2025年仁爱科普版选修3生物下册月考试卷含答案

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A.④②B.③②C.③④D.④③2、下列技术与原理相符的是A.发酵技术——无氧呼吸B.转基因技术——基因突变C.植物体细胞杂交技术——细胞增殖D.动物细胞融合技术——细胞膜的流动性3、关于动物细胞培养的错误叙述是()()A.B.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织C.将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞D.获得的细胞可以用于检测有毒物质，只能判断某种物质是否有毒，不能判断毒性的大小在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液4、下列关于生物学中常见的几种酶的叙述，正确的是（）A.DNA连接酶将目的基因的黏性末端与载体的黏性末端之间的碱基黏合B.用限制性核酸内切酶从质粒上切下一个目的基因需消耗4个水分子C.Taq酶是PCR仪扩增DNA分子时常用的一种耐高温的DNA连接酶D.在解离根尖分生区细胞时加入纤维素酶有利于提高解离的效果5、苏云金芽孢杆菌中存在一种BT基因，该基因编码合成一种毒性很强的蛋白质晶体，能使棉铃虫等目害虫瘫痪致死。1993年我国科学家将BT基因成功导入棉花作物，培育出了抗虫棉，下列有关叙述合理的是（）A.基因工程的工具酶包括限制性核酸内切酶、DNA连接酶和运载体B.目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒C.新品种抗虫棉只能抵抗棉铃虫一种害虫D.把BT基因转入棉花细胞核DNA中可以防止基因污染6、生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体。治疗性克隆是指通过克隆技术获得重组胚胎，然后从早期胚胎中分离出胚胎干细胞，使之定向分化为特定的细胞、组织和器官，用于替代疗法。下列叙述错误的是（）A.生殖性克隆需将细胞核移植到去核卵母细胞中B.生殖性克隆需借助早期胚胎培养技术C.治疗性克隆需借助胚胎移植技术D.治疗性克隆需要的胚胎干细胞可来自囊胚7、2015年2月3日；英国议会院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。

据图分析，下列叙述错误的是（）A.该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代B.捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿C.三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核D.三亲婴儿的培育还需要早期胚胎培养和胚胎移植等技术8、下列关于利用胚胎工程技术的叙述错误的是（）A.要选择健康具有正常生殖能力的母羊作为受体B.人工授精后的一定时间内，收集供体原肠胚用于胚胎移植C.利用胚胎分割技术可以获得两个基因型基本相同的胚胎D.早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清9、2014年，重庆市推广“稻+N”循环生态种养殖模式，将单一的农田变成了复合式的绿色生态田。“稻+N”就是在种植水稻的同时，通过降低种植密度，营造生存环境。让鸭、鱼、泥鳅、小龙虾、蛙等物种在稻田中生长，形成一个生态互补、高效、高质的种养殖模式。下列叙述不正确的是（）A.物质循环仅在稻、鸭、鱼等生物构成的群落内完成B.物种组成是该群落与其他普通稻田群落的重要区别C.“稻+N”生态模式可以提高对空间和资源的利用率D.此生态模式应该遵循生态工程的自生和协调等原理评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)10、澳大利亚布里斯班一对小姐弟被确认为全球第二对半同卵双胞胎；发育成该对半同卵双胞胎的受精卵形成过程如下图所示，图3中染色单体分离后分别移向细胞的三个不同方向，从而分裂成A；B、C三个细胞，其中两个细胞发育成姐弟二人。下列说法，正确的是（）

A.图1表示卵子的异常受精过程，此时卵子发育到减数第二次分裂的中期B.该卵子与2个精子受精，表明顶体反应和透明带反应未能阻止多精入卵C.若图4细胞A包含父系和母系染色体组各1个，则细胞C含2个母系染色体组D.这对小姐弟来源于母亲的染色体一般相同，来源于父亲的染色体可能不同11、下列有关动物细胞工程操作的叙述，错误的是（）A.动物细胞培养是动物细胞工程的基础，在进行细胞培养时，培养基中除了加入细胞所需的各种营养物质外，还需要加入凝固剂B.动物细胞融合与植物体细胞杂交都能形成杂种个体C.干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等，有着自我更新能力及分化潜能D.iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，可以避免免疫排斥反应12、小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞；制备流程如下图所示。下列有关叙述错误的是（）

A.为获得更多的囊胚，可注射孕激素促进雌鼠产生更多的卵子B.胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养C.用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞D.细胞a、b均是胚胎干细胞的良好来源，可在饲养层上分裂、分化13、我国科学家培育“荧光猪”的技术流程如下图所示。图中字母表示有关技术或原理；匹配正确的是。

A.农杆菌转化法B.体外受精C.有丝分裂D.胚胎移植14、建设生态文明是关系人民幸福，关系民族未来的大计。某农户在从事农业活动中建立了庭院生态系统（结构如下图），相关叙述不正确的是（）

A.流入该庭院生态系统的能量是生产者固定的太阳能B.与森林生态系统相比，该庭院生态系统抵抗力稳定性较弱C.该生态系统的结构包括生产者、消费者、分解者及非生物的物质与能量D.从能量流动的角度来看，生态农业实现了能量的多级利用，提高了能量的利用率15、下列关于生态系统和生态工程的叙述，正确的是（）A.生态系统中遗传基因库越丰富，营养结构越复杂，恢复力稳定性越强B.生态工程的特点是少消耗、多效益、可持续C.治理沙漠的目的是要消除沙漠，改善环境D.退耕还林、还湖可防止由于过度开垦土地种植粮食所导致的水土流失16、下图表示某人工设计的生态系统；下列相关叙述正确的是（）

A.该生态系统经过能量的循环利用，提高了系统总能量的利用效率B.通过蝇蛆、蚯蚓、沼气池中的微生物等分解者的作用，有效地促进了系统中物质的循环利用C.离开了人的作用，该系统将很快崩溃D.该生态系统遵循了“物质循环再生”原理评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)17、生物学家利用基因工程技术通过生物反应器生产人的血清蛋白。请根据相关知识回答下列问题：

（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”是_______________________________

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是________

（3）基因工程中最常用的运载体是______

（4）人的基因在牛体内能表达，说明人和牛______18、自然条件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体，其主要步骤如图所示。回答下列问题：

（1）从供体奶牛获得的精子，需对其进行___________处理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞，为使其超数排卵常使用____________激素处理；采集到卵母细胞后，在体外将其培养到___________期；使其成熟。

（3）步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛，步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。

（4）进行步骤乙时，受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________，这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。19、基因治疗：基因治疗是指用正常基因_______或______患者细胞中有缺陷的基因，从而达到治疗疾病的目的。20、根据课本知识填空：

（1）神经元的轴突末梢经过多次分支；最后每个小枝末端膨大，呈杯状或球状，叫做________。

（2）抗体可以与病原体结合；从而抑制病原体的繁殖或___________________________。

（3）要检测目的基因是否转录出了mRNA；可以用____________________________做探针。

（4）所谓人工种子就是以植物组织培养得到的________________________（写出2个即可）等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子。

（5）胰岛素能促进组织细胞加速_______________葡萄糖。21、今年年初；爆发了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠状病毒通过其表面的S-蛋白与人细胞膜上的ACE2相互识别，感染人的呼吸道上皮细胞。请分析回答问题：

（1）新型冠状病毒表面的S-蛋白作为_________剌激淋巴细胞，使机体产生_________性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是_________。

（2）感染病毒后，免疫系统对肺细胞强烈攻击引发肺炎，此时可通过适度使用_________对病人进行治疗；使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）科学家采集了感染新型冠状病毒并已康复的甲、乙两人的血液，检测相关抗体的水平，结果如图1。据此分析，应选取_________的B淋巴细胞用以制备单克隆抗体（单抗）。

（4）将制备的多种单抗分别与病毒混合，然后检测病毒对宿主细胞的感染率，结果如图2。据此分析，对病毒抑制效果最好的单抗是__________号。

（5）患者康复后一段时间，若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的__________细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。22、下图表示哺乳动物精子和卵细胞发生和成熟的示意图。请据图回答下列问题：

（1）③过程中精子头部的顶体是由__________发育来的；④过程在__________内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带。为了阻止多精入卵，会发生__________反应和__________反应。

（3）精子的发生开始的时期是__________；雌性动物卵泡的形成的时期是__________。

（4）初级卵母细胞进行Ⅰ过程是在__________时期完成的，Ⅱ过程是在__________过程中完成的。23、请写出基因工程的概念：_________________。请写出胚胎移植的概念：_____________________。请分别写出植物组织培养和动物细胞培养的原理_________。24、自然条件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体，其主要步骤如图所示。回答下列问题：

（1）从供体奶牛获得的精子，需对其进行___________处理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞，为使其超数排卵常使用____________激素处理；采集到卵母细胞后，在体外将其培养到___________期；使其成熟。

（3）步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛，步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。

（4）进行步骤乙时，受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________，这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。评卷人得分四、判断题(共5题，共35分)25、一般情况下一个卵细胞只能由一个精子发生融合形成受精卵()A.正确B.错误26、精子入卵后形成雄原核；同时卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核()A.正确B.错误27、受精包括受精前的准备阶段和受精阶段，在自然状态下，哺乳动物的受精在子宫内完成。（选择性必修3P56）()A.正确B.错误28、下图表示哺乳动物发育过程的几个阶段；请判断下列题的叙述是否正确？

（_____）（1）从A到C的过程中有机物的含量减少。

（_____）（2）A；B时期胚胎中的细胞都是全能细胞。

（_____）（3）胚胎移植必须使用处于B或C时期的胚胎。

（_____）（4）图示过程细胞通过有丝分裂增殖，遗传物质可能会发生改变。A.正确B.错误29、在生态工程建设中，只能遵循“先污染、破坏、再治理”的发展思路______A.正确B.错误评卷人得分五、非选择题(共3题，共27分)30、人的血清白蛋白（HAS）在临床上需求量很大；目前通常将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白，基本步骤如下：

Ⅰ.采集良种供体奶牛的卵母细胞和精子；通过体外受精，形成受精卵；

Ⅱ.将人血清白蛋白基因导入奶牛受精卵；形成重组细胞；

Ⅲ.电脉冲刺激重组细胞；促使其形成早期胚胎；

Ⅳ.将胚胎移植到受体母牛的子宫中；最终发育成转基因小牛。

请回答下列问题：

（1）步骤Ⅰ中；卵母细胞与精子结合过程中防止多精入卵的生理反应包括_____________。自然条件下，受精卵是在雌性动物的_________内完成的。

（2）步骤Ⅱ中；将人的血清白蛋白基因导入牛受精卵最为有效的方法是___________。导入基因前，需要将血清白蛋白基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，这一步骤称为_____________________。

（3）步骤Ⅲ中；进行动物早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种无机盐和有机盐；维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还需要添加_______和动物血清。一般情况下，通常在合成培养基中加入一定量的抗生素，其目的是____________。

（4）步骤Ⅳ中，应选择性别为_______的奶牛胚胎进行移植。31、拟南芥AtNX1基因编码一个位于液泡膜上的Na+转运蛋白，可将Na+逆浓度梯度转运至液泡内，以降低Na+毒害和提高植物的耐盐性。研究人员利用根瘤农杆菌侵染法将AtNXl基因转化到烟草等植物中；能显著提高其耐盐特性。

（1）AtNX1基因提高耐盐机理为：Na+转运至液泡内使__________升高；利于吸水。

（2）AtNX1基因可从构建拟南芥cDNA文库中获取。

①构建cDNA文库需要的工具酶有__________。

a.限制酶b.DNA连接酶c.RNA聚合酶d.逆转录酶。

②利用PCR技术从cDNA文库中获取AtNX1基因（基因序列未知）；需根据AtNX1蛋白氨基酸序列设计引物，引物序列可以有多种原因是____________________。在PCR体系中需加入其中__________引物（填“全部”或“任意1种”或“其中2种”）。

（3）如图为培育转基因苗的基本操作过程。

①步骤Ⅲ目是________________________________________。

②步骤Ⅳ目是获得耐盐的____________；其培养基中除营养物质和植物激素外还应有__________。

③步骤Ⅳ和Ⅴ过程要注意控制培养基中__________的浓度比例，以便获得幼苗。32、下图表示构建转人抗体基因小鼠生产人源性单克隆抗体的流程。请据图回答问题：

(1)图示过程涉及的生物技术有________；________、________。

(2)构建的基因表达载体除含有人抗体基因；标记基因外；还应具有________、________。

(3)向转基因小鼠注射特定的抗原后，从小鼠的________中提取B淋巴细胞；细胞X是________，体外培养细胞X所用的培养液必须添加________等天然成分，培养过程中会产生接触抑制吗？________。评卷人得分六、综合题(共3题，共30分)33、乙型脑炎病毒（JEV）是一种RNA病毒；病毒的E蛋白参与病毒复制过程。研究人员利用基因重组的方法构建了二种新型JEV疫苗：DNA疫苗和E蛋白疫苗。图示主要流程。

【小题1】过程①为_____；过程②所需要的酶是_____。

【小题2】研究发现：受体细胞为大肠杆菌或酵母菌时，所形成的E蛋白结构不完全相同。原因是____。A．大肠杆菌无细胞核，酵母菌有细胞核可进行基因转录B．大肠杆菌无膜结构的细胞器，无法对蛋白质进一步加工C．两种受体细胞在基因表达时所使用的密码子不同D．两种受体细胞在基因表达时所遵循的碱基互补配对原则不同【小题3】关于DNA疫苗的叙述，正确的是____。A．分子较小，结构较稳定B．能通过PCR技术增加生产量C．能激活机体产生特异性免疫D．DNA疫苗已广泛用于人工免疫如图表示N质粒和成功导入E蛋白基因的质粒EN。为筛选含EN的菌落；可用含不同抗生素：氨苄青霉素和四环素的平板培养基进行筛选，现得到A；B、C三类菌落，生长情况如表。（‘+’代表生长，‘-’代表不生长）

。平板菌落。

A

B

C

无抗生素。

+

+

+

氨苄青霉素。

+

+

-

四环素。

+

-

-

氨苄青霉素+四环素。

+

-

-

【小题4】表中无抗生素平板培养基的作用是_____。另三种培养基属于下列选项中的_____。A．固体培养基通用培养基B．固体培养基选择培养基C．液体培养基通用培养基D．液体培养基选择培养基【小题5】据图和表判断，____。A．A菌落细胞被导入了N质粒B．B菌落细胞被导入EN质粒C．C菌落细胞未被导入任何质粒D．两种抗生素均能抑制E蛋白表达34、科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞（iPS）；继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如下：

（1）从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为_________，培养的细胞在贴壁成长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为____

（2）图中2-细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得，该过程称为_____；也可从灰鼠体内取出卵子，通过_____后进行早期胚胎培养获得。

（3）图中重组囊胚通过_________技术移入白鼠子宫内继续发育，小鼠胚胎干细胞（ES）可由囊胚的_____分离培养获得。

（4）若一次给受体母牛移入体外受精的多个胚胎，产生的多个后代基因型相同吗?_____，原因是_____。

（5）哺乳动物受精过程能阻止多精子入卵受精的有_____。A．顶体反应B．精子穿越卵子透明带触及卵黄膜，导致透明带反应C．精子触发卵黄膜表面微绒毛的抱合反应D．精子入卵后，触发卵黄膜封闭作用35、如图是江苏某农村因地制宜建设的生态农业园示意图。请回答下列问题：

（1）该生态农业园建设依据的主要生态工程原理有_____（至少答出2个）。在“沼气发酵池→采摘园”过程中发生着_____（选填“仅物质”“仅能量”或“物质和能量”）的传递。

（2）池塘养鱼时，通常采用多鱼种混合放养模式，主要体现了群落的_____（选填“水平”或“垂直”）结构在实践中的应用，这种养殖模式的优点是_____。

（3）流入该生态系统的总能量是_____。该生态农业园增加了“蝇蛆养殖、食用菌种植”等项目，其意义是_____。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、B【分析】分析图形可知，①是外植体，②是愈伤组织，③是胚状体，④是试管苗；植物组织培养技术的应用中，用人造种皮包裹胚状体制成人工种子；利用愈伤组织提取药物紫草素，故B正确。2、D【分析】【分析】

1；发酵是利用微生物的代谢活动；通过生物催化剂（微生物细胞或酶）将有机物质转化成产品的过程。

2；转基因技术是指利用DNA重组、转化等技术将特定的外源目的基因转移到受体生物中；并使之产生可预期的、定向的遗传改变。

3；植物体细胞杂交是指将植物不同种、属；甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。

4；动物细胞融合也称细胞杂交；是指两个或多个动物细胞融合成一个细胞的过程。

【详解】

A；发酵可以在无氧条件下进行；如乳酸菌发酵酸奶，也可以在有氧条件下进行，如醋酸菌发酵产生醋酸，A错误；

B；转基因技术的原理是基因重组；B错误；

C；植物体细胞杂交是将植物的原生质体诱导融合再离体培养的技术；C错误；

D；动物细胞融合是利用细胞膜的流动性；将两个或多个动物细胞融合成一个细胞的过程，D正确；

故选D。

【点睛】

本题是现代生物科技的综合考查题，理解并识记发酵、转基因、植物体细胞杂交和动物细胞融合等技术是解题的关键。3、C【分析】【详解】

用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织，因为胚胎或幼龄动物的器官或组织分裂能力旺盛，A正确；动物细胞培养时，先用胰蛋白酶处理组织使其分散成单个细胞，B正确；将细胞培养在含有毒物质的溶液中，可通过变异细胞的百分率判断有毒物质的毒性，C错误；细胞存在接触抑制，因此在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液进行传代培养，D正确。4、B【分析】【分析】

限制酶用于切割DNA；称为分子手术刀；DNA连接酶用于缝合两个DNA片段，称为分子缝合针。Taq酶是耐高温的DNA聚合酶，用于PCR扩增技术，将脱氧核苷酸连接到正在形成的子链上；解离根尖分生区细胞时在盐酸的作用下，使植物细胞分散开。

【详解】

DNA连接酶将目的基因的黏性末端与载体的黏性末端之间的碱基黏合形成磷酸二酯键，A错误；用限制酶从质粒上切下一个目的基因需打开2个切口，破坏四个磷酸二酯键，消耗4个水分子，B正确；Taq酶是PCR仪扩增DNA分子时常用的一种耐高温DNA聚合酶，C错误；在解离根尖分生区细胞时加入盐酸使植物细胞相互分散开，D错误。5、B【分析】【分析】

1；基因工程又叫DNA重组技术；是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

2；基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体；其中使用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等。

【详解】

A；运载体不属于基因工程中的工具酶；A错误；

B；目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒；B正确；

C；新品种抗虫棉不仅能抵抗棉铃虫一种害虫；C错误；

D；把BT基因转入棉花细胞核DNA中可能导致基因污染；D错误。

故选B。6、C【分析】【分析】

治疗性克隆：指利用克隆技术产生特定细胞和组织(皮肤；神经或肌肉等)用于治疗性移植。

生殖性克隆：指将克隆技术用于生育目的；通过克隆技术产生独立生存的新个体。

【详解】

A；生殖性克隆需将细胞核移植到去核卵母细胞中构建形成重组细胞；A正确；

B；生殖性克隆需借助动物细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术；B正确；

C；治疗性克隆是利用克隆技术生产特定的细胞、组织和器官；用它们来修复或替代受损的细胞、组织和器官，以达到治疗疾病的目的，不需要借助胚胎移植技术，C错误；

D；治疗性克隆需要的胚胎干细胞可来自囊胚中的内细胞团；D正确。

故选C。7、C【分析】【详解】

A；受体母亲提供细胞核；供体提供去核卵母细胞，这样就可避免受体母亲的线粒体遗传物质（线粒体中的致病基因）传递给子代，A正确；

B；红绿色盲属于核基因控制的遗传病；而由图示可知捐献者提供的是去核的卵细胞，因此不会把其携带的红绿色盲基因传递给三亲婴儿，B正确；

C；由图示可知三亲婴儿的的染色体来自于母亲和父亲；C错误；

D；由图示可知三亲婴儿的获得运用了动物细胞培养、核移植技术；体外受精形成早期胚胎需要进行早期胚胎培养等，D正确。

故选C。

【点睛】

本题考查核移植技术、动物细胞培养、体外受精和早期胚胎培养、胚胎移植及细胞质遗传和核基因遗传等知识。8、B【分析】【分析】

1；胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（用激素进行同期发情处理；用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。

2；来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质；胚胎分割可以看作动物无性繁殖或克隆的方法之一。

【详解】

A；胚胎移植时；对供体、受体要进行选择，选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，A正确；

B；人工授精后的一定时间内；收集供体桑椹胚或囊胚用于胚胎移植，B错误；

C；来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质；因此利用胚胎分割技术可以获得两个基因型相同的胚胎，C正确；

D；早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清；D正确。

故选B。9、A【分析】【分析】

1.生态农业：是按照生态学原理和经济学原理；运用现代科学技术成果和现代管理手段，以及传统农业的有效经验建立起来的，能获得较高的经济效益；生态效益和社会效益的现代化农业。

2.生态农业能实现物质和能量的多级利用。

3.生态工程是指应用生态系统中物质循环原理；结合系统工程的最优化方法设计的分层多级利用物质的生产工艺系统，其目的是将生物群落内不同物种共生；物质与能量多级利用、环境自净和物质循环再生等原理与系统工程的优化方法相结合，达到资源多层次和循环利用的目的。

【详解】

A；物质循环发生在生物群落和无机环境之间；A错误；

B；群落的物种组成是区别不同群落的重要特征；因此，物种组成是该群落与其他普通稻田群落的重要区别，B正确；

C；“稻+N”生态模式可以提高对空间和资源的利用率；进而提高了能量利用率，C正确；

D；此生态模式应该运用了生态工程的自生和协调等原理；D正确。

故选A。

【点睛】二、多选题(共7题，共14分)10、A:D【分析】【分析】

根据图示；半同卵双胞胎的形成过程有两个精子同时进入到一个卵细胞，受精卵中有三个染色体组，有丝分裂过程中，染色体复制，有丝分裂后期形成6个染色体组，通过三极纺锤体将六个染色体组拉开，每一极2个染色体组，其中有两极的染色体各有一组来自双亲，有一极染色体均来自于父亲，细胞分裂后，其中两个细胞发育成个体。

【详解】

A；图1两个精子进入一个卵细胞；是异常受精过程，发生在卵细胞的减数第二次分裂中期，A正确；

B；阻止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵黄膜封闭作用而不是顶体反应；B错误；

C；若图4细胞A包含父系和母系染色体组各1个；C应该包含父系和母系染色体组各1个或包含两个父系染色体组，C错误；

D；该姐弟来源于母亲的染色体是复制而来是相同的；来自于父亲的染色体由两个不同的精子提供，可能不同，D正确。

故选AD。11、A:B【分析】【分析】

。成体干细胞是成体组织或器官内的干细胞；包括骨髓中的造血干细胞；神经系统中的神经干细胞和睾丸中的精原干细胞等。一般认为，成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力。造血干细胞是发现最早、研究最多、应用也最为成熟的一类成体干细胞，主要存在于成体的骨髓、外周血和脐带血中。

【详解】

A；动物细胞培养是动物细胞工程的基础；在进行细胞培养时，细胞处于分散状态，需要用液体培养基，不需要加入凝固剂，A错误；

B；动物细胞融合只能获得融合细胞；不能获得杂种个体，B错误；

C；干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中；包括胚胎干细胞和成体干细胞等，有着自我更新能力及分化潜能的干细胞，与组织、器官的发育、再生和修复等密切相关，因而在医学上有着广泛的应用，C正确；

D；因为诱导过程无须破坏胚胎；而且iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应，所以科学家普遍认为iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞，D正确。

故选AB。12、A:C:D【分析】【分析】

囊胚期胚胎分化为了内细胞团和滋养层；内细胞团细胞具有全能性，可以诱导分化为各种类型的细胞。

【详解】

A；为获得更多的囊胚；可注射促性腺激素促进雌鼠产生更多的卵子，A错误；

B、胚胎干细胞和诱导出的各种动物细胞都需在CO2培养箱中进行培养；B正确；

C；用胰蛋白酶将细胞a周围的胶原蛋白水解后；而不是将膜蛋白水解，可获得分散的胚胎干细胞，C错误；

D、细胞a是内细胞团细胞，是胚胎干细胞的良好来源，细胞b是滋养层细胞已经不是具有全能性的胚胎干细胞了；将胚胎干细胞培养在饲养层上，只能分裂不能分化，D错误。

故选ACD。13、C:D【分析】试题分析：A常用显微注射法；B表示动物细胞核移植技术，C表示早期胚胎培养，细胞分裂方式是有丝分裂，D表示胚胎移植。故选CD。

考点：本题考查基因工程和胚胎工程，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构。14、A:C【分析】【分析】

1；生态农业是指运用生态学原理；在环境和经济协调发展的思想指导下，运用现代科学技术建立起来的多层次、多功能的综合农业体系。

2；6、生态系统中的生物种类越多；营养结构越复杂，生态系统的自我调节能力就越强，抵抗力稳定性就越高；反之，生物种类越少，营养结构越简单，生态系统的自我调节能力就越弱，抵抗力稳定性就越低。

【详解】

A；流经该生态系统的总能量有生产者固定的太阳能；还包括人工投入的能量，如饲料中包含的能量，A错误；

B；与森林生态系统相比；该庭院生态系统营养结构简单，抵抗力稳定性较弱，B正确；

C；该生态系统的结构包括生产者、消费者、分解者、非生物的物质与能量和食物链（网）；C错误；

D；该生态农业实现了物质的循环利用和能量的多级利用；提高了能量利用率，提升了经济效益，D正确。

故选AC。15、B:D【分析】【分析】

生态工程学的研究对象是社会-经济-自然复合生态系统；需遵循“整体；协调、循环、再生”的生态工程原理。

【详解】

A；生态系统中遗传基因库越丰富；营养结构越复杂，其抵抗性稳定性越强，恢复力稳定性越弱，如热带雨林，A错误；

B；生态工程是在人的参与下；遵循“整体、协调、循环、再生”的原理，以达到“少消耗、多效益、可持续”的目的，B正确；

C；治理沙漠的目的是为了固沙、保水、改善环境以及缺水用水的问题；并不是为了消除沙漠，C错误；

D；退耕还林、退耕还湖可以防止因过度开垦而导致的水土流失问题；能够改善和恢复环境，使人与自然更加和谐，D正确。

故选BD。16、B:C:D【分析】【分析】

流经该生态系统的总能量是生产者通过光合作用固定的全部太阳能；建立该人工生态系统的目的是实现对能量的多级利用，提高能量的利用率，减少环境污染。与种植单一作物的农田相比，该生态系统生物种类多，自我调节能力强，建立该生态系统遵循的原理主要是物质循环再生原理和生物多样性原理。

【详解】

A；该生态系统经过能量的多级利用；提高了系统总能量的利用效率，但能量流动是单向的，不能循环利用，A错误；

B；通过蝇蛆、蚯蚓、沼气池中的微生物等分解者的作用；使系统中的有机物被分解后，利于植物的利用，有效地促进了系统中物质的循环利用，B正确；

C；人工设计的生态系统；人的作用相当关键，离开了人的作用，该系统将很快崩溃，C正确；

D；该生态系统猪、鸡粪进沼气池；沼渣喂养蚯蚓蝇蛆，施农田等，遵循了“物质循环再生”原理，D正确。

故选BCD。

【点睛】三、填空题(共9题，共18分)17、略

【分析】（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”即切割DNA的是限制核酸内切酶简称限制酶；

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是DNA连接酶；

（3）基因工程中最常用的运载体是质粒；

（4）人的基因在牛体内能表达；说明人和牛共用一套遗传密码。

【考点定位】基因工程的基本工具【解析】限制酶DNA连接酶质粒共用一套遗传密码18、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种)，如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期；充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。

【详解】

（1）体外受精前要对精子进行获能处理；使其具有受精能力。

（2）要使动物超数排卵；利用促性腺激素；需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。

（3）步骤甲是人工受精；将受精卵移入受体母牛，进行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。

（4）胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。

【点睛】

胚胎移植的实质：早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】取代修补20、略

【分析】【分析】

1；神经元由细胞体和突起两部分组成；突起又分为树突和轴突，树突短而多，轴突长而少。神经元的轴突末梢经过多次分支，最后每个小枝末端膨大，呈杯状或球状，叫做突触小体。

2；目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

3；人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子，在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗。

【详解】

（1）神经元由细胞体和突起两部分组成；突起又分为树突和轴突，树突短而多，轴突长而少；轴突末端的多次分支后，每个小枝末端膨大的部分称为突触小体。

（2）抗体可以与病原体结合；从而抑制病原体的繁殖或对人体细胞的黏附。

（3）检测目的基因是否转录出mRNA可采用分子杂交技术。

（4）人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体；不定芽、顶芽、腋芽为材料；经过人工包膜包装得到的种子，可以在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗．植物体细胞杂交技术的优点就是克服远缘杂交不亲和的障碍，或者是打破了生殖隔离。

（5）胰岛素能促进组织细胞加速摄取；利用和储存葡萄糖；从而使血糖水平降低。

【点睛】

本题考查教材基础知识，旨在考查考生的理解、记忆能力，要求考生熟记关键语句，并能运用专业术语准确作答。【解析】突触小体对人体细胞的黏附放射性同位素）标记的目的基因胚状体、不定芽、腋芽、顶芽摄取、利用和储存21、略

【分析】【分析】

分析图1：表示多年前感染EV并已康复的甲；乙两人的血液中抗EV-GP抗体的水平。根据曲线图可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组。

分析图2：表示单抗与病毒混合后病毒对宿主细胞的感染率。根据柱形图可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒对宿主细胞的感染率明显低于其他组别。

【详解】

（1）由题意可知；新型冠状病毒表面的S-蛋白作为抗原刺激淋巴细胞，使机体产生特异性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是蛋白质。

（2）免疫系统对被新冠病毒感染后肺细胞强烈攻击引发肺炎；此时可通过适度使用免疫抑制剂对病人进行治疗，使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）由图1可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组，故应选取甲的B细胞用以制备单克隆抗体。

（4）由图2可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ后，病毒对宿主细胞的感染率较低。因此抑制效果最好的单抗是Ⅲ。

（5）患者康复后一段时间；若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的记忆细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。

【点睛】

本题结合图解，考查病毒、单克隆抗体的制备等，要求考生识记病毒的结构，明确病毒没有细胞结构；识记单克隆抗体的制备过程，掌握其优点及相关应用，能结合图中信息准确答题【解析】①.抗原②.特异③.糖蛋白（或蛋白质）④.免疫抑制剂⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.记忆22、略

【分析】【分析】

1；分析题图：①表示染色体复制；②是减数分裂，③是精细胞变形为精子过程，④是受精作用；

2；哺乳动物精子和卵子发生的不同点：（1）精子的减数两次分裂是连续的；场所唯一（MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸）；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不唯一，（MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中）；（2）精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，MⅡ是在受精过程中完成的。

【详解】

（1）精子变形③过程中精子头部的顶体是由高尔基体发育来的；④过程是受精过程，在输卵管内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带，透明带反应和卵细胞膜反应是阻止多精入卵的两道防线。

（3）雄性动物精子产生的时期是初情期；雌性动物卵泡细胞的形成是在胚胎期性别分化以后完成的，这是精子和卵子在发生上的重要区别。

（4）初级卵母细胞进行减数第一次分裂是在排卵前后时期完成的；减数第二次分裂是在受精作用过程中完成的。

【点睛】

本题考查卵细胞的形成过程和受精作用等相关知识，意在考查学生识记相关细节和解决问题的能力。【解析】高尔基体输卵管透明带反应卵细胞膜反应初情期胚胎期性别分化以后排卵前后受精作用23、略

【分析】【分析】

动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。植物组织培养又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织；器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

【详解】

1；基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术；是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。

2；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。

3；动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖，其原理是细胞增殖。

4；植物组织培养又叫离体培养；指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。

【点睛】

本题考查基因工程概念、胚胎移植、动植物细胞培养等相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技术或DNA重组技术②.又称受精卵移植，是指将雌性动物体内的的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状况相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术③.植物细胞全能性、细胞增殖24、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种)，如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期；充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。

【详解】

（1）体外受精前要对精子进行获能处理；使其具有受精能力。

（2）要使动物超数排卵；利用促性腺激素；需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。

（3）步骤甲是人工受精；将受精卵移入受体母牛，进行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。

（4）胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。

【点睛】

胚胎移植的实质：早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。四、判断题(共5题，共35分)25、A【分析】【详解】

由于存在防止多精入卵的两道屏障，故一个卵细胞一般只能同一个精子结合，形成受精卵，这句话是正确的。26、A【分析】【详解】

受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。精子入卵后形成雄原核，同时被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核，雄、雌原核充分发育后，相向移动，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵，故此说法正确。

故正确。27、B【分析】【详解】

受精包括受精前的准备阶段和受精阶段；在自然状态下，哺乳动物的受精在输卵管内完成。

故错误。28、B【分析】【分析】

据图分析；图中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原肠胚。图B中1是滋养层，2是内细胞团，3是透明带，4是囊胚腔；图C中5是外胚层，6是滋养层，7是原肠腔，8是内胚层。

【详解】

（1）从A到C的过程中细胞均需要消耗能量；故胚胎中有机物的含量均减少，（1）正确。

（2）桑椹胚之前所有细胞都具有发育成完整胚胎的潜能；属全能细胞，故A时期胚胎中的细胞都是全能细胞，囊胚期时细胞出现分化，滋养层细胞不是全能细胞，（2）错误。

（3）胚胎移植必须使用处于桑椹胚或囊胚时期的胚胎；处于A或B时期的胚胎，（3）错误。

（4）图示过程细胞通过有丝分裂增殖；有丝分裂过程中可能发生突变，遗传物质可能会发生改变，（4）正确。

故分别为√、×、×、√。29、B【分析】【详解】

生态系统的恢复力稳定性是有一定限度的，导致了生态工程的局限性，使生态工程并不能解决所有的污染、破坏问题，因此不能走“先污染、破坏，后治理”的老路，故错误。五、非选择题(共3题，共27分)30、略

【分析】试题分析：本题考查体内受精；基因工程、早期胚胎培养等知识；要求考生识记体内受精的过程、基因工程的操作步骤以及早期胚胎培养的培养液。

（1）防止多精入卵的两道屏障为透明带反应；卵细胞膜反应。自然条件下；受精作用的场所为输卵管。

（2）将目的基因导入动物细胞的方法为显微注射技术。将血清白蛋白基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起；称为构建基因表达载体。

（3）早起胚胎培养过程中；培养液中除了含有各种无机盐和有机盐；维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还需要添加激素和动物血清。为了防止污染，在合成培养基中还需要加入抗生素。

（4）血清白蛋白要从乳汁中提取，只有雌性奶牛才能产生乳汁，因此胚胎移植时，必须选取雌性奶牛的胚胎进行移植。【解析】透明带反应、卵细胞膜反应输卵管显微注射技术构建基因表达载体激素防止污染雌性31、略

【分析】【分析】

本题以图文结合为情境；综合考查学生对基因工程的基本操作程序；植物组织培养技术的过程等相关知识的识记和理解能力。

【详解】

(1)依题意可知，AtNX1基因提高耐盐机理为：Na+转运至液泡内使细胞液浓度（渗透压）升高；利于吸水。

(2)①如果用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补cDNA片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群体就叫做这种生物的cDNA文库。可见构建cDNA文库需要的工具酶有：限制酶、DNA连接酶、逆转录酶，即a、b；d。②根据AtNX1蛋白氨基酸序列设计引物；首先要依据基因的表达过程推知基因的碱基序列。由于一种氨基酸可能有多种密码子，因此所推知的对应生物的DNA碱基序列就会有多种。可见，根据AtNX1蛋白氨基酸序列设计引物，引物的序列可以有多种，在PCR体系中需加入其中的全部引物。

(3)①步骤Ⅲ是将消毒的幼龄叶片的组织加入到含重组Ti质粒的农杆菌培养液中；其目是借助农杆菌转化法将目的基因（重组DNA分子）导入受体细胞。②步骤Ⅳ是借助植物组织培养技术，将受体细胞经过脱分化培养，以获得耐盐的愈伤组织。为了获得耐盐的愈伤组织，其培养基中除营养物质和植物激素外还应有盐（NaCl）。

③步骤Ⅳ和Ⅴ过程依次需要经过脱分化和再分化培养；因此要注意控制培养基中生长素与细胞分裂素（不同植物激素）的浓度比例，以便获得幼苗。

【点睛】

解答此题需识记并理解基因工程的基本操作程序、植物组织培养过程并形成清晰的知识网络。在此基础上，以题意和图示中的“箭头指向和文字信息”为切入点，从中把握所蕴含的生物学信息，进而对各问题进行分析解答。【解析】细胞液浓度（渗透压）a、b、d一种氨基酸可能有多种密码子，对应生物DNA碱基序列就会有多种全部将目的基因（重组DNA分子）导入受体细胞愈伤组织盐（NaCl）生长素与细胞分裂素（不同植物激素）32、略

【分析】（1）单克隆抗体的制备过程中涉及到多种生物技术，如转基因技术、动物细胞融合、动物细胞培养；（2）构建的基因表达载体一般含有四个部分：抗体基因、标记基因、启动子、终止子；（3）在向转基因小鼠体内注射特定的抗原后，一般在小鼠的脾脏提取B淋巴细胞；依据图示可知，X细胞是骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合而成的，应为杂交瘤细胞；体外培养细胞X，属于动物细胞的培养，所用的培养液必须添加血浆或血清等天然成分；由于杂交瘤细胞具备瘤细胞无限增殖的特性，为此，在培养的过程中它不会产生接触抑制。【解析】转基因技术动物细胞培养动物细胞融合启动子终止子脾脏杂交瘤细胞血浆或血清不会六、综合题(共3题，共30分)33、略

【分析】【分析】

基因表达载体的基本结构包括复制原点、目的基因、标记基因、启动子、终止子等。根据题干信息和图形分析，P0是载体质粒，其含有的氨苄青霉素抗性基因（ampr）和四环素抗性基因（tetr）都属于标记基因，可以用检测目的基因是否导入受体细胞；EcoRV酶为限制酶，其切割质粒后悔破坏了四环素抗性基因（tetr）。

【小题1】乙型脑炎病毒RNA经逆转录可得①cDNA；将E蛋白基因和P质粒连接需用②限制酶和DNA连接酶。

【小题2】大肠杆菌属于原核生物；酵母菌属于真核生物，由于大肠杆菌没有膜结构的细胞器，无法对蛋白质进一步加工，故当受体细胞为大肠杆菌或酵母菌时，所形成的E蛋白结构不完全相同。

【小题3】DNA疫苗属于基因；分子较小，结构较稳定，能通过PCR技术增加生产量，还能通过转录和翻译表达出相应的产物，引起免疫反应。

【小题4】P0是载体质粒，其含有的氨苄青霉素抗性基因（ampr）和四环素抗性基因（tetr）