2025年牛津译林版选择性必修3生物上册月考试卷含答案

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①基因工程的核心步骤是构建基因表达载体。

②蛋白质工程可通过直接改造蛋白质的结构从而改变其功能。

③克隆羊的培育涉及细胞核移植；早期胚胎培养和胚胎移植等技术。

④PCR技术需要利用限制性核酸内切酶打开DNA双链。

⑤利用核移植技术可以培育试管婴儿。

⑥牛胚胎发育的历程是：受精卵→桑椹胚→囊胚→原肠胚→幼体。

⑦利用动物细胞培养技术和细胞融合技术可以制备单克隆抗体。

⑧利用植物茎尖培养脱毒苗时，全程都需要光照A.一项B.两项C.三项D.四项4、甘薯由于能增强免疫功能、防癌抗癌、抗衰老、防止动脉硬化等越来越被人们喜爱。但甘薯属无性繁殖作物，同时又是同源六倍体，具有自交不育和杂交不亲和性，这使甘薯生产和育种存在诸多常规方法难于解决的问题。下列相关操作不合理的是（）A.利用组织培养形成的胚状体制作人工种子，解决种苗用量大、成本高的问题B.利用茎尖分生组织培养脱毒苗，使植株具备抗病毒的能力，产品质量得到提高C.利用原生质体融合实现体细胞杂交，可以克服杂交不亲和，充分利用遗传资源D.利用培养的愈伤组织进行诱变育种，可以显著提高变异频率，大大缩短育种年限5、我国利用不同微生物的发酵作用制作食品，历史悠久，在多种文献中均有记载。下列说法错误的是（）

①《齐民要术》中记载：“作盐水；令极咸，于盐水中洗菜，即内雍中。”

②《北山酒经》中记载：“每坛加蜡三钱；竹叶五片，隔水煮开，乘热灌封坛口。”

③《齐民要术》中记载了二十三种利用谷物酿制食醋的工艺。其经历的三个主要发酵过程为：糖化→酒化→醋化。

④《本草纲目拾遗》中记述：“豆腐又名菽乳，豆腐腌过酒糟或酱制者，味咸甘心。”A.①介绍的是泡菜制作，配制盐水要煮沸冷却后使用，且盐度不宜过大B.②中每坛加蜡隔水煮开，乘热灌封坛口有助于陈酒的储藏C.③中从酒化到醋化的过程需要移至温度较低的环境中进行D.④中发酵产腐乳用的豆腐坯属固体培养基，不需对其进行严格灭菌6、马铃薯利用块茎进行无性生殖，种植的世代多了以后往往会感染病毒而减产，为此农户都希望得到无病毒的幼苗进行种植，获得无病毒幼苗的最佳办法是（）A.选择优良品种进行杂交B.进行远缘植物体细胞杂交C.利用茎尖进行组织培养D.人工诱导基因突变7、下列有关培养基的叙述，正确的是（）A.培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素B.培养基中都只含有碳源、氮源、水和无机盐C.固体培养基表面可形成肉眼可见的单个细菌D.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)8、下列就“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的有关叙述，正确的是（）A.经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置B.同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数C.在稀释度足够高时，所形成的单个菌落中所有细胞的遗传信息必定相同D.在相同培养条件下，未接种的培养基表面无菌落生长说明培养基没有被杂菌污染9、模型是人们为了某种特定目的而对认识的对象所做的一种简化的概括性描述。对图示生物概念模型的分析正确的是（）

A.若该模型表示体外受精技术，则C不能直接移植到代孕母体B.若该模型表示核移植技术，则C→D过程与胚胎移植技术有关C.若B表示培养液和胚胎干细胞，则C→D的培养过程中有可能出现分化现象D.若该模型表示农杆菌转化法操作流程，则C可表示Ti质粒，D是植物细胞10、下列实验过程中，出现的正常现象有（）A.制作果酒时，发酵瓶中溶液产生较多泡沫B.用果酒制作果醋过程中，液面出现一层褐色菌膜C.制作腐乳过程中，豆腐表面发黏且长有白色菌丝D.用固定化酵母进行酒精发酵，凝胶珠浮在液面11、下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。下列说法正确的是（）

A.若能在细菌B中检测到人的生长激素基因，则说明该基因工程项目获得成功B.将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的就是导入了重组质粒的细菌C.将人的生长激素基因与质粒A结合的过程共形成了4个磷酸二酯键D.将重组质粒导入细菌B之前，可以用Ca2+处理细菌B12、免疫PCR是对微量抗原的一种检测方法。下图是利用该技术检测牛乳中微量抗生素的流程图：首先将抗体1固定在微板上，冲洗后加入待检的牛乳，再加入DNA标记的抗体2，进行PCR扩增，最后进行电泳检测，相关叙述正确的是（）

A.图示中的DNA可以是非牛乳基因中的DNA片段B.如果第三次冲洗不充分则有可能出现假阳性现象C.电泳检测结果只能判断阳性与否，无法判断牛乳中抗生素的含量D.微量抗原抗体反应通过PCR技术间接扩增放大，从而达到可检测的水平13、高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌；其筛选过程如下图1所示。将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如下图2所示情况。下列选项正确的是（）

A.过程①②合称为稀释涂布平板法B.甲乙试管中的液体均为选择培养基C.Ⅱ号培养基上的接种方法为平板划线法D.图2中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种14、据人民网报道，“一对名为露露和娜娜的基因编辑婴儿于2018年11月在中国健康诞生。这对双胞胎的一个基因经过修改，使她们出生后即能天然抵抗艾滋病。这是世界首例免疫艾滋病的基因编辑婴儿”。下列有关说法不正确的是（）A.基因编辑制造人类的行为是符合伦理道德的B.基因编辑技术，可改变人类进化的速度和方向，有利于人类的进化C.通过基因编辑技术改变了人类的遗传物质，使人类进化成新物种D.基因编辑技术可用于疾病预防领域研究，但不能用于编辑婴儿15、刚果红是一种染料，可以与纤维素形成红色复合物，当红色复合物中的纤维素被分解后红色消失。表中是筛选纤维素分解菌的培养基，利用此培养基可从土壤中筛选纤维素分解菌，结果如图。下列说法正确的是（）。培养基的成分：纤维素15gFeSO40．5gKH2PO41gZnSO40．5gK2HPO41gCaCl20．5g尿素0．5g刚果红适量MgSO40．5g琼脂20g定容1L

A.培养基中纤维素和尿素分别提供碳源和氮源B.KH2PO4和K2HPO4在提供无机盐的同时还能维持培养基的pHC.将土壤稀释液接种在平板上的方法为稀释涂布平板法D.平板上5个菌落都有透明圈，说明5个菌落都能分解纤维素评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)16、平板冷凝后，为什么要将平板倒置？________17、人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质一一培养基。其中，配制成的_______________的基质称为液体培养基，配制成的固体状态的基质称为________________________。在液体培养基中加入凝固剂_______________________后，制成琼脂固体培养基，它是实验室中最常用的培养基之一。微生物在_________________培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。（琼脂是一种从红藻中提取的____________________。琼脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常规培养条件下呈现固态。）18、加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧___________，导致DNA分子不能形成__________。19、动物细胞培养的流程：

取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用______处理分散成______→制成______→转入培养瓶中进行______培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续_____培养。20、科学家采用定点诱变的方法构建T4溶菌酶的新蛋白质，发现其中一种新蛋白质的第9和第164位氨基酸残基被转换为半胱氨酸残基，并形成一个二硫键。这种新蛋白质的热稳定性会有什么变化？这项技术的要点是什么？_________21、在日常生活中，我们还遇到哪些有关生物技术安全与伦理问题？我们能基于所学生物学知识参与这些问题的讨论吗？尝试举一个实例加以说明______。评卷人得分四、判断题(共1题，共5分)22、“设计试管婴儿”与“试管婴儿”相比在植入前需要对胚胎进行遗传学诊断。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题，共30分)23、鉴江是粤西沿海最大的河流，沿河两岸的居民生活用水基本来源于鉴江。但若生活污水未经处理排放到鉴江中，会导致大肠杆菌超标，进而引发细菌性痢疾等肠道疾病。研究发现，大肠杆菌能分解乳糖，产生酸性物质和气体。某研究小组拟对鉴江中的大肠杆菌进行鉴别和统计。用到的两种培养基配方和滤膜法步骤如下：。培养基名称配方（L-1）pH乳糖蛋白胨培养基蛋白胨10g，牛肉膏5g，乳糖5g，NaCl5g，溴甲酚紫0．016g（溴甲酚紫在酸性时呈黄色，碱性时呈紫色）7．4牛肉膏蛋白胨培养基蛋白胨10g，牛肉膏5g，NaCl5g7．4

滤膜法具体步骤：

（一）用无菌的三角瓶接取1000毫升水样；盖好瓶塞。

（二）将漏斗和抽滤瓶固定好；用镊子夹住滤膜边缘，将水样倒入漏斗中，边抽滤；边加水。

（三）用镊子将滤膜取出；放在无菌平板上进行培养；观察并记录实验结果。

回答下列问题：

(1)在乳糖蛋白胨培养基中，提供氮源的物质有______________________。

(2)高压灭菌条件常为121℃，15min，但乳糖蛋白胨培养基进行灭菌时，因为乳糖在121℃会被破坏，而选用了115℃，为了达到相同灭菌效果可以______________________；

(3)研究小组取两支含乳糖蛋白胨培养基的试管A和B，A管中加入1ml待测水样，B管不做处理，然后都放人培养箱中培养24h。若A试管产生气体，同时出现______________________（填颜色）时；则提示水样被大肠杆菌污染。

(4)制作滤膜法中所用的无菌平板时，在牛肉膏蛋白胨培养基的基础上还应加入______________________，便于统计菌落。按上述滤膜法步骤制作的3个样品平板上的菌落初步从______________________（答出两点）等方面进行形态学鉴定。然后统计三个平板上所有的菌落数分别为49、51、47，能否据此得出每升水样中大肠杆菌数约为49的结论?______________________。理由是_________________________________________。24、柑橘溃疡病是由地毯草黄单胞杆菌引起的；发生在柑橘的一种病害；植株受害后会发生落叶、落果，严重时叶片落光，整株枯死。利用基因工程将来自水稻的Xa27基因导入柑橘可获得抗柑橘溃疡病的植株，利用植物组织离体培养技术则可培育无病毒植株。回答下列问题：

(1)为了获得脱毒苗，通常可以选取植株______附近的组织进行离体培养，选取该部位组织的原因是______。

(2)如图1表示科研人员利用柑橘幼苗获得抗病转基因植株的过程：

①基因表达载体必需的结构除复制原点、启动子、终止子、目的基因外，还有______。

②共培养时，Ti质粒的作用是______。

③共培养后，要利用选择培养基进行培养，目的是______。

④再分化过程中，诱导愈伤组织生根、生芽的先后顺序为______。

⑤从个体生物学水平鉴定柑橘再生植株时可采用______（填具体操作）的方法。经鉴定有几棵植株没有抗病的能力，分别提取这几棵植株的DNA，依据______的特异性碱基序列设计引物，扩增后利用______进行检测；结果如图2。

据图2分析，植株A、E、F不具有抗病能力的原因可能是______，植株B、C不具有抗病能力的原因可能是______。25、T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通过污染饲料引起畜禽中毒反应。CYP3A是猪体内降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导CYP3A基因表达水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（选填“初级”或“次级”）代谢产物，主要以_____方式进入猪细胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因启动子上游的两个调控序列，为研究T-2毒素诱导CYP3A基因表达的机理，研究者首先将不同调控序列分别和CYP3A基因启动子及荧光素酶基因（LUC基因）连接构建表达载体，再分别导入猪肝细胞，然后向各组猪肝细胞培养液中加入_____，适宜条件下进行培养；24h后检测LUC酶活性，计算启动子活性相对值，结果如图1所示。据图可知，B1和B2调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1两种蛋白均参与T-2毒素对CYP3A的诱导；B2是Spl的结合位点。研究者推测，NF-Y通过与B1结合，与Sp1共同调控CYP3A基因的表达。

①为证明Bl是NF-Y的结合位点，研究者依据B1序列制备了野生型和突变型探针，分别与猪肝细胞核蛋白提取物混合，实验分组及结果如图2．据实验结果推测，第4组出现阻滞带的原因是_____，进而推测第5组结果产生的原因是_____。

②研究者设计实验进一步证明了NF-Y和Spl通过互作共同发挥调控功能，实验设计思路是：增大或缩小B1和B2两者之间的距离，检测CYP3A基因的启动子活性。据此分析，实验假设是_____。评卷人得分六、综合题(共4题，共36分)26、水果可以用来加工制作果汁；果酒和果醋等。回答下列问题：

（1）制作果汁时；可以用果胶酶；纤维素酶等提高水果的出汁率和澄清度。果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、___________、_________。纤维素酶可以分解植物__________（填“细胞膜”或“细胞壁”）中的纤维素。

（2）用果胶酶处理果泥时；为了提高出汁率，需要控制反应的温度，原因是__________。

（3）现有甲乙丙三种不同来源的果胶酶；某同学拟在果泥用量；温度、pH等所有条件都相同的前提下比较这三种酶的活性。通常，酶活性的高低可用_____来表示。

（4）获得的果汁（如苹果汁）可以用来制作果酒或者果醋，制作果酒需要______菌，其代谢类型是________。果酒制作过程中也需要O2，O2的作用是___________。制作果醋需要醋酸菌，醋酸菌属于________（填“好氧”或“厌氧”）的细菌，其生长所需最适温度和增殖方式分别是____和_____。27、某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌；并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下。将各种物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL，再经高温灭菌，制成固体培养基备用。

。KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O蛋白胨葡萄糖尿素琼脂1．4g2．1g0．2g1．0g10．0g1．0g15．0g

（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？________（填“能”或“不能”），原因是________________________________。

（2）培养基常用________法灭菌，培养皿常用________法灭菌，待培养基冷却到________（填“20”、“30”、“40”或“50”）℃左右时，在________附近倒平板，等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止________________；造成污染。

（3）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用________法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的________就能大约推测出样品中活菌数。

（4）培养分解尿素的细菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是______________________________________。28、维生素C既是人与动物必需的营养成分；并有抗氧化作用而广泛应用于食品工业。中国科技工作者发明的维生素C“二步发酵法”生产工艺是世界首创：第一步发酵用醋酸杆菌为菌种，第二步发酵用氧化葡萄糖酸杆菌（“小菌”）和假单胞杆菌（“大菌”）混合菌种。下图为二步发酵法的生产流程，请回答有关问题：

(1)为纯化和保存菌种，将一步发酵液抽样稀释用_________法接种含有碳酸钙粉的培养基上，以________（填下列选项代号）为最佳指标；分离保存菌种。

A.菌落直径大小B.溶钙圈大小C.溶钙圈直径与菌落直径比值。

(2)对一步发酵培养液检测发现几乎没有杂菌存在，请推测可能的原因是_________。

(3)二步发酵过程中大小菌的菌种数比例会影响产酸率，种液接入发酵罐前衢对种液中的大小菌计数。计数所用的培养基除含有与发酵液相同的成分外，还需添加__________，根据菌落的____________对培养波中的大小菌分别计数。现某检测员将种液稀释接种了3个平板，统计假单孢杆菌的菌落数分别是30、100和200，取平均值110。该结果可信度低，原因是_____________。

(4)若要尝试固定化混合菌进行二步发酵来生产古龙酸，你认为固定化混合菌操作时要注意哪些方面？_______________至少提出两点）。29、多不饱和脂肪酸（PUFAs）是人体必需脂肪酸；猪肉是我国最主要的肉类消费品，提高其PUFAs含量对居民健康具有重要意义。为解决猪肉中PUFAs含量不足的问题，研究者从线虫中获得控制PUFAs合成的必需酶基因fat1，培育转fat1基因猪，操作过程如图1。

(1)利用PCR技术扩增fat1基因时，应在两种引物的一端分别加上限制酶_____和_____识别与切割的序列。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体一般选用两种限制酶，选择的原则是_____。

a；目的基因编码蛋白质的序列中有两种限制酶切割位点。

b；表达载体内；每种限制酶只有一个切割位点。

c；酶切后；目的基因两端的黏性末端序列相同。

d；酶切后；载体形成的两个黏性末端序列不同。

(2)图1中的连接产物需先导入大肠菌中的原因是_____；所构建的重组基因表达载体中未标注出的必需元件还有_____。

(3)将重组表达载体转染猪成纤维细胞，另设一组空白对照。48小时后于荧光显微镜下观察到_____；说明转染成功。然后以转基因细胞为核供体构建克隆胚胎，最终获得转fat1基因猪。

(4)研究者提取转基因猪的基因组DNA，利用限制酶DraⅢ将其完全酶切并电泳分离。然后用探针通过_____的方法；检测fat1基因是否成功整合在猪基因组DNA中，酶切方式及检测结果如图2。

①转基因猪1、2、3中分别被转入了_____个fat1基因。

②请解释图2检测结果中4条杂交带位置不同的原因：_____。

③该实验_____（填“能”或“不能”）说明成功培育转基因猪，理由是_____。参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、B【分析】【分析】

1；试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

2；设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎；然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。

【详解】

A；设计试管婴儿运用了体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植和遗传学诊断等技术；A错误；

B；移植前需对胚胎进行遗传学诊断；从中选择符合要求的胚胎，B正确；

C；姐姐进行造血干细胞移植没有改变其基因；故姐姐健康后所生的孩子仍含地中海贫血基因，C错误；

D；设计试管婴儿会带来伦理道德问题；我国未放开设计试管婴儿技术的研究与应用，D错误。

故选B。2、D【分析】【分析】

下丘脑可以分泌促性腺激素释放激素作用于垂体；促进垂体释放促性腺激素，该激素能够促进性腺分泌性激素，同时性激素能够促进生殖器官的发育和生殖细胞的形成。

【详解】

促进雌性动物大量排卵；首先要选择性成熟的雌性动物，注射促性腺激素，同时注射的量要适宜，太多了会导致产生的性激素过多，通过反馈调节，抑制自身下丘脑和垂体的活动，导致自身的性腺萎缩，故给性成熟的雌性动物注射一定的促性腺激素，可使其超数排卵，即D正确。

故选D。

【点睛】3、D【分析】【分析】

1.将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体．用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

2.植物组织培养的过程：离体的植物组织；器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进一步发育植株（新植体）。

3.植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞；进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。

4.基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定。

【详解】

①基因表达载体的构建是基因工程的第二步；也是基因工程的核心步骤，①正确；

②蛋白质工程是通过直接改造基因的结构从而实现了对蛋白质的结构的改造；②错误；

③克隆羊的培育涉及细胞核移植；早期胚胎培养和胚胎移植等技术；属于无性繁殖，③正确；

④PCR技术需要利用高温打开DNA双链；④错误；

⑤利用体外受精；胚胎移植技术可以培育试管婴儿；⑤错误；

⑥哺乳动物胚胎发育的历程是：受精卵→桑椹胚→囊胚→原肠胚→幼体；牛也不例外，⑥正确；

⑦制备单克隆抗体的过程利用了动物细胞培养技术和细胞融合技术；⑦正确；

⑧利用植物茎尖培养脱毒苗时；诱导芽形成的过程需要光照，其他过程中未必需要光，⑧错误。

共四项错误。

故选D。

【点睛】4、B【分析】【分析】

植物的体细胞杂交是将不同种的植物体细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞；进而利用植物组织培养技术将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。

【详解】

A；植物细胞工程应用之一是利用胚状体包囊人工胚乳和人工种皮制成人工种子；实现大规模生产，从而降低成本，A正确；

B；茎尖等分裂旺盛部位病毒极少或无病毒感染；所以利用茎尖分生组织培养出无病毒且保持优良性状的幼苗，脱毒苗不等于抗毒苗，通过基因工程将抗病毒基因转移至受体细胞从而培育出抗病毒的转基因植物，B错误；

C；通过植物体细胞杂交技术可以实现两个植物物种间的体细胞杂交；得到同时具有两种遗传物质的植物，可以实现种间的杂交，克服了远缘杂交不亲和的障碍，C正确；

D；愈伤组织具有分裂旺盛的优点；适于诱变育种的取材，能提高突变频率，D正确。

故选B。5、C【分析】【分析】

1；用谷物酿制食醋经历的三个主要发酵过程为：糖化→酒化→醋化。分别是淀粉在微生物的作用下水解成葡萄糖；葡萄糖在微生物的作用下分解成乙醇和二氧化碳（在无氧的条件下），乙醇被微生物在有氧的环境下氧化成乙酸。

2；在制作泡菜时所配制的泡菜盐水要煮沸；以杀灭盐水中的微生物，防止杂菌污染。泡菜制作过程中，温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短、容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。

3；采用较低温度（一般在60～82℃）；在规定的时间内，对食品进行加热处理，达到杀死微生物营养体的目的，是一种既能达到消毒目的又不损害食品品质的方法。由法国微生物学家巴斯德发明而得名。巴氏杀菌热处理程度比较低，一般在低于水沸点温度下进行加热，加热的介质为热水。《北山酒经》中记载：“每坛加蜡三钱，竹叶五片，隔水煮开，乘热灌封坛口。”这种用加热杀菌保存酒液的原理和方法，与酿酒中普遍使用的巴氏杀菌法基本相同。

4；腐乳发酵过程中；豆腐就是毛霉的固体培养基；现代腐乳生产是在严格无菌条件下将优良的毛霉菌种接种在豆腐上；味咸是因为加了盐，加盐的目的除了调味外，还有抑制微生物的生长，避免腐败变质以及具有析出豆腐中的水分、使豆腐变硬的作用，酒的含量一般控制在12%左右，目的是抑制微生物生长，同时使腐乳具有独特的香味。

【详解】

A；根据以上分析可知；①介绍的是泡菜制作技术，配制的盐水要煮沸冷却后使用，以杀灭盐水中的微生物，防止杂菌污染，同时盐水的盐度不宜过大，避免使发酵过程中的乳酸菌大量失水而死亡，A正确；

B；蜡封坛口可以创造无氧环境；有助于陈酒的储藏；另外隔水煮开即加热可以杀菌，B正确；

C；酵母菌发酵的适宜温度为18~25℃；而醋酸菌发酵的适宜温度为30~35℃，所以③中从酒化到醋化的过程需要移至温度较高的环境中进行，同时需要通氧，C错误；

D；从微生物培养的角度看；豆腐是固体培养基，腐乳制作时主要利用的是空气中的毛霉，接种时不需要对其进行严格灭菌，D正确。

故选C。6、C【分析】【分析】

1；植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织；然后再分化生成根、芽，最终形成植物体．植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。

2；培育无病毒植株苗；应选择不含病毒部分培养，而植物体新生部位不含病毒，如根尖和茎尖。

【详解】

进行植物微型繁殖时常采用茎尖或根尖作为外植体；原因是茎尖或根尖病毒极少，因此切取一定大小的茎尖或根尖进行组织培养，再生的植株就可能不带病毒，C正确；

故选C。7、A【分析】【分析】

培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出供其生长繁殖的营养基质。

【详解】

A；在培养乳酸杆菌时；需要在培养基中添加维生素即生长因子，A正确；

B；培养基中一般都含碳源、氮源、水和无机盐；但还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质的需求，B错误；

C；微生物在固体培养基上生长时；稀释度足够高时，可形成肉眼可见的单个菌落，肉眼不能看到单个细菌，C错误；

D；液体培养基没有加入凝固剂；固体培养基中含有凝固剂，加入少量水也不会制成液体培养基，D错误。

故选A。二、多选题(共8题，共16分)8、A:B:D【分析】【分析】

土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中；需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数。

【详解】

A；倒置培养的原因是可以防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基中造成污染；经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置，以防止杂菌污染，A正确；

B；为使实验结果更准确；同一稀释度下可以多涂布几个平板，至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数，求平均值，B正确；

C；细菌在分裂生殖中也会产生基因突变；虽然一个菌落是由一个活菌繁殖而来，但是个菌落中所有细胞的遗传信息不一定相同，C错误；

D；证明选择培养基没有被杂菌污染的方法是对培养基进行空白培养；即选取未接种的培养皿与接种样品的培养皿同时培养，在相同培养条件下，未接种的培养基表面无菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染，D正确。

故选ABD。9、A:B:C【分析】【分析】

1；基因表达载体是目的基因和载体重组后形成的。

2；体外受精是指获能的精子和成熟的卵细胞结合形成受精卵的过程。

3；胚胎干细胞具有发育的全能性；能够分裂和分化。

4；动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核；移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物。

【详解】

A；若该模型表示体外受精技术；则C（受精卵）不能直接移植到代孕母体，需要将C移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。当胚胎发育到适宜的阶段时，才可以将其取出向受体移植，A正确；

B；若该模型表示核移植技术；A和B表示供体细胞核和去核的卵细胞，则C→D过程表示胚胎体外培养和胚胎移植技术，B正确；

C；若A、B表示培养液和胚胎干细胞；则C→D的传代培养过程中有可能出现分化现象，C正确；

D；若该模型表示农杆菌转化法操作流程；则C可表示重组Ti质粒，D是农杆菌，D错误。

故选ABC。10、A:C:D【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，进行有氧呼吸大量繁殖；（2）在无氧条件下，产生酒精和二氧化碳。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

3；参与腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【详解】

A；果酒制作时；除了产生酒精，还会产生大量二氧化碳，因此发酵瓶中容易产生较多泡沫，A正确；

B；用果酒制作果醋过程中；液面出现一层白色菌膜，而不是褐色菌膜，B错误；

C；制作腐乳过程中；豆腐表面发黏且长有白色菌丝，C正确；

D；用固定化酵母进行酒精发酵；酒精浓度越来越高，因此凝胶珠逐渐浮上液面，D正确。

故选ACD。

【点睛】11、C:D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成；

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；检测到细菌B合成人的生长激素才能说明获得成功；A错误；

B；根据题意；细菌B不含有质粒A及其上的基因，即没有抗氨苄青霉素基因；质粒含抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，基因发生重组时抗四环素基因被破坏，抗氨苄青霉素基因被保留，故在含氨苄青霉素的培养基上能生长的是导入了普通质粒或者重组质粒的细菌，B错误；

C；将人的生长激素基因与质粒A结合的过程连接两个切口；该过程共形成4个磷酸二酯键，C正确；

D、将目的基因导入细菌时，需要用Ca2+处理细菌；使其处于易于吸收周围环境中DNA分子的生理状态，D正确。

故选CD。

【点睛】12、A:B:D【分析】【分析】

免疫PCR是一种抗原检测系统；将一段已知序列的DNA片段标记到抗体2上，通过抗原抗体的特异性识别并结合，抗体2会和固定抗体1；抗生素形成复合物“固定抗体1—抗生素—抗体2”，再用PCR方法将这段DNA进行扩增，通过检测PCR产物的量，即可推知固定抗体1上吸附的抗生素的量。

【详解】

A；免疫PCR中所用的DNA不选用受检样品（牛乳）中可能存在的DNA。待检测的牛乳中可能含有牛乳腺细胞的DNA（其上含有牛乳基因的DNA片段）；若图示中的DNA用牛乳基因中的DNA片段，经过PCR扩增后的产物中，不仅有抗体2上的DNA扩增产物，还可能有牛乳中本身含有的牛乳基因片段的扩增产物，使检测结果偏大，A正确；

B；如果第三次冲洗不充分；可能使残留的、呈游离状态的抗体2上的DNA也作为PCR的模板参与扩增，会出现假阳性现象，B正确；

CD；微量抗原抗体反应；是通过PCR技术扩增抗体2上连接的DNA，最后通过检测扩增产物—DNA的量来确定抗生素的量的方法。因此，PCR扩增产物的量与牛乳中抗生素的量呈正相关，抗原、抗体的数量可通过PCR技术间接扩增放大，C错误，D正确。

故选ABD。13、A:C:D【分析】【分析】

接种微生物的方法主要是稀释涂布平板法和平板划线法；

稀释涂布线法：逐步稀释菌液进行一系列的梯度稀释；然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养；

平板划线法由接种环沾取少许待分离的材料；在无菌平板表面进行平行划线；扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。

【详解】

A；根据I号培养基上菌落分布均匀；可知①②过程为稀释涂布平板法，A正确；

B；甲乙试管中的液体是用于样品稀释；应为无菌水，B错误；

C；由Ⅱ号培养基上上的划线区域可知从I号培养基上挑选的菌落进行接种的方法是平板划线法；C正确；

D；淀粉与碘液反应呈蓝色；但如果淀粉分解菌中的淀粉酶将淀粉水解后就不能呈蓝色，因此周围不显蓝色的菌落含有所需菌种，D正确。

故选ACD。14、A:B:C【分析】【分析】

基因编辑技术属于基因工程；而对于人体胚胎的操作又涉及胚胎工程，所有对于人体的操作都应经过安全性审查，要符合伦理道德；但用于疾病预防领域的研究又具有进步意义。

【详解】

A；基因编辑制造人类的行为不符合伦理道德；A错误；

B；基因编辑技术；只是对个别人个别基因进行编辑，不一定改变人类进化的速度和方向，B错误；

C；基因编辑技术改变了人类的遗传物质；但并没有出现生殖隔离，即没有形成新物种，C错误；

D；基因编辑技术可用于疾病预防领域研究；具有进步意义，但不能用于编辑婴儿，D正确。

故选ABC。15、A:B:C【分析】【分析】

本题知识点为刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理、培养基中各物质的作用。刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。纤维素为纤维素分解菌提供碳源，尿素为纤维素分解菌提供氮源，KH2PO4和K2HPO4具有缓冲作用；在提供无机盐的同时还能维持培养基的pH。获取单个菌落的方法可通过稀释涂布平板或平板划线等技术完成。

【详解】

A；在此培养基中；纤维素为纤维素分解菌提供碳源，尿素为纤维素分解菌提供氮源，A正确；

B、KH2PO4和K2HPO4具有缓冲作用；在提供无机盐的同时还能维持培养基的pH，B正确；

C；从平板上纤维素分解菌的菌落分布可以看出（菌落较均匀）；接种方法为稀释涂布平板法，C正确；

D；菌落周围有透明圈不一定是细胞分解了纤维素；还有可能是分解了刚果红染料，D错误；

故选ABC。三、填空题(共6题，共12分)16、略

【解析】平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠。将平板倒置，既可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，又可避免培养基中的水分过快挥发17、略

【解析】①.液体状态②.固体培养基③.琼脂④.固体⑤.多糖18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】DNA断裂絮状沉淀19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】胰蛋白酶单个细胞细胞悬液原代传代20、略

【分析】【详解】

蛋白质形成二硫键，使蛋白质的结构更加稳定，因此T4溶菌酶的热稳定性会提高。这项技术属于蛋白质工程技术，其步骤为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。【解析】会提高T4溶菌酶的耐热性。这项技术属于蛋白质工程技术，该技术的要点是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。21、略

【分析】【详解】

在日常生活中；我们遇到的有关生物技术安全与伦理问题有：生殖性克隆人伦理问题；试管婴儿与设计试管婴儿伦理问题、转基因产品的安全性与伦理问题和生物武器的安全性等。

例如转基因产品的安全性：转基因技术的安全性的争议；主要集中在两个方面，一是对人是否安全，二是对环境的影响。

对人的安全方面；支持转基因技术的人认为投放市场的转基因作物都是经过充分实验的，被改变的基因仅限于增加作物的抗病；抗灾害能力，并且在北美地区转基因食品已经使用的很多年，可以说现在美国加拿大20岁左右的年轻人从小就是吃转基因食品长大的；反对转基因技术的人认为转基因食品有害，他们的证据主要是一位科学家的实验证明，用转基因食品喂养的小白鼠癌症发病率明显升高，但问题是这个实验只成功过一次，后来别的科学家在相同的条件下都没能再现这个实验结果。

在环境方面对转基因技术的争议是最大的；也是欧洲人反对转基因技术的重要依据，反对人持有的观点是，通过改良基因创造出抵抗病虫害和其他灾害的植物，这种技术如果失去控制可能会把农作物改造成适应性极强的超级植物，自然平衡使任何生物都不可能占绝对优势地位，但转基因技术产生的超级植物可能会打破自然平衡而泛滥成灾。

伦理问题：由于转基因技术创新打破了物种界限,使不同物种间的基因可以进行前所未有的新组合,其可能造成的危害难以预见,这就使转基因技术创新呈现前所未有的复杂性,并不可避免地会引发很多全新的社会伦理问题,引出种种有关生物科学家的道德责任和学术自由的哲学争论。在转基因植物技术创新中,功利主义的预设和学术自由的主张必须以人类的价值、尊严和社会公正为前提条件。相关领域的科学家必须担当起必要的道德责任,把握好伦理横杆,以促使转基因植物技术创新沿着科学的轨道健康发展。【解析】在日常生活中；我们遇到的有关生物技术安全与伦理问题有：生殖性克隆人伦理问题；试管婴儿与设计试管婴儿伦理问题、转基因产品的安全性与伦理问题和生物武器的安全性等。

例如转基因产品的安全性：转基因技术的安全性的争议；主要集中在两个方面，一是对人是否安全，二是对环境的影响。

对人的安全方面；支持转基因技术的人认为投放市场的转基因作物都是经过充分实验的，被改变的基因仅限于增加作物的抗病；抗灾害能力，并且在北美地区转基因食品已经使用的很多年，可以说现在美国加拿大20岁左右的年轻人从小就是吃转基因食品长大的；反对转基因技术的人认为转基因食品有害，他们的证据主要是一位科学家的实验证明，用转基因食品喂养的小白鼠癌症发病率明显升高，但问题是这个实验只成功过一次，后来别的科学家在相同的条件下都没能再现这个实验结果。

在环境方面对转基因技术的争议是最大的；也是欧洲人反对转基因技术的重要依据，反对人持有的观点是，通过改良基因创造出抵抗病虫害和其他灾害的植物，这种技术如果失去控制可能会把农作物改造成适应性极强的超级植物，自然平衡使任何生物都不可能占绝对优势地位，但转基因技术产生的超级植物可能会打破自然平衡而泛滥成灾。

伦理问题：由于转基因技术创新打破了物种界限,使不同物种间的基因可以进行前所未有的新组合,其可能造成的危害难以预见,这就使转基因技术创新呈现前所未有的复杂性,并不可避免地会引发很多全新的社会伦理问题,引出种种有关生物科学家的道德责任和学术自由的哲学争论。在转基因植物技术创新中,功利主义的预设和学术自由的主张必须以人类的价值、尊严和社会公正为前提条件。相关领域的科学家必须担当起必要的道德责任,把握好伦理横杆,以促使转基因植物技术创新沿着科学的轨道健康发展。四、判断题(共1题，共5分)22、A【分析】【分析】

“设计试管婴儿”在植入前需要对胚胎进行遗传学诊断；而“试管婴儿”是解决不孕不育等问题，不需要进行遗传学诊断。

【详解】

“设计试管婴儿”与“试管婴儿”相比在植入前需要通过多种技术手段对胚胎进行遗传学诊断；以便选择合适的设计出来的试管婴儿。

故正确五、实验题(共3题，共30分)23、略

【分析】【分析】

培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水；碳源、氮源和无机盐，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因为它们来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。(1)

由配方表分析可知；在乳糖蛋白胨培养基中，提供氮源的物质有蛋白胨和牛肉膏。

(2)

高压灭菌条件常为121℃；15min；但乳糖蛋白胨培养基进行灭菌时，因为乳糖在121℃会被破坏，而选用了115℃，为了达到相同灭菌效果可以适当延长灭菌时间。

(3)

研究小组取两支含乳糖蛋白胨培养基的试管A和B；A管中加入1mL待测水样，B管不做处理，然后都放入培养箱中培养24h。若A试管产生气体，还不可以提示水样可能被大肠杆菌污染，这时还需要再观察试管中的颜色变化，由于大肠杆菌能产生酸性物质和气体，同时培养基中的溴甲酚紫在酸性时呈黄色，故若A试管出现黄色时，则提示水样被大肠杆菌污染。

(4)

制作滤膜法中所用的无菌平板时；在牛肉膏蛋白胨培养基的基础上还应加入琼脂形成固体培养基，便于统计菌落。按上述滤膜法步骤制作的3个样品平板上的菌落初步从形态；大小、颜色和透明度等方面进行形态学鉴定。该培养基为鉴别培养基，在平板上生长的菌落，只有部分是大肠杆菌形成的菌落，因此大肠杆菌实际数值应该小于49。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的种类和作用，掌握菌落计数的方法和具体操作等知识，意在考查学生识记所学知识要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力，同时获取题干信息准确答题。【解析】(1)牛肉膏；蛋白胨##蛋白胨、牛肉膏。

(2)适当延长灭菌时间。

(3)黄色。

(4)①.琼脂②.形态、大小、颜色和透明度③.否#不能④.培养基表面的菌落，只有部分是大肠杆菌形成的菌落24、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步骤：①目的基因的获取和筛选；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定；

2；植物顶端分生区附近(如茎尖)的病毒极少；甚至无病毒，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗。

【详解】

（1）为了获得脱毒苗；通常选取植株茎尖（或顶端分生区附近的组织）进行离体培养，选取该组织的原因是此处病毒极少甚至无病毒。

（2）①基因表达载体上除有复制原点；启动子、终止子、目的基因外；还有标记基因（便于筛选目的基因）；

②农杆菌Ti质粒上的T-DNA片段可以携带目的基因并整合至植物细胞的染色体DNA上；

③选择培养的目的是筛选出含有目的基因的柑橘细胞；

④先诱导生芽有利于生根；故再分化阶段，需要先诱导愈伤组织生芽，待长出芽后，再将其转接到诱导生根的培养基上，进一步诱导形成试管苗；

⑤在个体生物学水平可用接种地毯草黄单胞杆菌（或喷施地毯草黄单胞杆菌菌液）的方法，观察植株是否患有柑橘溃疡病来直接鉴定再生植株；分析再生植株没有抗病能力的原因，可以提取各植株的DNA，依据Xa27基因（目的基因）的特异性碱基序列设计引物，扩增后用（凝胶）电泳分离PCR产物进行检测；植株B、C没有出现条带，则可能是因为没有导入目的基因；植株A、E、F出现条带但不具有抗病能力，则可能是因为导入植物细胞的目的基因不能转录或转录后未翻译或翻译出的蛋白质没有活性等。【解析】(1)茎尖（或顶端分生区）此处病毒极少甚至无病毒。

(2)标记基因携带目的基因并整合至植物细胞的染色体DNA上筛选出含有目的基因的植物细胞先诱导生芽，再诱导生根接种地毯草黄单胞杆菌（或喷施地毯草黄单胞杆菌菌液）Xa27基因（凝胶）电泳导入植物细胞的目的基因不能表达（或不能转录，转录后不能翻译，翻译出的蛋白质没有活性等，合理即可）没有导入目的基因25、略

【分析】【分析】

图1可知：T-2毒素是一种常见的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导其表达水平升高，当用两种调控序列同时连接启动子，启动子的活性最高。

图2可知：野生型探针能与NF-Y结合；突变型探针不能与NF-Y结合，NF-Y抗体一定能与NF-Y结合。

【详解】

（1）初级代谢产物一般是霉菌生命活动所必需的，大多存在于细胞内。次级代谢产物不是霉菌生命活动必需的，并且分泌到体外，故T-2毒素是霉菌的次级代谢产物。T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由扩散的方式进入细胞。

（2）实验的自变量是有无调控序列；根据单一变量原则，对照组的目的是为了排除无光变量的影响，除了没有调控序列，其他处理和实验组相同，所以对照组和实验组猪肝细胞均导入含CYP3A基因启动子及LUC基因的表达载体，然后向各组猪肝细胞培养液中加入加入等量T-2毒素，适宜条件下进行培养。从图中信息可知，缺失两个调控序列和对照组活性一致，缺失一个比对照组活性略强，两个都存在活性最高，说明这两个调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件。故缺失两个调控序列或其中任一个，T-2毒素都不能诱导启动子活性明显增强。

（3）①实验的目的是要验证NF-Y能与B1结合；根据第2组和第3组结果，依据B1序列制备的NF-Y结合位点野生型探针能与NF-Y结合，根据第4组结果，突变型探针不能与NF-Y结合。第5组加入了NF-Y抗体，一定能与NF-Y结合。故可以解释为：结合位点突变的探针不能结合核蛋白中的NF-Y，也不会竞争NF-Y与标记探针的结合，所以第4组与第2组同样位置出现阻滞带。第5组，NF-Y的抗体结合NF-Y，因此第5组中出现标记探针；NF-Y和NF-Y抗体的结合物，结合物分子量大，阻滞带的位置更靠后。

②假设NF-Y和Sp1通过互作共同发挥调控功能，它们之间的距离是发挥作用的最佳距离，故增大或缩小B1和B2两者之间的距离都会降低CYP3A基因的启动子的活性。【解析】(1)次级自由扩散。

(2)等量的T-2毒素缺失两个调控序列或其中任一个；T-2毒素都不能诱导启动子活性增强。

(3)结合位点突变的探针不能结合核蛋白中的NF-Y，也不会竞争NF-Y与标记探针的结合，所以第4组与第2组同样位置出现阻滞带。NF-Y的抗体结合NF-Y，因此第5组中出现标记探针、NF-Y和NF-Y抗体的结合物，结合物分子量大，阻滞带的位置更靠后。NF-Y和Sp1通过互作共同发挥调控功能，它们之间的距离是发挥作用的最佳距离。六、综合题(共4题，共36分)26、略

【分析】【分析】

1；果胶酶的种类：多聚半乳糖醛酸酶、果胶酯酶、果胶分解酶；果胶酶能分解植物的细胞壁，瓦解植物细胞之间的胞间层，能将果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，从而提高果汁的出汁率和澄清度。2、温度通过影响酶的活性，从而影响化学反应速率。3、果酒制作的菌种是酵母菌，代谢类型是异养兼性厌氧，果醋制作的菌种是醋酸菌，代谢类型是异养需氧型。

【详解】

（1）果胶酶是分解果胶的一类酶的总称；包括多聚半乳糖醛酸酶；果胶酯酶、果胶分解酶，酶具有专一性，纤维素酶能分解植物细胞壁中的纤维素。

（2）温度是影响果胶酶活性的因素之一；为了提高出汁率，需要将温度控制在果胶酶的最适温度，因为在最适宜的温度下果胶酶的活性最强。

（3）酶活性是指酶催化一定化学反应的能力；酶活性的高低可以用在一定条件下，酶所催化某一化学反应的速度来表示，在该实验中可通过比较在一定条件下，单位时间内；单位体积中反应物的消耗量或产物的增加量来表示。

（4）制作果酒需要酵母菌，酵母菌是异养兼性厌氧型微生物；果酒制作过程中O2的作用是促进酵母菌有氧呼吸大量繁殖；制作果醋需要醋酸菌；醋酸菌属于好氧细菌，醋酸菌生长的最适温度是30-35℃，繁殖方式是二分裂。

【点睛】

熟知果胶酶的种类及其催化作用的特点是解答本题的关键，识记果酒和果醋制作的基本原理。【解析】果胶分解酶果胶酯酶细胞壁在最适宜的温度下果胶酶的活性最强单位时间内单位体积中反应物的消耗量或产物的增加量酵母菌异养兼性厌氧型促进有氧呼吸，使酵母菌大量繁殖好氧30-35℃二分裂式27、略

【分析】【分析】

1；配制以尿素为唯一氮源的培养基；在该培养基上能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌，分解尿素的细菌能合成脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。

2；为了保证稀释涂布平板法统计菌落数目的结果准确；一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。

（1）

该培养基中含有蛋白胨和尿素；蛋白胨和尿素中都含有氮元素，故尿素不是唯一氮源，该培养基不能选择出只以尿素为氮源的微生物。

（2）

培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌；培养皿常用干热灭菌法灭菌。待培养基冷却到50℃左右不太烫手时可以进行倒平板，倒平板操作需要在酒精灯火焰附近进行。等平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止培养皿盖上的水珠落入培养基，造成污染，也避免了培养基中水分过快的挥发。

（3）

要统计每克土壤样品中活菌数目；宜采用稀释涂布平板法接种。稀释倍数足够大时，每个细胞则会长成单菌落，故根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数目就能大约推测出样品中活菌数。

（4）

检测固体培养基是否被污染的方法是：将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间；观察培养基上是否有菌落产生，如果有菌落产生，则说明培养基被污染了。

【点睛】

本题考查微生物培养中的无菌技术、微生物的分离和计数、培养基的分类和作用等相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力，对相关知识点的识记和理解是解题的关键。【解析】（1）不能培养基含蛋白胨；尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为氮源的微生物（培养基含蛋白胨，蛋白胨中含有氮元素）

（2）高压蒸汽灭菌干热灭菌50酒精灯火焰培养皿盖上的水珠落入培养基。

（3）（稀释）涂布平板菌落数目。

（4）将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生28、略

【分析】【分析】

1.微生物接种常用的两种方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落。

2.固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术；包括包埋法；化学结合法和物理吸附法。一般来说，酶更合适采用化学结合和物理吸附法固定化，而细胞多采用包埋法固定化。这是因为细胞体积大，而酶分子小；体积大的细胞难以被吸附或结合，而体积小的酶容易从包埋材料中漏出。

3.菌落：是指由单个微生物细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度；形成以母细胞为中心的一团肉眼可见的；有一定形态、构造等特征的子细胞集团。各种微生物在一定条件下形成的菌落特征，如大小、形状、边缘、表面、质地、颜色等，具有一定的稳定性，是衡量菌种纯度、辨认和鉴定菌种的重要依据。

(1)

为纯化和保存菌种；将一步发酵液抽样稀释后用稀释涂布平板法接种在含有碳酸钙粉的培养基上，由于醋酸菌代谢过程中产生的醋酸会与培养基中的碳酸钙发生反应，形成溶钙圈，我们以溶钙圈直径与菌落直径比值，即C为最佳指标