2025年沪教版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案

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A.过程①和②使用的酶均为DNA聚合酶B.p1303载体上可能含有增强Bapt基因表达的序列C.可使用Bapt基因制成的探针检测过程⑤是否成功D.改造的红豆杉细胞需组织培养至完整植株再进行紫杉醇提取2、下列关于哺乳动物早期胚胎发育的叙述，错误的是（）A.由受精卵发育为囊胚的过程中每个细胞的核质比逐渐增大，胚胎中DNA总量逐惭增加B.胚胎发育至囊胚期即开始了细胞分化，细胞分化是基因选择性表达的结果C.囊胚从透明带中伸展出来称为孵化，这之前属于卵裂期D.滋养层细胞在囊胚期已发育成胎膜和胎盘并可用于性别鉴定3、将一个具有两个野生型基因（A+、B+）的人体细胞和一个具有两个隐性突变基因（A-、B-）小鼠细胞诱导融合，筛选得到的杂种细胞在传代培养过程中，人体细胞中的某条染色体会发生丢失现象，小鼠的染色体不丢失。最终通过检测基因产物，确定基因A+、B+是否位于一条染色体上。下列说法正确的是（）A.杂种细胞传代培养需要添加激素及血清等天然成分的选择培养液B.诱导融合后的细胞具有两种细胞的遗传物质并发生了基因重组C.如果子细胞中只出现（A+、B+）和（A-、B-）所表达的基因产物，说明基因A+、B+在同一染色体上D.如果子代细胞出现（A+、B-）、（A-、B+）、（A+、B+）和（A-、B-）等所表达的全部基因产物，说明A+、B+位于两条染色体上4、用农作物秸秆等纤维质原料生产的乙醇，经加工可制成燃料乙醇，从而可以减少对石油资源的依赖，如图为生产燃料乙醇的简要流程，据图分析，错误的是（）

A.微生物A和微生物B所利用的碳源相同B.图中过程②常用的微生物B是酵母菌C.要得到微生物A，最好选择富含纤维素的土壤采集土样D.微生物A的同化作用类型为异养型5、家庭酿造甜米酒时一般是先将米煮熟，待其冷却后拌酒曲，然后在米饭中央挖一小洞，加盖后置于适当地方保温。下列关于此过程的叙述，正确的是（）A.将米煮熟的目的只是消灭杂菌B.冷却的目的是防止拌酒曲时烫手C.在米饭中央挖洞有利于CO2的排出D.发酵制米酒时并不需要严格密封6、如图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述不正确的是（）

A.抗胃癌单克隆抗体可以和甲特异性结合B.利用聚乙二醇、灭活的病毒和电融合等方法均可诱导细胞融合获得乙C.用特定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞不能生长D.丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁7、用X酶切割DNA分子后，得到黏性末端①，用Y酶切割DNA分子后，得到黏性末端②，如下图所示，以下说法不正确的是（）

A.X与Y通常是不同的限制酶B.限制酶与DNA水解酶破坏的化学键相同C.具有①②的两个DNA片段可连接成重组分子，重组后可以被X或Y切割D.使用X和Y同时切割目的基因和载体不可以防止目的基因反向链接8、下列关于DNA片断扩增及其鉴定的说法错误的是（）A.在凝胶中DNA分子的迁移速率主要和DNA分子的大小、构象等有关B.凝胶中DNA分子通过染色，可以在波长300nm的紫外灯下被检测出来C.该实验用到的缓冲液和酶，从冰箱取出直接水浴加热D.电泳技术可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)9、下列关于人早期胚胎发育过程中桑椹胚和囊胚的叙述中，正确的是（）A.囊胚与桑椹胚相比，每个细胞内DNA总量增加B.囊胚期出现了细胞分化，但遗传物质未发生改变C.囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异不是复制水平上的差异，而是转录水平上的差异引起D.桑椹胚的形成在卵巢，囊胚的形成在输卵管10、2019年，中国科学院神经科学研究所利用CRISPR—Cas9基因编辑技术，用基因敲除的猴的体细胞通过克隆技术培育出5只克隆疾病猴。下列相关叙述错误的是（）A.克隆猴基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰B.受精卵经基因编辑后形成的胚胎都成功发育为克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物D.可以运用该基因编辑技术进行生殖性克隆人的研究11、下图是我国科学家制备小鼠孤雄单倍体胚胎干细胞的相关研究流程；其中Oct4基因在维持胚胎干细胞全能性和自我更新中发挥极其重要的作用。下列叙述正确的是（）

A.受精卵发育过程中桑椹胚前的细胞都是全能性细胞B.推测Oct4基因的表达有利于延缓衰老C.过程③胚胎干细胞细胞核大、核仁明显D.从卵巢中获取的卵母细胞可直接用于过程①12、RNA经逆转录后再进行PCR扩增的技术称为RT－PCR，过程如图所示。下列相关叙述正确的是（）

A.过程①需要RN逆转录酶、引物、核糖核苷酸等条件B.真核细胞的mRNA经过程①②获得的DNA无内含子片段C.过程③PCR扩增时引物中的CG含量会影响退火温度D.RT－PCR技术可应用于新冠病毒（RNA病毒）的核酸检测13、理垃圾的有效方法之一是用微生物对其进行降解，下图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。下列叙述错误的是（）

A.图中培养基应以淀粉为唯一碳源，将菌液接种到培养基应使用平板划线法B.菌落①与②周围透明圈的大小不同原因可能是两个菌群对碘液分解能力不同C.若菌落①与②分属细菌和真菌，则二者结构上最主要区别是有无核膜包被的细胞核D.实验结束后，为防止造成环境污染，使用过的培养基应灭菌处理后再倒掉14、茯砖茶的制作包括发酵与发花等工序，发酵前要下“诱水”，下“诱水”就是将原有老茶煮水后喷洒在料堆之上。发花可使砖茶原料在加工过程中形成“金花”，学名“冠突散囊菌”——茶界“益生菌”，也是国家茶业界二级机密保护菌种。下列相关叙述错误的是（）A.茯砖茶的制作需利用酵母菌等多种细菌进行发酵B.下“诱水”相当于微生物培养过程中的“接种”，推测相关菌种可耐热C.发酵过程涉及多种酶催化，发酵后饮用有利于营养物质的吸收D.茯砖茶发酵完成后要灭菌并密封，有利于长期保存15、在动物细胞培养的过程中，贴壁的细胞不一定都能增殖并形成克隆（单个细胞繁殖形成的细胞群体），而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞，这一特点可用于测定动物细胞的增殖能力。大致流程如下图，相关叙述不正确的是（）

A.出现接触抑制后，细胞克隆停止增殖B.克隆细胞与接种的细胞的遗传信息不一定相同C.胰蛋白酶可使细胞分散成单个利于计数D.需采用固体培养基培养才能形成细胞克隆16、生物技术的飞速发展在安全性和伦理道德方面引发了许多争论，你认为下列说法哪些是正确的？（）A.科学家要对自己的科学研究负责，对社会负责B.科学家应向公众传播科学知识C.公众应该理性地、负责任地对待这些问题D.公众可以根据自己的价值观采取不同的态度17、如图是青蛙的胚胎细胞核移植的过程，下列叙述错误的是（）

A.过程1代表对体细胞采用显微操作去核B.青蛙囊胚除了可以作为核移植的供体细胞外，也可以直接进行胚胎移植C.胚胎细胞核移植成功率远低于成体细胞核移植D.我国支持治疗性克隆，反对生殖性克隆评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)18、禁止生物武器公约。

（1）1972年4月10日，苏联、美国、英国分别在其首都签署了《禁止试制、生产和储存并销毁细菌（生物）和毒剂武器公约》（简称_____）；并于1975年3月26日生效。1984年11月15日，我国也加入了这一公约。

（2）我国在任何情况下_____、_____、_____生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。19、本课题对能分解尿素的细菌进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化菌种的第一步。对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生物化学的方法。在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的___________将尿素分解成了_____________。氨会使培养基的________________，pH______________。因此，我们可以通过检测培养基______________来判断该化学反应是否发生。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_____________，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变________________。20、载体具备的条件：①_____。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③______。21、其它载体：_______22、PCR技术的DNA体外复制环境有DNA解旋酶、耐热DNA聚合酶、DNA母链、4种脱氧核苷酸和__________，它能使DNA聚合酶能够从引物的________端开始连接脱氧核苷酸。（人教P58列表），而引物是一段______________片段，用于PCR的引物长度通常为____个核苷酸。23、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。24、近年来，克隆技术的发展取得了巨大突破｡在日常生活中，我们遇到过与克隆技术有关的问题吗？_____。25、第四步：_____26、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了______，方法是采用______。评卷人得分四、实验题(共2题，共12分)27、研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用；两者的提取及应用如图所示。

（1）柚皮易焦糊，宜采用____________法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过___________除去其中的固体杂质。

（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或____________接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是_______________。实验前需对超净工作台进行____________处理。

（3）培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供______________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度___________。

（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果28、苹果树腐烂病是由黑腐皮壳菌引起的；是限制苹果产量的重要因素之一。生产上主要以化学药剂防治该病。为开发生物防治途径，科研人员拟从土壤中分离筛选出能抑制黑腐皮壳菌生长的枯草芽孢杆菌，实验流程图如图1：

（1）①中木糖和硝酸钾的作用分别是______________。

（2）②→③中梯度稀释的目的是_____________________________________________。

（3）制作的平板需要倒置的目的除了防止培养基中水分过快蒸发之外，还有______________。

（4）现有经纯化后获得的4个枯草芽孢杆菌品系，为探究哪个品系对黑腐皮壳菌的抑制效果更好，科研人员在如图2平板中的A处接种黑腐皮壳菌，在距离A处等距离的B1～B4处分别接种等量的4个枯草芽孢杆菌品系，在适宜条件下培养3﹣5天后，通过观察_________________________筛选出抑菌更好的枯草芽孢杆菌菌株。

图2

（5）在利用稀释涂布平板法统计土样中活菌的数目时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在______________的平板进行计数。该方法所得结果往往比实际细菌的数目要少，原因是__________________________________。评卷人得分五、综合题(共4题，共36分)29、植物的秸秆中含有大量的纤维素；秸秆焚烧还田不仅会造成环境污染，还会造成大量能量的浪费。从土壤中分离出能高效降解纤维素的酵母菌，然后利用优良酵母菌以植物秸秆为原料通过发酵生产出乙醇，以此提高能量的利用率。如图表示从土壤中分离出优良酵母菌的流程示意图，回答下列问题。

(1)图中①过程采用的接种方法是____________（填“稀释涂布平板法”或“平板划线法”），作此判断的理由是____________。

(2)培养基甲和培养基乙中的碳源是____________，两者在组成成分上的差异一定有____________。

(3)进行多次筛选处理时，从液体培养基中定期取样，并用_____________和_____________的方法统计微生物的数量，评估菌株增殖状况。这两种方法中时效性较好的是____________。

(4)刚果红能与纤维素形成红色复合物，不能与纤维素水解产物形成红色复合物，从而在纤维素分解菌周围出现透明的水解圈。将获得的4种优良菌株接种到含纤维素，刚果红的固体培养基中，结果如图所示。A．B，C，D四种优良菌株中降解纤维素能力最强的是____________。

30、冬季北方漫长的低温天气导致微生物活性降低；很难保证污水生物处理的效果，现以生理生态学原理为指导，实施低温创新技术，寻求一种在低温时活性相对较高的特殊菌群，如图是某实验室在低温条件下培养苯酚降解菌的技术路线图，请据图回答问题：

(1)低温条件下，进行苯酚降解菌的分离是以______为唯一碳源，除了碳源还需要______等营养物质。

(2)获得纯净的苯酚降解菌的关键是______。

(3)采用平板划线法分离苯酚降解菌，在完成平板划线后待菌液被培养基吸收，需要将接种后的平板和______放入10℃恒温培养箱中进行培养。

(4)筛选苯酚降解菌时，选择培养基筛选的原理为______。

(5)在技术路线中，苯酚降解菌进行变性梯度凝胶电泳（DGGE）检测前，要进行PCR扩增苯酚降解菌的DNA，PCR的每次循环一般可以分为______三个阶段，引物的作用为______。31、2018年11月；南方科技大学副教授贺建奎借助基因编辑技术，诞生了第一例能天然抵抗HIV的婴儿。CRISPR/Cas9基因编辑技术可简单；准确地进行基因定点编辑。其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列，可人为选择DNA上的目标位点进行切割（如图所示）。请据图分析：

（1）向导RNA中的双链区遵循_____________。

（2）若α链剪切位点附近序列为TCCAGAATC，则相应的识别序列为_______________________。

（3）Cas9蛋白由基因C指导在________中合成。图丙代表的是一个________分子的结构简图，组成该分子的单体是_________，图中被运输的氨基酸是________。（脯氨酸密码子为CCG；精氨酸密码子为CGG，丙氨酸密码子为GCC，甘氨酸密码子为GGC）

（4）基因C在编码蛋白质时，控制最前端几个氨基酸的DNA序列如图乙所示（起始密码子为AUG或GUG）。在发生转录时，作为模板链的是图中的________（填“a”或“b”）链。若由于基因C中一个碱基对发生替换，而导致合成的肽链中第3位氨基酸变成了亮氨酸（密码子有CUU、C.CUA、CUG），则该基因中碱基对替换情况是___________。32、（一）现科研人员研究利用玉米秸秆作为廉价的糖源转化生产燃料酒精；不仅可以缓解能源危机；减少环境污染，而且是实现可持续发展战略的基本保障，具体的工艺流程如下图。请回答下列问题：

（1）由于木质纤维素组成成分复杂、结构稳定，生物降解时难以迅速进行，常用酸或碱预处理，目的是打断纤维素内部的化学键，降低聚合度，易被_______水解。

（2）将预处理后的玉米秸秆进行_______灭菌，冷却后接种一定浓度的里斯木霉菌悬液，24h就能产生大量的葡萄糖，葡萄糖与蒽酮试剂能产生颜色，为了检测秸秆水解效果，可采用光电比色法测定糖液中的葡萄糖含量，之前制作_______的标准曲线（填写坐标），使用的比色杯若光面玻璃不干净，将导致测量的数据_______（填偏小、偏大或无影响）。推测加入里氏木霉菌悬液的用途是_______。

（3）发酵过程接种休哈塔酵母，该微生物在_______的发酵液中可以生长繁殖；而绝大多数其他微生物都因无法适应该环境而抑制。

（4）酿酒的残渣堆积会积累醋杆菌，可从中筛选优良菌株。可采用_______方法将混合菌液接种到加有碳酸钙粉末的固体培养基中，加入碳酸钙可以筛选菌株的实验原理是_______。

（二）转基因技术可以使重组生物增加人们所期望的新性状；培育出新品种，下图是基因工程操作流程图，请根据图示回答下列问题：

（5）获取序列未知的目的基因，常用的方法是从______中提取，①过程中常用的酶有______。

（6）若要通过工程菌获得人类胰岛素，②过程中常用氯化钙处理大肠杆菌，其目的是______。为了检测目的基因是否成功表达出胰岛素，需要采用的方法有______

（7）在培育转基因抗冻蕃茄时，将离体蕃茄叶组织经脱分化形成愈伤组织，再通过______培养得到单细胞，将外源基因导入其中并培育形成抗冻蕃茄植株，过程④中用到的植物细胞工程技术是______

（8）若要培育能生产彩色羊毛的转基因羊，则需将转基因的受体细胞培养到早期胚胎后，再通过______过程形成转基因羊。参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、B【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成；

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；

（4）目的基因的检测与鉴定：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：分子水平鉴定用抗原—抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；①为逆转录过程；需要逆转录酶的催化；②为PCR扩增过程，该过程需要使用Taq酶，A错误；

B；根据题干信息“研究人员构建紫杉醇合成关键酶（Bapt）基因的超表达载体来提高紫杉醇产量”可知；p1303载体上可能含有增强子序列，作用是促进Bapt基因的表达，B正确；

C；因为红豆杉细胞中本身存在Bapt基因；不管超表达载体是否成功导入，都能与Bapt基因探针形成杂交分子，因此不能通过Bapt基因探针来检测步骤⑤是否成功，C错误；

D；要获得细胞产物；只需要培养到愈伤组织阶段即可，不需要培育成完整的红豆杉植株，D错误。

故选B。2、D【分析】【分析】

胚胎发育过程：

（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加；

（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）；

（3）囊胚：细胞开始分化；其中个体较大的细胞叫内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔（注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化）；

（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层；下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔（细胞分化在胚胎期达到最大限度）。

【详解】

A；从受精卵到囊胚的发育为卵裂期；卵裂期因细胞有丝分裂导致细胞数量增加，但胚胎总体积并不增大，所以每个细胞的核质比增大，胚胎中DNA因细胞数量的增加而增加，A正确；

B；胚胎发育至囊胚时即开始了细胞分化；细胞分化的实质是基因的选择性表达，B正确；

C；胚胎的早期发育在透明带内进行的阶段称为卵裂期；囊胚发育到一定阶段会被从透明带内挤压出来，这一过程称为孵化，C正确；

D；囊胚分为内细胞团和滋养层；其中滋养层将发育为胎膜和胎盘，但这发生在囊胚期之后，D错误。

故选D。3、C【分析】【分析】

动物细胞培养时，培养基中需要加入糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等营养物质，还需加入血清、血浆等天然物质。细胞需置于含CO2的混合气体的培养箱中培养，CO2的主要作用是维持培养液的pH。

【详解】

A；杂种细胞传代培养需要添加激素及血清等天然成分的完全培养液；A错误；

B；诱导融合后的细胞具有两种细胞的遗传物质；属于染色体变异，B错误；

C、由题可知，子细胞中能够某个子细胞中同时检测到（A+、B+）基因所表达的产物，而不是单独出现A+或者B+所表达的产物，说明基因A+、B+在同一染色体上；C正确；

D、如果子代细胞出现（A+、B-）、（A-、B+）、（A+、B+）和（A-、B-）等所表达的全部基因产物，可能A+、B+位于一条染色体上；不能排除在染色体之间发生了结构变异的可能性，D错误。

故选C。4、A【分析】【分析】

1；土壤中存在着大量纤维素分解酶；包括真菌、细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶；纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖，使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长；

2；微生物常见的接种的方法①平板划线法②稀释涂布平板法；

3；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。

【详解】

A；微生物A所利用的碳源为纤维素；微生物B所利用的碳源为纤维素降解物，A错误；

B；题图中过程②表示生产乙醇的过程；常用的微生物是酵母菌，B正确；

C；根据题图可知；微生物A利用的碳源是纤维素，故要获得微生物A，最好选择富含纤维素的土壤采集土样，C正确；

D；微生物A可利用纤维素作为碳源；故其同化作用类型为异养型，D正确。

故选A。5、D【分析】【分析】

1.米酒制作菌种是酵母菌；代谢类型是异养兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，条件是18~25℃；前期需氧，后期不需氧，酵母菌的呼吸过程如下：

有氧呼吸:第一阶段：在细胞质基质中；一分子葡萄糖形成两分子丙酮酸；少量的[H]和少量能量，这一阶段不需要氧的参与；第二阶段：丙酮酸进入线粒体的基质中，分解为二氧化碳、大量的[H]和少量能量；第三阶段:在线粒体的内膜上，[H]和氧气结合，形成水和大量能量，这一阶段需要氧的参与。

无氧呼吸：第一阶段:在细胞质的基质中；与有氧呼吸的第一阶段完全相同，即一分子的葡萄糖在酶的作用下分解成两分子的丙酮酸，过程中释放少量的H]和少量能量；第二阶段：在细胞质的基质中，丙酮酸在不同酶的催化下，分解为酒精和二氧化碳。

【详解】

A；家庭酿造甜米酒时将米煮熟的原因是便于微生物发酵和可以食用；A错误；

B；冷却的目的是防止温度太高将菌种杀死；B错误；

C；在米饭中央挖洞是为了氧气的进入；进行酵母菌的繁殖，C错误；

D；发酵制米酒时并不需要严格密封；D正确。

故选D。6、C【分析】【分析】

分析题图：甲为抗原；乙为多种细胞（包括为融合的细胞和多种融合的细胞），丙表示经过选择培养基筛选出的杂交瘤细胞，丁表示经过抗体阳性检测出的能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞。

【详解】

A；抗胃癌单克隆抗体可以和甲（抗原）特异性结合；A正确；

B；利用聚乙二醇（化学法）、灭活的病毒（生物法）和电融合（物理法）可诱导细胞融合获得杂种细胞；B正确；

C；用特定的选择培养基对乙筛选；融合具有同种核的细胞和未融合细胞均不能生长，只有融合的杂种细胞才能生长，C错误；

D；需对丙（杂交瘤细胞）进行抗体检测；经过筛选后才能获得丁（能产生特异性抗体的杂交瘤细胞），D正确。

故选C。7、C【分析】【分析】

限制酶主要从原核生物中分离纯化出来。特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。

【详解】

A；由图可知；X与Y识别的核苷酸序列不同，因此X与Y是不同的限制酶，A正确；

B；限制酶与DNA水解酶破坏的化学键相同；都是磷酸二酯键，B正确；

C；具有①②的两个DNA片段可连接成重组分子；核苷酸序列发生了改变，先前能识别的核苷酸序列发生了改变，所以重组后不可以被X或Y切割，C错误；

D；使用X和Y同时切割目的基因和载体可以防止自身环化；但不可以防止目的基因反向链接（因为两种酶切割形成的黏性末端的碱基序列能互补），D正确。

故选C。8、C【分析】【分析】

DNA分子具有可解离的基团；在一定的PH下，这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下，这些带电分子会向着与它所带电荷相反方向的电极移动，这个过程就是电泳。PCR的产物一般通过琼脂凝胶电泳来鉴定。

【详解】

A；在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶浓度、DNA分子的大小和构象等有关；A正确；

B；凝胶中的DNA分子通过染色、可以在波长为300nm的紫外线下被检测出来；B正确；

C；该实验所需材料可以直接从公司购买；缓冲液和酶应分装成小份，并在-20℃储存。使用前，将所需试剂从冰箱拿出，放在冰块上缓慢融化，C错误；

D；电泳技术可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定；D正确。

故选C。二、多选题(共9题，共18分)9、B:C【分析】【分析】

胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。

【详解】

A；由桑椹胚发育到囊胚进行的是有丝分裂；形成的每个细胞内DNA总量不变，A错误；

B；囊胚期细胞出现了细胞分化；但细胞分化的实质是基因的选择性表达，因此其遗传物质未发生改变，B正确；

C；囊胚期内细胞团和滋养层细胞的差异不是DNA复制水平上的差异；而是转录水平上的差异，即基因的选择性表达，C正确；

D；受精卵在输卵管中形成；后在子宫中发育，故胚胎发育的早期不可能在卵巢，D错误。

故选BC。10、B:D【分析】【分析】

动物细胞核移植技术是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

【详解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的体细胞通过克隆技术（属于无性繁殖）获得的；所以其基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰，A正确；

B；经基因编辑后形成的胚胎不一定都能发育成克隆疾病猴；B错误；

C；克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物；C正确；

D；不能利用该技术进行克隆人的研究；D错误。

故选BD。

【点睛】11、A:B:C【分析】【分析】

分析图示可知；将卵子去核，然后注入Oct4转基因小鼠的精子，用氧化锶激活，可使该换核的细胞形成雄原核，并分裂分化形成单倍体囊，最终形成孤雄单倍体胚胎干细胞。

【详解】

A；由于桑椹胚期的细胞没有出现分化；桑椹胚前的细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，是全能性细胞，A正确；

B；从题干可知；Oct4基因在维持胚胎干细胞全能性和自我更新中发挥极其重要的作用，可推测Oct4基因的表达有利于延缓衰老，B正确；

C；过程③胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性；体积较小，细胞核大，核仁明显，C正确；

D；卵巢中取出来的是未成熟的卵细胞；要进行培养到减数第二次分裂的中期才能受精，不能直接用于过程①，D错误。

故选ABC。

【点睛】12、B:C:D【分析】【分析】

PCR技术：1；概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。2、原理：DNA复制。3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

A；过程①是由mRNA形成单链DNA的过程；表示逆转录，需要RNA、逆转录酶、引物、脱氧核苷酸等条件，A错误；

B；真核细胞中DNA的外显子部分转录的RNA拼接形成mRNA；因此真核细胞的mRNA经过程①②逆转录过程获得的DNA无内含子片段，B正确；

C；CG含量越高；氢键越多，结构越稳定，因此过程③PCR扩增时引物中的CG含量会影响退火温度，C正确；

D；新冠病毒遗传物质是RNA；RT-PCR技术可应用于新冠病毒的核酸检测，D正确。

故选BCD。

【点睛】13、A:B【分析】【分析】

1.微生物接种常用的两种方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落。

2.选择培养基中培养基中加入某种化学成分；根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学；物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率。

【详解】

A；筛选高效降解淀粉的菌种；则选择培养基中的碳源应为淀粉，根据图示可知，图中菌株采用稀释涂布平板法进行接种，目的是使菌落分布较均匀，然后放在相同且适宜条件下培养，A错误；

B；高效降解淀粉的菌种可以产生淀粉酶将培养基中的淀粉水解；因此可以用碘液鉴定培养基中淀粉的分解情况，菌落形成后加入碘液染色，比较菌株菌落周围透明圈的大小。产生的淀粉酶活性越高，淀粉分解量越多，培养基中筛选菌落周围透明圈越大，因此图中菌落①与菌落②周围透明圈的大小不同，说明分泌的淀粉酶活性不同，B错误；

C；①②分别属于真菌和细菌；真菌属于真核生物，有以核膜为界限的细胞核，细菌属于原核生物，没有以核膜为界限的细胞核，只有拟核，C正确；

D；实验结束后；对使用过的培养基要灭菌处理后再倒掉，以防止杂菌污染环境，D正确。

故选AB。14、A:D【分析】【分析】

根据题意分析：茯砖茶的制作包括发酵与发花等工序；发酵过程涉及多种酶催化，发酵后饮用有利于营养物质的吸收。

【详解】

A；酵母菌是真菌；不是细菌，A错误；

B；下“诱水”就是将原有老茶煮水后喷洒在料堆之上；相当于微生物培养过程中的“接种”，推测相关菌种可耐热，B正确；

C；发酵过程涉及多种酶催化；发酵后富含多种小分子营养物质，因此发酵后饮用有利于营养物质的吸收，C正确；

D；茯砖茶在储藏过程中仍然继续自然发酵；因此灭菌并密封处理，不利于长期保存，D错误。

故选AD。15、D【分析】【分析】

动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞；制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。

【详解】

A；在动物细胞培养的过程中；当出现接触抑制后，细胞克隆停止增殖，A正确；

B；在细胞分裂的过程中；可能会发生基因突变，因此，克隆细胞与接种的细胞的遗传信息不一定相同，B正确；

C；胰蛋白酶可使细胞分散成单个；从而利于计数，C正确；

D；需采用液体培养基培养才能形成细胞克隆；D错误。

故选D。16、A:B:C【分析】【分析】

1；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）．对待转基因技术的正确做法是趋利避害；不能因噎废食.

2；对生物技术中的伦理问题的争论；中国政府的态度：禁止生殖性克隆人，坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆人.

【详解】

A；科学家要对自己的科学研究负责；对社会负责，重视转基因生物的安全性等问题，A正确；

B；科学家应向公众传播科学知识；使人们正确认识生物技术的安全性和伦理道德问题，B正确；

C；公众应科学理性地对待转基因生物和转基因食品等生物技术问题；正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食，C正确；

D；公众应该理性地、负责任地对待这些问题；不可以根据自己的价值观采取不同的态度，D错误。

故选ABC。17、A:B:C【分析】【分析】

我国政府一再重申四不原则：不赞成；不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。原因如下：1克隆人只是某些人出于某种目的制造出的“产品”；没有“父母”，这可能导致他们在心理上受到伤害；2由于技术问题，可能孕育出有严重生理缺陷的克隆人；3克隆人的家庭地位难以认定，这可能使以血缘为纽带的父子、兄弟和姐妹等人伦关系消亡；4生殖性克隆人冲击了现有的一些有关婚姻、家庭和两性关系的伦理道德观念；5生殖性克隆人是对人类尊严的侵犯；6生殖性克隆人破坏了人类基因多样性的天然属性，不利于人类的生存和进化。

【详解】

A；过程1代表对卵母细胞或卵细胞采用显微操作去核；而不是对体细胞去核，也可以采用紫外线照射去除细胞核，A错误；

B；青蛙属于体外受精；体外发育不需要进行胚胎移植，B错误；

C；胚胎细胞分化程度低；移植成功率远高于成体细胞核移植，C错误；

D；我国政府不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验；但是支持治疗性克隆，D正确。

故选ABC。三、填空题(共9题，共18分)18、略

【分析】【详解】

为最大程度的保障人类权益；签署了禁止生物武器公约：

（1）《禁止试制；生产和储存并销毁细菌（生物）和毒剂武器公约》；简称《禁止生物武器公约》。

（2）我国对于生物武器的态度是在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。【解析】①.《禁止生物武器公约》②.不发展③.不生产④.不储存19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】脲酶氨碱性增强升高pH的变化酚红指示剂红20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】能在受体细胞中复制并稳定保存具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】噬菌体、动植物病毒22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2种引物DNA或RNA20—3023、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。24、略

【分析】【详解】

在日常生活中；我们遇到过的与克隆技术有关的问题有：

①濒临灭绝动物的克隆：克隆可以拯救濒危的国家保护动物以及植物；我们可运用克隆，复制濒临灭绝的生物，让其不至于在我们的生活中消失；

②农业克隆：应用于农业等领域；通过转基因的方式，增加粮食的亩产量，提高土地的单位出产量；

③细胞克隆替代或者修复人体细胞问题；比如胚胎干细胞；

④畜牧业克隆：应用于畜牧业，提升优良品种群体基数，缩短畜牧育种年限。【解析】有，比如：①濒临灭绝动物的克隆；②农业克隆：应用于农业等领域，通过转基因的方式，增加粮食的亩产量，提高土地的单位出产量；③细胞克隆替代或者修复人体细胞问题，比如胚胎干细胞；④畜牧业克隆：应用于畜牧业，提升优良品种群体基数，缩短畜牧育种年限。25、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因的检测和鉴定26、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因DNA分子杂交技术。四、实验题(共2题，共12分)27、略

【分析】【详解】

(1)植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等。具体采用哪种方法要根据植物原料的特点来决定。柚皮易焦糊，宜采用压榨法提取柚皮精油。压榨过程中得到的糊状液体需用过滤法除去其中固定杂质。

(2)筛选、纯化培养某一特定微生物时，常用平板划线法或稀释涂布平板法。为防止杂菌的污染，需对器具培养基等进行消毒灭菌处理，培养基宜采用高压蒸汽灭菌锅进行高温灭菌处理，而超净工作台常使用紫外线或化学药物进行消毒处理。

(3)微生物培养过程中为微生物的生长提供氮源的有尿素、蛋白胨等含氮丰富的物质。电泳法纯化特定生物成分，是利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，这些不同使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中不同分子的分离。当待分离分子所带电荷相同时，分子量越大，电泳速度越慢。

(4)抑菌实验时；在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈，透明圈越大，抑菌效果越好。

【点睛】【解析】①.压榨②.过滤③.稀释涂布平板法(或：稀释混合平板法)④.高压蒸汽灭菌锅⑤.消毒⑥.氮源⑦.越慢⑧.直径(或：大小)28、略

【分析】【分析】

微生物的分离：①利用该分离对象对某一营养物质的“嗜好”；专门在培养基中加入该营养物质，使该微生物大量增殖。这些物质主要是一些特殊的碳源；氮源，如纤维素可用来富集纤维素分解微生物，尿素可用来富集尿素分解微生物。②利用该分离对象对某种抑制物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物质，经培养后，由于原来占优势的它种微生物的生长受到抑制，而分离对象却可趁机大量增殖，使之在数量上占优势。如筛选酵母菌和霉菌，在培养基中加入青霉素，因青霉素可抑制细菌和放线菌的细胞壁的合成，从而抑制两类微生物的生长，而酵母菌和霉菌正常生长增殖。

【详解】

（1）微生物的生长需要碳源；氮源、水和无机盐；①中木糖含有C、H、O元素，故能提供碳源，硝酸钾中含有N元素，可以提供氮源和无机盐。

（2）分离筛选枯草芽孢杆菌需要得到单菌落；②→③中梯度稀释的目的是将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在固体培养基表面形成单个菌落。

（3）制作的平板需要倒置的目的除了防止培养基中水分过快蒸发之外；还可以防止冷凝水落入培养基造成污染。

（4）分析题意可知，A处接种黑腐皮壳菌，在距离A处等距离的B1~B4处分别接种等量的4个枯草芽孢杆菌品系；在适宜条件下培养3－5天，由于枯草芽孢杆菌能抑制黑腐皮壳菌生长，通过观测黑腐皮壳菌菌落的形状（黑腐皮壳菌菌落边缘与4个枯草芽孢杆菌菌落的距离），就能筛选出抑菌更好的枯草芽孢杆菌菌株。

（5）在利用稀释涂布平板法统计土样中活菌的数目时；为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。当两个或多个细菌连在一起时平板上观察到的只是一个菌落，故该方法所得结果往往比实际细菌的数目要少。

【点睛】

本题考查微生物的分离和计数的相关知识，意在考查考生利用所学知识解决实际问题的能力，难度中等。【解析】提供碳源，提供氮源和无机盐将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在固体培养基表面形成单个菌落防止冷凝水落入培养基造成污染观测黑腐皮壳菌菌落的形状（黑腐皮壳菌菌落边缘与4个枯草芽孢杆菌菌落的距离）30～300当两个或多个细菌连在一起时平板上观察到的只是一个菌落五、综合题(共4题，共36分)29、略

【分析】【分析】

平板划线法：

优点：可以观察菌落特征；对混合菌进行分离。此法主要用于菌种分纯，获得单菌落。

缺点：不能用于菌落计数。

稀释涂布平板法：

优点：可以用于菌落计数；可以观察菌落特征。

缺点：接种前需梯度稀释；吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延。

【详解】

（1）根据题图；培养基甲上形成的菌落分布比较均匀，图中①过程采用的接种方法是稀释涂布平板法。

（2）该实验的目的是获得能高效分解纤维素的酵母菌；所用培养基中唯一的碳源应该是纤维素。培养基甲是固体培养基，其中含有凝固剂，培养基乙是液体培养基，其中不含凝固剂。

（3）稀释涂布平板法和显微镜直接计数法都能用于微生物的计数；显微镜直接计数法的优点是快速，观察到马上可以计数，稀释涂布平板法最大的缺点是速度慢，需要平板上长出菌落一段时间后才能计数。时效性较好的是显微镜直接计数法。

（4）B菌落周围的透明圈直径与菌落直径比值最大，说明B菌株分解纤维素能力最强。【解析】(1)稀释涂布平板法该方法在培养基甲上形成的菌落分布比较均匀（菌落分布较均匀）

(2)纤维素培养基甲中含有凝固剂；培养基乙中不含凝固剂。

(3)稀释涂布平板法显微镜直接计数法显微镜直接计数法。

(4)B30、略

【分析】【分析】

PCR是一项体外复制DNA的技术；原理是DNA的复制。培养基一般含有碳源；氮源、水和无机盐等营养物质。微生物常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线法的接种工具是接种环，稀释涂布平板法的接种工具是涂布器。

【详解】

（1）分离某种化合物降解菌；那么该降解菌就会以该化合物为唯一碳源或氮源，所以低温条件下，进行苯酚降解菌的分离是以苯酚为唯一碳源，而培养基的成分中除了碳源外，还需要氮源；水和无机盐等营养物质。

（2）要获得纯净的微生物须从微生物群体中将目的菌分离出来；所以获得纯净的微生物的关键是防止杂菌污染。

（3）采用平板划线法分离苯酚降解菌时；需要进行对照设置，检验灭菌是否合格或者操作过程中是否有杂菌污染，所以需要将接种后的平板和一个未接种的平板放入10℃恒温培养箱中进行培养。

（4）筛选某种微生物时；需要用到选择培养基，而选择培养基筛选的原理是人为提供有利于目的菌的生长条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长。

（5）PCR是一项体外复制DNA的技术，PCR的每次循环一般可以分为变性、复性和延伸三个阶段，引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸。【解析】(1)苯酚氮源；水和无机盐。

(2)防止杂菌污染。

(3)一个未接种的平板。

(4)人为提供有利于目的菌生长的条件；同时抑制或阻止其他微生物的生长。

(5)变性、复性和延伸使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸31、略

【分析】【分析】

据图分析；图甲中目标DNA中间的一条链上的碱基序列与向导RNA的识别序列碱基互补配对，引导核酸内切酶Cas9将目标DNA的该片段两条单链都切开；图乙为基因C的结构图，含有两条单链；图丙为tRNA，是翻译过程中转运氨基酸的根据，其下端的三个碱基为反密码子，与mRNA上的密码子配对。

【详解】

（1）向导RNA中的双链区应遵循碱基互补配对原则。

（2）由于图中的识别序列和α链上的碱基序列都与对应的DNA单链上的碱基互补配对；所以向导RNA上相应的识别序列为．．．．．．UCCAGAAUC．．．．．．。

（3）Cas9蛋白属于蛋白质；在核糖体中合成；图丙代表的是tRNA分子的结构简图，组成该分子的单体是核糖核苷酸；tRNA运输的氨基酸由mRNA上的密码子来决定，而密码子的阅读顺序应沿图丙中核糖体的移动方向来阅读，故密码子应为GCC，其决定的氨基酸为丙氨酸。

（4）分析图乙可知，由于密码子为AUG或GUG，其对应的模板链上的碱基序列为TAC或CAC，因此模板链为b链；以b链为模板转录成的mRNA的碱基序列为GUAUGCAAGUCUCC；AUG为起始密码子，故第3个氨基酸的密码子为GUC，若由于基因C中一个碱基对发生替换，而导致合成的肽链中第3位氨基酸变成了亮氨酸，其密码子有CUU；C.CUA、CUG，则对比GUC可知，密码子由GUC变成了CUC，故推知该基因中碱基对替换情况是G//C替换成C//G。

【点睛】

解答本题的关键是掌握