2025年华师大版选择性必修3生物上册阶段测试试卷含答案

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A.参与果醋、泡菜发酵的生物为原核生物B.酶的种类不同导致过程②⑥的差异C.导致过程④⑤差异的原因是糖源是否充足D.过程②④⑥所需要的最适温度相同3、下列有关细胞工程的说法正确的是A.在愈伤组织形成过程中，除适宜的温度、pH和无菌条件外，还需要有植物激素进行调节B.植物体细胞杂交前需要用酶去除细胞壁获得原生质体，然后再用灭活的病毒促进融合C.动物细胞核移植技术可以使生物多样性大大增加D.动物细胞培养应在含5%CO2的恒温箱中培养,CO2的作用是为细胞提供碳源4、用酵母菌使葡萄汁产葡萄酒，当酒精含量达到12%~16%时，发酵就停止了。有关解释错误的是（）A.酒精对酵母菌有毒害作用B.营养物质因消耗而不足C.产物积累使pH值发生改变D.氧气过少导致其无法呼吸5、长时间浸泡的木耳可能滋生椰毒假单胞杆菌，其代谢产生的米酵菌酸是一种可以引起人食物中毒的毒素。米酵菌酸分子量较小不能单独引起免疫反应，为了高效检测米酵菌酸，科研人员在制备米酵菌酸单克隆抗体时，要将米酵菌酸经过处理后再将其多次注射小鼠，经检测合格后，才从小鼠脾脏中提取相应细胞与骨髓瘤细胞进行融合，相关叙述正确的是（）A.米酵菌酸分子经过特殊处理的目的是制备供免疫细胞识别的抗原B.经特殊处理的米酵菌酸分子多次注入小鼠是为了促进记忆T细胞的产生C.处理后的米酵菌酸分子注入小鼠的次数是由血液中米酵菌酸分子的浓度决定的D.从小鼠脾脏中提取的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞两两融合形成3种能增殖的杂交瘤细胞6、下列关于微生物的培养相关叙述中，正确的是（）A.扩大培养酵母菌应该使用液体培养基并使用摇床振荡培养B.琼脂在培养基中不仅可以作为凝固剂，还可以作为碳源C.划线分离操作过程，若划线4次，则接种环需要灼烧4次D.待培养基冷却至室温后，在酒精灯火焰附近倒平板7、泡菜在我国具有悠久的历史，《诗经》中曾记载“中田有庐，疆场有瓜，是剥是菹，献之皇祖”，汉代的《说文解字》中对此解释“菹菜者，酸菜也”。下列关于泡菜制作的叙述错误的是（）A.泡菜坛中蔬菜装量不能超过2/3，以防发酵液溢出B.泡菜的制作过程中可能有多种微生物参与发酵C.适量的食盐水和酸性条件可以抑制杂菌的生长D.腌制泡菜时如果加入一些陈泡菜汁，可以缩短腌制时间8、研究人员将大麦细胞的LTP1基因导入酵母中，让酵母产生LTP1蛋白。下图为该实验过程的部分流程。下列说法正确的是（）

A.运用PCR扩增LTP1基因时，应选择左图的A和D作为引物B.为方便构建重组质粒，可在引物5’端添加限制酶的识别序列C.如图中为了筛选导入重组质粒的啤酒酵母，只需配制含青霉素的培养基D.为了让大麦的基因在酵母中表达，需要在目的基因两侧添加大麦的启动子和终止子9、盐害是全球水稻减产的重要原因之一，中国水稻研究所等单位的专家通过农杆菌中的质粒将CMO基因、BADH基因、mtld基因、gutD基因和SAMDC基因5个耐盐基因导入水稻，获得了一批耐盐转基因植株。有关耐盐转基因水稻培育的分析正确的是（）A.该转基因水稻与原野生型水稻存在生殖隔离B.该基因工程所需的限制性核酸内切酶可能有多种C.只要目的基因进入水稻细胞，水稻就会表现出抗盐性状D.可通过将水稻种植到有农杆菌的土壤中观察目的基因是否表达评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)10、下图是一种“生物导弹”的作用原理示意图；没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段时间后被机体清除。阿霉素是一种抗肿瘤药，可抑制DNA和RNA的合成，对正常细胞也有一定毒性。下列相关说法正确的是（）

A.单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的B.活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程C.在治疗中，应先注射非活化的磷酸酶，再注射生物导弹D.单克隆抗体特异性强，能减轻阿霉素对正常细胞的伤害11、下列有关动物细胞培养和植物组织培养的叙述，正确的是（）A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基中的成分不同B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶C.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖组织培养可获得脱毒植株D.烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞培养能得到细胞代谢产物12、某种病毒的主要表面抗原为S蛋白，用S蛋白制备的单克隆抗体可用于该种病毒的检测。下列说法正确的是（）

A.B淋巴细胞分离自经S蛋白免疫过的小鼠B.稀释培养后多孔玻璃板中的杂交瘤细胞数目可能不到细胞总数的一半C.集落①的细胞既能无限增殖又能产生单克隆抗体D.集落②～④的细胞可用于扩大化培养生产单克隆抗体13、下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。下列说法正确的是（）

A.若能在细菌B中检测到人的生长激素基因，则说明该基因工程项目获得成功B.将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的就是导入了重组质粒的细菌C.将人的生长激素基因与质粒A结合的过程共形成了4个磷酸二酯键D.将重组质粒导入细菌B之前，可以用Ca2+处理细菌B14、下列关于用刚果红培养基筛选纤维素分解菌的叙述，正确的有（）A.刚建成的落叶植物公园土壤，可作为获取菌种的最佳样本B.刚果红可抑制其他微生物的生长，筛选出纤维素分解菌C.与细菌产生的胞内酶相比，真菌分泌的纤维素酶更易从培养液中获取D.纤维素酶的开发和利用，能促进人类对环境中一些废弃物的循环利用15、欲探究1g土壤中有多少能分解尿素的细菌，需要用科学的方法测定微生物数量。下列相关叙述不正确的是（）A.利用以尿素作为唯一氮源的培养基，可从土壤中分离出分解尿素的细菌B.平板划线法可以分离得到单菌落，也可用来测定样品中的活菌数C.样品的稀释度直接影响平板上的菌落数目，因此稀释度越大越好D.利用显微镜进行直接计数，可快速直观地测定样品中的活菌数16、下列有关生物技术安全性和伦理问题的观点，合理的是（）A.对转基因技术，我们应该趋利避害，理性看待B.我国禁止生殖性克隆和治疗性克隆C.我国不发展、不生产、不储存生物武器，并反对其扩散D.对基因检测应该保护个人遗传信息的隐私权17、下图是利用牛的乳腺细胞生产人体血清白蛋白的操作流程；其中细胞①已导入人血清白蛋白基因。相关叙述正确的是（）

A.细胞①的培养液中需要加入胃蛋白酶B.“卵母细胞”应在体外培养成熟C.图示“细胞②→早期胚胎”发生输卵管中D.该技术与试管牛培育的主要原理不同评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)18、在课题1中，我们学习了稀释涂布平板法。这一方法常用来统计样品中_________________的数目。当样品的稀释度足够高时，____________________。19、基因工程操作一般经历如下四个步骤：_____。20、目的：使目的基因在受体细胞中_____，并且可以______，使目的基因能够______作用。21、结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：______和______。22、___________（简称PCR）是一种____________迅速_______________的技术，它能以极少数的DNA为模板，在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝。23、毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的_____________分解成小分子的____________和______________；脂肪酶可以将_____________水解成_________________和________________。24、植物诱导融合的方法：物理法包括______等。化学法一般是用_____作为诱导剂。25、近年来，克隆技术的发展取得了巨大突破｡在日常生活中，我们遇到过与克隆技术有关的问题吗？_____。26、最后检测目的基因是否翻译成______，方法是从转基因生物中提取______，用相应的______进行______。评卷人得分四、实验题(共4题，共40分)27、德阳中江盛产蜜柚；汁多肉脆，口感香甜。但是近年各地大面积种植该类产品，导致大量果品积压。为了解决果农的燃眉之急，有一定生物学知识的村干部想到了多渠道开发产品的方法，帮助果农办起了加工厂。请回答下列相关问题；

（1）利用蜜柚果肉可以生产果汁，为提高出汁率和澄清度，可向蜜柚汁中加入果胶酶将果胶分解为________；生产果汁剩下的柚皮可用________法提取精油；作为工业原料。

（2）在利用蜜柚汁制作果酒的过程中；为了提高酵母菌的发酵效率，工作人员对酵母菌进行了固定化，过程如下：酵母细胞活化→①→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。

上述流程中，①为配制________溶液；溶化海藻酸钠时，要用________加热；直至其完全溶化。

（3）上述固定酵母细胞的方法称为法________，而制备固定化淀粉酶则不用此法进行固定，原因是________________________________

（4）在利用蜜抽果酒制作果醋的过程中，一工作人员又向发酵装置中添加一定量的蜜柚汁（不影响菌种的活性），检测发现乙醇的利用速率迅速下降，原因是________________________________________________。28、氧化硫硫杆菌（T．t）通过将单质硫与还原态硫氧化为硫酸以获得能量进行化能合成作用。科学家欲通过实验探究硫酸锌对T．t产酸量的影响。

实验材料：氧化硫硫杆菌（T．t）菌液；蒸馏水；100mg/L和1000mg/L的硫酸锌溶液，配制好的氧化硫硫杆菌（T．t）液体培养基(含单质硫)，恒温摇床等。

请分析并回答以下问题：

（1）氧化硫硫杆菌的代谢类型为______________，培养氧化硫硫杆菌（T．t）的液体培养基中的碳源是___________，该培养基从功能上属于______________培养基。

（2）实验前，科学家发现氧化硫硫杆菌（T．t）菌液已被杂菌污染，于是在配制好的氧化硫硫杆菌（T．t）液体培养基中加入____________，用______________法接种并进行纯化培养；得到了氧化硫硫杆菌菌落。

（3）实验步骤：

第一步：对配制好的培养基再次进行______________灭菌处理；以防止杂菌污染影响实验结果。

第二步：取三个锥形瓶（编号A、B、C）分别加入等量培养基后，再依次分别加入____________________________；

第三步：往A、B、C三组中接种______________后放入恒温摇床中培养7天。

第四步：每天测定并记录各组的硫酸含量。

（4）实验结果：如图所示；据图分析实验结论：

实验结论：________________________________________________________。29、某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A；磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基；成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如图所示。请分析回答下列问题。

（1）培养基中加入化合物A的目的是__________，这种培养基属于__________培养基。

（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的__________。实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”呼吸作用的类型是__________。

（3）在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是__________。

（4）转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具是__________，操作时采用__________灭菌的方法。

（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉，这样做的目的是____________________。

（6）某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数，他选用104、105、106倍稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是__________，此对照实验的目的是____________________。30、被称为“水中小白鼠”的斑马鱼是一种体长4厘米左右的热带淡水鱼；与人类基因同源性高达87%，并有相似的器官；生理功能和信号通路。由于发育周期短、费用低、体外受精、透明等优点，斑马鱼现在越来越广泛地应用于毒性检测、疾病模型创制、药物筛选等领域中。

研究人员欲通过使胰岛素基因表达受阻从而构建糖尿病模型斑马鱼。吗啉反义寡核苷酸是一种RNA剪接抑制剂；通过将其注入斑马鱼受精卵可阻碍相关基因的表达。针对其作用原理，现有两种假说：

假说1：吗啉反义寡核苷酸导致RNA前体上内含子2的对应序列不能被剪切。

假说2：吗啉反义寡核苷酸导致RNA前体上内含子2和外显子3的对应序列同时被剪切。

为了验证上述假说；研究人员进行了如下实验：

(1)从受精卵发育了3天的实验组和对照组的细胞中提取总RNA，再通过逆转录获得cDNA。若假说1成立，选择上图所示引物2和引物3进行PCR后的结果为______（填字母）。A．实验组有杂交带B．实验组无杂交带C．对照组有杂交带D．对照组无杂交带(2)若要证明假说2成立，进行PCR时，需要选择上图所示引物有____________。

(3)采用PCR技术扩增DNA需要引物的原因是__________________。

(4)为了获取大量斑马鱼胚胎干细胞用于药物筛选，可加入__________________，用于分散斑马鱼囊胚中的__________________。再取分散细胞作为初始材料进行______培养，然后分瓶继续培养。培养瓶中添加输卵管上皮细胞作为______细胞，以提高斑马鱼胚胎干细胞的数量。评卷人得分五、综合题(共3题，共15分)31、图1是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图，载体质粒P0具有四环素抗性基因（tetr)和氨苄青霉素抗性基因（ampr）。请回答下列问题：

（1）EcoRV酶切位点为EcoRV酶切出来的线性载体P1为___________末端。

（2）用TaqDNA聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段；其两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸。载体P1用酶处理，在两端各添加了一个碱基为___________的脱氧核苷酸，形成P2；P2和目的基因片段在__________酶作用下，形成重组质粒P3。

（3）为筛选出含有重组质粒P3的菌落；采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到A；B、C三类菌落，其生长情况如下表（“+”代表生长，“﹣”代表不生长）。根据表中结果判断，应选择的菌落是__________（填表中字母）类，另外两类菌落质粒导入情况分别是_____、________________。

（4）为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR鉴定。图2所示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，PCR鉴定时应选择的一对引物是__________。某学生尝试用图中另外一对引物从某一菌落的质粒中扩增出了400bp片段，原因是_______________。32、小鼠癌症模型是目前最为常用；先进和公认的临床前抗肿瘤药物效应评价体系；该模型随着肿瘤治疗策略的革新而不断发展，并为癌症的治疗手段提供重要的理论及实践指导。下图表示利用小鼠胚胎干细胞（ES细胞）做的小鼠癌症模型，据图分析回答下列问题：

（1）a过程表示基因工程，则其核心步骤是_____，该过程的目的_______________。

（2）b过程可增加ES细胞的数量，若想从早期胚胎中获得更多的ES细胞，可将早期胚胎培养至_______（时）期。d过程移入的胚胎能够存活，从免疫学上来说，是因为代孕子宫不会对其发生____________反应。d过程进行前，要对代孕小鼠进行_______________处理。用肝癌细胞作抗原刺激B淋巴细胞，再将此淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后获得细胞代谢产物______________；该产物与抗癌药物结合制成“生物导弹”，从而定向杀死小鼠体内的肝癌细胞。

（3）早期胚胎发育过程中，细胞逐渐开始分化，形成将来发育成各种组织的_______和滋养层细胞进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程称为_______。

（4）图示研究过程中使用的技术有_____________________________（至少答出2个）。33、图为某生物兴趣小组设计的果酒发酵实验装置；请据图分析回答相关问题。

(1)用此装置制作葡萄酒，在酒精发酵的过程中，需对气阀______进行关闭。若继续用此装置制作葡萄醋，需改变的条件是：①_______②_______。

(2)实验表明，醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌的死亡，请写出当缺少糖源时醋酸菌产生醋酸的反应简式：____________________________________。

(3)将豆腐块放在自然条件下发酵时，多种微生物参与了发酵，其中起主要作用的是__________。传统发酵以混合菌种的______________及____________为主，通常是家庭式或作坊式的。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、C【分析】【分析】

果酒制作菌种是酵母菌；代谢类型是兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，条件是18～25℃；前期需氧，后期不需氧；果醋制作的菌种是醋酸菌，代谢类型是需氧型细菌，属于原核细胞，条件是30～35℃、一直需氧；腐乳的制作原理：参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种，其中起主要作用的是毛霉，其代谢类型为异养需氧型，适宜温度为15℃～18℃；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。

【详解】

A；当氧气和糖原充足时醋酸菌将糖分解成醋酸；因此，制作果醋的前未必需要制作果酒，A错误；

B；通常情况下；泡菜制作一般10天后即可食用，不需进行排气操作，因为泡菜制作过程所需的菌种乳酸菌无氧呼吸的产物是乳酸，没有气体生成，B错误；

C；果酒、果醋和泡菜制作使用的菌种通常取自于自然环境；也可接种优良菌种，以提高产品品质，C正确；

D；所用制作原料和器具不需要进行严格灭菌；发酵全过程无需在无菌环境，D错误。

故选C。

【点睛】2、D【分析】【分析】

分析题图：图示是果酒和果醋生产过程中的物质变化情况；其中①是细胞呼吸的第一阶段，发生在细胞质基质中；②是无氧呼吸的第二阶段，为酒精发酵，发生在细胞质基质中；③为有氧呼吸的第二；三阶段，发生在线粒体中；④⑤均为醋酸发酵，发生在细胞质基质中。

【详解】

A；参与果醋、泡菜发酵的微生物分别为醋酸菌、乳酸菌；它们均为原核生物，A正确；

B；酶的催化具有特异性；酶的种类不同导致过程②⑥的差异，B正确；

C；过程④是醋酸菌在缺少糖源时；将酒精变成乙醛，再将乙醛变成醋酸，过程⑤是醋酸菌在氧气、糖源充足时，将葡萄糖转变成醋酸，C正确；

D；过程②酒精发酵所需要的最适温度是18～25℃；④醋酸发酵所需要的最适温度是30～35℃，⑥过程发酵的适宜温度是20～30℃，D错误。

故选D。3、A【分析】【分析】

【详解】

A；在脱分化形成愈伤组织的过程中；除适宜的温度、pH和无菌条件外，还需要生长激素和细胞分裂素进行调节，A正确；

B；植物原生质体融合不能用灭活的病毒；该方法用于动物细胞融合，B错误；

C；动物细胞核移植技术属于无性繁殖；不能使生物多样性增加，C错误；

D、动物细胞培养应在含5%CO2的恒温箱中培养,CO2的作用是调节pH；D错误。

故选A

【点睛】4、D【分析】【分析】

参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：

（1）在有氧条件下，反应式如下：

（2）在无氧条件下，反应式如下：

【详解】

A；酒精对酵母菌有毒害作用；A正确；

B；酵母菌无氧呼吸时需要消耗葡萄糖等营养物质；使营养物质减少，很难维持大量酵母菌的代谢需要，B正确；

C；酒精发酵过程中会产生酒精和二氧化碳；导致pH值发生改变，不适宜酵母菌生存，C正确；

D；酒精发酵时进行的是无氧呼吸；不需要氧气，D错误。

故选D。

【点睛】5、A【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

A；根据题干信息；米酵菌酸分子量较小不能单独引起免疫反应，在制备米酵菌酸单克隆抗体时，要将米酵菌酸经过处理后再将其多次注射小鼠，经检测合格后，才从小鼠脾脏中提取相应细胞与骨髓瘤细胞进行融合，因此米酵菌酸分子经过特殊处理的目的是制备供免疫细胞识别的抗原，进而产生能产生抗体的浆细胞，A正确；

B；经特殊处理的米酵菌酸分子多次注入小鼠是为了促进记忆B细胞的产生；进而使得二次免疫反应产生更多的浆细胞，B错误；

C；处理后的米酵菌酸分子注入小鼠的次数由机体内浆细胞的数量决定；C错误；

D；从小鼠脾脏中提取的B淋巴细胞与肿瘤细胞两两融合形成3种杂交细胞（B淋巴细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞、杂交瘤细胞）；但只有骨髓瘤细胞自身融合的细胞和杂交瘤细胞能增殖，D错误。

故选A。

【点睛】6、A【分析】【分析】

1；琼脂是一种从红藻中提取的多糖；常作为固体培养基中的凝固剂。

2；平板划线法每次接种前和接种后均需要对接种环灼烧灭菌。

【详解】

A；酵母菌是异养兼性厌氧微生物；在有氧条件下能大量繁殖，液体培养基能增大菌体与营养物质的接触，使用摇床振荡培养能增加溶氧量，故扩大培养酵母菌应该使用液体培养基并使用摇床振荡培养，A正确；

B；琼脂不能提供碳源；只能作为凝固剂，B错误；

C；每次划线前后均需要对接种环灼烧；所以若划线4次，则接种环需要灼烧5次，C错误；

D；待培养基冷却至50℃左右时；在酒精灯火焰附近倒平板，D错误。

故选A。7、A【分析】【分析】

泡菜（酸菜）的制作原理：在无氧条件下；乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。发酵过程中，亚硝酸盐先增加，后下降至相对稳定。

【详解】

A；泡菜坛中蔬菜装至半坛；再加入香辛料和酒至八成满，盐水没过蔬菜，A错误；

B；泡菜的制作过程中利用的菌种主要是乳酸菌；泡菜坛中还可能有其他微生物，B正确；

C；食盐水能增大环境溶液的浓度、酸性条件会抑制细胞代谢；适量的食盐水和酸性条件在腌制过程中可以抑制杂菌生长，C正确；

D；陈泡菜汁中含有乳酸菌；坛中加一些陈泡菜汁的目的是加入乳酸菌菌种，缩短腌制时间，D正确。

故选A。8、B【分析】【分析】

图示表示将使啤酒产生丰富泡沫的LTPI基因植入啤酒酵母菌中；使其产生LTP1蛋白，酸出泡沫丰富的啤酒的过程，图中A为获取目的基因的过程，B为质粒，C为基因表达体。

【详解】

A；结合题意可知；DNA复制只能从5’到3’，而DNA聚合酶只能从引物的3’端延伸DNA链，因此构建前利用PCR技术扩增目的基因时，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取B和C作为引物，A错误；

B；为构建重组质粒(即将目的基因和质粒整合到一起)；在引物5’端需要适当增加限制酶识别序列B正确；

C；由图可知；构建基因表达载体时，四环素抗性基因被破坏，而青霉素抗性基因没有被破坏，因此将导入C的酵母菌分别在含有青霉素和四坏素的两种选择培养基上培养，则在含有青霉素的培养基上能存活，但在含有四环素的培养基上不能存活，才能筛选导入重组质粒的啤酒酵母，C错误；

D；为了让大麦的基因在酵母中表达；需要在目的基因两侧添加酵母的启动子和终止子，D错误。

故选B。9、B【分析】【详解】

该转基因水稻与原野生型水稻属于同一个物种，不存在生殖隔离，A错误；该基因工程涉及多个目的基因，所以该基因工程所需的限制性核酸内切酶可能有多种，B正确；基因是选择性表达的，目的基因进入水稻细胞，还要检测水稻是否表现出抗盐性状，C错误；可通过将水稻种植到盐碱含量高的土壤中观察目的基因是否表达，D错误。二、多选题(共8题，共16分)10、A:B:D【分析】【分析】

单克隆抗体的制备。

（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原；然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。

（2）获得杂交瘤细胞：

①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；

②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞；该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。

（3）克隆化培养和抗体检测；

（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖；

（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。

【详解】

A；单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的；A正确；

B；根据题意可知；“阿霉素可抑制DNA和RNA的合成”，因此活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程，B正确；

C；在治疗中；应将非活化磷酸阿霉素和生物导弹同时注射，C错误；

D；单克隆抗体特异性强；能减轻阿霉素对正常细胞的伤害，D正确。

故选ABD。11、A:C:D【分析】【分析】

植物组织培养和动物细胞培养的比较。比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质固体培养基液体培养基培养基成分营养物质（蔗糖）、植物激素等营养物质（葡萄糖）、动物血清等培养结果植物体细胞株、细胞系培养目的快速繁殖、培育无毒苗等获得细胞或细胞产物分散处理无有脱分化有无

【详解】

A；动物细胞培养和植物组织培养所用培养基中的成分不同；如动物细胞培养需要加血清，植物细胞培养不需要添加血清，A正确；

B；植物组织培养不需要胰蛋白酶；B错误；

C；动物细胞培养可用于检测有毒物质；茎尖组织培养可获得脱毒植株，C正确；

D；烟草叶片离体培养能产生新个体；小鼠杂交瘤细胞培养能得到细胞代谢产物，D正确。

故选ACD。12、A:B:C【分析】【分析】

13、C:D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成；

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；检测到细菌B合成人的生长激素才能说明获得成功；A错误；

B；根据题意；细菌B不含有质粒A及其上的基因，即没有抗氨苄青霉素基因；质粒含抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，基因发生重组时抗四环素基因被破坏，抗氨苄青霉素基因被保留，故在含氨苄青霉素的培养基上能生长的是导入了普通质粒或者重组质粒的细菌，B错误；

C；将人的生长激素基因与质粒A结合的过程连接两个切口；该过程共形成4个磷酸二酯键，C正确；

D、将目的基因导入细菌时，需要用Ca2+处理细菌；使其处于易于吸收周围环境中DNA分子的生理状态，D正确。

故选CD。

【点睛】14、C:D【分析】【分析】

在筛选纤维素分解菌的过程中；刚果红可与培养基中纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。

【详解】

A；刚建成公园落叶少；土壤中的纤维素分解菌少，不利于获得菌种，A错误；

B；刚果红不能抑制其它微生物的生长；刚果红可鉴别出纤维素分解菌，B错误；

C；与细菌产生的胞内酶相比；真菌分泌的纤维素酶更易从培养液中获取，因为纤维素酶可以分泌出来，C正确；

D；纤维素酶的开发和利用；可用于分解秸秆、棉质衣物等，能促进人类对环境中一些废弃物的循环利用，D正确。

故选CD。15、B:C:D【分析】【分析】

选择培养基是用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。设计选择培养基时；主要考虑某些微生物的特殊营养需求或它们对某些化学物质具有的抗性。

【详解】

A；以尿素作为唯一氮源的培养基为选择培养基；可从土壤中分离出分解尿素的细菌，A正确；

B；平板划线法能将单个微生物分散到培养基上；从而分离得到单菌落，但是不可以用来测定样品中的活菌数，稀释涂布平板法可以计数，B错误；

C；样品的稀释度太大；会导致微生物数量太少，一般要求稀释后平板上的菌落数在30到300之间比较合适，C错误；

D；利用显微镜进行直接计数；可快速直观地测定样品中的活菌数和死菌数，D错误。

故选BCD。16、A:C:D【分析】【分析】

1；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

2；治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤、神经或肌肉等）用于治疗性移植。

3；生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的；即用于产生人类个体。

4；中国政府：禁止生殖性克隆人；坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆。

【详解】

A；对转基因技术；我们应该趋利避害，理性看待，A正确；

B；中国政府的态度是禁止生殖性克隆人；坚持四不原则（不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验），不反对治疗性克隆，B错误；

C；中国在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器；并反对生物武器及其技术和设备的扩散，C正确；

D；对基因检测应该保护个人遗传信息的隐私权；D正确。

故选ACD。17、B:D【分析】【分析】

题图分析：图示操作流程为“利用牛的乳腺细胞生产人体血清白蛋白”；因此首先需要将人体血清白蛋白基因导入雌性奶牛乳腺细胞，形成细胞①；取出细胞①的细胞核，注入去核牛卵母细胞中，形成细胞②，该过程采用了核移植技术，其原理是动物细胞的细胞核具有全能性；要形成转基因克隆奶牛还需要采用早期胚胎培养技术和胚胎移植技术。

【详解】

A；为了得到单个细胞；在细胞①的培养液中需要加入胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，A错误；

B；图中卵母细胞应该在体外培养到减数第二次分裂中期；此时的次级卵母细胞具有受精能力，B正确；

C；图示“细胞②→早期胚胎”为体外培养胚胎的过程；该过程在体外完成，C错误；

D；图示克隆牛的培育主要采用了核移植技术和胚胎移植技术；属于无性生殖；试管牛的培育主要采用了体外受精和胚胎移植技术，属于有性生殖，因此两者产生犊牛的生殖方式不相同，D正确。

故选BD。三、填空题(共9题，共18分)18、略

【解析】①.活菌②.培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】稳定存在遗传至下一代表达和发挥21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】黏性末端平末端。22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】多聚酶链式反应体外扩增DNA片段23、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质肽氨基酸脂肪甘油脂肪酸24、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】离心、振动、电刺激聚乙二醇25、略

【分析】【详解】

在日常生活中；我们遇到过的与克隆技术有关的问题有：

①濒临灭绝动物的克隆：克隆可以拯救濒危的国家保护动物以及植物；我们可运用克隆，复制濒临灭绝的生物，让其不至于在我们的生活中消失；

②农业克隆：应用于农业等领域；通过转基因的方式，增加粮食的亩产量，提高土地的单位出产量；

③细胞克隆替代或者修复人体细胞问题；比如胚胎干细胞；

④畜牧业克隆：应用于畜牧业，提升优良品种群体基数，缩短畜牧育种年限。【解析】有，比如：①濒临灭绝动物的克隆；②农业克隆：应用于农业等领域，通过转基因的方式，增加粮食的亩产量，提高土地的单位出产量；③细胞克隆替代或者修复人体细胞问题，比如胚胎干细胞；④畜牧业克隆：应用于畜牧业，提升优良品种群体基数，缩短畜牧育种年限。26、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质蛋白质抗体抗原－抗体杂交四、实验题(共4题，共40分)27、略

【分析】【分析】

1；果胶酶能够分解果胶；瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。

2；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。

3；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】

（1）为了提高出汁率和澄清度；需要用果胶酶和纤维素酶处理，果胶酶可将果胶分解成半乳糖醛酸（和半乳糖醛酸甲酯）；考虑到成本和技术难度问题，通常采用压榨法提取精油；

（2）固定化酵母菌的流程是：酵母细胞活化→配制CaCl2溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞，故①为配制CaCl2溶液；海藻酸钠溶化时；最好采用小火间断加热的方法，避免海藻酸钠焦糊；

（3上述过程将酵母菌包埋在海藻酸钠制成的凝胶中；其固定酵母细胞的方法称为包埋法；酶分子较小，容易从包埋材料中漏出，所以制备固定化淀粉酶则不用此法进行固定；

（4）结合分析可知；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，加入蜜柚汁后，发酵装置中糖源充足，醋酸菌直接将葡萄汁中的果糖分解成醋酸，故对乙醇的利用率迅速下降。

【点睛】

本题以利用蜜柚开发产品为情景，考查固定化酶和固定化细胞技术及果醋的制作，学生的理解能力和综合分析能力是解答本题的关键。【解析】半乳糖醛酸压榨CaCl2小火间断包埋酶分子较小，容易从包埋材料中漏出当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将蜜柚汁中的果糖分解成醋酸28、略

【分析】【分析】

微生物接种常用的两种方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）

结合题意“氧化硫硫杆菌通过将单质硫与还原态硫氧化为硫酸以获得能量进行化能合成作用”可知，氧化硫硫杆菌的代谢类型为自养需氧型；由于该菌可以进行化能合成作用，可以利用液体培养基中的无机碳或CO2；可以其作为液体培养基中的碳源；该培养基中含有单质硫，对生长的菌类具有选择作用，在功能上属于选择培养基。

（2）

培养微生物应用固体培养基进行培养；故应在配置好的液体培养基中加入琼脂；对微生物进行纯化培养的方法有平板划线法或稀释涂布平板法。

（3）

第一步；对培养基的灭菌方法为高压蒸汽灭菌；

第二步；由于本实验的目的是通过实验探究硫酸锌对T．t产酸量的影响，则实验的自变量为硫酸锌的有无及其含量，实验应遵循对照与单一变量原则，故本步骤应在三个锥形瓶中分别加入等量的蒸馏水；100mg/L和1000mg/L的硫酸锌溶液；

第三步；遵循无关变量一致原则，故往A；B、C三组中接种等量的氧化硫硫杆菌（T．t）后放入恒温摇床中培养7天。

（4）

据图分析；与对照（蒸馏水组）相比，低浓度硫酸锌对氧化硫硫杆菌（T．t）产酸无明显作用，高浓度硫酸锌对氧化硫硫杆菌（T．t）产酸起抑制作用。

【点睛】

本题主要考查培养基的制作和微生物的接种方法，意在强化学生对实验室的微生物的培养的相关知识的理解与掌握。熟记相关知识并能结合术语分析作答是解题关键。【解析】（1）自养需氧型无机碳或CO2选择培养基。

（2）琼脂平板划线法或稀释涂布平板法。

（3）高压蒸汽等量的蒸馏水；100mg/L和1000mg/L的硫酸锌溶液等量的氧化硫硫杆菌（T．t）

（4）低浓度硫酸锌对氧化硫硫杆菌（T．t）产酸无明显作用，高浓度硫酸锌对氧化硫硫杆菌（T．t）产酸起抑制作用29、略

【分析】【分析】

微生物的培养；培养基的成分必须含有碳源；氮源、水和无机盐。获取纯净微生物的关键是防止外来杂菌入侵。实验室中目的菌株的筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。

【详解】

（1）本实验是分离出降解的有机化合物A的菌种；所以培养基中加入化合物A的目的是筛选降解的有机化合物A的菌种，这种培养基属于选择培养基。

（2）分析培养基的配方可知；该培养基由化合物A；磷酸盐、镁盐以及微量元素配制而成，其他成分中为体现出提供碳源和氮源，因此化合物A为目的菌提供了碳源和氮源；在培养过程中应该振荡培养，增加培养液中的溶氧量，故目的菌是需氧微生物，呼吸作用的类型是有氧呼吸。

（3）获得纯净“目的菌”的关键是无菌技术；防止外来杂菌入侵。

（4）平板划线操作的工具是接种环；对于接种环的灭菌方法应该是灼烧灭菌。

（5））实验结束后；使用过的培养基应该进行灭菌处理后，才能倒掉，以杀死培养基上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。

（6）实验设计过程应遵循对照原则；该实验还应增设一组不接种的空白培养基作为对照，以证明培养基制备是否被杂菌污染，检验培养基是否灭菌合格。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记无菌技术操作方法及接种微生物接种常用的两种方法，能结合所学的知识准确答题。【解析】筛选目的菌选择化合物A有氧呼吸防止外来杂菌入侵接种环灼烧防止造成环境污染不接种的空白培养基检验培养基是否灭菌合格30、略

【分析】【分析】

根据题干信息分析；糖尿病模型斑马鱼的构建的原理是使胰岛素基因表达受阻，而使胰岛素基因表达受阻是通过给斑马鱼受精卵注射吗啉反义寡核苷酸实线的；吗啉反义寡核苷酸是一种RNA剪接抑制剂，其作用的机理有两种假说：可能是导致RNA前体上内含子2的对应序列不能被剪切，也可能是导致RNA前体上内含子2和外显子3的对应序列同时被剪切。

(1)

根据引物2和引物3在胰岛素基因片段上的位置；通过PCR扩增能得到内含子2的序列，若假说1成立，即吗啉反义寡核苷酸导致RNA前体上内含子2的对应序列不能被剪切，故实验组中应含有内含子2的序列，而对照组的该片段被切除了，因此用引物2和引|物3进行PCR反应，其结果为实验组中有杂交带，而对照组中无杂交带。

故选AD。

(2)

若要证明假说2成立；即RNA前体上内含子2和外显子3的对应序列同时被剪切下去，则可以选择图示引物5和引物2；引物5和引物6进行PCR，观察是否有杂交带出现。

(3)

由于DNA聚合酶不能从头合成DNA；而只能从引物3′端延伸DNA链，因此DNA复制需要引物。

(4)

用胰蛋白酶处理斑马鱼囊胚中的内细胞团；可以获得分散的斑马鱼胚胎干细胞，然后对其进行原代培养，接着分瓶继续培养。培养瓶中添加输卵管上皮细胞作为饲养层细胞，以提高斑马鱼胚胎干细胞的数量。

【点睛】

解答本题的关键是掌握基因的表达的相关知识点，明确基因转录出来的mRNA是要经过加工成为成熟的mRNA才能作为翻译的模板的，并能够根据题干提取有效信息进行答题。【解析】(1)AD

(2)5、65；2

(3)DNA聚合酶不能从头合成DNA；只能从3′端延伸DNA链，因此DNA复制需要引物。（得分点：“只能从3′端延伸DNA链”）

(4)胰蛋白酶内细胞团原代饲养层五、综合题(共3题，共15分)31、略

【分析】【分析】

基因表达载体的基本结构包括复制原点、目的基因、标记基因、启动子、终止子等。根据题干信息和图形分析，P0是载体质粒，其含有的氨苄青霉素抗性基因（ampr