息相关。请回答下列相关问题。

（1）若要纯化培养乳酸菌，在配制牛肉膏蛋白胨固体培养基时，一般还要加入琼脂，它是一种从红藻中提取的多糖，加入琼脂作为_______。在制作此培养基时还要满足微生物对特殊营养物质的需求，例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加_______，制备培养基的操作顺序是：计算→称量→_______→倒平板，培养基中的(NH4)2CO3是否能为乳酸菌提供碳源并说明原因___________________________。

（2）纯化微生物时；可采用___________________两种最常用的方法进行接种。为了能鉴别乳酸菌菌落，往往在配制培养基时加入碳酸钙，推测其原因是______________________________________。有些鉴别培养基可在培养基中加入指示剂，例如分解尿素的细菌在添加_____指示剂的培养基上会显示出特定的颜色；在鉴定大肠杆菌时在培养基中加入_______。制作泡菜时，要检测亚硝酸盐的含量，其原理为在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生_____反应，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成______色染料。纯化后的菌可在-20℃长期保存时，应采用______的方法对菌种进行长期保藏。

（3）若甲同学选取一定体积的乳酸菌菌液，进行梯度稀释，若将103倍的稀释样液接种在固体培养基上培养一段时间后，统计三个平板上菌落数分别是200、180、220。如果需要据此计算出乳酸菌的密度，还需要知道的一个重要数据是_______。另一同学乙涂布了4个平板，数值为177,193,185；其中一个空白对照平板出现了12个菌落，乙同学将173（185-12）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法是否正确，并说明你的原因。___________________________________________。32、腐乳是我国独有的发酵食品；由于具有高营养价值，在国际上也备受推崇。某科研机构研究了腐乳生产过程中不同浓度的食盐对腐乳中氨基酸含量和pH的影响，其中部分数据如下。

（1）腐乳生产过程有多种微生物的参与；其中起主要作用的是________________，从细胞结构角度分析应属于______________生物。

（2）腐乳制备过程中；加盐可以__________________，使豆腐块变硬。

（3）由图可知；后期发酵过程中，随着时间的延长，腐乳中游离氨基酸的含量将_____________。这是由于发酵过程中____将豆腐中的蛋白质分解。

（4）由表可知；后期发酵到60天时，盐度为___________的腐乳已经腐败，说明______________。

（5）中国健康管理协会提倡“少油低盐”的健康生活方式，综合上述研究结果，腐乳生产过程中应该控制盐度在______________________左右。评卷人得分六、综合题(共4题，共8分)33、没吃完的西瓜会盖上保鲜膜放入冰箱储藏。研究表明；有时候盖上保鮮膜储藏的西瓜中的细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。某生物研究小组用保鲜膜保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液，研究细菌的种类和数量。

（1）配制的培养基一般都含有水；无机盐、____________。常采用____________法对培养基进行灭菌；灭菌前需将pH调至________________________。

（2）为了避免培养基污染；在培养过程中，需将平板____________（填正置或倒置）。为了观察浸出液中微生物的种类和数量，采用____________法接种。接种时，实验操作应在酒精灯火焰附近进行的原因是__________________。

（3）将1mL西瓜浸出液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为26、28和27。据此可得出每升西瓜浸出液中的活菌数为____________，这种方法的统计结果比活菌的实际数目____________________________________。34、血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分；具有重要的运输功能。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题：

（1）将实验流程补充完整：A为__________，B为__________。凝胶色谱法是根据_________而达到分离蛋白质的有效方法。

（2）洗涤红细胞的目的是去除_________，洗涤干净的标志是_________。在实验流程A中发挥作用的试剂有__________。

（3）在洗脱过程中，如果红色区带不均匀，可能的原因有_______。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对血红蛋白样品进行纯度鉴定时，凝胶上出现________条电泳条带说明血红蛋白分子纯度为100%。35、一；加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。某同学通过实验比较了几种洗衣粉的去渍效果（“+”越多表示去渍效果越好）；实验结果见下表。

。加酶洗衣粉A加酶洗衣粉B加酶洗衣粉C无酶洗衣粉（对照）血渍++++++++油渍++++++++根据实验结果回答下列问题：

（1）加酶洗衣粉A中添加的酶是_____，加酶洗衣粉C中添加的酶是_____。

（2）表中不宜用于洗涤蚕丝织物的洗衣粉有_________，原因是________。

（3）相对于无酶洗衣粉，加酶洗衣粉去渍效果好的原因是________________。

（4）关于酶的应用，除上面提到的加酶洗衣粉外，固定化酶也在生产实践中得到应用，如固定化葡萄糖异构酶已经用于高果糖浆生产。固定化酶技术是指___________。固定化酶在生产实践中应用的优点是_____________（答出1点即可）。

二；回答下列问题。

（5）玫瑰精油可用玫瑰花瓣为原料，采用水蒸气蒸馏法提取。水蒸气蒸馏法的原理是_______________________。在进行蒸馏时，冷凝管的进水口比出水口_____（填“高”或“低”）。蒸馏收集到的乳浊液是玫瑰精油和水的混合物，要得到玫瑰精油，需要向乳浊液中加入NaCl，其目的是____________________；得到的油层还需要加入无水Na2SO4，其目的是___________________。

（6）某同学在通过发酵制作果酒时，发现在制作原料中添加一定量的糖，可以提高酒精度，原因是_______________。在家庭以葡萄为原料制作葡萄酒时，可以不添加酵母菌，原因是：________________。在制作葡萄酒的过程中，如果密封不严混入空气，发酵液会变酸，可能的原因是______________。36、资料1：据史料记载；早在公元5世纪魏代古籍中，就有腐乳生产工艺的记载，到了明代我国就大量加工腐乳，而今腐乳已成长为具现代化工艺的发酵食品。清代医学家赵学敏编著的《本草纲目拾遗》中记述：“豆腐又名菽乳，以豆腐腌过酒糟或酱制者，味咸甘心。”

资料2：手机现在已经成为人们离不开的通讯和娱乐工具；据传言手机屏幕上的细菌比马桶按钮上的还要多。某生物兴趣小组为了验证这一传言是否正确，进行如图所示实验并展示调查的结果。

请回答下列问题。

据资料1：

（1）腐乳制作中有多种微生物参与发酵，其中主要是___________，其生长的适宜温度为___________℃。

（2）“味咸”是因为加了盐，加盐的目的除了调味以外，还有___________和___________的作用；酒的含量一般控制在12%左右，目的是可以抑制微生物的生长，同时使腐乳___________。

（3）“甘心”是指在多种微生物的协同作用下，普通豆腐转变成风味独特的腐乳，其原因是毛霉等微生物产生的___________将豆腐中的蛋白质分解成___________；将脂肪水解为脂肪酸和甘油。

据资料2：

（4）该实验需制备培养基，培养基的营养成分一般包括水、碳源、___________等。据图，两实验组均采用___________法接种，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的___________，该方法测定的活菌数比实际值偏___________，原因是___________。

（5）在接种前需要检测培养基是否被污染，对于固体培养基常采用的检测方法是，将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间，___________，则培养基未被污染；反之，则培养基被污染。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、C【分析】【分析】

1；凝胶色谱法分离蛋白质的原理：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法；相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离。

2；电泳法是利用待测样品中各种分子带电性质的差异和分子本身的大小、形状不同；使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离或鉴定。

【详解】

分子甲的相对分子质量最小，会进入凝胶内部通道而移动速度慢，A错误；若分子乙留在透析袋内，说明其相对分子质量比较大，分子甲比分子乙相对分子质量小，甲可能不在袋内，B错误；分子丙比分子戊的相对分子质量大，若将样品以2000r/min的速度离心10min；分子戊在沉淀中，则丙也一定在沉淀中，C正确；SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中的样品，其电泳迁移率完全取决于分子的大小，相对分子质量相差越大，形成的电泳带相距越远，故分子甲和分子丙形成的电泳带相距最远，D错误。故选C。

【点睛】

​本题考查蛋白质的提取和分离中用到的实验技术，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的试剂及试剂的作用、实验步骤等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。2、D【分析】【分析】

平板划线法是通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作；将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面，其操作步骤是：①将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红；②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞；③将菌种试管口通过火焰达到消灭试管口杂菌的目的；④将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种；⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞；⑥将皿盖打开一条缝隙，把接种环伸入平板内划3～5条平行线，盖上皿盖，不要划破培养基；⑦灼烧接种环，冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线，重复上述过程，完成三；四、五区域内划线，注意不要将第五区的划线与第一区划线相连；⑧将平板倒置放在培养箱中培养。

【详解】

A.倒平板时；用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，防止空气中的杂菌污染，A正确；

B.接种时；左手将培养皿打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，B正确；

C.划线时在要从上一次划线的末端开始进行；让菌种来源于上一次划线末端，C正确；

D.在划线法接种时，第二次划线应从第一次划线的线末开始，图中没有让接种环在固体培养基表面连续划线的操作，D错误。3、A【分析】【分析】

植物组织培养技术。

(1)原理：植物细胞具有全能性。

(2)过程。

【详解】A、超低温处理后再生培养所用的技术手段是植物组织培养，其培养基中需要加入有机碳源和植物激素，A正确；B；人工种子是以植物组织培养的胚状体；不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包裹得到的种子，B错误；

C；该技术是植物组织培养；能保持亲本的优良性状，不能克服远缘杂交不亲和的障碍，C错误；

D；根据图表数据可知；0．5mm的茎尖超低温脱毒效果优于1．5mm的茎尖，D错误。

故选A。4、B【分析】【分析】

1；斐林试剂是检测还原糖的试剂；它与还原糖反应颜色由蓝色变为砖红色。

2；稀释涂布平板法可用来测定土壤微生物的种类和数量；平板划线法可以用于菌种的纯化和分离。

3；DNA粗提取实验材料；选用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大。

【详解】

A；橙汁的颜色会干扰沉淀量的判断；A错误；

B；稀释涂布法通过菌落的数量来代表活菌数；通过菌落的形态特征来鉴别其种类，B正确；

C；哺乳动物血液中的成熟红细胞没有细胞核和线粒体；而白细胞数量少，均不适宜做提取DNA的材料；菜花是植物细胞含有大量的DNA，可以作提取DNA的植物材料，但在提取前需先去除细胞壁，C错误；

D；洋葱内表皮细胞不分裂；不会形成染色体，D错误。

故选B。5、A【分析】【分析】

直接计数法是利用特定的细菌计数板,在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量,但不能区分死菌与活菌。

重量法是用于微生物生长测定的一种方法,有湿重和干重,测蛋白质和DNA含量反映细胞的物质量。

比浊法是在一定范围内,菌悬液中细胞浓度与浑浊度成正比,即与光密度成正比,菌越多,光密度越大。

稀释涂布平板法是活菌在适宜培养基和良好生长条件下通过生长形成菌落,此法又称活菌计数法。

【详解】

据分析，利用稀释涂布平板法能够将细菌个体从固体培养基上分离出来，并可以繁殖形成菌落，可根据菌落数测定出测定样品活菌数，故稀释涂布平板法可用于测定样品活菌数，A正确。6、C【分析】【分析】

分析曲线图可知；自变量是酶的用量，因变量是酶促反应速率．OB段表示随着酶用量的增加，反应速率加快；BC段表示随着酶用量的增加，反应速率不再加快。

【详解】

A；该实验已经是在最适温度下测得的；在BC段限制反应速率的因素不会是温度，A错误；

B；在AB段限制反应速率的因素是酶的用量；增加酶的用量可以加快酶促反应速率，但增加反应物浓度不可以，B错误；

C；增加酶的用量；反应速率没有增加可能是苹果泥用量少导致的，C正确；

D；在该实验给定的条件下；果胶酶的最佳用量是B点对应的值，D错误。

故选C。7、A【分析】【分析】

间期DNA复制时由于DNA解旋；使DNA稳定性降低，容易发生基因突变，所以基因突变一般发生在DNA复制时期。

【详解】

在植物组织培养过程中；由于培养细胞一直处于不断的分生状态，容易受到培养条件和外界压力（如射线；化学物质等）的影响而产生突变，因此容易获得突变体。培养基营养丰富，易于植物生长，不能体现容易获得突变体，纺锤丝的形成容易受抑制，则细胞的分裂受抑制，不能体现容易获得突变体，DNA复制容易受抑制，细胞不容易发生突变，综上分析，A正确，BCD错误。

故选A。8、C【分析】【分析】

1；凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法；相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离。

2；电泳技术就是在电场的作用下；利用待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，从而达到对样品进行分离、鉴定或提纯的目的。

3；红细胞的洗涤过程应该用生理盐水洗涤；不能用蒸馏水洗涤，离心分离红细胞时采用低速短时间。

【详解】

A；由分析可知；凝胶色谱分离法分离蛋白质时，利用凝胶改变蛋白质分子通过的路径，从而使相对分子质量不同的蛋白质得以分离，A正确；

B；电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程；从而达到对样品进行分离、鉴定或提纯的目的，B正确；

C；洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白；采集的血样要及时采用低速短时间离心分离，C错误；

D；一定范围内；缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变，D正确。

故选C。

【点睛】9、A【分析】试题分析：蒸馏温度高；水和玫瑰精油挥发就容易些会使玫瑰精油效果更好，故A正确。延长蒸馏时间应严格控制温度，故B错误。在乳浊液分层时应加入氯化钠溶液，故C错误。压榨法用石灰水浸泡，蒸馏不需要，故D错误。

考点：本题考查植物精油的提取相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。二、多选题(共9题，共18分)10、B:C:D【分析】【分析】

制作固定化酵母细胞的实验步骤：1、酵母细胞的活化；2、配制0.05mol/L的CaCl2溶液；3；配制海藻酸钠溶液（该实验成败的关键步骤）；4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合；5、固定化酵母细胞。

【详解】

A；溶化的海藻酸钠应冷却至室温后与活化的酵母菌混合；A错误；

B、海藻酸钠与酵母菌混合液应滴入CaCl2溶液中；以制备凝胶珠，B正确；

C；搅拌可使酵母菌与培养液充分接触；有利于发酵的顺利进行，C正确；

D；凝胶珠用蒸馏水冲洗2～3次后；再转移到发酵装置中，D正确。

故选BCD。11、B:C【分析】【分析】

本题是对用于微生物培养的培养基；选择培养基的选择作用、培养液中的成分、常用的接种方法等相关知识的综合性考查；回忆微生物培养的培养基、选择培养基的选择作用、培养液中的成分、常用的接种方法的具体操作和目的，然后结合问题进行解答。

【详解】

A；培养基中加入尿素作为唯一碳源；该培养基是选择培养基，A错误；

B；微生物培养常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法；B正确；

C；细菌合成的脲酶能将尿素分解成氨；氨会使培养基的碱性增强，pH升高，可加入酚红指示剂进行检测，C正确；

D；由于培养基中加入尿素作为唯一碳源；其他不分解尿素的微生物不能生长，故不会有多种杂菌长出来，D错误。

故选BC。12、A:C:D【分析】【分析】

参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。

【详解】

A；乳酸菌属于厌氧菌；开盖放气会影响乳酸菌发酵，因此不能开盖放气，A错误；

B；制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3；是为了发酵初期让酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，同时为了防止发酵过程中发酵液溢出，制作泡菜的盐水要淹没全部菜料，以保证乳酸菌进行无氧呼吸，B正确；

C；醋酸菌为需氧菌；且发酵温度高于果酒的发酵温度，因此制作好葡萄酒后，除通入无菌空气，还需要适当提高发酵装置的温度，C错误；

D；果酒与果醋发酵时温度宜控制在18-25℃；果醋发酵时温度宜控制在30-35℃，泡菜的制作温度低于30-35℃，D错误。

故选ACD。13、A:B:C【分析】【分析】

制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：（1）计算：依据是培养基配方的比例。（2）称量：牛肉膏比较黏稠；可同称量纸一块称取。牛肉膏和蛋白胨易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖。（3）溶化：牛肉膏和称量纸+水加热取出称量纸→加蛋白胨和氯化钠→加琼脂（注意：要不断用玻璃棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）→补加蒸馏水至100mL。（4）调pH。（5）灭菌：培养基采用高压蒸汽灭菌，培养皿采用干热灭菌。（6）倒平板。

【详解】

A；倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行；而配培养基不需要在酒精灯的火焰旁进行，A错误；

B；倒平板时；打开培养皿盖，将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，然后倒放于超净实验台上，B错误；

C；倒入培养基后立即盖上培养皿；冷却后将平板倒过来放置，C错误；

D；用平板划线法划完线后；要在培养皿皿底上做好标记，D正确。

故选ABC。14、B:D【分析】【分析】

1；分离菌株的思路:

(1)自然界中目的菌株的筛选:

①依据：根据它对生存环境的要求；到相应的环境中去寻找。

②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的TaqDNA聚合酶；就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。

(2)实验室中目的菌株的筛选:

①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养；温度、pH等）；同时抑制或阻止其他微生物生长。

2；统计菌落数目的方法：

(1)稀释涂布平板法（间接）：

①当样品的稀释庋足够高时；培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。

②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。

(2)利用显微镜直接计数。

【详解】

A；富集培养基为液体培养基；不应含有琼脂，A错误；

B；分离、纯化能降解PVC塑料膜的微生物的选择培养基中需加入PVC塑料膜作为唯一碳源；B正确；

C；转接至固体斜面培养基上的不同菌落置于4℃的冰箱临时保存；对于需要长期保存的菌种，可用甘油管藏的方法，C错误；

D；如果对白色污染进行传统填埋、焚烧容易造成二次污染；黄粉虫肠道微生物对白色污染的降解不会，D正确。

故选BD。15、A:B:C:D【分析】【分析】

微生物接种的方法很多；最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。若要对微生物进行取样计数，接种方法只能是稀释涂布平板法。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

【详解】

A；微生物的生长需要碳源、氮源、无机盐等物质；只是有些固氮菌由于能利用氮气作为氮源，不需要在培养基中添加氮源，A错误；

B；平板划线法不能用于计数；B错误；

C、将1mL菌液稀释100倍，在3个平板上分别接0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、39和36。据此可得出每升菌液中的活菌数为（42+39+36）÷3÷0．1×100×1000=3．9×107；C错误；

D；根据图示可知；两菌种的接种量比为1:1时比两菌种的接种量比为2:1时效果好，但由于该实验设置的两菌种的接种量比例的组数过少，所以无法判断处理该类厨余垃圾废液的两菌种的最佳接种量比，D错误。

故选ABCD。16、A:C:D【分析】【分析】

分析题干和表格信息可知；该实验的目的是探究不同酶；不同洗涤浓度对洗涤效果的影响，实验的自变量是酶的种类和浓度，因变量是洗涤效果，洗涤的温度、洗涤时间、洗涤方式、洗涤材料和污物的种类及污染程度等属于无关变量，无关变量应该保持一致且适宜。

【详解】

A；加酶洗衣粉是将通过基因工程生产的酶通过特殊物质层层包裹；与洗衣粉的其他成分隔离，遇水后包裹层很快溶解，释放出来的酶迅速发挥催化作用，并没有运用到固定化酶技术，因为酶未固定在不溶于水的载体上，也不能重复利用，A错误；

B；分析表格中的信息可知；相同浓度条件下，两种洗衣粉的洗涤效果无显著差异，因此若洗涤的是相同污布，两种加酶洗衣粉的洗涤效果相似，B正确；

C；pH会影响酶的活性；pH过高或过低时都会使酶变性失活，因此相同pH时，加酶洗衣粉洗涤效果不一定好于普通洗衣粉，C错误；

D；该表格显示甲、乙两种洗衣粉的最适洗涤浓度相同；都为0.6%左右，但是不能说明所有加酶洗衣粉最适洗涤浓度都相同，D错误。

故选ACD。

【点睛】17、A:C【分析】【分析】

果酒；果醋制作的注意事项。

(1)材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄；榨汁前先将葡萄冲洗，并除去枝梗，以防葡萄汁流失及污染。冲洗以洗去灰尘为目的，且不要太干净，以防洗去野生型酵母菌。

(2)防止发酵液被污染的方法①榨汁机要清洗干净并晾干。②发酵瓶要洗净并用体积分数为70%的酒精消毒；或用洗洁精洗涤。③装入葡萄汁后要封闭充气口。

【详解】

A；果酒发酵的菌种是酵母菌；其代谢类型为异养兼性厌氧型，而果醋发酵的菌种是醋酸菌，其代谢类型是异养需氧型，A符合题意；

B；制作果酒和果醋时均需要对发酵瓶消毒；均可用体积分数为70%的酒精进行消毒，B不符合题意；

C；在变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的；液体表面不能形成菌落，C符合题意；

D；果酒和果醋的制作可用同一装置；但需控制不同发酵条件，果酒制作需要无氧环境，适宜温度为18～25℃，而果醋制作需要有氧环境，适宜温度为30～35℃，D不符合题意。

故选AC。18、A:C:D【分析】【分析】

植物组织培养概念（广义）又叫离体培养；指从植物体分离出符合需要的组织。器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养概念（狭义）指用植物各部分组织，如形成层；薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。

【详解】

A；植物组织培养需要在严格的无菌和无毒条件下进行；因此要用酒精等对操作员的手、操作的操作台、植物组织培养的外植体等进行消毒处理；用于植物组织培养的培养基需要进行高压蒸汽灭菌处理，A错误；

B；用二倍体植株花药离体培养获得单倍体植株；高度不育，B正确；

C；植物组织培养过程中；细胞通过有丝分裂方式增殖，不会发生基因重组，C错误；

D；植物细胞组织培养时现脱分化形成愈伤组织；这段时间要无菌、恒温、避光，D错误。

故选ACD。三、填空题(共9题，共18分)19、略

【分析】【详解】

蛋白质的分离过程中，仔细观察红色区带在洗脱过程中的移动情况。如果色谱柱装填成功、分离操作正确，能清楚地看到红色区带狭窄、平整、均匀一致地随着洗脱液缓慢移动；如果红色区带歪曲、散乱、变宽，说明分离效果不好，与凝胶色谱柱的装填有关。【解析】红色区带凝胶色谱柱的装填20、略

【分析】【详解】

血红蛋白的提取和分离一般可分为四步：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。通过样品处理收集到血红蛋白溶液，通过粗分离除去小分子杂质，通过纯化除去相对分子质量大的蛋白质，判断纯化的蛋白质是否达到要求，常通过SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。【解析】纯化SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳21、略

【分析】【详解】

血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步，包括：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液，即样品的处理；再经过透析去除分子量较小的杂质，即样品的粗分离；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化；最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。【解析】样品处理纯化纯度鉴定22、略

【分析】【分析】

植物芳香油的提取方法：蒸馏法；压榨法和萃取等。

（1）蒸馏法：芳香油具有挥发性；把含有芳香油的花；叶等放入水中加热，水蒸气能将挥发性较强的芳香油携带出来，形成油水混合物；冷却后，油水混合物又会重新分成油层和水层，除去水层便得到芳香油，这种提取方法叫蒸馏法。根据蒸馏过程中原料放置的位置的标准，将水蒸气蒸馏法划分为水中蒸馏、水上蒸馏和水气蒸馏。

（2）萃取法：这种方法需要将新鲜的香花等植物材料浸泡在乙醚；石油醚等低沸点的有机溶剂中；是芳香油充分溶解，然后蒸去低沸点的溶剂，剩下的就是芳香油。

（3）压榨法：在橘子；柠檬、甜橙等植物的果皮中；芳香油的含量较多，可以用机械压力直接榨出，这种提取方法叫压榨法。

植物芳香油的蒸馏提取过程：浸泡；加热蒸馏、乳浊液的分离。

【详解】

（1）由于玫瑰精油化学性质稳定；难溶于水，易溶于有机溶剂，且能随水蒸气一同蒸馏，因此常用蒸馏法提取；而橘皮精油常用压榨法提取，这是由于加热会造成原料焦糊；橘皮精油的有效成分水解。

（2）胡萝卜素是橘黄色结晶；易溶于有机溶剂，萃取法提取胡萝卜素时，萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和用量。

（3）蛋内质的提取和分离一般要经过样品处理；粗分离、纯化以及纯度鉴定四个步骤。分离血红蛋白时用凝胶色谱法。

【点睛】

本题主要考查植物有效成分的提取的以及蛋白质的提取和分离，意在强化学生对相关知识的识记与理解，考生对蒸馏法、压榨法和萃取法提取植物有效成分的过程的识记是解题的关键。【解析】蒸馏压榨橘黄有机溶剂萃取剂的性质和用量粗分离纯化凝胶色谱法23、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】有机溶剂萃取24、略

【分析】【分析】

1；微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐；此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

2．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基基本过程为：计算；称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板五个步骤。

【详解】

（1）微生物接种的方法很多；最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线前要对接种环进行灼烧，目的是为了杀灭接种环上的微生物（灭菌）。

（2）微生物培养基一般都含有水；碳源、氮源、无机盐；此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

（3）用唯一碳源培养基分离微生物的主要操作步骤为①原料称量；溶解②调pH③分装、包扎④灭菌⑤倒平板⑥接种⑦培养。

【点睛】

本题考查了微生物分离与培养的有关知识，要求考生能够识记培养基的成分和培养条件，掌握微生物分离与纯化的方法与步骤，再结合所学知识准确答题。【解析】稀释涂布平板法灭菌氮源水无机盐pH氧气接种25、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】26、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】15～1827、略

【分析】【详解】

血红蛋白溶液装入透析袋中透析12小时。透析袋一般是用硝酸纤维素（又称玻璃纸）制成的，能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内。透析可以去除样品中相对分子量较小的杂质，或用于更换样品的缓冲液。【解析】小分子大分子小缓冲液四、实验题(共2题，共20分)28、略

【分析】【分析】

接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞；并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体--菌落。

在每次划线前后都要对接种环进行灭菌；接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，接种时划线操作是在火焰边进行。

阅读题干和题图可知；本题是选择和分离降解的有机化合物A的菌种的过程，根据问题涉及的具体内容梳理相关知识点，然后分析综合进行解答。

【详解】

（1）由题意可知；本实验是分离出降解的有机化合物A的菌种。培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌，培养基中加入化合物A的目的是筛选降解的有机化合物A的目的菌种。

（2）实验需要振荡培养；由此推测“目的菌”的代谢类型是异养需氧型，振荡培养的目的是增加溶解氧，使营养物质充分利用。

（3）由于“目的菌”有降解的有机化合物A的作用；所以培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量减少的培养基。

（4）转为固体培养时；常采用平板划线法或稀释涂布平板法进行接种，分离获得单菌落．接种后，为防止皿盖上凝集的水珠落入培养基造成污染，应将培养皿倒置。

（5）在操作的第一步以及每次划线之前都要将接种环放在火焰上灼烧；A正确；接种环必须冷却后，才可以伸入菌液中蘸取一环液，否则会烧伤或烧死微生物，B正确；蘸取菌液和划线要在火焰旁进行，防止空气中的杂菌，C正确；划线时要避免最后一区的划线与第一区线连。因为最后一区是细菌最稀少的，而第一区是细菌最致密的，如果连在一起则有可能影响单个菌落的分离效果，D错误。

（6）实验结束后要对使用过的器具；培养基进行灭菌处理；其目的是防止杂菌释放到环境中造成环境污染。

【点睛】

关键：1、筛选能降解化合物A的目的菌株需要配置只含化合物A作为唯一碳源的选择培养基；2、分离纯化目的菌株的常用方法有两种——平板划线法或稀释涂布平板法，其中这两种方法的操作方法以及设计的无菌操作技术是重点。【解析】高压蒸汽灭菌法目的菌异养需氧型减少稀释涂布平板倒置D灭菌29、略

【分析】【分析】

果胶是植物细胞壁及胞间层的主要组成成分之一；不仅影响出汁率，还会使果汁变的浑浊。果胶酶可以水解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得更容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。

把酶固定在不溶于水的载体上；使酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以反复利用。

【详解】

（1）用KMn04的溶液对苹果进行消毒处理。黑曲霉提取液中含有的果胶酶可水解果胶成可溶性的半乳糖醛酸；从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过吸附法将酶固定化，为了除去未被固定的酶，酶被固定后用蒸馏水洗涤固定化柱。

（2）实验中；先提取果胶酶再进行果汁的制作，防止苹果汁时间过久变质，故应先进行流程A，再进行流程B。在苹果汁澄清过程中，应关闭的阀1，避免提取液进入固定化柱中降低了果汁质量。为使果胶完全水解，应将流速调慢，延长反应时间。

(3)试验后；将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被重复使用。

【点睛】

固定化细胞常用包埋法，固定化酶常用物理吸附法或化学结合法。【解析】消毒果胶酶吸附未被固定的酶等AB阀1慢重复五、非选择题(共3题，共27分)30、略

【分析】试题分析：本题考查果酒和果醋的制作；腐乳的制作、酸奶的制作等知识；要求学生识记果酒、果醋、腐乳和酸奶制作的原理及过程，能结合所学的知识准确答题。果酒制作的原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃，因此酒精发酵的条件是无氧且温度控制在18～25℃，酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色，因此可以用酸性重铬酸钾溶液检测发酵过程是否产生酒精；果醋制作的原理是在氧气充足的条件下，醋酸菌将葡萄糖或酒精转化成醋酸，醋酸菌是好氧菌，最适宜生长的温度范围是30-35℃，因此醋酸发酵时应该持续通入氧气并将温度控制在30-35℃；腐乳制作过程中多种微生物参与了发酵，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质转化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶将脂肪转化成甘油和脂肪酸；酸奶制作的原理是乳酸发酵。据此答题。

（1）在泡菜腌制的过程中；要注意控制腌制的时间；温度和食盐的用量；最后要向坛盖边沿的水槽中注满水，这样可以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。泡菜坛内有时会长一层白膜，这层白膜是由于产膜酵母的繁殖形成的。用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少。

（2）在制作腐乳过程中；所需的微生物来源于空气中的毛霉孢子；而现代的腐乳生产是在无菌条件下，将优良的菌种直接接种在豆腐上，这样可以避免其他菌种的污染。腐乳在酿造后期发酵中添加适量酒液的目的是①防腐，②与有机酸结合形成脂，③利于后期发酵。

（3）在蓝莓果酒制作过程中，在变酸的酒的表面观察到的菌膜是由醋酸菌大量繁殖而形成的，其可在缺少糖源时将乙醇变为乙醛，然后变为醋酸。【解析】温度食盐的用量无氧环境产膜酵母先增加后减少空气中的毛霉孢子无菌①②③醋酸菌31、略

【分析】【分析】

1；微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐；此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求，对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。

2；微生物常见的接种的方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

（1）在配制牛肉膏蛋白胨固体培养基时，一般还要加入琼脂，其目的是作为凝固剂；乳酸杆菌的培养基中需要加入维生素；制备培养基的操作顺序是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板；异养生物只能利用含碳有机物，因此(NH4)2CO3是不能为乳酸菌提供碳源。

（2）微生物常见的接种的方法有①平板划线法；②稀释涂布平板法；乳酸呈酸性；乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，形成透明圈，故在配制培养基时加入碳酸钙就能鉴别乳酸菌菌落；分解尿素的细菌在添加酚红的指示剂的培养基上会显示出特定的颜色；在鉴定大肠杆菌时在培养基中加入伊红-美蓝，呈现黑色菌落的即为大肠杆菌；亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。纯化后的菌可在-20℃长期保存时，应采用甘油管藏的方法对菌种进行长期保藏。

（3）统计出平板上的菌落数量后还需知道接种时所用样液的体积；两者相除才能求出密度；乙同学一个空白对照平板出现了12个菌落，空白培养基上出现菌落说明被污染需重新制作培养并计数，用来计数是不正确的。

【点睛】

易错点：亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料；纯化后的菌可在-20℃长期保存时，采用的是甘油管藏的方法对菌种进行保藏。【解析】凝固剂维生素溶化→灭菌不能，乳酸菌为异养生物只能利用含碳有机物平板划线法或稀释涂布平板法乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，形成透明圈酚红伊红-美蓝重氮化玫瑰红甘油管藏接种时所用样液的体积不正确，空白培养基上出现菌落说明被污染需重新制作培养并计数32、略

【分析】【分析】

乳的制作过程主要是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。

1；让豆腐上长出毛霉：将豆腐块平放在笼屉内；将笼屉中的温度控制在15～18℃，并保持在一定的湿度，约48h后，毛霉开始生长，3d之后菌丝生长旺盛，5d后豆腐块表面布满菌丝．豆腐块上生长的毛霉来自空气中的毛霉孢子。

2；加盐腌制：将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中；同时逐层加盐，随着层数的加高而增高盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些；加盐研制的时间约为8d左右，加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期的制作过程中不会过早酥烂，同时，盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。

3；加卤汤装瓶：卤汤直接关系到腐乳的色、香、味；卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的；卤汤中的酒可以选用料酒、黄酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在12%左右；加酒可以抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味；香辛料种类很多，如胡椒、花椒、八角、桂皮、姜、辣椒等；香辛料可以调制腐乳的风味，也具有防腐杀菌的作用，可据个人口味配置卤汤。

4；密封腌制。

【详解】

（1）腐乳制作时；起主要作用的微生物是毛霉。毛霉具有核膜包裹的细胞核，属于真核生物。

（2）腐乳制备过程中；加盐可以析出豆腐中的水，使豆腐块变硬。

（3）发酵过程中；毛霉中的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质水解，故氨基酸含量上升，蛋白质含量下降。

（4）发酵到60天时；盐度为5%的腐乳中PH已经下降，说明腐乳已经腐败；说明盐度太低，容易导致其他微生物的生长，从而使腐乳腐败。

（5）盐度太小容易腐败；盐度太大氨基酸含量低，因此最好控制在8%左右。

【点睛】

本题考查腐乳的制作过程，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。【解析】毛霉真核析出豆腐中的水上升蛋白酶5%盐浓度过低，不足以抑制微生物的生长，导致腐败变质8%六、综合题(共4题，共8分)33、略

【分析】【分析】

（1）培养基的成分主要包括水；无机盐、碳源、氮源；培养微生物时还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求；

（2）微生物常见的接种的方法：①平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养；可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。②稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。

【详解】

（1）培养基的成分一般包括水；碳源、氮源和无机盐,常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌；灭菌前需将pH调至中性或微碱性。

（2）培养过程中；为了避免培养基被冷凝水污染，需要将平板倒置。将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落，因此为了确定浸出液中细菌的种类和数量，一般采用稀释涂布法接种。为了避免环境中微生物的污染，接种时应该在酒精灯火焰附近进行。

（3）3个平板上的菌落数分别为26、28和27，平均值为27，每升西瓜浸出液中的活菌数=27×10×100×1000=2.7×107；当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。

【点睛】

本题考查了微生物分离与培养的有关知识，要求考生能够识记培养基的概念、成分，识记灭菌方法，能够根据题干所给信息估算活菌的数量，再结合所学知识准确答题。【解析】碳源和氮源高压蒸汽灭菌中性或微碱性倒置稀释涂布平板避免环境中微生物的污染2.7×107低34、略

【分析】【分析】

蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理；粗分离、纯化、纯度鉴定。样品处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放和分离血红蛋白溶液；通过透析对血红蛋白溶液进行粗分离；透析的原理是透析袋能使小分子自由进出而大分子则保留在袋内，从而除去分子量较小的杂质；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量魇杂质蛋白除去，从而对样品进一步纯合，最后SDS—聚丙烯酰凝胶电泳进行纯度鉴定。在B过程中加入物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的是模拟生物体内的生理环境（保持体外pH和体内一致、保持蛋白质的正常结构、维持洗脱所需的压力等合理答案均可）；如果红色区带均匀一致的移动，说明色谱柱制作成功。

【详解】

（1）样品处理过程为：红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液→透析；所以A表示血红蛋白的释放，B表示样品的加入和洗脱。凝胶色谱法的原理是分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快，分子小的进入多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢，从而根据相对分子质量的大小达到分离蛋白质的有效方法。

（2）用红细胞的等渗溶液洗涤红细胞可以除去血浆蛋白；由于蛋白质的胶体性质，若洗涤次数过少，难以除去血浆蛋白；离心速度过高和时间过长会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀。达不到分离红细胞的效果。若离心后的上清液中没有黄色，说明洗涤干净。将红细胞置于蒸馏水中可使红细胞吸水涨破，释放出血红蛋白；甲苯可以溶解细胞膜，以利于血红蛋白的释放，所以实验流程A中发挥作用的试剂有蒸馏水