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文档简介

辽宁省质量技术监督局发布I Ⅲ 12规范性引用文件 13术语与定义 14材料的选择 24.1选择的部位 24.2取材季节的选择 24.3器官发育年龄的选择 2 25消毒灭菌 25.1外植体消毒灭菌 25.2培养基高压灭菌 25.3接种器具灭菌 26初代培养 36.1培养基配制 36.2培养环境条件 36.3培养方法 37继代培养 37.1培养基配制 37.2培养环境条件 37.3培养方法 37.4增殖速率的计算 37.3.1按理论计算 37.3.2实际计算 38生根培养 48.1培养基配制 48.2培养室环境条件 48.3培养方法 48.4根的生长 49组培苗的移栽 4 49.2移苗的方法 49.2.1清除培养基 49.2.2苗床准备 49.2.3移栽后的管理 49.2.3.1移植后10d之内 59.2.3.2移栽后10~19d 59.2.3.3生长2030d 510技术档案 5附录A(规范性附录)树莓组培苗木质量分级 6附录B(资料性附录)树莓组培苗移栽病虫害防治药剂用量 7附录C(资料性附录)组培室的构成及基本设备 8本标准依据BT1.1-2本标准的附录A为规范性附录,附录BC为资料性附录。本标准由辽宁省林业厅提出并归口。本标准主要起草单位:阜新市林业种苗管理站、阜蒙县林业科技示范中心。本标准主要起草人:张秀艳、齐金海、丁立娜、曹颖、武春艳、李钱、于丹、杨树勇、丁瑞军、田明芳、赵方明、张志会、刘金城、宋春颖、付玉、李畅、霍旺、柳士东、王国兴、舒红、胡玉珠、杨志勇、李亚辉、陈宝财、张莹、龙忠勤、姬东、扈延伍、董芷维、齐金艳、李宁、贾斌英、柴旭光、杨爱风。1本标准规定了树莓(RubuscorchorifoliusL.f.)组织培养育苗过程中材料的选择、消毒灭菌、初代2规范性引用文件凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。BT6DI育苗技术规程3术语与定义树莓RubuscorchorifoliusLf.根据植物细胞具有全能性的理论,利用植物体离体的器官(如根、茎、叶、茎织(如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等)或细胞(如大孢子、小孢子、体细胞等)以及原生质植物组织培养所利用植物体离体的器官(如根、茎、叶、茎尖、花、果实等)组织(如形成层、表2皮、皮层、髓部细胞、胚乳等)或细胞(如大孢子、小孢子、体细胞等)以及原生质体,称为外植体。初代培养Primaryculture生根培养Rootingculture42取材季节的选择43器官发育年龄的选择44取材的大小52培养基高压灭菌53接种器具灭菌3剪子、镊子、50h烧杯(处理外植体使用)用牛皮纸包装,做到无漏洞,捆绑好,用高压灭菌锅62培养环境条件在无菌的环境下,培养室温度23C~5C,湿度20%30%光照强度20x~20x整齐摆放在培养架(五层,每层间隔45m透光)上,培养室技术要求参照附录C片,采用75酒精消毒30s~4GsOP汞水溶液消毒处理3in~4in再用无菌水洗涤5次。然后7.2培养环境条件在无菌的环境下,培养室温度23C~5C,湿度20%30%光照强度20x~20x整齐摆放在培养架(五层,每层间隔45m透光)上,培养室技术要求参照附录C7.3培养方法7.4增殖速率的计算年内能繁殖试管苗的数量,可用式(1)计算y=mx"………………………48生根培养82培养室环境条件培养室温度18C~5C,湿度20%30%光照强度20x~20x培养室技术要求参照附录C~~92移苗的方法起污染和霉烂。最后蘸10D倍~2倍海藻素类(促进生根)溶液后移栽。59.2.3.2移栽后10d~19d6附录A(规范性附录)树种名称苗木种类苗齡级苗百分率适用范围根系苗高根系长度(条)根团(条)根团树莓组培苗5旺盛的生命力北至黑龙江、内蒙;南至广东、云南等省份7(资料性附录)防治病害、虫害种类一多抗霉素阿维菌素油8附录C(资料性附录)组培室的构成及基本设备组培实验室一般应包括更衣室、洗瓶室、配置室、配药室、灭菌室、接种室、培养室、驯化棚室等。结合具体情况,可以合并部分分室。C1洗瓶室用于玻璃器皿和实验用具的洗涤、干燥和贮存;培养材料的预处理与清洗;组培苗的出瓶、清洗和整理等。要求房间宽敞明亮,方便多人同时工作,有电源、水源,上下水通畅;地面耐湿、防滑、排水设备及用具:工作台、烘箱、晾干架、周转筐、各种规格的毛刷、药品柜等。C2培养基配置室用于培养基的配置、植物材料的预处理。要求房间宽敞明亮、通风干燥,方便多人同时工作,有电源、水源,上下水通畅。设备及用具:电子分析天平、托盘天平、电子天平、磁力搅拌器、蒸馏水器、酸度计、恒温水浴振荡器、微波炉、冰箱、展示柜、移液管、培养瓶、试剂瓶、烧杯、量筒、容量瓶、培养皿、玻璃棒、记号笔、封口膜、瓶盖、周转筐、纱布、小推车等。C3灭菌室用于培养基、器皿、工具和其他物品的消毒灭菌。要求安全、通风、明亮;墙面和地面防潮、耐高温。水源、电源加热;上下水通畅;设备及用具:压力灭菌锅、周转筐、换气扇、小推车等。C4接种室进行植物材料的接种、培养物的转移等无菌操作,即无菌操作室。要求空间宜小不宜大,密闭、干爽安静、清洁明亮、不易积尘。门窗密闭性好、吊装紫外光灯,保持环境无菌或低密度有菌状态;安置空调机;人流与物流分开。设备及用具:超净工作台、空调机、接种器械灭菌器、紫外光灯、酒精灯、广口瓶、三角瓶、接种工具、手持喷雾器、工作台、污物桶等。C5培养室用于培养离体材料。要求面积不宜过大,10-20m,培养室外有缓冲间或走廊;能够控制光照和温

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