2025年浙教版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年浙教版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共7题，共14分)1、下列关于植物组织培养的叙述中，错误的是（）A.其原理是细胞的全能性B.必须在无菌条件下进行C.再分化的过程中需要一定光照D.一般需用培养液进行培养2、将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因Pin-Ⅱ导入杨树细胞，培育成了抗虫杨树。下图表示含目的基因的DNA分子和农杆菌质粒，图中Apr表示氨苄青霉素抗性基因，Ner表示新霉素抗性基因；箭头表示识别序列完全不同的4种限制酶的酶切位点。下列叙述不正确的是（）

A.目的基因插入到质粒的T-DNA上，才能整合到受体细胞染色体中B.为使目的基因与质粒高效重组，最好选用EcoRI和PstIC.成功导入重组质粒的细胞会表现为不抗氨苄青霉素、抗新霉素D.可用DNA分子杂交或抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否表达3、下列有关生物技术安全性及伦理问题的说法，错误的是（）A.转基因产品的安全性争论重点发生在转基因食品等方面B.基因身份证上可以检测到个人的所有基因C.反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿性别D.当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验，但不反对治疗性克隆4、发酵工程的正确操作过程是（）

①发酵②培养基的配制③灭菌④产品的分离与提纯⑤菌种的选育⑥扩大培养⑦接种A.⑤②⑥⑦①③④B.⑤⑥②③⑦①④C.②⑤③⑦①⑥④D.⑦③⑤②③①④5、下列关于限制酶的叙述，错误的是（）A.限制酶可从原核生物中提取B.同一种限制酶切割不同的DNA分子产生的末端能够进行碱基互补配对C.限制酶能任意切割DNA分子，从而产生大量的DNA片段D.每种限制酶只能识别特定的脱氧核苷酸序列6、实验人员利用矮牵牛（2n=14）的红色花瓣细胞与枸杞（4n=48）的叶肉细胞，进行植物体细胞杂交。下列有关叙述错误的是（）A.可将两种植物细胞置于含纤维素酶和果胶酶的等渗溶液中处理B.融合后的原生质体均含有6个染色体组、62条染色体C.可利用光学显微镜观察，对融合的原生质体进行筛选D.植物体细胞杂交技术打破了生殖隔离，实现了远缘杂交育种7、用现代生物技术培育生物新品种，关于其优越性说法不正确的是（）A.克隆技术可以快速繁殖优良性状的家畜B.现代生物技术可以迅速使新品种形成群落C.现代生物技术可以克服远缘杂交不亲和的障碍D.现代转基因生物技术可以迅速改变生物的基因组成评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)8、限制酶BamHⅠ和BglⅡ是两种常见的工具酶，它们的识别序列及切割位点依次为G↓GATCC和A↓GATCT。研究中用BamHⅠ切割DNA获得目的基因，用BglⅡ切割质粒，并连接得到重组质粒。相关叙述错误的是（）A.酶切过程中，需控制好酶浓度、温度和反应时间等因素B.目的基因经BamHⅠ切割后形成的黏性末端是—CTAGC.分别用两种限制酶切割，保证了目的基因定向插入质粒D.经两种酶处理得到的重组质粒不能再被这两种酶所识别9、化工厂污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A；研究人员用化合物A；磷酸盐、镁盐以及微量元素等配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）实验的主要步骤如图所示。下列叙述错误的是（）

A.培养基中加入化合物A作为唯一碳源，目的是为了筛选目的菌B.实验培养过程中进行振荡培养，可使目的菌和培养液充分接触C.为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应立即快速挑取菌落D.将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验的目的是获得大量菌种10、下列关于植物组织培养及其应用的说法中，正确的是（）A.植物体体内具完整细胞结构的活细胞均可作为组织培养的外植体B.不同培养阶段的培养基中生长素与细胞分裂素的比例应不同C.单倍体育种和转基因植物的培育需要利用植物组织培养技术D.利用植物组织培养技术可实现某些重要细胞产物的工厂化生产11、某种病毒的主要表面抗原为S蛋白，用S蛋白制备的单克隆抗体可用于该种病毒的检测。下列说法正确的是（）

A.B淋巴细胞分离自经S蛋白免疫过的小鼠B.稀释培养后多孔玻璃板中的杂交瘤细胞数目可能不到细胞总数的一半C.集落①的细胞既能无限增殖又能产生单克隆抗体D.集落②～④的细胞可用于扩大化培养生产单克隆抗体12、为了检测药物X、Y和Z的抗癌效果，在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肺癌细胞使其贴壁生长。实验组分别加入等体积相同浓度的溶于二甲基亚矾（溶剂）的药物X、Y或Z，培养过程及结果如图所示。下列叙述错误的是（）

实验结果见下表：。组别细胞数目（个/孔）对照7．8×106药物X6．7×104药物Y5．3×105药物Z8．0×106

A.对照组中只需加入等体积的二甲基亚矾溶剂即可B.细胞培养液中通常需要加入一定量的抗生素防止病毒污染C.计数时可用胰蛋白酶处理贴壁细胞，使肺癌细胞脱落下来D.根据实验结果，三种药物均具有抗癌效果，但药物X的抗癌效果最好13、被誉为“魔法子弹”的抗体—药物偶联物（ADC）主要由三部分构成：“杀伤弹药”——小分子细胞毒性药物（有效载荷）、“制导系统”——靶向肿瘤细胞表面特异性抗原的单克隆抗体以及将两者连接起来的连接子。这种结构的优势在于具备高效的靶向性和杀伤肿瘤细胞的能力。下列说法错误的是（）A.ADC中的单克隆抗体可特异性消除肿瘤细胞B.ADC的用药量比常规药物使用量少C.ADC中的单克隆抗体的制备需用到细胞融合技术D.ADC可被定向运输到肿瘤细胞14、荧光原位杂交可用荧光标记的特异DNA片段为探针；与染色体上对应的DNA片段结合，从而将特定的基因在染色体上定位。下列说法正确的是（）

A.由图1可知，DNA探针的本质是荧光标记的DNA片段，其基本单位是脱氧核苷酸B.由图2可知，高温可以使双链DNA分子中的氢键断裂形成DNA单链C.图2中两条姐妹染色单体中最多可有2条荧光标记的DNA片段D.若C分别代表不同来源的一个染色体组，已知AA和BB中各有一对同源染色体可被荧光探针标记。若植物甲（AABB）与植物乙（AACC）杂交，则F1有丝分裂中期的细胞中可观察到6个荧光点评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)15、______——“分子缝合针”16、利用DNA和蛋白质等其它成分在___________中的溶解度不同，选择适当的盐浓度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。17、注意：a生理基础：______，______

b植物细胞融合前需用______和______除去细胞壁18、今年年初；爆发了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠状病毒通过其表面的S-蛋白与人细胞膜上的ACE2相互识别，感染人的呼吸道上皮细胞。请分析回答问题：

（1）新型冠状病毒表面的S-蛋白作为_________剌激淋巴细胞，使机体产生_________性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是_________。

（2）感染病毒后，免疫系统对肺细胞强烈攻击引发肺炎，此时可通过适度使用_________对病人进行治疗；使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）科学家采集了感染新型冠状病毒并已康复的甲、乙两人的血液，检测相关抗体的水平，结果如图1。据此分析，应选取_________的B淋巴细胞用以制备单克隆抗体（单抗）。

（4）将制备的多种单抗分别与病毒混合，然后检测病毒对宿主细胞的感染率，结果如图2。据此分析，对病毒抑制效果最好的单抗是__________号。

（5）患者康复后一段时间，若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的__________细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。19、有时还需进行______的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现______。评卷人得分四、判断题(共2题，共10分)20、雄性动物刚刚排出的精子并不具有受精能力，必须获能后才具备受精能力()A.正确B.错误21、中国政府积极支持制定《禁止生殖性克隆人国际公约》，坚决反对克隆人，不允许进行任何生殖性克隆人实验。（选择性必修3P108）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共2题，共14分)22、单克隆抗体在防治H7N9型禽流感上具有显著疗效。下图是科研人员制备H7N9病毒的单克隆抗体X的过程。回答下列问题：

（1）上图中B淋巴细胞是取自______________的动物或人。融合的M细胞先用选择培养基进行筛选，再进行克隆化培养和_______________以得到符合要求的N细胞，N细胞的名称是______________。

（2）为了进一步研究H7N9病毒的单克隆抗体X（以下简称抗体X）的效果及作用机制；科学家开展了如下实验：

实验一：在体外将抗体X与HA蛋白（H7N9病毒表面的一种蛋白）混合，检测抗体X对HA蛋白的亲和力。实验结果如下表所示。（注：KD值越小，抗体和HA蛋白的亲和力越高；机体Y为一种已知的H7N9病毒的抗体。）。抗体种类KD抗体X5．32×10-9M抗体Y1．95×10-9M

实验二：以一定浓度的H7N9病毒感染小鼠；一天后向小鼠腹腔分别注射一定剂量的抗体X；Y；14天后测定小鼠存活情况和体重变化。实验结果表明：抗体X的体内治疗效果优于抗体Y。

①实验一结果表明：对H7N9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是__________。

②分析实验一和实验二的结果差异，研究人员提出假说：抗体除了中和病毒活性之外，还可以通过和巨噬细胞表面的受体相结合，从而增强巨噬细胞的吞噬作用，进而清除被病毒感染的靶细胞。请以巨噬细胞、感染了H7N9病毒的肺上皮细胞、细胞培养液、抗体X、抗体Y和无关抗体等为材料，设计实验验证上述假说。写出实验思路__________。23、T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通过污染饲料引起畜禽中毒反应。CYP3A是猪体内降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导CYP3A基因表达水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（选填“初级”或“次级”）代谢产物，主要以_____方式进入猪细胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因启动子上游的两个调控序列，为研究T-2毒素诱导CYP3A基因表达的机理，研究者首先将不同调控序列分别和CYP3A基因启动子及荧光素酶基因（LUC基因）连接构建表达载体，再分别导入猪肝细胞，然后向各组猪肝细胞培养液中加入_____，适宜条件下进行培养；24h后检测LUC酶活性，计算启动子活性相对值，结果如图1所示。据图可知，B1和B2调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1两种蛋白均参与T-2毒素对CYP3A的诱导；B2是Spl的结合位点。研究者推测，NF-Y通过与B1结合，与Sp1共同调控CYP3A基因的表达。

①为证明Bl是NF-Y的结合位点，研究者依据B1序列制备了野生型和突变型探针，分别与猪肝细胞核蛋白提取物混合，实验分组及结果如图2．据实验结果推测，第4组出现阻滞带的原因是_____，进而推测第5组结果产生的原因是_____。

②研究者设计实验进一步证明了NF-Y和Spl通过互作共同发挥调控功能，实验设计思路是：增大或缩小B1和B2两者之间的距离，检测CYP3A基因的启动子活性。据此分析，实验假设是_____。评卷人得分六、综合题(共4题，共24分)24、水稻胚乳中含直链淀粉和支链淀粉，直链淀粉所占比例越小糯性越强。科研人员将能表达出基因编辑系统的DNA序列转入水稻，实现了对直链淀粉合成酶基因（Wx基因）启动子序列的定点编辑；从而获得了3个突变品系。

（1）将能表达出基因编辑系统的DNA序列插入Ti质粒构建重组载体时，所需的酶是______，重组载体进入水稻细胞并在细胞内维持稳定和表达的过程称为_____________。

（2）根据启动子的作用推测，Wx基因启动子序列的改变影响了______，从而改变了Wx基因的转录水平。与野生型水稻相比，3个突变品系中Wx基因控制合成的直链淀粉合成酶的氨基酸序列___(填：发生或不发生)改变，原因是_____________。

（3）为检测启动子变化对Wx基因表达的影响，科研人员需要检测Wx基因转录产生的mRNA（WxmRNA）的量。检测时分别提取各品系胚乳中的总RNA，经_____过程获得总cDNA。通过PCR技术可在总cDNA中专一性的扩增出Wx基因的cDNA，原因是_____________。

（4）各品系WxmRNA量的检测结果如图所示，据图推测糯性最强的品系为_____，原因是_____________。25、地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨；其中40%～60%能被土壤中某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶。对这些微生物的研究与应用，使人们能够利用秸秆等生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。已知刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不与水解后的纤维二糖；葡萄糖等发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红与纤维素形成红色复合物；而当纤维素被纤维素分解菌分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈（如下图所示）。请回答下列问题。

几种纤维素分解菌在刚果红培养基上形成的透明圈。

（1）现在要从土壤中分离纤维素分解菌；请你给出详细的实验方案。_______

（2）你打算到什么环境中去寻找纤维素分解菌？为什么？_______

（3）有同学说，可以把滤纸埋在土壤中，经过一段时间后，再从已腐烂的滤纸上筛选纤维素分解菌。请你评价这一做法。_______26、为了研究低温诱导对某基因的启动子P活性的影响；科研人员进行了启动子P的PCR提取；特定表达载体的构建和转基因烟草的功能鉴定。该基因及其启动子P的结构及相应限制酶的切割位点如下图所示，图中浅灰色区域碱基序列是已知的，启动子P（图中深灰色区域）及上游碱基序列未知，片段Ⅰ和片段Ⅱ中的字母A~F均表示引物。请回答下列问题。

(1)启动子是_____________识别和结合的部位。不能直接根据片段Ⅰ扩增启动子P的原因是_____________。

(2)为了能扩增正常启动子P，科研人员先用__________酶处理上图中的片段Ⅰ，使片段Ⅰ成为环状DNA；再将环状DNA用酶_____________处理得到了片段Ⅱ，如下图所示。根据片段Ⅱ，用引物_____________组合（用C；D、E、F表示）能扩增出启动子P。

(3)已知卡那霉素可抑制烟草细胞的生长，基因M可在烟草的根部正常表达，其表达产物可将X-Gluc水解生成蓝色物质。将启动子P和基因M结合并与含有卡那霉素抗性基因的Ti-质粒重组构建基因表达载体。将表达载体加入含有烟草细胞的培养基中，筛选出所需的烟草细胞，然后经过培养获得转基因烟草植株。将上述转基因烟草植株分为A、B两组，A组在常温（25℃，对照组）下培养，B组在低温（4℃，实验组）下培养，一段时间后取A、B的幼根，浸入适量_____________溶液中，观察烟草细胞中基因M的表达情况（表达强度越大，细胞表现的蓝色越深）。若A、B组的结果分别为_____________，则说明低温抑制启动子P的功能。27、蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”；有着超强的抗张强度。可制成防弹背心；人造韧带等。蜘蛛通过在腹部的腺体生成蜘蛛丝，并使用一种名为“喷丝头”的器官将蛛丝排出体外。由于蜘蛛会互相攻击，吃掉同类，因此无法像蚕丝一样通过养殖大量生产。利用现代生物技术生产蜘蛛丝不断取得成功，请回答下列问题：

运用基因工程技术已经创造出了“蜘蛛羊”过程如图；回答下列问题：

(1)蛛丝蛋白基因可从蜘蛛的________文库中获取，获取的基因不含启动子。甲过程需用到的工具是________（填工具名称）。检测目的基因是否导入受体细胞可用DNA分子杂交技术，要用_____________作探针。

(2)重组细胞培养成早期胚胎的过程中，需要提供________、无毒的条件，若在培养基中加入抗生素________（能、不能）抑制真菌的生长。若成功导入目的基因的转基因羊并没有产生相应的蛛丝蛋白，根据中心法则分析，其可能的原因是________。

(3)可将________技术结合基因工程等技术得到具有新性状的克隆羊。

(4)如图为蛛丝蛋白基因对应的DNA片段结构示意图。若用PCR技术获取目的基因，则与之对应的引物结合部位应该是图中的________（填数字）；该DNA分子在PCR仪中经过4次循环，一共消耗每种引物数量________个。

蛛丝蛋白产量低；科学家尝试用现代生物技术生产蛛丝蛋白，如利用微生物发酵，转基因动植物等。家蚕是唯一可以通过人工养殖大量获取丝纤维的动物，由于蚕丝蛋白和蜘蛛丝蛋白在结构上有一定的相似性，因此利用家蚕遗传改造大量获取类蜘蛛丝纤维是一个可行性高的策略。请回答下列问题：

(5)下列关于应用现代生物技术生产蛛丝蛋白叙述不正确的是____。A．不可采用细菌和植物作为表达体系，但可选用酵母菌作为表达体系B．将含有丝蛋白基因的表达载体导入雌性动物的乳腺细胞中可获得乳腺生物反应器C．若受体细胞为大肠杆菌，菌落的大小、有无荚膜、隆起程度等肉眼可见的特征都可作为优秀菌种鉴定的依据D．筛选出高产蛛丝蛋白菌种需经扩大培养，再接种到发酵罐中进行发酵生产(6)中国科学院谭安江研究组发现家蚕丝蛋白的主要成分有丝素重链（FibH），丝素轻链（FibL），丝胶蛋白（Sericin）等，其中FibH约占整个丝蛋白含量的70%以上。研究组利用基因工程的方法在家蚕丝腺和蚕茧中大量表达蜘蛛丝蛋白，其主要思路是借助转基因技术敲除________，同时保留了其上下游完整的调控序列，定点整合了含有部分蜘蛛丝基因和________的DNA片段；以便目的基因的筛选。

(7)研究人员发现若将蛛丝蛋白31号位的色氨酸替换为酪氨酸，蛛丝韧性可提高50%，利用蛋白质工程对蛛丝蛋白进行改造，基本途径是：预期蛋白质功能→________蛋白质空间结构→推测氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列。参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、D【分析】【分析】

1；植物组织培养的原理：植物细胞具有全能性。

2；植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例；特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，被称为“激素杠杆”。

【详解】

A；植物组织培养所依据的原理是细胞的全能性；A正确；

B；为保证实验成功；植物组织培养技术必须在无菌条件下进行，B正确；

C；由愈伤组织再分化过程中需要光照；原因是叶肉细胞中的叶绿素的合成需要光照，C正确；

D；植物组织培养一般需要用MS的固体培养基；D错误。

故选D。2、D【分析】【分析】

1；基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

2；分析图示可知；为保证目的基因的完整性，不能选用BamHⅠ酶；为了防止目的基因自身环化，应选用目的基因两侧的两种不同的限制酶；重组质粒中至少要保留一个抗生素的抗性基因，PstI和TthⅢ1只能选其中一个；综上所述，可选用EcoRI和PstI或者EcoRI和TthⅢ1，为保留重组质粒中的复制原点，最好选用EcoRI和PstI同时切割目的基因和质粒。

【详解】

A；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞；并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据这一特点，将目的基因插入到质粒的T-DNA上，才能整合到受体细胞染色体中，A正确；

B；由分析可知；为使目的基因与质粒高效重组，最好选用EcoRI和PstI同时切割目的基因和质粒，B正确；

C；由分析可知；应选用EcoRI和PstI切割质粒，氨苄青霉素抗性基因被破坏，故成功导入重组质粒的细胞会表现为不抗氨苄青霉素、抗新霉素，C正确；

D；检测目的基因是否表达应检测是否成功产生蛋白质；可用抗原-抗体杂交技术，D错误。

故选D。3、B【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。对待转基因技术的利弊；正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。

【详解】

A；转基因产品的安全性争论重点发生在转基因食品等方面；A正确；

B；基因身份证主要记录了个人的致病基因和易感基因；因此不能检测到个人的所有基因，B错误；

C；反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿性别；C正确；

D；当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验；但不反对治疗性克隆，D正确。

故选B。4、B【分析】【分析】

发酵工程；是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育；培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面，据此答题。

【详解】

发酵工程的基本操作过程为：菌种的选育→扩大培养→培养基的配制→灭菌→接种→发酵过程→产品的分离提纯；因此正确的操作过程是⑤⑥②③⑦①④，B正确，ACD错误。

故选B。5、C【分析】【分析】

限制酶属于基因工程中的工具酶的一种：

来源：主要从原核生物中分离纯化出来。

特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。

作用部位：磷酸二酯键。

【详解】

A；限制酶可以从某些原核生物中提取；A正确；

B；同一种限制酶切割不同的DNA分子时；由于识别位点相同，所产生的末端相同，能够进行碱基互补配对，B正确；

C；限制酶只能识别特定的脱氧核苷酸序列；而不能任意切割DNA分子，C错误；

D；一种限制酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列；D正确。

故选C。6、B【分析】【分析】

诱导植物细胞融合前；先要采用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁，获得原生质体；诱导植物原生质体融合时，可以采用物理方法（电激；振动等）和化学方法（聚乙二醇）；若原生质体均为两两融合，则会形成3种细胞，即矮牵牛细胞自身融合的细胞、枸杞细胞自身融合的细胞，杂种细胞，所以融合后的细胞中染色体数目为28条或96条或62条；可利用显微镜筛选得到融合后的杂种原生质体。

【详解】

A；可将两种植物细胞置于含纤维素酶和果胶酶的等渗溶液中处理；去除植物细胞壁，A正确；

B；原生质体融合方式可能是矮牵牛细胞与矮牵牛细胞融合含有4个染色体组、28条染色体；枸杞细胞与枸杞细胞融合含有8个染色体组、96条染色体；矮牵牛细胞与枸杞细胞融合含有6个染色体组、62条染色体，B错误；

C；通过B可知；不同细胞融合，含有染色体数不同，可利用光学显微镜观察，对融合的原生质体进行筛选，C正确；

D；植物体细胞杂交技术打破了生殖隔离；实现了远缘杂交育种，D正确。

故选B。7、B【分析】【分析】

现代转基因生物技术可以迅速改变生物的基因组成；基因工程和细胞工程等现代生物技术培育农作物新品种克服了远缘杂交不亲和障碍，在培育作物新品种方面所取得的重大突破。

【详解】

A；克隆技术可以在短时间内大量繁殖；故可快速繁殖优良性状的家畜，A正确；

B；现代生物技术可以迅速使新品种形成一个种群；群落包括该区域的所有生物，B错误；

C；现代生物技术中通过体细胞杂交可以克服远源杂交不亲和的障碍；C正确；

D；现代转基因生物技术可以迅速改变生物的基因组成；D正确。

故选B。

【点睛】二、多选题(共7题，共14分)8、B:C【分析】【分析】

关于限制酶；考生可以从以下几方面把握：（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（3）结果：形成黏性末端或平末端。

【详解】

A；影响酶促反应的因素有温度、pH、酶浓度、底物浓度等；因此酶切过程中，需控制好酶浓度、温度和反应时间等因素，A正确；

B；根据题意可知；限制酶BamHⅠ的识别序列及切割位点为G↓GATCC，因此目的基因经BamHI切割后形成的黏性末端是是-GATC或CTAG-，B错误；

C；由于这两种酶切割形成的黏性末端相同；因此分别用这两种限制酶切割，不能保证目的基因定向插入质粒，C错误；

D；经两种酶处理得到的重组质粒的相应部位的序列不能再被这两种酶识别；D正确。

故选BC。

【点睛】9、C:D【分析】【分析】

分析题干信息：该实验的目的是筛选出高效降解化合物A的细菌；在以化合物A为唯一碳源的培养基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A为碳源和氮源生长繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，无法生长繁殖。

【详解】

A；本实验的目的是“筛选到能高效降解化合物A的细菌”；因此培养基中加入化合物A作为唯一碳源，目的是为了筛选目的菌，A正确；

B；实验培养过程中进行振荡培养；可使目的菌和培养液充分接触，B正确；

C；为了防止污染；接种环经火焰灭菌后需要冷却后再挑取菌落，否则会导致高温使菌种死亡，C错误；

D；在以化合物A为唯一碳源的培养基中只有能降解化合物A的微生物才能生长繁殖；不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，无法生长繁殖，将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验的目的是对菌种“纯化”，D错误。

故选CD。

【点睛】10、A:B:C:D【分析】【分析】

植物组织培养：1；过程：离体的植物组织；器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，再分化产生胚状体，最好发育成植株（新植体）。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要。

2；原理：植物细胞的全能性。

3；应用：植物繁殖的新途径（快速繁殖优良品种、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种和突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。

【详解】

A；用于培养的植物细胞必须具有完整的细胞核；以保证有全套的遗传信息，因此植物体体内具完整细胞结构的活细胞均可作为组织培养的外植体，A正确；

B；脱分化过程和再分化过程所需的培养基中生长素与细胞分裂素的比例应不同；如生长素与细胞分裂素用量比值适中时，促进愈伤组织的形成；生长素与细胞分裂素用量比值低时，有利于芽的形成；生长素与细胞分裂素用量比值高时，有利于根的形成，B正确；

C；单倍体育种和转基因植物的培育都要经历细胞到植株的过程；因此都需要用到植物组织培养技术，C正确；

D；利用某些细胞能产生特定的产物；通过组织培养使细胞数量增加，进而增加产量，实现工厂化生产，D正确。

故选ABCD。

【点睛】11、A:B:C【分析】【分析】

12、B:D【分析】【分析】

分析题意可知:该实验目的是检测药物X和Y的抗癌活性；自变量是药物X或Y，因变量是检测细胞数量。

【详解】

A；加入等体积的二甲基亚矾溶作为空白对照；排除体积和溶剂等无关因素的影响，A正确;

B；抗生素具有杀菌(不是杀病毒)作用；为防止培养液被污染，可在培养液中加入一定量的抗生素，B错误;

C；要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来；需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，C正确;

D；分析实验结果；加入X的癌细胞个数是6.7×104，加入Y的癌细胞个数是5.3×105，说明药物X的抗癌效果比Y好，加入Z的癌细胞个数是8.0×106，与空白对照相比无抗癌作用，D错误。

故选BD。13、A:D【分析】【分析】

单克隆抗体的制备过程:首先用特定抗原注射小鼠体内；使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，单克隆抗体制备过程中的两次筛选：第一次筛选:利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞（A为B淋巴细胞，B为骨髓瘤细胞），不需要A；B、AA、BB型细胞。第二次筛选：利用多孔板法和抗原—抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。

【详解】

A；分析题意可知；ADC中的单克隆抗体将细胞毒性药物运送到靶向肿瘤，但不会消除肿瘤细胞，真正发挥药效的是细胞毒性药物，A错误；

B；由于ADC可将药物带到肿瘤细胞所在部位；定位杀死肿瘤细胞，故ADC的用药量比常规用药的药量少，B正确；

C；单克隆抗体的制备需要将B细胞与骨髓瘤细胞融合；故需要用到细胞融合技术，C正确；

D；ADC通过体液运输；与肿瘤细胞进行特异性结合，体液运输是不定向的，D错误。

故选AD。14、A:B:D【分析】【分析】

1；基因探针是用放射性同位素、荧光分子等标记的DNA分子作为探针；原理是DNA分子杂交。

2；DNA分子是一个独特的双螺旋结构；是由两条平行的脱氧核苷酸长链盘旋而成，外侧由脱氧核糖和磷酸交替连接构成基本骨架，内侧是碱基对（A-T；C-G）通过氢键连接。

3；目的基因的检测与鉴定：

分子水平上的检测：

①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；

②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；

③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。

个体水平上的鉴定：

抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；由图1可知；DNA探针是用荧光分子标记的DNA分子，DNA的基本组成单位是脱氧核苷酸，因此荧光标记的DNA探针的基本单位是脱氧核糖核苷酸，A正确；

B；由图2可知；高温（煮沸）可以使双链DNA分子中的氢键断裂形成DNA单链，B正确；

C；图中两条姐妹染色单体中含有2个DNA分子共有4条链；所以最多可有4条荧光标记的DNA片段，C错误；

D、由于AA和BB中各有一对同源染色体可被荧光探针标记，若植物甲（AABB）与植物乙（AACC）杂交，则其F1（AABC）含有3个荧光点；经间期复制加倍，有丝分裂中期的细胞中可观察到6个荧光点，D正确。

故选ABD。三、填空题(共5题，共10分)15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】DNA连接酶16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】不同浓度的NaCL溶液DNA杂质17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】细胞膜流动性植物细胞全能性纤维素酶果胶酶18、略

【分析】【分析】

分析图1：表示多年前感染EV并已康复的甲；乙两人的血液中抗EV-GP抗体的水平。根据曲线图可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组。

分析图2：表示单抗与病毒混合后病毒对宿主细胞的感染率。根据柱形图可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒对宿主细胞的感染率明显低于其他组别。

【详解】

（1）由题意可知；新型冠状病毒表面的S-蛋白作为抗原刺激淋巴细胞，使机体产生特异性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是蛋白质。

（2）免疫系统对被新冠病毒感染后肺细胞强烈攻击引发肺炎；此时可通过适度使用免疫抑制剂对病人进行治疗，使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）由图1可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组，故应选取甲的B细胞用以制备单克隆抗体。

（4）由图2可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ后，病毒对宿主细胞的感染率较低。因此抑制效果最好的单抗是Ⅲ。

（5）患者康复后一段时间；若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的记忆细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。

【点睛】

本题结合图解，考查病毒、单克隆抗体的制备等，要求考生识记病毒的结构，明确病毒没有细胞结构；识记单克隆抗体的制备过程，掌握其优点及相关应用，能结合图中信息准确答题【解析】①.抗原②.特异③.糖蛋白（或蛋白质）④.免疫抑制剂⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.记忆19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】个体生物学水平抗虫性状。四、判断题(共2题，共10分)20、A【分析】【详解】

雄性动物刚刚排出的精子并不具有受精能力，必须获能后才具备受精能力，精子获能的过程不是获得能量的过程，是获得受精能力的过程，可在获能液或受精液中完成，故正确。21、A【分析】【详解】

中国政府对于“克隆人”的态度是禁止生殖性克隆人，积极支持制定《禁止生殖性克隆人国际公约》，坚决反对克隆人，不允许进行任何生殖性克隆人实验。故该说法正确。五、实验题(共2题，共14分)22、略

【分析】【分析】

1；分析题图：小鼠骨體瘤细胞和取自感染病毒的人体内的浆细胞进行细胞融合；M表示融合细胞，N表示筛选出的杂交瘤细胞。

【详解】

（1）分析题图：小鼠骨體瘤细胞和取自感染病毒的人体内的浆细胞进行细胞融合，M表示融合细胞，N表示筛选出的杂交瘤细胞；B淋巴细胞是取自感染H7N9病毒的动物或人；随后将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，对融合后的细胞用选择培养基进行筛选，挑选出B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞，然后再进行克隆化培养和抗体检测，以得到符合要求的N细胞，N细胞的名称是杂交瘤细胞；

（2）①据题中图表分析，KD值越小，抗体和HA蛋白的亲和力越高；抗体Y的KD值小于抗体X的KD值，故对H7N9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是抗体Y；

②抗体X的体内治疗效果优于抗体Y，但对H7N9病毒HA蛋白亲和力更高的抗体是抗体Y，验证抗体除了中和病毒活性之外，还可以通过和巨噬细胞表面的受体相结合，从而增强巨噬细胞的吞噬作用，进而清除被病毒感染的靶细胞，需要进行抗体X和抗体Y的对照实验，并与无关抗体进行比较，可以将巨噬细胞及感染了H7N9病毒的肺上皮细胞分别加入A；B、C三组细胞培养液中；并向这三组培养液中分别加入无关抗体、抗体X和抗体Y，一段时间后检测并比较肺上皮细胞的裂解百分比。

【点睛】

对单克隆抗体制备流程、抗体效果检测原理和实验目的及用品的分析，是解决本题的关键。【解析】①.感染过H7N9病毒②.抗体检测③.杂交瘤细胞④.Y⑤.将巨噬细胞及感染了H7N9病毒的肺上皮细胞分别加入A、B、C三组细胞培养液中，并向这三组培养液中分别加入无关抗体、抗体X和抗体Y，一段时间后检测并比较肺上皮细胞的裂解百分比。23、略

【分析】【分析】

图1可知：T-2毒素是一种常见的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导其表达水平升高，当用两种调控序列同时连接启动子，启动子的活性最高。

图2可知：野生型探针能与NF-Y结合；突变型探针不能与NF-Y结合，NF-Y抗体一定能与NF-Y结合。

【详解】

（1）初级代谢产物一般是霉菌生命活动所必需的，大多存在于细胞内。次级代谢产物不是霉菌生命活动必需的，并且分泌到体外，故T-2毒素是霉菌的次级代谢产物。T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由扩散的方式进入细胞。

（2）实验的自变量是有无调控序列；根据单一变量原则，对照组的目的是为了排除无光变量的影响，除了没有调控序列，其他处理和实验组相同，所以对照组和实验组猪肝细胞均导入含CYP3A基因启动子及LUC基因的表达载体，然后向各组猪肝细胞培养液中加入加入等量T-2毒素，适宜条件下进行培养。从图中信息可知，缺失两个调控序列和对照组活性一致，缺失一个比对照组活性略强，两个都存在活性最高，说明这两个调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件。故缺失两个调控序列或其中任一个，T-2毒素都不能诱导启动子活性明显增强。

（3）①实验的目的是要验证NF-Y能与B1结合；根据第2组和第3组结果，依据B1序列制备的NF-Y结合位点野生型探针能与NF-Y结合，根据第4组结果，突变型探针不能与NF-Y结合。第5组加入了NF-Y抗体，一定能与NF-Y结合。故可以解释为：结合位点突变的探针不能结合核蛋白中的NF-Y，也不会竞争NF-Y与标记探针的结合，所以第4组与第2组同样位置出现阻滞带。第5组，NF-Y的抗体结合NF-Y，因此第5组中出现标记探针；NF-Y和NF-Y抗体的结合物，结合物分子量大，阻滞带的位置更靠后。

②假设NF-Y和Sp1通过互作共同发挥调控功能，它们之间的距离是发挥作用的最佳距离，故增大或缩小B1和B2两者之间的距离都会降低CYP3A基因的启动子的活性。【解析】(1)次级自由扩散。

(2)等量的T-2毒素缺失两个调控序列或其中任一个；T-2毒素都不能诱导启动子活性增强。

(3)结合位点突变的探针不能结合核蛋白中的NF-Y，也不会竞争NF-Y与标记探针的结合，所以第4组与第2组同样位置出现阻滞带。NF-Y的抗体结合NF-Y，因此第5组中出现标记探针、NF-Y和NF-Y抗体的结合物，结合物分子量大，阻滞带的位置更靠后。NF-Y和Sp1通过互作共同发挥调控功能，它们之间的距离是发挥作用的最佳距离。六、综合题(共4题，共24分)24、略

【分析】【分析】

基因工程的操作步骤：

1；获取目的基因（从基因组文库中获取、利用PCR技术扩增目的基因、化学合成法）；

2；基因表达载体的构建（这也是基因工程的核心）；一个完整的基因表达载体包括：

（1）启动子：位于基因的首端；是RNA聚合酶识别并结合的位点，驱动目的基因的转录；（2）目的基因：编码蛋白质的基因；（3）终止子：位于基因的尾端，其作用使转录在需要的地方停止；（4）标记基因：作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的受体细胞筛选出来。

3；将目的基因导入受体细胞（植物、动物、微生物）：目的基因进入受体细胞内；并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化。

4；目的基因的检测与鉴定（DNA分子杂交技术,分子杂交技术、抗原抗体杂交）。

【详解】

（1）将目的基因与Ti质粒构建基因表达载体时；需要限制酶的切割，将目的基因插入载体时需要DNA连接酶的连接，重组载体进入水稻细胞并在细胞内维持稳定和表达的过程叫做转化。

（2）根据以上分析可知，启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点，如果启动子序列改变将会影响RNA聚合酶与之结合和识别，进而影响基因的转录水平。在真核生物中，编码蛋白质的序列是基因中编码区，编码区中不包括启动子序列，因此直链淀粉合成酶的基因碱基序列中不含有启动子，因此3个突变品系中Wx基因中控制合成直链淀粉酶的氨基酸序列不发生改变。

（3）以mRNA为模板合成cDNA的过程为逆转录，利用PCR技术扩增Wx基因的cDNA，需要以Wx基因合成的引物，这样引物能够在总cDNA中与Wx基因的cDNA特异性结合，从而利用PCR扩增技术专一性扩增出Wx基因的cDNA。

（4）识图分析可知，图中品系3的Wx基因的mRNA的含量最少；那么合成的直链淀粉酶最少，直链淀粉合成量最少，因此该水稻胚乳中含的直链淀粉比例最小，糯性最强。

【点睛】

本题考查基因工程的知识点，要求学生掌握基因工程的操作工具和操作步骤是解决问题的关键。识记并理解基因工程中工具酶的种类和作用，把握基因表达载体构建的过程，理解启动子的功能和编码蛋白质的基因的结构，这是该题考查的难点；把握PCR扩增技术的操作过程和引物的作用，这是突破第（3）问的关键。【解析】（1）限制性核酸内切酶和DNA连接酶转化（2）RNA聚合酶与启动子的识别和结合不发生编码直链淀粉合成酶的碱基序列中不含启动子（3）逆转录（或：反转录）引物是根据Wx基因的一段已知序列设计合成的（或：引物能与Wx基因的cDNA特异性结合）（2分）（4）品系3品系3的WxmRNA最少，控制合成的直链淀粉合成酶最少，直链淀粉合成量最少，糯性最强（2分）25、略

【分析】【分析】

1、纤维素是植物多糖，所含元素为C、H、O，是构成植物细胞壁的成分之一。纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶；前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。

2；刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理：刚果红是一种染料；它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。这样，我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

【详解】

（1）对纤维素分解菌进行分离的实验流程为：土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落。

纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的环境中；因此，采集土样时，可以选择纤维素丰富的环境，如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等，用无菌小铁铲铲去表层土，迅速铲取土样，装入无菌信封内密封。土壤稀释，将稀释液接种到选择培养基中进行培养，增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到该菌。然后进行梯度稀释，将稀释后的样品涂布到鉴别纤维素分解菌的固体培养基上，在培养的过程中，纤维素分解菌产生纤维素酶，将纤维素分解成纤维二糖；葡萄糖。刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，而纤维素被分解后则不能与刚果红结合形成红色复合物，在培养基上就形成了以纤维素分解菌为中心的透明圈，用接种环或接种针挑选产生透明圈的菌落就是纤维素分解菌的菌落。

（2）生物与环境存在相互依存的关系；在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对较高，更容易找到，例如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等。

（3）滤纸中含有大量的纤维素；将滤纸埋在土壤中，是通过人工增大了土壤中的纤维素浓度，创造了纤维素分解菌生存的适宜环境，纤维素分解菌就会在滤纸上聚集，经过30d左右，就可以从腐烂滤纸上筛选出纤维素分解菌，因此这一做法可行。

【点睛】

本题主要考查分离纤维素分解菌的原理和实验流程，要求考生识记相关知识，能运用所学内容解释某些生物学问题。【解析】首先进行土壤取样。在富含纤维素的潮湿土壤中用无菌小铁铲铲去表层土，迅速铲取土样，装入无菌信封内密封。其次，进行选择培养。将土壤稀释液接种到选择培养基中进行培养，以增加纤维素分解菌的浓度。然后进行梯度稀释，将稀释后的样品涂布到鉴别纤维素分解菌的固体培养基上，在培养的过程中，纤维素分解菌产生纤维素酶，将纤维素分解成纤维二糖、葡萄糖。这些产物不能与刚果红结合形成红色复合物，在培养基上就形成了以纤维素分解菌为中心的透明圈，用接种环或接种针挑选产生透明圈的菌落就是纤维素分解菌的菌落。打算到富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌。因为根据生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对较高，因此从这种土样中获得目的微生物的概率要高于普通环境。这一做法可行，通过人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境，使纤维素分解菌聚集。滤纸富含纤维素，将滤纸埋在土壤中，纤维素分解菌就会在滤纸上聚集分解纤维素，可以从腐烂滤纸上筛选纤维素分解菌。26、略

【分析】【分析】

分析题图；启动子P左右两端都有酶1切割位点，可用酶1切割片段I使切割后的片段I首尾两端产生相同的末端，再用DNA连接酶处理片段Ⅰ形成环状DNA分子。用酶2切割环状DNA可获得片段II。由于子链合成方向是从子链的5'-3'，用引物D和E可扩增出启动子P。

(1)

启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点；用于基因的转录；由于启动子P及左侧的序列未知，无法合成PCR所需要的引物，故不能直接根据片段Ⅰ扩增启动子。

(2)

结合图示可知；图中的片段I在启动子P的左右两端各有一个酶1的切割位点，酶1可切割启动子P的左右两端产生相同的末端，再用DNA连接酶连接可形成环状DNA的片段I；片段II的首尾两端都有灰色区域，结合题图分析可知，片段II是用酶2切割处理环状DNA产生的；由于子链合成方向是从子链的5'-3'，所以可以用引物D和E扩增出启动子P。

(3)

结合题干信息“卡那霉素可抑制烟草细胞的生长”及“基因M可在烟草的根部正常表达，其表达产物可将X－Gluc水解生成蓝色物质”可知，用含有卡那霉素和X-Gluc的培养基可筛选出所需的烟草细胞，在卡那霉素中能存活说明获得了质粒，能将X-Gluc水解成蓝色说明获