2025年粤教新版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案

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A.用胡萝卜根段培养成试管苗，体现了细胞的全能性B.⑤⑥过程所需的生长素和细胞分裂素的比例不同C.愈伤组织的细胞呈正方形，排列紧密，无大液泡D.经组织培养得到的植株，一般可保持原品种的遗传特性2、下图表示“试管牛”；“克隆牛”和“转基因牛”的培育过程；有关说法合理的是（）

A.三种牛的培育过程都经过了受精作用B.三种牛培育过程都体现了细胞核的全能性C.三种牛培育过程都用到了胚胎移植技术D.三种牛体细胞中的遗传信息完全相同3、利用卷心菜发酵制作泡菜过程中；乳酸菌酵母菌细胞数量和pH的变化如图所示。下列叙述不正确的是。

A.酵母菌和乳酸菌均有核膜包被的细胞核B.发酵初期乳酸菌建立了明显的菌种优势C.前6天pH下降主要由乳酸菌代谢引起D.发酵中期酵母菌通过无氧呼吸进行增殖4、下列有关酶制剂应用的叙述，正确的是（）A.加酶洗衣粉因为添加了酶制剂，所以比普通洗衣粉更易污染环境B.固定化葡萄糖异构酶只能催化一种化学反应C.加酶洗衣粉的洗涤效果总比普通洗衣粉的好D.腐乳发酵前期主要依赖毛霉产生的淀粉酶5、实时荧光定量PCR可用于对样品中特定DNA序列进行定量分析。将荧光标记的Taqman探针与待测样本DNA混合，当探针完整时，不产生荧光。在PCR过程中，与目的基因结合的探针被TaqDNA聚合酶水解，R与Q分离后，在特定光的激发下R发出荧光，随着循环次数的增加，荧光信号强度增加，通过实时检测荧光信号强度，可得Ct值(达到荧光阈值所经历的循环次数)。下列相关叙述正确的是（）

A.荧光基因R连接在探针的3’端B.该反应体系中并未加入ATP，所以新链的合成不需要消耗能量C.TaqDNA聚合酶在该反应中的作用是合成磷酸二酯键D.Ct值越小，说明样品中特定DNA序列的含量越多6、人们可以运用植物体细胞杂交技术获得抗线虫病的杂种萝卜一油菜植株；已知萝卜具有抗线虫病基因，而油菜容易被胞囊线虫侵染造成减产。科研人员以萝卜和油菜为亲本进行体细胞杂交，以获得抗线虫病的杂种植株，具体操作流程如图所示。下列说法错误的是（）

A.过程③中施加的生长素的含量要高于细胞分裂素的B.对杂种植株接种胞囊线虫进行个体水平上的鉴定C.可通过观察是否含有叶绿体来对融合细胞进行初步筛选D.过程④中需要进行适当的光照以促进细胞中叶绿素的合成7、γ-氨基丁酸（GABA）是一种重要的中枢神经系统抑制性神经递质；其拥有良好的水溶性与热稳定性。现已证实，作为小分子量非蛋白质氨基酸的GABA具备食用安全性，并可用于饮料等食品的生产。研究表明，摄入一定量的GABA具备改善机体睡眠质量；降血压等生理功效。微生物发酵过程中，可以催化合成GABA。如图是腐乳在前发酵和盐腌制过程中GABA含量的变化，下列叙述错误的是（）

A.腐乳制作过程中有多种微生物的参与，其中起主要作用的是曲霉B.腐乳腌制过程中加盐的目的主要是抑菌和调味C.毛坯中GABA含量可能因微生物发酵过程中产生的酶的作用而增加D.盐坯中GABA含量减少，可能是由γ-氨基丁酸溶于水导致的8、2020年诺贝尔生理学或医学奖授予发现丙肝病毒的三位科学家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化；部分患者可发展为肝硬化甚至肝癌。下图为利用小鼠甲为实验材料研制丙肝病毒的单克隆抗体的实验流程。下列叙述错误的是（）

A.在动物细胞培养时，培养液中除营养物质外还要添加一定量的血清、血浆B.图中筛选1的目的是获得杂交瘤细胞C.每个脾B淋巴细胞可产生多种抗体，所以需要进行细胞筛选D.若B淋巴细胞的基因型为HH，骨髓癌细胞的基因型为SS，在两两融合后基因型可能有HHSS、HHHH、SSSS评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)9、厨余垃圾是指居民日常生活及食品加工、饮食服务、单位供餐等活动中产生的垃圾。废液中的淀粉、蛋白质、脂肪等微溶性物质，易腐烂变质，滋生病原微生物等。若处理不当，可能造成严重的污染。圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌组合可以将有机厨余垃圾迅速分解成水和二氧化碳，减轻环境污染。为制备分解有机厨余垃圾的微生物菌剂，某科研小组对两菌种进行了最佳接种量比的探究实验，并得出下图的实验结果。下面叙述错误的是（）

A.巨大芽孢杆菌生长过程中需要氮源，圆褐固氮菌生长过程中不需要氮源B.要统计活菌数量可采用平板划线法和稀释涂布平板法C.将1mL菌液稀释100倍，在3个平板上分别接0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、39和36。据此可得出每升菌液中的活菌数为3．9×105D.处理该类厨余垃圾废液，两菌种的最佳接种量比为1：110、白地霉侵染是导致柑橘酸腐病的主要原因，实验证明桔梅奇酵母通过分泌普切明酸对白地霉具有生物防治能力。已知铁是真菌生长的必需元素，是胞内重要酶活性中心的组成部分。普切明酸是桔梅奇酵母产生的一种水溶性铁螯合剂，能快速在培养基中扩散并与其中的Fe3+形成稳定红色复合物。研究配制的含有不同浓度FeCl3的培养基如下表所示。实验结果为随FeCl3浓度增大，抑菌圈红色加深但变窄，如下图所示。相关叙述正确的是（）。成分MgSO4NaH2PO4蛋白胨FeCl3溶液水琼脂用量5g7g15g500mL7g20g

A.蛋白胨可以提供碳源、氮源、维生素，琼脂不是营养物质B.白地霉采用了平板划线法，桔梅奇酵母采用了涂布平板法C.结果表明，FeCl3浓度增大，普切明酸与Fe3+结合的数量减少D.结果表明，FeCl3能降低桔梅奇酵母对白地霉的防治效果11、为对某样品中噬菌体计数，工作人员将0.1mL稀释倍的噬菌体样品与敏感细菌混合后平铺在平板上培养一段时间，长满细菌的平板因部分细菌被噬菌体裂解而形成圆形透明斑，即噬菌斑（1个噬菌斑为1个pfu），噬菌体效价可用每毫升样品中含有的pfu数表示。下列叙述正确的是（）

A.透明的平板培养一段时间后变为不透明状态，是由细菌大量繁殖造成的B.噬菌体样品应有足够的稀释度，以保证初期一个细菌最多被一个噬菌体吸附C.若平均每个平板的噬菌斑数量为150，则该样品的噬菌体效价为1.5×108pfu/mLD.若有少数活噬菌体末能侵染细菌，噬菌斑计数结果比样品中实际活噬菌体数偏低12、如图是单克隆抗体制备过程示意图，1～3代表相关过程，a～e代表相关细胞，其中c是两两融合的细胞。以下叙述错误的是（）

A.过程1是给小鼠注射特定抗原蛋白，可刺激小鼠产生特异性免疫反应B.过程2的促融方法可采用电融合技术，该技术能击穿核膜促使核融合C.c细胞有三种，每种细胞染色体组数不相等，e细胞是杂交瘤细胞D.过程3是进行抗体检测，并克隆产生阳性细胞的过程13、下图表示选用具有同一外源目的基因对某品种奶牛进行遗传特性改造的三种途径；下列有关叙述正确的是（）

A.获得奶牛1通常采用显微注射法导入外源基因B.奶牛2体内不同组织细胞的基因组成一定相同C.成功获得奶牛1、2、3表明三个受体细胞都具有全能性D.奶牛1、2、3的获得均需在体外进行早期胚胎培养14、基因定点突变技术通过改变基因特定位点的核苷酸来改变蛋白质的氨基酸序列；常用于研究某个氨基酸对蛋白质的影响，其原理是利用人工合成的诱变寡核苷酸引物和多种酶来合成突变基因，过程如图所示。下列分析错误的是（）

A.基因定点突变的原理是使基因发生碱基对的替换B.诱变寡核苷酸引物的延伸需要消耗四种核糖核苷酸C.突变基因的合成是以正常基因的单链作为模板的D.延伸过程遵循碱基互补配对原则，且需要DNA聚合酶的催化15、新冠病毒通过刺突蛋白（S蛋白）的活性域（RBD）与人体细胞表面的ACE2受体相互作用感染细胞。科学家设计了一种自然界中不存在的蛋白质LCB1，可与S蛋白的RBD紧密结合，以干扰新冠病毒的感染。下列说法合理的是（）A.LCB1可能与S蛋白的抗体在结构上类似B.S蛋白的RBD结构可为设计LCB1提供信息C.设计LCB1时，需避免在结构上与ACE2类似D.生产LCB1涉及到基因工程的某些操作技术评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)16、选用去核______的原因：卵（母）细胞______；卵（母）细胞______。17、微生物________________的方法很多，最常用的是_____________和__________________。18、平板划线法是通过____________在_______________培养基表面______________的操作，将__________的菌种______________分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由____________繁殖而来的肉眼可见的_______________，这就是_______________________。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的______________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到_____________培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成____________，从而能在培养基表面形成___________________。19、基因工程操作一般经历如下四个步骤：_____。20、来源：主要是从______中分离纯化出来的。21、为了避免外源DNA等因素污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行_____________。而使用的缓冲液并在__________℃存储。22、基因工程是蛋白质工程的关键技术；蛋白质工程是基因工程的延伸。有人对基因工程和蛋白质工程的关系进行了比较，并归纳为下表。

基因工程与蛋白质工程的比较。比较项目蛋白质工程蛋白质工程原理中心法则中心法则区别过程获取目的基因→构建表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测氨基酸序列→合成DNA→表达出蛋白质实质定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需要的生物类型或生物产品（基因的异体表达）定向改造蛋白质的分子结构以生产人类所需要的蛋白质定向改造蛋白质的分子结构以生产人类所需要的蛋白质结果生产自然界中已有的蛋白质生产自然界中已有的蛋白质生产自然界中已有的蛋白质联系蛋白质工程是第二代基因工程

上表的比较是否正确？如果有不妥之处，尝试进行修改。_________评卷人得分四、判断题(共1题，共2分)23、胚胎发育早期，细胞的数量不断增加，胚胎的总体积也增加。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共1题，共7分)24、三氯生是一种抑菌物质，具有优异的贮存稳定性，可以替代抗生素用于基因工程中筛选含目的基因的受体细胞。已知fabV（从霍乱弧菌中发现的烯脂酰ACP还原酶）基因可以使大肠杆菌抵抗三氯生。

(1)通过PCR方法扩增fabV基因时，先要根据_____设计两种特异性引物序列，以确保Taq酶从引物的3′端延伸DNA链，至少需要经过_____次扩增才能获得8个双链等长的目的基因。

(2)基因工程的核心步骤是_____；某科研团队将可以受温度调控的基因插入上述选出的重组质粒中，构建了温度调控表达质粒（如图2）。其中C基因在低温下会抑制P2，R基因在高温下会抑制P1，如果将lacZ基因和GFP（绿色荧蛋白）基因插入图2质粒中，使得最后表现为低温下只表达GFP蛋白，而高温下只表达lacZ蛋白。则lacZ基因插在_____之间，GFP基因的插入位置及注意点是_____。

(3)若以大肠杆菌为受体细胞，筛选上述插入了GFP基因的受体细胞的依据是：大肠杆菌能在含_____的培养基上生长，且_____。评卷人得分六、综合题(共3题，共6分)25、为了研究低温诱导对某基因的启动子P活性的影响；科研人员进行了启动子P的PCR提取；特定表达载体的构建和转基因烟草的功能鉴定。该基因及其启动子P的结构及相应限制酶的切割位点如下图所示，图中灰色区域碱基序列是已知的，启动子P（图中黑色区域）及上游碱基序列未知，片段I和片段II中的字母A~F均表示引物。请回答下列问题。

（1）启动子是_________的位点。不能直接根据片段I扩增启动子P的原因是_________。

（2）为了能扩增正常启动子P，科研人员先用_________酶处理上图中的片段I，使片段I成为环状DNA；再将环状DNA用_________（填“酶1”或“酶2”）处理得到了片段II，如下图所示。根据片段II能不能扩增出启动子P？若能，请写出可选用的引物组合（用C、D、E、F表示），若不能请说明理由_________。

（3）已知卡那霉素可抑制烟草细胞的生长，基因M可在烟草的根部正常表达，其表达产物可将X－Gluc水解生成蓝色物质。将启动子P和基因M结合并与含有卡那霉素抗性基因的Ti－质粒重组构建基因表达载体。将表达载体和酚类物质混合后加人含有烟草细胞的培养基中，酚类物质的作用是________。再用含有________的培养基筛选出所需的烟草细胞，然后经过________获得转基因烟草植株。

（4）将上述转基因烟草植株分为A、B两组，A组在常温（25℃，对照组）下培养，B组在低温（4℃，实验组）下培养，一段时间后取A、B的幼根，浸入适量________溶液中，观察烟草细胞中基因M的表达情况（表达强度越大，细胞表现的蓝色越深）。若A、B组的结果分别为________，则说明低温抑制启动子P的功能。26、传统的中国白酒酿造过程中；将酒曲磨碎后与煮熟的高粱；玉米、大米等粮食混合，密封发酵。请回答下列问题：

(1)酿酒过程中，会发现先“来水”后“来酒”，是因为______________。为检验发酵时是否产生酒精，可用___________溶液进行检测，与酒精反应呈__________色。

(2)工业制酒时，筛选优良酵母菌需先获得单菌落。若用平板划线法分为5个区域进行划线，理论上需要灼烧接种环________________次。要检测发酵液中活体酵母菌的密度，可采用_____________法，但该方法计算得出的菌体数往往比实际数目低。为了酵母细胞可以与酒精分离并重复利用，可利用海藻酸钠固定酵母细胞制备成凝胶珠，该固定方法称为______________。发酵酒精度数较低，可利用酒精沸点低易挥发的性质，通过________________________的方法来提高酒精度数。

(3)自然界中目的菌株的筛选依据，是根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找，而实验室中微生物筛选的原理是___________________________。27、中科院动物研究所小组已培自出中国首例转基因猕猴。这研究成果标志着中国科学家在灵长类转基因动物研究方面达到世界领先水平。图是转基因猕猴培育过程示意图；据图回答。

（1）过程①需要使用的酶是________。过程②中常用__________技术将目的基因导入受精卵。

（2）如果⑤过程在体外进行，那么卵母细胞需要培养到__________，精子需要获能。该过程中防止多精入卵受精的第二道屏障是__________________。

（3）在体外培养受精卵时，要维持无菌、无毒的环境，提供营养和适宜温度、pH值，同时细胞培养所需气体主要有________________。

（4）图中⑦过程称为___________，为使代孕雌猴与供体雄猴生殖器官的生理变化相同，此前需对代孕雌猴做__________处理。

（5）若要同时获得多只与此转基因猕猴相同的小猴，可采用胚胎分割技术，在对囊胚阶段的胚胎分制时，要注意_______________________________参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、C【分析】【分析】

植物组织培养的过程：离体的植物组织；器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进一步发育植株（新植体）。原理是植物细胞的全能性。

【详解】

A；用分化的植物细胞可以培养成完整的植株；这是因为植物细胞具有全能性，A正确；

B；⑤⑥过程分别形成愈伤组织和试管苗；形成的产物不同，所需的生长素和细胞分裂素的比例不同，B正确；

C；愈伤组织的细胞是一团疏松无规则、高度液泡化、呈无定形状态的、具有分生能力的薄壁细胞；C错误；

D；经组织培养得到的植株；属于无性生殖，一般可保持原品种的遗传特性，D正确。

故选C。2、C【分析】【分析】

克隆动物和试管动物的比较：

。

试管动物。

克隆动物。

生殖方式。

有性生殖。

无性生殖。

技术手段。

体外受精；胚胎移植。

核移植技术；胚胎移植。

遗传规律。

遵循。

不遵循。

【详解】

A；克隆牛的培育过程没有经过受精作用；A错误；B、克隆牛的培育体现了细胞核的全能性，但试管牛和转基因牛的培育体现的是细胞（受精卵）的全能性，B错误；

C；三种牛培育过程都用到了胚胎移植技术；C正确；

D；三种牛体细胞中的遗传信息都存在差异；转基因牛与试管牛相比，导入了外源基因，试管牛与克隆牛的细胞质基因不同，D错误。

故选C。3、A【分析】【详解】

乳酸菌是原核生物，细胞内没有核膜包围的细胞核，A错误；根据曲线图中乳酸菌和酵母菌的数量变化曲线对比分析可知，发酵初期乳酸菌远多于酵母菌，所以乳酸菌成为了明显的优势菌种，B正确；结合曲线图分析，前6天，由于乳酸菌远多于酵母菌，其产生的乳酸会降低培养液的pH，所以C正确；由于整个发酵过程都是在无氧环境条件下进行的，在发酵中期（22-26天），酵母菌明显增多，酵母菌增多只能是通过无氧呼吸增殖，D正确。4、B【分析】【分析】

1；加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉；目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

2；酶是活细胞产生的具有催化功能的有机物；具有高效性、专一性，酶的作用条件较温和。酶对有机溶剂非常敏感，容易失活。

【详解】

A；加酶洗衣粉中的酶制剂属于有机物；易被分解，不会造成环境污染，A错误；

B；固定化葡萄糖异构酶只能催化一种化学反应；固定化细胞可催化一系列化学反应，B正确；

C；酶发挥作用需要适宜的条件；因此加酶洗衣粉的洗涤效果不一定总比普通洗衣粉好，C错误；

D；腐乳前期发酵主要依赖毛霉产生的蛋白酶将蛋白质水解为小分子的多肽和氨基酸；D错误。

故选B。

【点睛】5、D【分析】【分析】

实时荧光定量PCR技术中；TaqDNA聚合酶有两个作用，一是形成子链的磷酸二酯键，二是水解探针，破坏磷酸二酯键；破坏探针导致荧光出现，Ct值越大，即是荧光强度越大，说明样品中特定DNA序列的含量越多。

【详解】

A；因为引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸；从图中引物1的方向可以分析出，R端是5'端，A错误；

B；该反应体系中并未加入ATP；但新链的合成需要消耗能量，解旋的能量来自于高温，聚合的能量来自于原料，B错误；

C；在该反应中TaqDNA聚合酶有两个作用；一是形成子链的磷酸二酯键，二是水解探针，破坏磷酸二酯键，C错误；

D；Ct值越小；即是荧光强度越小，说明样品中特定DNA序列的含量越少，D错误。

故选D。6、A【分析】【分析】

题图分析；图中①过程为酶解法去除细胞壁获得原生质体的过程，②原生质体融合成为杂种细胞的过程，③是杂种细胞脱分化形成愈伤组织的过程，④过程表示再分化成为杂种植株的过程。

【详解】

A；过程③中施加的生长素的和细胞分裂素比例适中；可以诱导产生愈伤组织，A错误；

B；对杂种植株接种胞囊线虫进行个体水平上的鉴定；进而检测杂种植株是否达到预期，B正确；

C；由于用于融合的叶肉细胞中有叶绿体；而根细胞中没有叶绿体，因此，可通过观察是否含有叶绿体来对融合细胞进行初步筛选，C正确；

D；过程④为脱分化形成再生植株的过程；该过程中需要进行适当的光照以促进细胞中叶绿素的合成，D正确。

故选A。7、A【分析】【分析】

腐乳发酵过程中起主要作用的微生物是毛霉。

【详解】

A；腐乳制作过程中有多种微生物的参与；其中起主要作用的是毛霉，A错误；

B；腐乳腌制过程中加盐的目的主要是抑制杂菌的生长和调节风味；B正确；

C；GABA的化学本质是氨基酸；由豆腐中蛋白质水解得到，毛坯中GABA含量因微生物产生的蛋白酶作用而增加，C正确；

D；GABA含量下降；一方面与食盐抑制毛霉生长，酶活性降低有关；另一方面，豆腐中的水分渗出，部分GABA因溶于水会随水流失而导致测定值减小，D正确。

故选A。8、C【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞，诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，注入小鼠腹腔中培养或者体外培养，最后从小鼠腹水或者培养液中获取单克隆抗体。单克隆抗体制备过程中至少涉及两次筛选，第一次是利用选择性培养基进行初步筛选出杂交瘤细胞，第二次是利用克隆化培养和抗体检测的方法筛选出既能大量增殖，又能产生所需抗体的杂交瘤细胞。

【详解】

A；为了更好地促进动物细胞的培养；尽可能模拟细胞在体内的生活环境，培养液中除营养物质外还要添加一定量的血清、血浆，A正确；

融合后的体系中含有多种细胞；未融合的同种细胞，融合的具有同种核的细胞，还有杂交瘤细胞，筛选1的目的是为了获得杂交瘤细胞，B正确；

C；脾B淋巴细胞只能产生针对相应抗原的抗体；每个B淋巴细胞只能产生一种抗体，C错误；

D；二者的融合细胞的种类可能有B淋巴细胞+B淋巴细胞、骨髓瘤细胞+骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞+B淋巴细胞；基因型可能是HHHH、SSSS、HHSS，D正确。

故选C。二、多选题(共7题，共14分)9、A:B:C:D【分析】【分析】

微生物接种的方法很多；最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。若要对微生物进行取样计数，接种方法只能是稀释涂布平板法。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

【详解】

A；微生物的生长需要碳源、氮源、无机盐等物质；只是有些固氮菌由于能利用氮气作为氮源，不需要在培养基中添加氮源，A错误；

B；平板划线法不能用于计数；B错误；

C、将1mL菌液稀释100倍，在3个平板上分别接0．1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、39和36。据此可得出每升菌液中的活菌数为（42+39+36）÷3÷0．1×100×1000=3．9×107；C错误；

D；根据图示可知；两菌种的接种量比为1:1时比两菌种的接种量比为2:1时效果好，但由于该实验设置的两菌种的接种量比例的组数过少，所以无法判断处理该类厨余垃圾废液的两菌种的最佳接种量比，D错误。

故选ABCD。10、A:D【分析】【分析】

1；培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。

2；微生物常见的接种的方法：

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；蛋白胨可以提供碳源、氮源、维生素；琼脂是凝固剂的一种，并不是营养物质，在培养液中加入琼脂可以使液体培养基成为琼脂固体培养基，A正确；

B；白地霉、桔梅奇酵母的接种都采用了涂布平板法；B错误；

C、随培养基中FeCl3浓度的增加，普切明酸与Fe3+的结合增强；抑菌圈的红色加深，C错误；

D、普切明酸与Fe3+形成红色复合物，但随培养基中FeCl3浓度的增加，抑菌圈变窄，说明FeCl3能降低桔梅奇酵母对白地霉的防治效果；D正确。

故选AD。11、A:B:D【分析】【分析】

病毒：是一种个体微小结构简单；只含一种核酸(DNA或RNA)和蛋白质组成的，必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞结构生物。

【详解】

A；噬菌体在细菌细胞中；没有裂解细菌，细菌繁殖导致透明的平板培养一段时间后变为不透明状态，A正确；

B；噬菌体样品应有足够的稀释度；以保证初期一个细菌最多被一个噬菌体吸附，如果稀释度不够，会出现两个或多个噬菌体吸附同一个细菌，从而导致噬菌斑数量减少，噬菌斑计数结果比样品中实际活噬菌体数偏低，B正确；

C、若平均每个平板的噬菌斑数量为150，则该样品的噬菌体效价为：150÷0.1×106=1.5×109pfu/mL；C错误；

D；若有少数活噬菌体末能侵染细菌；会导致形成噬菌斑数量减少，从而导致噬菌斑计数结果比样品中实际活噬菌体数偏低，D正确。

故选ABD。12、B:C【分析】【分析】

单克隆抗体的制备涉及细胞融合；细胞培养和细胞筛选；从题干信息图可看出，过程1代表的是注射特异性抗原使小鼠免疫，从而获得能产生相应抗体的B淋巴细胞；过程2是将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的过程；过程3是克隆培养筛选后的阳性细胞，一共需要进行两次，最终获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，此后在培养基或小鼠腹腔中培养。

【详解】

A；图中过程1是通过注射抗原或抗原蛋白来获得产生相应抗体的B淋巴细胞；A正确；

B；过程2是促进细胞融合的过程；其中电融合技术是用低压电流击穿细胞膜促使细胞融合，B错误；

C；c细胞为杂交瘤细胞；有三种，分别是骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞-B淋巴细胞、B淋巴细胞-B淋巴细胞，其中骨髓瘤细胞和B淋巴细胞都有两个染色体组，融合后的细胞都含有4个染色体组，其中e细胞是杂交瘤细胞，C错误；

D；过程3是专一抗体检测及克隆培养筛选后获得阳性细胞；该过程需要多次进行，D正确。

故选BC。13、A:D【分析】【分析】

分析题图：奶牛1的培育采用了基因工程技术；早期胚胎培养技术和胚胎移植技术；奶牛2的培育采用可基因工程技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术；奶牛3的培育采用了核移植、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术。

【详解】

A；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；A正确；

B；奶牛2的培育过程中；在囊胚阶段注入了含有外源基因的受体细胞，因此其体内不同组织细胞的基因型可能不同，B错误；

C；奶牛3表明受体细胞的细胞核具有全能性；C错误；

D；结合分析可知；奶牛1、2、3的获得均需在体外进行早期胚胎培养，D正确。

故选AD。14、B:C【分析】【分析】

1；DNA复制过程为：

（1）解旋：需要细胞提供能量；在解旋酶的作用下，两条螺旋的双链解开。

（2）合成子链：以解开的每一段母链为模板；在DNA聚合酶等酶的作用下，利用游离的4种脱氧核苷酸为原料，按照碱基互补配对原则，合成与母链互补的子链。

（3）形成子代DNA分子：延伸子链；母链和相应子链盘绕成双螺旋结构。

2；特点：边解旋边复制；复制方式：半保留复制。

3；条件：模板是亲代DNA分子的两条链；原料是游离的4种脱氧核苷酸；能量是ATP；酶是解旋酶、DNA聚合酶。

【详解】

A；定点突变改变特定位点的核苷酸；先是人工合成诱变寡核苷酸引物，随后经过延伸和复制，产生新的突变基因，A正确；

B；诱变寡核苷酸引物的延伸需要消耗四种脱氧核苷酸；B错误；

C；突变基因的合成以正常基因的单链为模板；C错误；

D；延伸过程中遵循碱基互补配对原则；该过程需要将脱氧核苷酸连接起来，所以需要DNA聚合酶的催化，D正确。

故选BC。15、A:B:D【分析】【分析】

1；蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。

2；蛋白质工程崛起的缘由：基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质。

3；蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构；又称为第二代的基因工程。

4；基本途径：从预期的蛋白质功能出发；设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白质工程特有的途径。

【详解】

A；S蛋白的抗体能与S蛋白RBD特异性结合；而根据题干可知：LCB1可与S蛋白RBD紧密结合，说明LCB1可能与S蛋白的抗体在结构上类似，A正确；

B；由于LCB1可与S蛋白RBD紧密结合；故LCB1可依据S蛋白的RBD结构进行设计，B正确；

C；由题干信息分析可知；新冠病毒是通过其表面的S蛋白的RBD与人体细胞表面的ACE2受体相互作用；而人工合成的LCB1可识别并紧密结合S蛋白的RBD，阻止S蛋白的RBD与ACE2受体结合，由此说明LCB1可能与ACE2受体的某些区域结构类似，C错误；

D；可用蛋白质工程进行LCB1的设计和生产；而蛋白质工程是建立在基因工程的基础之上的，因此生产LCB1用到了基因工程的操作技术，D正确。

故选ABD。

【点睛】三、填空题(共7题，共14分)16、略

【解析】①.卵（母）细胞②.比较大，容易操作③.细胞质多，营养丰富。17、略

【解析】①.接种②.平板划线法③.稀释涂布平板法18、略

【解析】①.接种环②.琼脂固体③.连续划线④.聚集⑤.逐步稀释⑥.一个细胞⑦.子细胞群体⑧.菌落⑨.梯度稀释⑩.琼脂固体⑪.单个细胞⑫.单个的菌落19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】原核生物21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】高压灭菌—2022、略

【分析】【详解】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，其结果是生产自然界没有的蛋白质。【解析】蛋白质工程的结果是生产自然界没有的蛋白质四、判断题(共1题，共2分)23、B【分析】【详解】

胚胎发育早期；细胞数量不断增加，但胚胎总体积不变或略有缩小。

故错误。五、实验题(共1题，共7分)24、略

【分析】【分析】

1；基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：

①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因DNA分子杂交技术；

②检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；

③检测目的基因是否翻译成蛋白质抗原一抗体杂交技术。

④个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

2；图1中①-④依次为目的基因的获取、表达载体的构建、目的基因导入受体细胞、目的基因的检测。

（1）

PCR是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，需要Taq酶，但Taq酶不能从头开始合成DNA，前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物，因此需要根据目的基因fabV基因的两端按碱基互补配对原则设计引物。至少需要经过4次扩增才能获的8个双链等长的目的基因。

（2）

基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，题干信息显示C基因在低温下会抑制P2，R基因在高温下会抑制P1，说明P2启动子在高温下可以启动转录；P1启动子在低温下可以启动转录。题目显示高温下只表达lacz蛋白，则lacZ基因要插在“高温下不被抑制”的启动子的后面，即P2→T2之间；GFP基因要低温下表达，则插入位置要在P1→T1之间；且不破坏C基因和R基因。

（3）

因为fabV（从霍乱弧菌中发现的烯脂酰ACP还原酶）基因可以使大肠杆菌抵抗三氯生；大肠杆菌能在含三氯生的培养基上生长，说明大肠杆菌插入重组质粒，且依据是低温下有绿色荧光高温下无绿色荧光。

【点睛】

本题考查基因工程相关知识点，要求学生熟练掌握基因工程的原理、步骤及相关的目的，形成知识网络，结合题目要求解决相关问题。【解析】(1)目的基因（fabV基因）两端碱基序列4

(2)基因表达载体的构建P2→T2插在P1→T1之间；且不破坏C基因和R基因。

(3)三氯生低温下有绿色荧光，高温下无绿色荧光六、综合题(共3题，共6分)25、略

【分析】【分析】

1；PCR扩增目的基因需要有一段已知的碱基序列。

2；分析题图；启动子P左右两端都有酶1切割位点，可用酶1切割片段I使切割后的片段I首尾两端产生相同的末端，在用DNA连接酶处理片段Ⅰ形成环状DNA分子。用酶2切割环状DNA可获得片段II。由于子链合成方向是从子链的5'-3'，用引物D和E可扩增出启动子P。

3；将目的基因导入植物细胞的农杆菌转化法；其依据主要是：当植物受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物，吸引农杆菌移向这些细胞，这时农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。

【详解】

（1）启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点；不能直接根据片段Ⅰ扩增启动子的原因是启动子P左侧序列未知。

（2）图中的片段I在启动子P的左右两端各有一个酶1的切割位点；酶1可切割启动子P的左右两端产生相同的末端，再用DNA连接酶连接可形成环状DNA的片段I；片段II的首尾两端都有灰色区域，结合题图分析可知，片段II是用酶2切割处理环状DNA产生的。子链合成方向是从子链的5'-3'，所以可以用引物D和E扩增出启动子P。

（3）在培养基中添加酚类物质的目的是吸引农杆菌侵染烟草细胞；有利于启动子P和M基因成功转化。用含有卡那霉素和X-Gluc的培养基可筛选出所需的烟草细胞，在卡那霉素中能存活说明获得了质粒，能将X-Gluc水解成蓝色说明获得了基因M，筛选出的烟草细胞经过植物组织培养可获得转基因植株。

（4）由题意可知；基因M可在烟草的根部正常表达，其表达产物可将X－Gluc水解生成蓝色物质，故可用适量X－Gluc溶液检测A；B的幼根细胞中基因M的表达情况；表达强度越大，细胞表现的蓝色越深。若A组蓝色深而B组蓝色较浅，则说明B组低温使启动子P受抑制，表达的产物少。

【点睛】

本题考查基因工程的相关知识，解答本题的关键是分析题图，明确基因工程的基本步骤和工具，并根据限制酶的切割位点判断引物应该设计的碱基序列，结合题意明确检测基因表达载体的方法。【解析】RNA聚合酶识别并结合启动子P及左侧的序列未知，无法合成PCR所需要的引物酶1和DNA连接酶2能，可选用的引物组合是D和E吸引农杆菌感染烟草细胞卡那霉素组织培养X－GlucA蓝色较深、B蓝色较浅26、略

【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼