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文档简介
…………○…………内…………○…○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页,总=sectionpages22页第=page11页,总=sectionpages11页2025年沪教版选修3生物下册阶段测试试卷含答案考试试卷考试范围:全部知识点;考试时间:120分钟学校:______姓名:______班级:______考号:______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共5题,共10分)1、下列关于病毒在生物和医学领域应用的叙述,不正确的是A.促进动物细胞融合B.诱导原生质体脱分化C.作为抗原制备疫苗D.作为目的基因的载体2、下列有关生物技术安全性和伦理问题的叙述,正确的是A.目前对于转基因生物安全性的争论主要在食品安全和环境安全两个方面B.当今社会的普遍观点是不反对生殖性克隆人实验,但反对转基因C.反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿D.生物武器是用致病微生物、生化毒剂、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力3、下列关于现代生物技术的叙述中正确的是A.哺乳动物囊胚时期的细胞尚未分化,所有细胞都有发育的全能性B.利用基因工程技术可获得转基因植物,该过程中会发生有丝分裂、细胞分化和减数分裂C.核移植技术涉及的原理是细胞的全能性D.利用基因治疗技术,不能修复细胞中的病变基因4、下列关于哺乳动物体内受精的叙述,正确的是()A.在精子形成过程中,只有细胞核和线粒体保留下来B.受精一般是在输卵管内完成的,而胚胎的发育一直是在子宫内进行的C.动物卵细胞形成过程始于初情期后D.精子接触卵细胞膜时,会发生透明带反应5、胎牛血清(FBS)是天然的培养基;能够在多种动物卵母细胞的成熟过程中提供足够的营养物质,起到非常好的促进效果。下表是后期胚胎培养液(CR2后液)中添加不同浓度FBS对牛核移植胚胎发育的影响情况,下列叙述错误的是()
。组别培养液卵裂率/%囊胚率/%对照组CR2前液+CR2后液59.17±1.3413.53±2.04试验组1CR2前液+10%FBSCR2后液62.14+1.7813.78±2.77试验组2CR2前液+20%FBSCR2后液68.95±4.1526.09±2.20试验组3CR2前液+30%FBSCR2后液62.02±8.648.78±3.20A.囊胚中内细胞团发育成胎儿的各种组织,且囊胚期已发生分化B.促进核移植胚胎发育的最适FBS浓度浓度约为20%C.从卵巢采集的卵母细胞需在体外培育成熟D.添加不同浓度的FBS对卵裂率和囊胚率均有促进作用评卷人得分二、多选题(共6题,共12分)6、下列关于采用胚胎工程技术实现某良种肉用牛快速繁殖的叙述,不正确的是A.采取激素注射等方法对良种母牛作超数排卵处理B.体外培养发育到原肠胚期的胚胎即可进行移植C.使用免疫抑制剂以避免代孕牛对植入胚胎的排斥反应D.利用胚胎分割技术,同卵多胎较同卵双胎成功率要低7、小鼠的某种上皮细胞与某种淋巴细胞体外培养时,细胞周期基本相同,但上皮细胞在培养时,呈现扁平不规则多角形,且粘附在培养瓶内壁上;而该淋巴细胞则常常悬浮在培养液中。下列有关叙述错误的是()A.使用合成培养基培养动物细胞通常不添加天然成分B.培养基内加入适量的抗生素可以形成无病毒的培养环境C.培养消化道上皮细胞更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象D.相同次数分瓶培养所获得的两者细胞数目完全相同8、目前,检测是否感染新冠病毒(RNA病毒)的方法主要有核酸检测、抗体检测、抗原检测三大类。下列相关叙述正确的是()A.新冠病毒只能寄生在活细胞中,在细胞外液中不能检测到新冠病毒B.核酸检测是利用相应的生物技术对新冠病毒的遗传物质RNA进行检测C.新冠病毒核酸检测试剂应针对新冠病毒不易发生突变的保守序列进行设计D.若某人的血液中检测出新冠病毒抗体,则此人一定有新冠病毒感染史9、下列有关生殖细胞的发生和受精过程的叙述正确的是()A.雄原核形成的同时,卵子完成减数第二次分裂B.透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障C.精子与卵细胞膜相互融合,精子入卵D.卵子是从动物的初情期开始,经过MⅠ和MⅡ两次连续分裂形成的10、小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞;制备流程如下图所示。下列有关叙述错误的是()
A.为获得更多的囊胚,可注射孕激素促进雌鼠产生更多的卵子B.胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养C.用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞D.细胞a、b均是胚胎干细胞的良好来源,可在饲养层上分裂、分化11、为了推进乡村振兴,科技人员在某村引进赤松茸,推广“稻菇轮作”露地栽培模式,如下图所示,相关叙述正确的是()
A.当地农田生态系统中引进的赤松茸属于分解者,可以实现该生态系统中能量的多级利用B.该模式沿袭了“无废弃农业”的传统,菌糠和秸秆由废弃物变为了生产原料C.该模式充分利用了水稻秸秆中的能量,提高了能量传递效率D.该模式既让土地休养生息,又增加了生态效益和经济效益,遵循了生态工程中的循环原理和整体原理评卷人得分三、填空题(共8题,共16分)12、生物学家利用基因工程技术通过生物反应器生产人的血清蛋白。请根据相关知识回答下列问题:
(1)在基因工程的操作中的“分子手术刀”是_______________________________
(2)在基因工程的操作中的“分子缝合针”是________
(3)基因工程中最常用的运载体是______
(4)人的基因在牛体内能表达,说明人和牛______13、自然条件下;奶牛的繁殖率非常低,一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体,其主要步骤如图所示。回答下列问题:
(1)从供体奶牛获得的精子,需对其进行___________处理才具有受精能力。
(2)通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞,为使其超数排卵常使用____________激素处理;采集到卵母细胞后,在体外将其培养到___________期;使其成熟。
(3)步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛,步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。
(4)进行步骤乙时,受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________,这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。14、基因治疗:基因治疗是指用正常基因_______或______患者细胞中有缺陷的基因,从而达到治疗疾病的目的。15、根据课本知识填空:
(1)神经元的轴突末梢经过多次分支;最后每个小枝末端膨大,呈杯状或球状,叫做________。
(2)抗体可以与病原体结合;从而抑制病原体的繁殖或___________________________。
(3)要检测目的基因是否转录出了mRNA;可以用____________________________做探针。
(4)所谓人工种子就是以植物组织培养得到的________________________(写出2个即可)等为材料;经过人工薄膜包装得到的种子。
(5)胰岛素能促进组织细胞加速_______________葡萄糖。16、今年年初;爆发了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明,新型冠状病毒通过其表面的S-蛋白与人细胞膜上的ACE2相互识别,感染人的呼吸道上皮细胞。请分析回答问题:
(1)新型冠状病毒表面的S-蛋白作为_________剌激淋巴细胞,使机体产生_________性免疫反应,人细胞膜上的ACE2的化学本质是_________。
(2)感染病毒后,免疫系统对肺细胞强烈攻击引发肺炎,此时可通过适度使用_________对病人进行治疗;使其免疫功能下降,以避免肺部严重受损。
(3)科学家采集了感染新型冠状病毒并已康复的甲、乙两人的血液,检测相关抗体的水平,结果如图1。据此分析,应选取_________的B淋巴细胞用以制备单克隆抗体(单抗)。
(4)将制备的多种单抗分别与病毒混合,然后检测病毒对宿主细胞的感染率,结果如图2。据此分析,对病毒抑制效果最好的单抗是__________号。
(5)患者康复后一段时间,若再次受到该病毒的攻击,机体内相应的__________细胞迅速增殖分化,产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。17、下图表示哺乳动物精子和卵细胞发生和成熟的示意图。请据图回答下列问题:
(1)③过程中精子头部的顶体是由__________发育来的;④过程在__________内完成。
(2)在④过程中发生顶体反应;释放顶体酶,溶解卵丘细胞之间的物质和透明带。为了阻止多精入卵,会发生__________反应和__________反应。
(3)精子的发生开始的时期是__________;雌性动物卵泡的形成的时期是__________。
(4)初级卵母细胞进行Ⅰ过程是在__________时期完成的,Ⅱ过程是在__________过程中完成的。18、请写出基因工程的概念:_________________。请写出胚胎移植的概念:_____________________。请分别写出植物组织培养和动物细胞培养的原理_________。19、自然条件下;奶牛的繁殖率非常低,一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体,其主要步骤如图所示。回答下列问题:
(1)从供体奶牛获得的精子,需对其进行___________处理才具有受精能力。
(2)通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞,为使其超数排卵常使用____________激素处理;采集到卵母细胞后,在体外将其培养到___________期;使其成熟。
(3)步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛,步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。
(4)进行步骤乙时,受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________,这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。评卷人得分四、判断题(共5题,共45分)20、一般情况下一个卵细胞只能由一个精子发生融合形成受精卵()A.正确B.错误21、精子入卵后形成雄原核;同时卵子完成减数分裂Ⅱ,排出第二极体后,形成雌原核()A.正确B.错误22、受精包括受精前的准备阶段和受精阶段,在自然状态下,哺乳动物的受精在子宫内完成。(选择性必修3P56)()A.正确B.错误23、下图表示哺乳动物发育过程的几个阶段;请判断下列题的叙述是否正确?
(_____)(1)从A到C的过程中有机物的含量减少。
(_____)(2)A;B时期胚胎中的细胞都是全能细胞。
(_____)(3)胚胎移植必须使用处于B或C时期的胚胎。
(_____)(4)图示过程细胞通过有丝分裂增殖,遗传物质可能会发生改变。A.正确B.错误24、在生态工程建设中,只能遵循“先污染、破坏、再治理”的发展思路______A.正确B.错误评卷人得分五、非选择题(共3题,共9分)25、如图甲表示质粒pBR322上含有青霉素抗性基因(XR)和四环素抗性基因(YR)。其中,XR内部含有限制酶KasI识别序列,YR内部含有限制酶FseI;HpaII识别序列。如图乙表示生产人抗凝血酶Ⅲ的过程;利用人工合成的人抗凝血酶Ⅲ对治疗抗凝血酶缺失症有显著效果。
(1)图甲中质粒pBR322的本质是_______;限制酶KasI;FseI、HpaII的作用是________。
(2)图乙中;人抗凝血酶Ⅲ基因称为______,获取该基因后常用______技术进行扩增。
(3)质粒pBR322作为运输基因的载体;除了要具有一个或多个酶切位点;标记基因外,还要能够______________。
(4)人抗凝血酶Ⅲ基因与质粒pBR322结合后构建的基因表达载体导入受体细胞的方法是_____。这一过程中通常以受精卵作为受体细胞的原因是__________________。
(5)目的基因是否表达,还需要检测和鉴定。检测转基因羊是否产生人抗凝血酶Ⅲ的方法是___________________。26、口蹄疫是口蹄疫病毒引起的一种动物性传染病;目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。疫苗的主要成分是病毒的一种结构蛋白VP1。科学家尝试利用转基因番茄生产口蹄疫疫苗。请回答下列问题:
⑴Ti质粒是农杆菌中的一种质粒;把目的基因插入Ti质粒的___________中,可实现目的基因转入受体细胞。
⑵构建含VP1基因的重组Ti质粒;还需要在质粒上插入_________,便于目的基因的表达。
⑶口蹄疫病毒的遗传物质为RNA;则获得能够重组到质粒上的VP1基因必须用到___________酶。如要获得大量的该VP1基因,可利用________技术进行扩增,扩增产物可以与___________(填试剂名)在沸水浴条件下呈蓝色。
⑷通常用BamHI、HindIII两种酶分别切割目的基因和质粒;获得不同黏性末端构建表达载体的原因是(写出一条即可)_____________________________________;用含__________的培养基能筛选出含重组Ti质粒的农杆菌。
⑸VP1基因转入普通番茄细胞内并成功实现表达的过程,在基因工程中称为______。我们可以使用____________技术检测目的基因是否插入了受体细胞的染色体DNA上。27、科研人员将某种荧光蛋白(GFP)基因导入金鱼的受精卵中来进行有关研究;请回答:
(1)以上过程的GFP基因称为______基因;该基因可由mRNA________形成。
(2)已知含GFP基因的DNA两端分别有EcoRI与SmaI切割位点;切割下来的GFP基因含有____末端和______末端。
(3)质粒用EcoRI;SmaI切割之后;需用___________酶将GFP基因与其连接形成重组质粒。
(4)构建重组质粒时;可用GFP基因代替抗氨苄青霉素基因作为_____________。
(5)GFP基因重组质粒导入受精卵通常用__________法,受精卵经过卵裂、桑堪胚、______、原肠胚等阶段发育为胚胎。紫外光下观察,可以看到转基因鱼发出荧光的部位存在差异,其原因是_________________________。评卷人得分六、综合题(共4题,共16分)28、近年来烟草叶绿体基因工程在提高光合效率;抗性和品质等方面取得了研究进展。下图是将拟南芥果糖1;6-二磷酸醛缩酶基因(简称“醛缩酶基因”)转入烟草叶绿体基因组的部分流程示意图,请据图回答下列问题:
(I)图1中;利用PCR技术扩增拟南芥醛缩酶基因时,应选用的引物是____________。图2重组质粒中未标注出的必需元件还有___________,构建该重组质粒用的限制性核酸内切酶有__________。
(2)将拟南芥醛缩酶基因导入烟草叶绿体基因组时;一般将含有目的基因的质粒包裹在金粉上,通过轰击进入叶绿体中,这种方法称为_____________。叶绿体基因组中存在基因区和基因间隔区,应将目的基因导入叶绿体基因组中的基因间隔区,其原因是_______________________________。
(3)检测目的基因是否成功导入受体细胞的方法是_____________;该项技术用到的基因探针的制作方法是:在________________________________上用放射性同位素等做标记。
(4)若拟南芥醛缩酶基因在烟草叶绿体中成功表达,其活性是野生型烟草的1.4~1.9倍,在高浓度下可达2.2倍,说明拟南芥醛缩酶通过_________________来提高光合效率。29、科研人员通过基因工程实现了β-甘露聚糖酶基因在猪肠道野生酵母菌中的表达;使原来不能被猪利用的粗纤维在猪肠道内被分解成可直接吸收的单糖。下图为构建工程菌的部分过程,其中介导序列能引导载体整合到酵母菌的染色体DNA上。请据图回答:
(1)①过程中需要的工具酶是___________,其最适温度的范围一般是___________(a.55~60℃,b.70~75℃,c.90~95℃)。②③过程中的工具酶作用的化学键是___________。
(2)①过程从野生酵母菌染色体DNA中PCR扩增介导序列时,科研人员设计了如下一对引物:和其中下划线部分序列的设计依据是___________,方框部分序列的设计目的是___________。
(3)若BamhI酶切的DNA末端与BglⅡ酶切的DNA末端可以被DNA连接酶连接,原因是___________,连接的部位,这两种酶___________(填“都能”、“都不能”或“只有一种能”)切开,原因是___________。
(4)若使用EcoRⅠ和SalI酶对重组表达载体进行完全酶切并鉴定,可得到___________种DNA片段。30、他莫昔芬(Tamoxifen)是治疗乳腺癌的常用药物,然而长期服用容易引起耐药性。牛樟芝(AC)是一种传统的药用蘑菇提取物,科研人员用AC处理Tamoxifen抗性的乳腺癌细胞(MCF-7tamR);发现其可以缓解Tamoxifen的耐药性,相关研究如下,请回答问题:
(1)乳腺癌发生的根本原因是外界致癌因子引起了________突变。
(2)科研人员在不同条件下培养MCF-7tamR细胞;分别于24h;48h测定细胞增长率,结果如图1所示。
①体外培养MCF-7tamR细胞时,培养基中除水、糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子外,通常还需要加入______和抗生素;传代培养时,贴满瓶壁的细胞需要用_____等处理后分瓶继续培养。
②分析图1结果,依据__________,可知AC和Tamoxifen联合使用对于MCF-7tamR细胞的治疗效果最好。
(3)Skp2和RhoA是乳腺癌细胞中两种关键酶,前者抑制细胞凋亡,后者影响细胞代谢。两种酶是基因通过___________过程指导合成的蛋白质。
(4)为进一步探明AC的作用机理,研究人员从100μg/mlAC处理24h的MCF-7tamR细胞中获取mRNA;逆转录得到cDNA后,特异性扩增skp2和RhoA基因的片段,进行电泳检测。结果如图2所示。
①β-actin基因在不同细胞中转录水平相对稳定,且表达量较高,在实验中可消除______等无关变量对实验结果的影响;常用作参照基因。
②由实验结果可知,AC抑制了细胞中Skp2、RhoA基因的_______过程。据此推测AC的作用机制可能是__________。31、酵母菌的维生素;蛋白质含量高;可生产食品和药品等。科学家将大麦细胞的LTP1基因导入啤酒酵母菌中,获得的啤酒酵母菌可产生LTP1蛋白,并酿出泡沫丰富的啤酒。基本操作过程如图所示,请据图回答下列问题。
(1)该技术定向改变了酵母菌的性状;这种可遗传变异属于________。
(2)从大麦细胞中可直接分离获得LTP1基因;还可采用________方法获得目的基因。
(3)假如载体被切割后,得到的分子末端序列为AATTCG,则能与该载体连接的LTP1基因分子末端是__________。。A.GCTTAAB.TAATTCCC.CTTTAGD.AAATCT(4)切割完成后;采用DNA链接酶将载体与LTP1基因连接,连接后得到的DNA分子称为________________。
(5)此操作中可以分别用含有青霉素;四环素的两种选择培养基进行筛选;则有C进入的酵母菌在选择培养基上的生长情况是______________________________________________________。
(6)除了看啤酒泡沫丰富与否外;还可用什么方法检测LTP1基因在啤酒酵母菌中是否表达?
_____________________________________________________。参考答案一、选择题(共5题,共10分)1、B【分析】【分析】
促进植物细胞融合的方法:物理法(离心;振动、电刺激等)和化学法(聚乙二醇(PEG));促进动物细胞融合的方法:物理法、化学法(同植物)以及生物法(灭活病毒等)。
运载体:常用的运载体有质粒;噬菌体的衍生物、动植物病毒.作为运载体必须具备的条件:①要具有限制酶的切割位点;②要有标记基因(如抗性基因);以便于重组后重组子的筛选③能在宿主细胞中稳定存在并复制;④是安全的,对受体细胞无害,而且要易从供体细胞分离出来。
【详解】
促进动物细胞融合的方法:物理法、化学法(同植物)以及生物法(灭活病毒等),A正确;病毒不能诱导原生质体脱分化;B错误;灭活的病毒作为抗原制备疫苗,C正确;常用的运载体有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒,故病毒可作为目的基因的载体,D正确;故选B。2、C【分析】【详解】
A;目前对转基因生物安全性的争论主要是食物安全和环境安全;另外还有生物安全问题,A错误;
B;当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验;特别是生殖性克隆,但不反对治疗性克隆,不反对转基因,B错误;
C;试管婴儿可以设计婴儿的性别;反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿,C正确;
D;生物武器是指有意识的利用微生物、毒素、昆虫侵袭敌人的军队、人口、农作物或者牲畜等目标;以达到战争目的一类武器,干扰素为淋巴因子,并非生物武器,D错误.
故选C。3、D【分析】【分析】
【详解】
哺乳动物囊胚时期的细胞已分化;不都具有全能性,A错;
利用基因工程技术可获得转基因植物;该过程中会发生有丝分裂;细胞分化,没有减数分裂,B错;
核移植技术涉及的原理是细胞核的全能性;不是细胞全能性,C错;
基因治疗是把正常基因导入病人体内,使该基因的表达产物发挥功能,达到治疗疾病目的,没有修复细胞的病变基因,D正确。4、D【分析】1;精细胞变形形成精子的过程:细胞核→精子头的主要部分;高尔基体→头部的顶体;中心体→精子的尾;线粒体→线粒体鞘(尾的基部);细胞内其他物质→原生质滴(最后脱落)。
2;受精一般是在输卵管内完成的;卵子的减数第二次分裂发生于受精时。
3;受精过程为:顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带(透明带反应)→卵细胞膜反应(卵黄膜封闭作用)→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失;雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。
【详解】
A;在精子形成过程中;细胞核、线粒体、中心体、高尔基体都保留下来,A错误;
B;受精一般是在输卵管内完成的;而胚胎的早期发育是在输卵管中进行的,后在子宫中进行,B错误;
C;动物卵细胞的形成是从胎儿时期开始的;雄性动物精子开始产生的时期是初情期,C错误;
D;精子接触卵细胞膜时;会发生透明带反应,防止多精入卵和多精受精的发生,D正确。
故选D。
【点睛】5、D【分析】【分析】
表格分析:该实验的自变量为不同浓度FBS;因变量为卵裂率;囊胚率,数据显示,随着FBS浓度的增加,卵裂率和囊胚率均呈先上升后下降的趋势,并且浓度升高到一定程度会抑制囊胚的发育。
【详解】
A;囊胚中内细胞团将来发育成成熟胚胎的各种组织;其中的滋养层细胞将来发育成胎盘和胎膜,显然囊胚期已发生分化,A正确;
B;根据表中数据可知;添加20%FBS对促进核移植胚胎发育有较好的作用,B正确;
C;由于卵原细胞的减数第一次发生在排卵前后;因此从卵巢采集的卵母细胞需在体外培育成熟,C正确;
D;表格中数据显示;30%FBS的浓度对囊胚率具有抑制作用,D错误。
故选D。
【点睛】二、多选题(共6题,共12分)6、B:C【分析】【分析】
胚胎移植的基本程序主要包括:①对供;受体的选择和处理(选择遗传特性和生产性能优秀的供体;有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理,用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理);②配种或人工授精;③对胚胎的收集、检查、培养或保存(对胚胎进行质量检查,此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段);④对胚胎进行移植;⑤移植后的检查。
【详解】
A.采取注射促性腺激素等方法;对良种母牛作超数排卵处理,A正确;
B.体外培养发育到桑椹胚或囊胚的胚胎进行移植;B错误;
C.受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应;不需要注射免疫抑制剂,C错误;
D.利用胚胎分割技术;同卵双胎较同卵多胎成功率更高,D正确。
故选:BC。7、A:B:D【分析】【分析】
细胞培养是指在体外模拟体内环境(无菌;适宜温度、酸碱度和一定营养条件等);使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。细胞培养也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。
【详解】
A;动物细胞培养应在无毒、无菌的环境下进行;由合成培养基提供各种营养成分,但通常还需要添加血清、血浆等天然成分,A错误;
B;抗生素具有抑菌或杀菌作用;但对病毒无用,培养基内加入适量的抗生素不能形成无病毒的培养环境,B错误;
C;消化道上皮细胞是单层柱状上皮细胞;培养消化道上皮细胞更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象,C正确;
D;细胞培养时会出现贴壁生长和接触抑制现象;如果要传代培养,就应该用胰蛋白酶处理分散成单个细胞后分瓶培养,相同次数分瓶培养所获得的两者细胞数目不一定相同,D错误。
故选ABD。8、B:C【分析】【分析】
注射疫苗;引起人体的免疫反应,在体内产生抗体和记忆细胞,进而获得了对该抗原的抵抗能力,因为记忆细胞能存活时间长,所以人可以保持较长时间的免疫力。
【详解】
A;病毒寄生在活细胞内;但病毒可以存在于细胞外液中,A错误;
B;新冠病毒是RNA病毒;遗传物质是RNA,核酸检测是利用相应的生物技术对新冠病毒的遗传物质RNA进行检测,B正确;
C;新冠病毒核酸检测试剂应针对新冠病毒不容易发生突变的保守序列进行设计;C正确;
D;注射疫苗后;人体内会产生相应的抗体,因此,血液中检测出新冠病毒抗体的个体不一定有新冠病毒感染史,D错误。
故选BC。9、A:B:C【分析】【分析】
在受精作用过程中;精子头部的顶体首先释放顶体酶,发生顶体反应;然后精子穿越放射冠和透明带,此时透明带发生透明带反应,这是防止多精入卵的第一道屏障;接着精子进入卵黄膜,此时会发生卵黄膜封闭作用;此时卵细胞才真正完成减数分裂,并释放第二极体;精子的细胞核和卵细胞的细胞核分别形成雄原核和雌原核,即雌;雄原核的形成;最后核膜消失,雌、雄原核融合,标志着受精作用的完成。
【详解】
A;雄原核形成与卵子完成减数第二次分裂是同时进行的;A正确;
B;精子触及卵黄膜的瞬间;发生透明带反应,阻止其他精子进入,是防止多精入卵受精的第一道屏障,B正确;
C;精子的细胞膜与卵黄膜融合后;精子入卵,C正确;
D;卵子的发生开始于胎儿期性别分化之后;减数第一次分裂和减数第二次分裂是不连续的,D错误。
故选ABC。
【点睛】10、A:C:D【分析】【分析】
囊胚期胚胎分化为了内细胞团和滋养层;内细胞团细胞具有全能性,可以诱导分化为各种类型的细胞。
【详解】
A;为获得更多的囊胚;可注射促性腺激素促进雌鼠产生更多的卵子,A错误;
B、胚胎干细胞和诱导出的各种动物细胞都需在CO2培养箱中进行培养;B正确;
C;用胰蛋白酶将细胞a周围的胶原蛋白水解后;而不是将膜蛋白水解,可获得分散的胚胎干细胞,C错误;
D、细胞a是内细胞团细胞,是胚胎干细胞的良好来源,细胞b是滋养层细胞已经不是具有全能性的胚胎干细胞了;将胚胎干细胞培养在饲养层上,只能分裂不能分化,D错误。
故选ACD。11、A:B:D【分析】【分析】
生态农业是指运用生态学原理;在环境与经济协调发展的思想指导下,应用现代科学技术建立起来的多层次多功能的综合农业生产体系,生态系统中能量多级利用和物质循环再生是生态农业的一条基本原理。
【详解】
A;当地农田生态系统中引进的赤松茸是异养生物;属于真菌,是分解者,可以实现该生态系统中能量的多级利用,A正确;
B;该模式沿袭了“无废弃物农业”的传统;遵循物质循环再生原理,菌糠和秸秆由废弃物变为了生产原料,实现了物质的循环利用,B正确;
C;该模式充分利用了秸秆中的能量;从而提高能量的利用率,但不能提高能量的传递效率,C错误;
D;该模式既让土地休养生息;在确保土地的肥力的同时又增加了生态效益和经济效益,D正确。
故选ABD。三、填空题(共8题,共16分)12、略
【分析】(1)在基因工程的操作中的“分子手术刀”即切割DNA的是限制核酸内切酶简称限制酶;
(2)在基因工程的操作中的“分子缝合针”是DNA连接酶;
(3)基因工程中最常用的运载体是质粒;
(4)人的基因在牛体内能表达;说明人和牛共用一套遗传密码。
【考点定位】基因工程的基本工具【解析】限制酶DNA连接酶质粒共用一套遗传密码13、略
【分析】【分析】
胚胎移植:
1;胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎;或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内,使之继续发育为新个体的技术,其中提供胚胎的个体称为“供体”,接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种,作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种),如转基因、核移植,或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎,都必须经过胚胎移植技术才能获得后代,是胚胎工程的最后一道“工序”。
2;胚胎移植的意义:大大缩短了供体本身的繁殖周期;充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。
【详解】
(1)体外受精前要对精子进行获能处理;使其具有受精能力。
(2)要使动物超数排卵;利用促性腺激素;需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。
(3)步骤甲是人工受精;将受精卵移入受体母牛,进行的操作叫做胚胎移植(乙);胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。
(4)胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。
【点睛】
胚胎移植的实质:早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。14、略
【分析】【分析】
【详解】
略【解析】取代修补15、略
【分析】【分析】
1;神经元由细胞体和突起两部分组成;突起又分为树突和轴突,树突短而多,轴突长而少。神经元的轴突末梢经过多次分支,最后每个小枝末端膨大,呈杯状或球状,叫做突触小体。
2;目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
3;人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料;经过人工薄膜包装得到的种子,在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗。
【详解】
(1)神经元由细胞体和突起两部分组成;突起又分为树突和轴突,树突短而多,轴突长而少;轴突末端的多次分支后,每个小枝末端膨大的部分称为突触小体。
(2)抗体可以与病原体结合;从而抑制病原体的繁殖或对人体细胞的黏附。
(3)检测目的基因是否转录出mRNA可采用分子杂交技术。
(4)人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体;不定芽、顶芽、腋芽为材料;经过人工包膜包装得到的种子,可以在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗.植物体细胞杂交技术的优点就是克服远缘杂交不亲和的障碍,或者是打破了生殖隔离。
(5)胰岛素能促进组织细胞加速摄取;利用和储存葡萄糖;从而使血糖水平降低。
【点睛】
本题考查教材基础知识,旨在考查考生的理解、记忆能力,要求考生熟记关键语句,并能运用专业术语准确作答。【解析】突触小体对人体细胞的黏附放射性同位素)标记的目的基因胚状体、不定芽、腋芽、顶芽摄取、利用和储存16、略
【分析】【分析】
分析图1:表示多年前感染EV并已康复的甲;乙两人的血液中抗EV-GP抗体的水平。根据曲线图可知;多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组。
分析图2:表示单抗与病毒混合后病毒对宿主细胞的感染率。根据柱形图可知;单克隆抗体和病毒混合,加入单抗Ⅲ;Ⅴ后,病毒对宿主细胞的感染率明显低于其他组别。
【详解】
(1)由题意可知;新型冠状病毒表面的S-蛋白作为抗原刺激淋巴细胞,使机体产生特异性免疫反应,人细胞膜上的ACE2的化学本质是蛋白质。
(2)免疫系统对被新冠病毒感染后肺细胞强烈攻击引发肺炎;此时可通过适度使用免疫抑制剂对病人进行治疗,使其免疫功能下降,以避免肺部严重受损。
(3)由图1可知;多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组,故应选取甲的B细胞用以制备单克隆抗体。
(4)由图2可知;单克隆抗体和病毒混合,加入单抗Ⅲ后,病毒对宿主细胞的感染率较低。因此抑制效果最好的单抗是Ⅲ。
(5)患者康复后一段时间;若再次受到该病毒的攻击,机体内相应的记忆细胞迅速增殖分化,产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。
【点睛】
本题结合图解,考查病毒、单克隆抗体的制备等,要求考生识记病毒的结构,明确病毒没有细胞结构;识记单克隆抗体的制备过程,掌握其优点及相关应用,能结合图中信息准确答题【解析】①.抗原②.特异③.糖蛋白(或蛋白质)④.免疫抑制剂⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.记忆17、略
【分析】【分析】
1;分析题图:①表示染色体复制;②是减数分裂,③是精细胞变形为精子过程,④是受精作用;
2;哺乳动物精子和卵子发生的不同点:(1)精子的减数两次分裂是连续的;场所唯一(MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸);而卵子的两次分裂是不连续的,场所不唯一,(MⅠ场所在卵巢,MⅡ场所在输卵管中);(2)精子和卵子发生的时间不同:精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退;多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的;MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的,MⅡ是在受精过程中完成的。
【详解】
(1)精子变形③过程中精子头部的顶体是由高尔基体发育来的;④过程是受精过程,在输卵管内完成。
(2)在④过程中发生顶体反应;释放顶体酶,溶解卵丘细胞之间的物质和透明带,透明带反应和卵细胞膜反应是阻止多精入卵的两道防线。
(3)雄性动物精子产生的时期是初情期;雌性动物卵泡细胞的形成是在胚胎期性别分化以后完成的,这是精子和卵子在发生上的重要区别。
(4)初级卵母细胞进行减数第一次分裂是在排卵前后时期完成的;减数第二次分裂是在受精作用过程中完成的。
【点睛】
本题考查卵细胞的形成过程和受精作用等相关知识,意在考查学生识记相关细节和解决问题的能力。【解析】高尔基体输卵管透明带反应卵细胞膜反应初情期胚胎期性别分化以后排卵前后受精作用18、略
【分析】【分析】
动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织;将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。植物组织培养又叫离体培养,指从植物体分离出符合需要的组织;器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。
【详解】
1;基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术;是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞,以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。
2;胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎;或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内,使之继续发育为新个体的技术。
3;动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织;将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖,其原理是细胞增殖。
4;植物组织培养又叫离体培养;指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。
【点睛】
本题考查基因工程概念、胚胎移植、动植物细胞培养等相关知识,意在考察考生对知识点的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技术或DNA重组技术②.又称受精卵移植,是指将雌性动物体内的的早期胚胎,或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状况相同的其他雌性动物体内,使之继续发育为新个体的技术③.植物细胞全能性、细胞增殖19、略
【分析】【分析】
胚胎移植:
1;胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎;或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内,使之继续发育为新个体的技术,其中提供胚胎的个体称为“供体”,接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种,作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种),如转基因、核移植,或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎,都必须经过胚胎移植技术才能获得后代,是胚胎工程的最后一道“工序”。
2;胚胎移植的意义:大大缩短了供体本身的繁殖周期;充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。
【详解】
(1)体外受精前要对精子进行获能处理;使其具有受精能力。
(2)要使动物超数排卵;利用促性腺激素;需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。
(3)步骤甲是人工受精;将受精卵移入受体母牛,进行的操作叫做胚胎移植(乙);胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。
(4)胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。
【点睛】
胚胎移植的实质:早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。四、判断题(共5题,共45分)20、A【分析】【详解】
由于存在防止多精入卵的两道屏障,故一个卵细胞一般只能同一个精子结合,形成受精卵,这句话是正确的。21、A【分析】【详解】
受精过程为:顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带(透明带反应)→卵细胞膜反应(卵黄膜封闭作用)→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成;核膜消失;雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。精子入卵后形成雄原核,同时被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ,排出第二极体后,形成雌原核,雄、雌原核充分发育后,相向移动,彼此靠近,核膜消失,形成受精卵,故此说法正确。
故正确。22、B【分析】【详解】
受精包括受精前的准备阶段和受精阶段;在自然状态下,哺乳动物的受精在输卵管内完成。
故错误。23、B【分析】【分析】
据图分析;图中A是桑椹胚,B是囊胚,C是原肠胚。图B中1是滋养层,2是内细胞团,3是透明带,4是囊胚腔;图C中5是外胚层,6是滋养层,7是原肠腔,8是内胚层。
【详解】
(1)从A到C的过程中细胞均需要消耗能量;故胚胎中有机物的含量均减少,(1)正确。
(2)桑椹胚之前所有细胞都具有发育成完整胚胎的潜能;属全能细胞,故A时期胚胎中的细胞都是全能细胞,囊胚期时细胞出现分化,滋养层细胞不是全能细胞,(2)错误。
(3)胚胎移植必须使用处于桑椹胚或囊胚时期的胚胎;处于A或B时期的胚胎,(3)错误。
(4)图示过程细胞通过有丝分裂增殖;有丝分裂过程中可能发生突变,遗传物质可能会发生改变,(4)正确。
故分别为√、×、×、√。24、B【分析】【详解】
生态系统的恢复力稳定性是有一定限度的,导致了生态工程的局限性,使生态工程并不能解决所有的污染、破坏问题,因此不能走“先污染、破坏,后治理”的老路,故错误。五、非选择题(共3题,共9分)25、略
【分析】【分析】
基因工程的基本工具:
1;“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)
来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。
功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列;并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。
结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。
2;“分子缝合针”——DNA连接酶。
两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较:
相同点:都缝合磷酸二酯键。
区别:E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌;只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。
与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端;形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。
3;“分子运输车”——载体。
载体具备的条件:能在受体细胞中复制并稳定保存。具有一至多个限制酶切点;供外源DNA片段插入。具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。
最常用的载体是:质粒,它是一种裸露的;结构简单的、独立于细菌拟核之外;并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
其它载体:λ噬菌体的衍生物;动植物病毒。
【详解】
(1)图甲中质粒pBR322是基因工程常用的载体;是能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列的,故其本质是环状DNA,限制酶KasI;FseI、HpaII的功能是能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列并切割。
(2)图乙中;通过向羊转人抗凝血酶Ⅲ基因,使转基因羊能够分泌含人抗凝血酶的乳汁,故人抗凝血酶Ⅲ基因称为目的基因,获取该基因后常用PCR技术进行扩增。
(3)质粒pBR322作为运输基因的载体;在进入受体细胞后要能够自我复制,才能使目的基因有表达的可能性。
(4)在对动物细胞进行基因表达载体导入时;所用方法是显微注射。受精卵具有全能性,可使含目的基因的动物细胞能够成功表达目的基因。
(5)目的基因是否表达;还需要检测和鉴定。人抗凝血酶是一种蛋白质,故检测转基因羊是否产生人抗凝血酶Ⅲ的方法是抗原—抗体杂交。
【点睛】
熟悉基因工程的操作步骤及步骤需使用的“工具”是关键。【解析】小型环状DNA识别DNA中特定的序列并切割目的基因PCR自我复制显微注射法受精卵具有细胞的全能性(合理即可)抗原―抗体杂交26、略
【分析】【分析】
1;基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取;利用PCR技术扩增和人工合成。
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤;基因表达载体包括目的基因;启动子、终止子和标记基因等。
(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同;导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法;基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定;抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】
(1)VP1基因应插入Ti质粒上的T—DNA上;通过转化作用进入番茄细胞并插入染色体DNA,使VP1基因能够维持稳定并发挥作用。
(2)基因表达载体包括目的基因;启动子、终止子和标记基因;为便于目的基因的表达,应在质粒上插入启动子,启动子是RNA聚合酶的结合位点,能启动转录。
(3)口蹄疫病毒的遗传物质为RNA;要获得目的基因,应利用逆转录的方法,需要逆转录酶;PCR技术可在体外大量扩增目的基因;扩增的产物为DNA,与二苯胺(试剂)在沸水浴条件下呈蓝色。
(4)只用一种酶切割目的基因和质粒,得到的黏性末端都相同,VP1基因和Ti质粒可能会自身环化,目的基因(VP1基因)与质粒也可能反向连接,为避免出现这样的情况,可用BamHI、HindIII两种酶分别切割目的基因和质粒;由图可知,重组Ti质粒中卡那霉素抗性基因完整,四环素抗性基因被破坏,所以用含卡那霉素和四环素的培养基能筛选出含重组Ti质粒的农杆菌。
(5)将目的基因导入受体细胞;并使其在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为转化;检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因使用的DNA分子杂交技术。
【点睛】
将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法。农杆菌是一种在土壤中生活的微生物,能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物,而对大多数单子叶植物没有感染能力。当植物体受到损伤时,伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物,吸引农杆菌移向这些细胞,这时农杆菌中的Ti质粒的T-DNA(可转移的DNA)可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上,根据农杆菌的这种特点,如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上,通过农杆菌的转化作用,就可以使目的基因进入植物细胞,并将其插入到植物细胞中染色体的DNA上,使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。【解析】T—DNA启动子反转录(或“逆转录”)PCR二苯胺(试剂)防止VP1基因自身环化或防止Ti质粒自身环化或防止目的基因(VP1基因)与质粒反向连接卡那霉素和四环素转化DNA分子杂交27、略
【分析】【分析】
目的基因主要指编码蛋白质的结构基因;也可以是一些具有调控作用的因子;获得目的基因的方法:①从基因文库中获取②利用PCR技术扩增③人工合成(化学合成)。限制性核酸内切酶主要是从原核生物中分离纯化出来的,其能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性,结果是经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端;DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键,在构建基因表达载体时,DNA连接酶将目的基因和质粒重组。将目的基因导入动物细胞的方法是显微注射技术,具体操作程序:目的基因表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→注射了目的基因的受精卵移植到雌性动物的子宫或输卵管内发育→新性状动物。
【详解】
(1)科研人员将绿色荧光蛋白(GTP)基因导入金鱼的受精卵中进行有关研究;则GTP基因为目的基因,可以通过mRNA反转录获得。
(2)EcoRⅠ酶切割GFP基因后露出的是黏性末端;SmaⅠ限制酶切割GFP基因后露出的是平末端。
(3)用DNA连接酶可以把目的基因(GFP基因)和运载体(质粒)连接起来。
(4)构建基因表达载体时;常常采用抗生素抗性基因作标记基因,因此可以GFP基因代替抗氨苄青霉素基因作为标记基因。
(5)把目的基因(或重组质粒)导入动物细胞的受精卵常常采用显微注射法;胚胎发育过程包括受精卵→卵裂→桑椹胚→囊胚→原肠胚等阶段发育成胚胎;紫外光下;金鱼体内发光部位有差异,说明该基因表达的部位不同,即基因是选择性表达的。
【点睛】
解答本题的关键是掌握基因工程的操作步骤,识记基因工程的操作工具及作用,能够结合所学知识准确答题。【解析】目的反转录黏性平DNA连接标记基因显微注射囊胚基因的选择性表达六、综合题(共4题,共16分)28、略
【分析】【分析】
基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取的方法有:从基因文库中获取;利用PCR技术扩增和人工合成。
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤;基因表达载体包括目的基因;启动子、终止子、标记基因和复制原点等。
(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同;导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有:农杆菌转化法;基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是:显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是:感受态细胞法。
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定;抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】
(1)图1中;基因中两条链是反向平行的,故利用PCR技术扩增目的基因时,选引物时应该选方向相反且把目的基因包含在里面,故所选的引物是引物甲;引物丙。重组质粒应包括目的基因、启动子、终止子、标记基因和复制原点等,图2重组质粒中未标注出的必需元件还有复制原点,由图2可知,BamHI会破坏标记基因,结合图1目的基因两端的限制酶切点可判断构建该重组质粒用的限制性核酸内切酶应选择HindIII和BclI。
(2)将目的基因导入烟草叶绿体基因组时;一般将含有目的基因的质粒包裹在金粉上,通过轰击进入叶绿体中,这种方法称为基因枪法。叶绿体基因组中存在基因区和基因间隔区,为避免对叶绿体自身的基因组的表达造成影响,应将目的基因导入叶绿体基因组中的基因间隔区。
(3)检测目的基因是否成功导入受体细胞的方法是DNA分子杂交技术;该项技术用放射性同位素等做标记含有目的基因的DNA单链片段作基因探针。
(4)若拟南芥醛缩酶基因在烟草叶绿体中成功表达,其活性是野生型烟草的1.4~1.9倍,在高浓度下可达2.2倍,说明拟南芥醛缩酶通过促进暗反应中CO2的固定(利用)来提高光合效率。
【点睛】
本题考查基因工程等相关知识,理解基因工程操作过程,PCR技术及基因表达载体的构建方法等是解题的关键。【解析】引物甲、引物丙复制原点和基因枪法避免对叶绿体自身的基因组的表达造成影响DNA分子杂交技术含有目的基因的DNA单链片段促进暗反应中CO2的固定(利用)29、略
【分析】【分析】
分析题图为将β-甘露聚糖酶基因整合到酵母细胞的基因的过程:图示为构建工程菌的部分过程;其中①表示采用PCR技术扩增介导序列的过程;②是用DNA连接酶将质粒载体与介导序列连接形成重组质粒的过程;③表示用DNA连接酶将质粒载体;介导序列质粒载体和克隆载体重新组成形成重组表达载体。
【详解】
(1)图中①表示采用PCR技术扩增介导序列的过程,该过程在高温条件下进行,需要热稳定性DNA聚合酶(Taq酶或耐高温的DNA聚合酶);其最适温度的范围一般是70~75℃;②③表示基因表达载体的构建过程,除了图中的限制酶外,该过程中还需要DNA连接酶,作用的化学键是磷酸二酯键。
(2)下划线部分序列的设计根据是介导序列两端的部分DNA序列;GAATTC是限制酶EcoRⅠ的识别序列;而CCTAGG是限制酶BamHⅠ的识别序列,因此方框部分序列的设计目的是使扩增出的介导序列两端含有限制酶EcoRⅠ和BamHⅠ的识别序列,(便于构建重组质粒)。
(3)若BamhI酶切的DNA末端与BglⅡ酶切的DNA末端可以被DNA连接酶连接,说明黏性末端序列互补或黏性末端相同,连接的部位这两种酶
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