2025年外研版三年级起点选择性必修3生物上册阶段测试试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年外研版三年级起点选择性必修3生物上册阶段测试试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、培育甘蓝和萝卜体细胞杂交植株过程中，运用的技术包括（）A.干细胞技术和细胞融合技术B.细胞融合技术和植物组织培养技术C.细胞融合技术和细胞核移植技术D.干细胞技术和植物组织培养技术2、当面对日常生活中与转基因技术有关的话题时，我们需要理性地表明观点和参与讨论。下列不属于理性看待转基因技术的是（）A.要靠确凿的证据和严谨的逻辑来思考转基因技术的影响B.只要有证据表明某转基因产品有害，就应该禁止转基因技术的应用C.经济、文化和伦理道德观念等的差异，人们对转基因技术有不同的看法D.要在清晰地了解转基因技术的原理和规程的基础上来讨论转基因技术的相关问题3、如图为腐乳制作过程的流程图；下列说法不正确的是（）

豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制A.毛霉为好氧型真菌，为避免其无氧呼吸，码放豆腐时要留出一定缝隙B.加盐腌制的目的是析出豆腐中的水分使之变硬，同时能抑制微生物的生长C.加卤汤密封腌制中，毛霉不断增殖，并产生大量的酶，分解蛋白质D.豆腐上生长的白毛是毛霉的直立菌丝4、下列有关抗虫基因表达载体的叙述，正确的是（）A.切割含抗虫基因的DNA片段和载体必须用同一种限制酶，才能获得相同末端B.抗虫基因表达载体中要有启动子和终止密码子C.抗虫基因表达载体必须具备标记基因，其作用是筛选含有目的基因的受体细胞D.抗虫基因的表达启动于复制原点5、下列有关植物细胞工程的应用的叙述，错误的是（）A.微型繁殖技术不仅能实现种苗的大量繁殖，还能保持优良品种的遗传特性B.利用茎尖进行作物脱毒的原因是茎尖的病毒极少，甚至无病毒C.在植物的组织培养过程中，经化学或物理诱变处理可得到有用的突变体，如抗花叶病毒的甘蔗等D.应用植物组织培养技术得到人参植株，然后从其细胞中提取细胞产物，可实现细胞产物的工厂化生产6、下图为真核生物核基因结构模式图，下列叙述正确的是（）

A.启动子编码起始密码子B.cDNA文库和基因组文库的基因中均含有内含子C.在转录完成后，RNA聚合酶从c~d区段脱落下来D.细胞内DNA复制时，只复制编码区，不复制非编码区7、下列关于PCR技术的叙述，正确的是（）A.依据的原理是DNA的半保留复制B.需要设计一对序列互补的特异性引物C.需要解旋酶和热稳定的DNA聚合酶D.需要恒定的高温8、下图表示核移植与克隆动物的相关图解，有关叙述错误的是（）

A.用于核移植的供体细胞①一般都选用传代10代以内的细胞B.选用去核卵母细胞的主要原因是其细胞质可使体细胞核的全能性表达C.采集的卵母细胞培养到的②时期表示减数第二次分裂中期D.图示过程说明高度分化的动物细胞仍具有发育的全能性9、某高校学生利用所学的知识调查流经学校的河水中大肠杆菌的状况，测定了该河流水样中的大肠杆菌含量，并进行了大肠杆菌的分离等工作，图1和图2分别是同学甲和乙得到的结果。下列相关叙述错误的是（）

A.图1中Ⅲ区是观察细菌菌落形态的最佳区域B.整个划线操作的过程都必须在酒精灯火焰旁进行，同学甲所用接种工具总共灼烧灭菌了5次C.图1中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从Ⅲ区挑取单菌落D.同学乙采用的是稀释涂布平板法，接种时可能涂布不均匀评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)10、我国研究人员创造出一种新型干细胞——异种杂合二倍体胚胎干细胞；具体研究过程如下图所示，下列叙述正确的是（）

A.单倍体囊胚1最可能是由卵子发育预带的，单倍体ES应取自囊胚的内细胞团B.培养液中除了需要加入血清等营养物质，还需要加入抗生素等消灭病毒C.体外培养条件下ES细胞可以增殖而不发生分化D.ES细胞在形态上表现为体积大、细胞核小、核仁明显11、格瓦斯是一种广泛流传于东欧的低度酒精饮料。制作过程：①将发酵面包制成的面包液、糖化液装入发酵罐，加入保加利亚乳酸菌、酵母菌进行发酵；②发酵液经过严格的过滤；③过滤液经5～8s迅速升温到127℃进行高温杀菌，冷却后即可饮用。酵母菌产生酒精的能力差异较大，其产酒精能力与其耐受酒精的能力有关。下列说法正确的是（）A.保加利亚乳酸菌和酵母菌都能同时进行有氧呼吸和无氧呼吸B.面包液、糖化液可为微生物的生长提供碳源、氮源以及水和无机盐等营养物质C.若想得到产酒精能力比较强的酵母菌，可向培养基中添加较高浓度的酒精进行筛选D.过程③中瞬时高温灭菌可使微生物蛋白质空间结构迅速破坏，从而达到灭菌效果12、常乳是母牛泌乳期一周后直到泌乳停止前一周这个时间段内分泌的乳汁。奶牛自身乳房和乳头中可能含有的细菌，加上挤乳过程中产生的少量污染，常乳中会有一定量的细菌存在。研究小组要检测一份常乳样品中细菌的总量（不考虑菌种），检测流程如下图，每个平板上接种菌液量为0.1mL。下列说法正确的是（）

A.倒平板时将培养皿打开一条细缝，不要完全打开，防止杂菌污染B.上述方法是稀释涂布平板法，培养基要营养全面，适合各种细菌生长C.也可以通过连续划线的方法接种，通过菌落数计算样品中的细菌总数D.若三个平板上的菌落平均数为59，则所每毫升样品中细菌总数为5.9×10713、为了检测药物X、Y和Z的抗癌效果，在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肺癌细胞使其贴壁生长。实验组分别加入等体积相同浓度的溶于二甲基亚矾（溶剂）的药物X、Y或Z，培养过程及结果如图所示。下列叙述错误的是（）

实验结果见下表：。组别细胞数目（个/孔）对照7．8×106药物X6．7×104药物Y5．3×105药物Z8．0×106

A.对照组中只需加入等体积的二甲基亚矾溶剂即可B.细胞培养液中通常需要加入一定量的抗生素防止病毒污染C.计数时可用胰蛋白酶处理贴壁细胞，使肺癌细胞脱落下来D.根据实验结果，三种药物均具有抗癌效果，但药物X的抗癌效果最好14、生活垃圾分类就是通过回收有用物质减少生活垃圾的处置量，提高可回收物质的纯度增加其资源化利用价值，减少对环境的污染。目前，各地陆续颁布实施《生活垃圾管理条例》，生活垃圾分类已成为市民的日常生活方式。处理垃圾的有效方法之一是用微生物对其进行降解。下图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。下列叙述正确的是（）

A.剩余饭菜、玻璃碎片、果皮果壳属于湿垃圾B.菌落①②透明圈大小不同是两个菌群对碘液分解能力不同C.若垃圾分类不当混入过期的抗生素或电池等会抑制微生物生长D.图中将菌液接种到培养基的方法是释涂布平板法15、利用枯草芽孢杆菌的发酵可以生产亮氨酸脱氢酶。在启动子和亮氨酸脱氢酶基因之间插入信号肽（SPN）基因并将重组质粒导人枯草芽孢杆菌构建工程菌，可提高亮氨酸脱氢酶的生产水平。重组质粒的构建如图所示，KmR为卡那霉素抗性基因，ApR为氨苄青霉素抗性基因，图中各限制酶切割产生的黏性末端不同。下列叙述正确的是（）

A.重组质粒pMA5-SPN-leudh除图中标注外还应具有终止子、复制原点等结构B.构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶有助于正确插入目的基因C.图中KmR和ApR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选D.图中各限制酶切开的是氢键和磷酸二酯键，切下的DNA片段拼接需依靠DNA连接酶评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)16、两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：

①相同点：都缝合______键。

②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。17、回答下列问题。

（1）果酒的制作离不开酵母菌，温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，酒精发酵时一般将温度控制在_________，醋酸菌是一种________细菌，它的最适生长温度为_______________，乳酸菌是________细菌，在无氧的情况下，将葡萄糖分解成___________。

（2）微生物的接种方法很多，最常用的是_____________和__________________，稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目___________，这是因为______________________________。

（3）饮用水中大肠杆菌的数目可以通过滤膜法来测定，将滤膜放在____________培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现___________；从而计算出水样中大肠杆菌的数目。

（4）固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括化学结合法、____________和物理吸附法。酶更适合采用__________和___________固定化，而细胞多采用___________固定化。18、在____________的温度范围内，DNA的双螺旋结构解体，双链分开，这过程成为__________。19、通过____________的方式，来控制NaCL溶液的浓度，使DNA在盐溶液中溶解或析出。20、植物繁殖的新途径。

微型繁殖：可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。

作物脱毒：采用______组织培养来除去病毒（因为植物分生区附近的病毒______）

人工种子：以植物组织培养得到的______、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经_____包装得到的种子。优点：完全保持优良品种的遗传特性，______；方便储藏和运输。

人工种子的结构包括：______、_____和______。21、生物数据库的知识与正在迅猛发展的生物信息学有关。什么是生物信息学________？22、近年来，克隆技术的发展取得了巨大突破｡在日常生活中，我们遇到过与克隆技术有关的问题吗？_____。23、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。24、应用分析与比较的方法，对生殖性克隆与治疗性克隆进行列表阐述｡

生殖性克隆与治疗性克隆的比较。比较项目生殖性克隆治疗性克隆含义__________用到的技术__________目的__________评卷人得分四、判断题(共1题，共6分)25、目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作法。（选择性必修3P54）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题，共6分)26、如图为酿制葡萄酒的两个简易装置；请分析回答：

（1）制作果酒与果醋的菌种在结构上最主要的区别在于前者有_____，后者应将温度控制在_____℃

（2）甲装置中，A液体是_____，NaHCO3溶液的作用是_____；若用乙装置，在发酵过程中，必须进行的操作是每隔12小时左右将瓶盖_____一次。

（3）将葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，这是因为___________

（4）果酒制作是否成功，需发酵后取样鉴定，可用_____试剂检验。

（5）醋酸菌可以利用果酒进行发酵，请写出相应反应式：_________________27、金黄色葡萄球菌是一种常见的食源性致病微生物；该菌具耐高盐的特性。哥伦比亚血平板含无菌脱纤维羊血，金黄色葡萄球菌可破坏菌落周围的红细胞，产生透明的溶血圈。如图为检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程，请回答：

（1）从功能上看7．5％NaCl（高盐）肉汤培养基属于________培养基，用该培养基对金黄色葡萄球菌进行培养的主要目的是提高___________。

（2）从培养过程分析，振荡培养可以____________________________；更有利于微生物的生长。

（3）在配制哥伦比亚血平板时，添加无菌脱纤维羊血是在高压蒸汽灭菌________（填“之前”或“之后”），原因是________________________。

（4）图中血平板上的接种方法是________________。经规范操作并多次重复，血平板上均出现__________的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌。但牛奶供应商仍认为此菌并非牛奶所携带，因此需要对本次操作进行完善，具体方案是________________。28、两只克隆小猴“中中”和“华华”是世界首例非人灵长类动物的体细胞克隆猴；这是我国的研究成果。一年后5只世界首例生物节律紊乱的体细胞克隆猴诞生。下图为培育克隆猴的流程，回答下列问题：

(1)在“中中”“华华”之前，科学家已培育了胚胎细胞克隆猴，胚胎细胞核移植难度明显低于体细胞核移植的原因是_____。

(2)科学家首先将采集的卵母细胞培养至____期，然后去核，这里的“去核”实际上是指去除____。核移植过程中用灭活的仙台病毒进行了短暂处理，其目的是_____。形成的重构胚具有_____的能力。体外培养重构胚时，需提供适宜的营养及环境条件，推测环境条件包括_____（答出2点）。

(3)我国科研团队采集一只睡眠紊乱最明显的BMAL1基因敲除的猕猴的体细胞，通过核移植技术获得了5只克隆猴，理论上这5只克隆猴之间的细胞核基因型_____（填“相同”“不相同”或“不一定相同”）。为验证上述5只基因敲除猕猴存在昼夜节律紊乱问题，科学家用检测设备监测实验猴，通过行为学分析检测其是否明显表现出睡眠紊乱的症状，对照组的设置应为_____。在研究人类疾病致病机制、研发人类新药时，选用“模型猴”更优于“模型鼠”的原因是_____。评卷人得分六、综合题(共2题，共8分)29、蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”；有着超强的抗张强度．可制成防弹背心；降落伞绳等．蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱．科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法培育转基因蜘蛛羊．目前，基因工程中使用的限制酶主要是从原核生物中分离纯化获得的。含有限制酶的细胞通常还具有相应的甲基化酶，它可对自身DNA序列进行甲基化修饰。请根据资料和图解回答下列问题：

（1）原核细胞中的限制酶可切割外源DNA，但不破坏自身DNA，其原因可能是①______________；②____________________。

（2）下图为蛛丝蛋白基因对应的DNA片段结构示意图。

则与之对应的引物结合部位应该是图中的________(填数字)；PCR过程中，若一个蛛丝蛋白基因扩增了4次，则消耗了引物________个，所得DNA中含有其中一种引物的共________个。

（3）若想在蜘蛛羊乳汁中提取所需要的蛛丝蛋白，可以通过①过程将蛛丝蛋白基因和乳腺中________的基因的________等调控元件重组在一起，该调控元件上有________酶结合位点。通过________的方法导入山羊的________中培育成蜘蛛羊，这样就可以在蜘蛛羊的乳汁中提取蛛丝蛋白，这称为________。

（4）目的基因导入受体后，进行了PCR检测结果如下图(1号来自普通山羊，2号是含蛛丝蛋白的质粒，3～8号来自转基因山羊)，从结果可以看出，________号山羊含有蛛丝蛋白基因。若这些成功导入目的基因的转基因蜘蛛羊并没有产生相应的蛛丝蛋白，根据中心法则分析，其可能的原因是________。

30、下图表示某生物DNA结构的一部分及限制酶的识别序列和酶切位点；请回答以下问题。

限制酶EcoRIBamHIHindlⅢSacI识别序列和切割位点G↓AATTCG↓GATCCA↓AGCTTGAGCT↓C

(1)若目的基因为抗虫基因，需要在连接Ti质粒前进行PCR扩增，需要在样本中再加入_____________、________和_______酶，一般要经历多次循环，每次循环可以分为_______、_______、__________三步。扩增后切割目的基因，应使用表中的限制酶是_________。

(2)若目的基因为胰岛素基因，科研人员构建了如图所示的重组载体，tetr为四环素抗性基因，ampr为氨苄青霉素抗性基因。

构建重组载体需要的酶有_________、_________。图中的启动子上有_________的识别和结合位点，从而驱动基因的转录。将重组载体导入大肠杆菌体内后，将其涂布于含____的选择培养基上。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、B【分析】【分析】

细胞融合技术是指将不同种的植物细胞；在一定条件条融合成杂种细胞的过程。植物组织培养技术就是在无菌和人工控制条件下，将立体的植物器官；组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。

【详解】

培育甘蓝和萝卜体细胞杂交植株的过程；是将甘蓝细胞和萝卜体细胞杂交后培育成植株的过程，运用了细胞融合技术和植物组织培养技术，A；C、D错误，B正确。

故选B。2、B【分析】【分析】

转基因技术是一把双刃剑；最重要的是要科学合理的利用这项技术，通过技术提高了很多农产品的收益；解决了饥饿问题和对遗传病的治疗带来新的希望。关于转基因技术的利弊，现在并没有明确的结论，关于舆论的正确导向，需要靠事实来说话，需要科学的态度来对待，所以要靠确凿的证据和严谨的逻辑来进行思考和辩论。

【详解】

A；转基因技术是一把双刃剑；要理性的看待转基因技术，要靠确凿的证据和严谨的逻辑来思考转基因技术的影响，A正确；

B；转基因作为一项技术本身是中性的；所以只要有证据表明产品有害，就应该禁止该产品的使用，而不是禁止转基因技术的应用，B错误；

C；由于不同的人在经济、文化和伦理道德观念等方面存在差异；所以不同的人对转基因技术会有不同的看法，C正确；

D；转基因技术转基因技术是一把双刃剑；最重要的是要科学合理的利用这项技术，要在清晰地了解转基因技术的原理和规程的基础上来讨论转基因技术的相关问题，D正确。

故选B。3、C【分析】【分析】

原理（1）腐乳的发酵在多种微生物的协同作用下进行；其中起主要作用的是毛霉，它是一种丝状真菌，新陈代谢类型是异养需氧型。（2）毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以将脂肪水解成甘油和脂肪酸。

【详解】

A；毛霉为好氧菌；为避免其无氧呼吸，码放豆腐时要注意留出一定的缝隙，A正确；

B；加盐腌制可以析出豆腐中的水分使之变硬；同时也能抑制微生物的生长，B正确；

C；加卤汤、密封腌制；具有防腐杀菌的作用，同时使腐乳具有一定的香味，在此条件下毛霉不能生长增殖，C错误；

D；豆腐上生长的白毛是毛霉的直立菌丝；D正确。

故选C。

【点睛】4、C【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；不同的限制酶切割DNA也可以获得相同的黏性末端；A错误；

B；抗虫基因表达载体中要有启动子和终止子和标记基因；B错误；

C；抗虫基因表达载体中要有启动子和终止子和标记基因；标记基因的作用是筛选含有目的基因的受体细胞，C正确；

D；抗虫基因的表达启动于启动子；D错误。

故选C。5、D【分析】【分析】

植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径(包括微型繁殖；作物脱毒；人工种子等)、作物新品种的培育(单倍体育种、突变体的利用)、细胞产物的工厂化生产。

【详解】

A；微型繁殖属于无性生殖；不仅能高效、快.速地实现种苗的大量繁殖，还能保持优良品种的遗传特性，A正确；

B；茎尖组织含病毒极少；甚至无病毒，因此利用茎尖组织培养技术可以实现作物脱毒，能提高作物的产量和品质，B正确；

C；由于植物的组织培养过程中；培养细胞一直处于不断的分生状态，容易受到培养条件和外界压力的影响产生突变，所以植物的组织培养过程中经化学或物理的诱变处理可得到有用的突变体，如抗花叶病毒的甘蔗等已用于生产，C正确；

D；获取细胞代谢产物时；运用植物组织培养技术经过脱分化得到愈伤组织后，从中筛选出产量高的细胞进行植物细胞培养，再从细胞培养液或破碎细胞获取人参等次生代谢产物，而不需要利用植物组织培养技术得到人参等植株个体，D错误。

故选D。6、C【分析】【分析】

真核细胞的基因由编码区和非编码区两部分组成；其中编码区包括能够编码蛋白质的序列（外显子）和一般不能够编码蛋白质的序列（内含子），在真核细胞基因表达时，首先由DNA转录出前驱mRNA，然后经过裁接才能形成成熟的mRNA。

【详解】

A；mRNA上起始密码子的序列应由基因的编码区编码；而启动子位于编码区上游的非编码区，所以启动子不编码起始密码子，A错误；

B；cDNA文库中不含有内含子；B错误；

C；c~d区为终止子区域；终止子可终止转录过程，因此在转录完成后，RNA聚合酶从c~d区段脱落下来，C正确；

D；DNA分子复制时形成的子代DNA与亲代DNA相同；不具有选择性，因此细胞内DNA复制时，即复制编码区，也复制非编码区，D错误。

故选C。7、A【分析】【分析】

PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链；低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制。

【详解】

A；PCR是体外进行DNA复制的技术；依据的原理是DNA的半保留复制，A正确；

B；引物只需要与DNA的两端分别互补即可；本身应避免互补，B错误；

C；该技术不需要解旋酶；利用高温进行解旋，C错误；

D；PCR是利用不同的温度进行体外DNA复制；D错误。

故选A。8、D【分析】【分析】

全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。每个细胞都含有该个体的整个基因组；这是细胞具有全能性的基础。选用去核卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞大，容易操作；卵（母）细胞质多，营养丰富；含有促使细胞全能性表达的物质。

【详解】

A；用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞；原因是10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型，A正确；

B；在目前现有技术条件下；还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，因为卵细胞的细胞质可使体细胞细胞核全能性得到表达，B正确；

C；体外受精时精子需要经过获能处理；采集的卵母细胞培养到②减数第二次分裂中期，才具有受精能力，C正确；

D；供体细胞核移入去核卵母细胞中；能发育成有克隆动物，这说明分化的动物细胞核具有全能性，D错误。

故选D。9、B【分析】【分析】

通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作；将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养，可以分离得到单菌落。

【详解】

A；Ⅲ区是观察细菌菌落形态的最佳区域；A正确；

B；整个划线操作的过程都必须在酒精灯火焰旁进行；以防止杂菌污染，图1中一共划线3个区域，每次划线前后都要灼烧接种环，所以一共进行4次灼烧，B错误；

C；图中Ⅰ、Ⅱ区均没有出现单菌落；说明细菌数量太多，菌落重叠，而Ⅲ区出现单菌落，所以应该从Ⅲ区挑取单菌落，C正确；

D；同学乙采用的是稀释涂布平板法；培养后菌落分布不均匀可能是接种时涂布不均匀造成的，D正确。

故选B。二、多选题(共6题，共12分)10、A:C【分析】【分析】

分析题图：小鼠的卵细胞体外培养到囊胚时期；取内细胞团细胞培养成孤雌单倍体ES细胞，取大鼠的精子体外培养到囊胚时期，取内细胞团细胞培养成孤雄单倍体ES细胞，两种ES细胞融合成异种杂合二倍体胚胎干细胞，据此答题。

【详解】

A；图中的单倍体囊胚1最可能是由小鼠的卵子（卵细胞）发育而来；所采用的技术应为早期胚胎培养技术，图中的单倍体ES应取自囊胚的内细胞团细胞，该部位的细胞具有发育的全能性，A正确；

B；培养过程中使用的培养液除含有一些无机盐和有机盐外；还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分以及血清等物质，为避免杂菌污染，需要加入抗生素，B错误；

CD；ES在形态上表现为体积小、细胞核大、核仁明显；且在体外培养时可以维持只增殖不分化的状态，C正确、D错误。

故选AC。11、B:C:D【分析】1；酵母菌的新陈代谢类型为异养兼性厌氧型；在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2；乳酸菌的代谢类型是异养厌氧型；在无氧条件下乳酸菌能够将葡萄糖分解为乳酸。

【详解】

A；乳酸菌为严格厌氧菌；只能进行无氧呼吸，A错误；

B；面包液、糖化液主要成分为糖类；也含有其他物质，可为微生物的生长提供碳源、氮源、水和无机盐等营养物质，B正确；

C；酵母菌产酒精能力与其耐受酒精的能力有关；利用选择培养基，向培养基中添加较高浓度的酒精筛选出产酒精能力比较强的酵母菌，C正确；

D；过程③中瞬时高温会破坏微生物的蛋白质空间结构；进而将微生物杀死达到灭菌效果，D正确。

故选BCD。12、A:B:D【分析】【分析】

分析题文描述和题图：图示为采用稀释涂布平板法分离常乳样品中细菌总量的流程图。首先将常乳样品进行一系列梯度稀释，然后取1×105倍稀释的稀释液0.1mL分别涂布到3个平板上进行培养。为了防止杂菌污染；稀释涂布平板的所有操作都应控制无菌条件。

【详解】

A；为了防止杂菌污染；倒平板时应将培养皿打开一条细缝，不要完全打开，A正确；

B；为了检测一份常乳样品中细菌的总量；图示对常乳样品进行了一系列梯度稀释，由此可见，上述方法是稀释涂布平板法，培养基要营养全面，适合各种细菌生长，B正确；

C；通过连续划线的方法接种；不易分离出单个菌落，不能用于微生物的计数，C错误；

D、取1×105倍稀释的稀释液0.1mL分别涂布到3个平板上进行培养，若三个平板上的菌落平均数为59，则所每毫升样品中细菌总数为59÷0.1×105＝5.9×107；D正确。

故选ABD。13、B:D【分析】【分析】

分析题意可知:该实验目的是检测药物X和Y的抗癌活性；自变量是药物X或Y，因变量是检测细胞数量。

【详解】

A；加入等体积的二甲基亚矾溶作为空白对照；排除体积和溶剂等无关因素的影响，A正确;

B；抗生素具有杀菌(不是杀病毒)作用；为防止培养液被污染，可在培养液中加入一定量的抗生素，B错误;

C；要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来；需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，C正确;

D；分析实验结果；加入X的癌细胞个数是6.7×104，加入Y的癌细胞个数是5.3×105，说明药物X的抗癌效果比Y好，加入Z的癌细胞个数是8.0×106，与空白对照相比无抗癌作用，D错误。

故选BD。14、C:D【分析】【分析】

1；根据《上海市生活垃圾管理条例》第四条本市生活垃圾按照以下标准分类规定：湿垃圾；即易腐垃圾，是指食材废料、剩菜剩饭、过期食品、瓜皮果核、花卉绿植、中药药渣等易腐的生物质生活废弃物；干垃圾，即其它垃圾，是指除可回收物、有害垃圾、湿垃圾以外的其它生活废弃物。

2；由题图信息分析可知；该实验的目的是为了筛选获得高效降解淀粉的菌种，在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，属于选择培养基，接种方法是稀释涂布平板法。

【详解】

A；剩余饭菜、果皮果壳属于湿垃圾；玻璃碎片属于干垃圾，A错误；

B；菌落①②透明圈大小不同是两个菌群对淀粉的分解能力不同；透明圈大的分解能力强，B错误；

C；抗生素或电池等会抑制微生物生长；不利于微生物的分解，C正确；

D；图中出现透明圈；因此将菌液接种到培养基的方法是释涂布平板法，D正确。

故选CD。15、A:B:C【分析】【分析】

限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。

【详解】

A；重组质粒pM5-SPN-leudh中除图中标注外；还应该具有终止子，复制原点等结构，A正确；

B；NdeI和BamHI两种酶切割形成的黏性末端不同；构建重组质粒用NdeI和BamHI两种酶切有助于目的基因正确插入，B正确；

C；KmR和A_pR为标记基因；图中KmR和A_pR存在于质粒中的作用是便于重组DNA分子的筛选，C正确；

D；限制酶和DNA连接酶的作用部位为磷酸二酯键；D错误。

故选ABC。三、填空题(共9题，共18分)16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】磷酸二酯17、略

【分析】【分析】

果酒制作菌种是酵母菌；来源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌种保藏中心，条件是无氧；温度是18～25℃，pH值呈酸性．果醋制备的菌种是醋酸菌，条件是发酵过程中充入无菌氧气，温度为30～35℃。

【详解】

（1）酒精发酵时一般将温度控制在18～25℃；醋酸菌是一种好氧细菌，它的最适生长温度为30～35℃。乳酸菌是厌氧细菌，在无氧的情况下，将葡萄糖分解成乳酸。

（2）微生物的接种方法很多；最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

（3）饮用水中大肠杆菌的数目可以通过滤膜法来测定；将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现黑色，从而计算出水样中大肠杆菌的数目。

（4）固定化技术一般包括化学结合法；包埋法和物理吸附法。酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定化；而细胞多采用包埋法固定化。

【点睛】

本题考查果酒和果醋制备原理，意在考查学生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构，属识记内容。【解析】18－25℃好氧30－35℃厌氧乳酸平板划线法稀释涂布平板法低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落伊红美蓝黑色包埋法化学结合法物理吸附法包埋法18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】80—100℃变性19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】滴加蒸馏水逐渐稀释2mol/L浓度的NaCL溶液20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】茎尖极少或没有）胚状体人工薄膜不受季节的限制人工种皮；胚状体和人工胚乳。

（2）21、略

【分析】【详解】

生物信息学是研究生物信息的采集、处理、存储、传播,分析和解释等各方面的学科，也是随着生命科学和计算机科学的迅猛发展，生命科学和计算机科学相结合形成的一门新学科，生物信息学主要是核酸和蛋白质序列数据的计算机处理和分析。【解析】生物信息学是研究生物信息的采集、处理、存储、传播,分析和解释等各方面的学科，也是随着生命科学和计算机科学的迅猛发展，生命科学和计算机科学相结合形成的一门新学科22、略

【分析】【详解】

在日常生活中；我们遇到过的与克隆技术有关的问题有：

①濒临灭绝动物的克隆：克隆可以拯救濒危的国家保护动物以及植物；我们可运用克隆，复制濒临灭绝的生物，让其不至于在我们的生活中消失；

②农业克隆：应用于农业等领域；通过转基因的方式，增加粮食的亩产量，提高土地的单位出产量；

③细胞克隆替代或者修复人体细胞问题；比如胚胎干细胞；

④畜牧业克隆：应用于畜牧业，提升优良品种群体基数，缩短畜牧育种年限。【解析】有，比如：①濒临灭绝动物的克隆；②农业克隆：应用于农业等领域，通过转基因的方式，增加粮食的亩产量，提高土地的单位出产量；③细胞克隆替代或者修复人体细胞问题，比如胚胎干细胞；④畜牧业克隆：应用于畜牧业，提升优良品种群体基数，缩短畜牧育种年限。23、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。24、略

【分析】【详解】

生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎；并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术，其目的是用于生育，获得人的复制品；治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术，其目的是用于医学研究和疾病的治疗。

据概念可知，实现生殖性克隆和治疗性克隆都会用到的技术有体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等；治疗性克隆在获取胚胎干细胞后，根据治疗目的诱导干细胞分化形成各种组织和器官，供患者移植用，故治疗性克隆还会应用到的技术为干细胞培养技术。【解析】生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎，并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等体细胞核移植技术，早期胚胎培养技术、动物细胞培养技术、胚胎移植技术、干细胞培养技术等用于生育，获得人的复制品用于医学研究和疾病的治疗四、判断题(共1题，共6分)25、A【分析】【详解】

目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作法。也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。这些方法是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变性，故正确。五、实验题(共3题，共6分)26、略

【分析】【分析】

分析题图：图示为酿制葡萄酒的两个简易装置，甲装置中，A为葡萄汁，能为酵母菌提供碳源、氮源、水、无机盐和生长因子；NaHCO3溶液能够吸收酵母菌酒精发酵产生的CO2；乙装置需要定期拧松瓶盖排气。

（1）

制作果酒的菌种是酵母菌；属于真核生物；制作果醋的菌种是醋酸菌，属于原核生物，它们在结构上最主要的区别在于前者有以核膜为界限的细胞核，即有核膜包被的细胞核。醋酸菌发酵的适宜温度为30℃～35℃，因此制作果酒后制果醋，应将温度控制在30℃～35℃。

（2）

甲装置中，A液体是葡萄汁，能为酵母菌提供碳源、氮源、水、无机盐和生长因子；NaHCO3溶液的作用是吸收酵母菌酒精发酵产生的CO2；若用乙装置；在发酵过程中，必须进行的操作是每隔12小时左右将瓶盖拧松一次，排除二氧化碳。

（3）

酵母菌属于兼性厌氧菌；其在有氧条件下可以大量繁殖，故将葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，这样既为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气，又可防止发酵旺盛时汁液溢出。

（4）

酒精可用重铬酸钾来检验；在酸性条件下，该试剂与酒精反应呈现灰绿色。

（5）

醋酸菌可以利用果酒进行发酵，相应反应式为：

【点睛】

本题考查果酒和果醋的制作，要求考生识记参与果酒和果醋制作的微生物及其代谢类型，掌握果酒和果醋制作的原理及条件，能结合所学的知识准确答题，难度适中。【解析】（1）核膜包被的细胞核30-35

（2）葡萄汁吸收酵母菌酒精发酵产生的CO2拧松。

（3）为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气；防止发酵旺盛时汁液溢出。

（4）重铬酸钾。

（5）27、略

【分析】【分析】

1；选择培养基：人为提供有利于目的菌株生长的条件；同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基。

2；根据题意分析；金黄色葡萄球菌可破坏哥伦比亚血平板上菌落周围的红细胞，产生透明的溶血圈。

【详解】

（1）金黄色葡萄球菌具耐高盐的特性；可用7.5％NaCl（高盐）肉汤培养基进行选择培养，可进一步提高金黄色葡萄球菌的浓度。

（2）振荡培养的目的是使微生物与营养物质充分接触，增加O2浓度；更有利于微生物生长。

（3）因为无菌脱纤维羊血上有红细胞；而高温会破坏红细胞。故添加无菌脱纤维羊血是在高压蒸汽灭菌之后。

（4）根据图中最右边的图示可知；接种方法是平板划线法。已知金黄色葡萄球菌可破坏菌落周围的红细胞，产生透明的溶血圈。故若要初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，则血平板上要均出现周围出现透明溶血圈的菌落。本实验缺乏对照组，实验不完善，还需要设置不加（鲜）牛奶但其他操作和培养条件均相同的对照组。

【点睛】

本题旨在考查学生理解选择培养基的原理和应用、平板划线法的使用要点，把握知识的内在联系并应用相关知识综合解决问题的能力。【解析】选择金黄色葡萄球菌的浓度使微生物与营养物质充分接触/增加O2之后防止高温破坏红细胞平板划线法周围出现透明溶血圈设置不加（鲜）牛奶但其他操作和培养条件均相同的对照组28、略

【分析】【分析】

1；克隆动物概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

2；原理：动物细胞核的全能性。

3；动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。原因：动物胚胎细胞分化程度低；恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难。

【详解】

（1）体细胞分化程度高；表现全能性困难，而胚胎细胞分化程度低，表现全能性容易，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。

（2）去核前应保证采集的卵母细胞在体外培养至减数分裂II中期；去核是指去除纺锤体—染色体复合物；核移植前需用灭活的仙台病毒对体细胞进行短暂处理，在此过程中，灭活的仙台病毒的作用是诱导体细胞与去核卵母细胞融合。目前动物细胞核移植技术普遍使用的去核方法是显微操作法，核移植的具体操作是将体细胞注入去核卵母细胞，从而得到重构胚，使其具有发育成完整个体的能力；体外培养重构胚时，培养液中除应含有细胞所需要的各种营养物质外，通常需要加入动物血清等一些天然成分，并将其置于含有95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱中培养；培养过程中需要定期更换培养基，并创造无菌；无毒环境。胚胎移植前还需对代孕母猴进行同期发情处理，这样可以使移植的胚胎获得相同的生理环境，以保证胚胎能够继续发育。

（3）通过核移植技术获得了5只克隆猴，理论上这5只克隆猴之间的细胞核基因型相同，细胞质基因来源于受体细胞；为了验证这5只基因敲除猕猴是否存在昼夜节律紊乱问题，该实验的自变量是BMAL1基因是否敲除，因变量是是否出现睡眠紊乱症状。所以对照组的设置应为与克隆猕猴生理状态相同的正常的猕猴个体(