2025年人教新起点选择性必修3生物下册月考试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年人教新起点选择性必修3生物下册月考试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、下列生物技术操作对遗传物质的改造，不能遗传给子代的是（）A.将含胰岛素基因的表达载体转入大肠杆菌，筛选获得的基因工程菌B.通过植物体细胞杂交获得的番茄--马铃薯杂种植株C.将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者，进行基因治疗D.将生长激素基因导入奶牛受精卵，培育出能分泌含生长激素乳汁的奶牛2、土壤农杆菌含有一个大型的Ti质粒（如下图所示）；在侵染植物细胞的过程中，其中的T-DNA片段转入植物的基因组。若想用基因工程并通过土壤农杆菌向某种植物中导入抗旱基因，以下分析不合理的是（）

A.若用Ti质粒作为抗旱基因的载体，目的基因的插入位置应该在T-DNA片段内，且要保证复制起始点和用于转移T-DNA的基因片段不被破坏B.将重组Ti质粒导入土壤农杆菌中时，可以用Ca2+处理细菌C.用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌去感染植物细胞，可以通过植物组织培养成具有抗旱基因的植物D.若能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因，则说明该基因工程项目获得成功3、下列关于蛋白质工程的说法，正确的是（）A.蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作B.对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现C.蛋白质工程与基因工程密不可分，被称为第二代基因工程D.蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程完全相同4、下列有关细胞全能性的叙述正确的是（）A.植物组织培养繁育花卉的原理是植物细胞具有全能性B.动物克隆技术说明动物体细胞具有全能性C.用植物的种子繁殖后代说明植物细胞具有全能性D.细胞分化程度越高，全能性越高，分裂能力越强5、在通过培育转基因作物解决粮食短缺问题的过程中，人们必须时刻高度戒备的问题是（）A.转基因作物是否具有优良品质B.转基因作物是否有效地提高产量C.转基因作物抗逆性范围和强度D.转基因作物的安全性6、下列生物技术操作对生物遗传物质的改造，不会遗传给子代的是（）A.用经过修饰的腺病毒做载体将治疗遗传性囊性纤维病的正常基因转入患者组织中B.将治疗乙型肝炎的重组人干扰系a-1b基因转入大肠杆菌，筛选获得基因工程菌C.将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄，获得耐寒的番茄植株D.将外源生长素基因导入鲤鱼受精卵，培育出快速生长的转基因鲤鱼7、限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的脱氧核苷酸序列。如图所示为四种限制酶BamHI、EcoRI、HindⅢ以及BglⅡ的识别序列，箭头表示每一种限制酶的特定切割位点，切割出来的DNA片段末端可以互补黏合的是_________（限制酶），其正确的末端互补序列应该为（）

A.BamHⅠ和EcoRI；末端互补序列为B.BamHⅠ和HindⅢ；末端互补序列为C.EcoRI和HindⅢ；末端互补序列为D.BamHⅠ和BglⅡ；末端互补序列为8、为初步探究某动物PHB2蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因，研究者从基因数据库中获取了该蛋白的基因编码序列（简称phb2基因），大小为0.9kb（1kb=1000碱基对），利用大肠杆菌表达该蛋白。图1为所用载体图谱示意图，图中限制酶的识别序列及切割位点见下表，phb2基因序列不含图1中限制酶的识别序列。转化后的大肠杆菌提取质粒，再用选中的两种限制酶进行酶切，酶切产物经电泳分离，结果如图2．下列叙述错误的是（）

相关限制酶的识别序列及切割位点（注：箭头表示切割位点）。名称识别序列及切割位点名称识别序列及切割位点HindⅢA↓AGCTTTTCGA↑AEcoRIG↓AATTCCTTAA↑GPvitⅡCAG↓CTGGTC↑GACPstIGA↑CGTCGA↑CGTCKpnⅠG↓GATCCCCATG↑GBamHIG↓GATCCCCTAG↑G

A.需设计特异性的引物通过PCR技术扩增phb2基因B.为使phb2基因与载体正确连接，在扩增的phb2基因两端分别引入KpnⅠ和EcoRⅠ两种不同限制酶的识别序列C.经过两种限制酶酶切的phb2基因与载体进行连接时，可选用T4DNA连接酶D.图2中3号的质粒很可能是含目的基因的重组质粒9、基因工程可按照人们意愿定向改造生物的性状，下列相关叙述错误的是（）A.PCR过程中使用的两种引物一般情况下能互补配对B.DNA聚合酶和DNA连接酶能催化形成相同的化学键C.不同的限制酶切割DNA形成的黏性末端可能相同D.启动子和终止子分别位于基因的上游和下游，调控转录过程评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)10、利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如图所示；下列叙述正确的是（）

A.过程①需使用逆转录酶B.过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因C.过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备D.过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞11、运用细胞工程技术获得单克隆抗体时，必要的操作是（）A.对小动物注射特定抗原B.融合并筛选杂交瘤细胞C.原代培养效应B细胞D.将胰蛋白酶注入小动物腹腔12、抗生素可由微生物产生，具有抑菌作用，能在琼脂培养基中扩散。在筛选产生抗生素的菌种时，先在琼脂培养基平板上划线接种从土壤中获得的甲菌，在27℃下培养3天，形成菌落。然后接种乙、丙、丁三种致病菌（图a），继续在同样条件下培养3天，结果如图b。分析结果；可得出的结论是。

A.甲菌产生了抗生素B.丙菌的生长被乙菌产生的抗生素抑制C.乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制D.丁菌产生的抗生素抑制了丙菌的生长13、为探究提高“日照蓝莓”品质和产量的新途径，某生物兴趣小组以“日照蓝莓”的主要品种——兔眼蓝莓为实验材料进行脱毒处理，其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”。下列有关叙述正确的是（）A.取材时可选用兔眼蓝莓的芽尖等分生组织作为外植体B.用70%酒精和5%左右次氯酸钠对外植体消毒时，要控制好时间以避免造成伤害C.对分化培养基灭菌前需添加生长素类、细胞分裂素类和赤霉素类等生长调节剂D.脱毒后的兔眼蓝莓果实体积更大，产量更高，后代个体中更不易被病毒感染14、将苏云金杆菌的Bt基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如图所示(KanR为卡那霉素抗性基因)。下列相关叙述正确的是（）

A.可使用含卡那霉素的培养基来筛选含重组质粒的农杆菌B.过程①必须用同种限制酶切割含Bt基因的DNA和Ti质粒C.过程③将棉花细胞与农杆菌混合培养能使T-DNA进入棉花细胞D.过程④和过程⑤的培养基中添加的激素的浓度不同15、欲探究1g土壤中有多少能分解尿素的细菌，需要用科学的方法测定微生物数量。下列相关叙述不正确的是（）A.利用以尿素作为唯一氮源的培养基，可从土壤中分离出分解尿素的细菌B.平板划线法可以分离得到单菌落，也可用来测定样品中的活菌数C.样品的稀释度直接影响平板上的菌落数目，因此稀释度越大越好D.利用显微镜进行直接计数，可快速直观地测定样品中的活菌数16、下列关于传统发酵技术的说法中，错误的是（）A.果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌属于兼性厌氧生物，在有氧条件下大量繁殖B.制作果醋需要醋酸菌，它是一种严格厌氧的微生物，可将葡萄中的糖分解为乙酸C.多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等D.制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸和二氧化碳17、胚胎干细胞体外培养时，要最大程度地抑制其分化、维持全能性，细胞为圆形或扁圆形，结构相对简单；细胞核大，细胞质少，核质比高。输卵管上皮细胞能合成、分泌细胞生长因子和细胞分化抑制因子。科学家通过病毒介导或者其他的方式，将四种与多能性相关的转录因子导入宿主细胞，使其重新编程为iPS细胞，iPS细胞特性与胚胎干细胞极为相似。下列叙述正确的是（）A.培养iPS细胞时可加入输卵管上皮细胞，以维持iPS细胞的未分化状态和全能性B.介导转录因子导入皮肤细胞时，应用灭活的病毒，以防止皮肤细胞被感染C.重编程为iPS细胞时，关闭了体细胞特异性表达的基因，开启了使细胞全能性分化的基因D.可以通过观察细胞形态，初步鉴定iPS细胞是否诱导成功18、淀粉经淀粉酶水解后得到的产物是重要的工业原料；但工业化生产常需在高温条件下进行，而现有的淀粉酶耐热性不强，科研人员发现将淀粉酶（AmyS1）第27位的亮氨酸替换为天冬氨酸能产生耐热性高的淀粉酶（AmyS2），由此科研人员根据AmyS2的氨基酸序列设计并人工合成了AmyS2基因，将其导入芽孢杆菌内，具体过程如下图所示。最终结果表明，与导入质粒B相比，导入质粒C的芽孢杆菌培养液中更易获得并提纯AmyS2．下列说法错误的是（）

A.获得AmyS2基因并将其导入芽孢杆菌得到AmyS2的过程是通过基因工程实现的B.构建质粒C时需用限制酶Eco52I和BamHI同时切割质粒B和信号肽基因C.信号肽基因表达的产物可帮助核糖体上合成的AmyS2进入内质网和高尔基体D.可用PCR技术检测芽孢杆菌的DNA上是否插入了AmyS2基因评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)19、微生物________________的方法很多，最常用的是_____________和__________________。20、（1）致病菌：第二次世界大战期间，侵华日军在中国领土上修建了几十座_____工厂，曾用数千名中国人做实验，还曾在中国20多个地区使用了_____；造成了几十万中国老百姓死亡。日本战败投降时，侵华日军又一次把培养的细菌释放出来，在中国造成传染病大流行。

（2）生化毒剂：如_____分子可以阻滞神经末梢释放_____；从而引起肌肉麻痹。

（3）病毒：如_____病毒；在年轻人普遍都没有接种天花疫苗的情况下，若有人用天花病毒或某些动物的痘病毒作为生物武器，后果不堪设想。

（4）基因重组致病菌：这些致病菌是人类的_____致病菌，可让大批受感染者突然发病，而又无药可医。21、DNA连接酶与DNA聚合酶作用的异同:

DNA聚合酶只能将______加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接_____的末端，形成磷酸二酯键。22、目的：使目的基因在受体细胞中_____，并且可以______，使目的基因能够______作用。23、PCR技术的DNA体外复制环境有DNA解旋酶、耐热DNA聚合酶、DNA母链、4种脱氧核苷酸和__________，它能使DNA聚合酶能够从引物的________端开始连接脱氧核苷酸。（人教P58列表），而引物是一段______________片段，用于PCR的引物长度通常为____个核苷酸。24、DNA的粗提取实验中，如果实验材料是非哺乳动物如鸡血细胞，需要在鸡血细胞中加入一定量的____________，如果实验材料是植物细胞，需要先使用_______________溶解细胞膜。25、将DNA粗提取液在____________℃的恒温水浴箱中保温10—15分钟。26、有时还需进行______的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现______。27、某种微生物合成的一种蛋白酶与人体消化液中某种蛋白酶的结构和功能很相似，只是前者热稳定性较差，进入人体后容易失效。尝试根据本节课所学知识提出改造该种微生物蛋白酶的思路_________。评卷人得分四、判断题(共4题，共8分)28、转基因生物可能会破坏生态平衡（______）A.正确B.错误29、动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术，体现了动物细胞的全能性。（选择性必修3P52）()A.正确B.错误30、胚胎发育早期，细胞的数量不断增加，胚胎的总体积也增加。()A.正确B.错误31、蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。（选择性必修3P93）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共3题，共24分)32、金黄色葡萄球菌是一种常见的病原菌；具有高度耐盐化的特性，在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。某研究小组进行了测定某处土壤中金黄色葡萄球菌数量的实验。回答下列问题：

(1)实验小组选用含7．5%NaCl的牛肉膏蛋白胨培养基培养金黄色葡萄球菌，制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是_________（用文字和箭头表示）。培养基中加入7．5%NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选，原因是_________。

(2)在制作血平板时需要等平板冷却后，方可加入血液，以防止_________。在血平板上，金黄色葡萄球菌菌落的周围会出现_________。

(3)土壤是微生物天然的培养基，测定土壤中金黄色葡萄球菌的数量时，一般采用_________法。为了保证获得菌落数在_________之间适于计数的平板，需要选用一定稀释范围的样品液进行培养。测定土壤中金黄色葡萄球菌、放线菌和真菌的数量时，稀释倍数较低的是_________。实验结果统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，其原因是_________。33、玉米是重要的粮食作物；其叶片细胞中的P蛋白是一种水通道蛋白，由P基因编码，在植物生长发育过程中对水分的吸收具有重要的调节功能。科研人员成功培育出超量表达P蛋白转基因玉米，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图所示，请回答下列问题：

(1)强启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被_______识别并结合，驱动基因的持续转录，如将强启动子插入到玉米叶绿体某基因内部，可获得该基因_______突变株。为使P基因在玉米植株中超量表达，应优先选用_______酶组合，将Ti质粒切开后构建重组表达载体。T-DNA在该实验中的作用是_______。

(2)将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌后进行组织培养，培养基中需加入_______进行筛选，此物质属于氨基糖苷类抗生素，它能抑制蛋白质在叶绿体和线粒体中合成，使植物的光合作用和_______受到干扰；从而引起植物细胞死亡。

(3)愈伤组织是一种相对没有分化的_______团，经液体悬浮培养叮以分散成胚性细胞，在适宜的培养基中，这种单细胞可以发育成_______；再继续发育成转基因玉米株系。

(4)影响玉米愈伤组织能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈伤组织继代次数以及_______等。目前，组织培养过程中培养瓶常用透气封口膜封口，目的是_______。34、下图是某同学设计的传统发酵装置示意图。比较传统发酵技术与现代发酵工程；回答下列问题：

(1)传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒的原理是______。请设计简单的实验验证发酵过程中产生了酒精（不考虑发酵液中葡萄糖的影响），写出实验思路并预期实验结果与结论______。

(2)传统发酵技术一般以天然存在的______发酵，品质不一，现代工业发酵一般为单一菌种发酵，品质较高。自制的果酒并非商品意义上的产品，在实际生产中还需要经过______装瓶等过程才能获得成品酒。

(3)若要测定发酵罐中酵母菌的种群密度，取10mL发酵液稀释1000倍，利用25×16的血细胞计数板，观察并统计到中方格中的酵母菌平均数为9个，则每毫升发酵液中酵母菌数量约是______个。

(4)利用上图中装置酿酒与酿醋时，操作上的最主要的区别是______。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、C【分析】【分析】

基因治疗是指将外源正常基因导入靶细胞；以纠正或补偿缺陷和异常基因引起的疾病，以达到治疗目的。其中也包括转基因等方面的技术应用，也就是将外源基因通过基因转移技术将其插入病人的适当的受体细胞中，使外源基因制造的产物能治疗某种疾病。从广义说，基因治疗还可包括从DNA水平采取的治疗某些疾病的措施和新技术。

【详解】

A；将含胰岛素基因的表达载体转入大肠杆菌；筛选获得的基因工程菌可以通过二分裂的方式遗传给后代，A不符合题意；

B；通过植物体细胞杂交获得的番茄--马铃薯杂种植株；遗传物质发生改变，可以通过无性繁殖遗传给子代，B不符合题意；

C；将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞；只是淋巴细胞含有这个基因，其生殖细胞的该基因没有改变，因此不能遗传给子代，C符合题意；

D；将生长激素基因导入奶牛受精卵；受精卵含有生长素基因，受精卵培育成的奶牛含有该基因，因此可以遗传给后代，D不符合题意。

故选C。2、D【分析】【分析】

农杆菌的特点是易感染双子叶植物和裸子植物；对单子叶植物没有感染力。农杆菌的Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。农杆菌转化过程：目的基因插入Ti质粒的T-DNA→农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。

【详解】

A；土壤农杆菌含有一个大型的Ti质粒；在侵染植物细胞的过程中，其中的T-DNA片段可转入植物的基因组，所以若用Ti质粒作为抗旱基因的载体时，目的基因的插入位置应该在T-DNA片段内，且要保证复制起始点和用于转移T-DNA的基因片段不被破坏，A正确；

B、将目的基因导入细菌时，需要用Ca2+处理细菌；使其成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态，B正确；

C；用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌去感染植物细胞；使其具有抗旱基因，然后再通过植物组织培养技术将受体细胞培养成具有抗旱基因的植物，C正确；

D；能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因；只能说明目的基因导入成功，不能说明该基因成功表达，即不能说明该基因工程项目获得成功，D错误。

故选D。

【点睛】

本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能从题文提取有效信息，并结合所学知识，对生物学问题作出准确判断的能力。3、C【分析】【分析】

蛋白质工程是指以蛋白质分子结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求。蛋白质工程能对现有的蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质；而基因工程原则上能生产自然界原有的蛋白质。

【详解】

AB；蛋白质工程是在分子水平上对基因直接进行操作；AB错误；

C；蛋白质工程与基因工程密不可分；被称为第二代基因工程，C正确；

D；蛋白质工程的流程为：预期蛋白质供能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成DNA→表达出蛋白质；这和天然蛋白质合成的过程是不相同的，D错误。

故选C。

【点睛】4、A【分析】【分析】

关于细胞的“全能性”；可以从以下几方面把握：

(1)概念：细胞的全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。

(2)细胞具有全能性的原因是：细胞含有该生物全部的遗传物质。

(3)细胞全能性大小：受精卵>干细胞>生殖细胞>体细胞。

(4)细胞表现出全能性的条件：离体；适宜的营养条件、适宜的环境条件。

(5)全能性以细胞形成个体为标志。

【详解】

A；细胞的全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能；所以组织培养繁育花卉所利用的原理就是植物细胞具有全能性，A正确；

B；动物克隆技术说明高度分化的动物细胞的细胞核具有全能性；B错误；

C；种子是器官；用种子繁殖后代不能说明植物细胞具有全能性，C错误；

D；细胞分化程度越高；全能性越低，分裂能力越弱，D错误。

故选A。5、D【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

【详解】

人们培育转基因作物解决粮食问题时；在欣赏转基因作物具有的抗逆性等优良品质成果的同时，应关注转基因作物对其他生物和对人类的影响，即转基因作物的安全性，ABC错误，D正确。

故选D。6、A【分析】【分析】

1；基因治疗是指把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中；使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。例：将腺苷酸脱氨酶（ADA）基因导入患者的淋巴细胞，治疗复合型免疫缺陷症。

2；对于有性生殖的生物；外源基因需要导入细胞核内才能随着细胞增殖传递给子代细胞。

【详解】

A；因为将治疗遗传性囊性纤维病的正常基因转入患者的体细胞中使其正常表达；因此不会通过遗传传递给子代，A正确；

B、将治疗乙型肝炎的重组人干扰素a-1b基因转入大肠杆菌；筛选获得基因工程菌，重组质粒能随细菌分裂而遗传给后代，B错误；

C；将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄；培育出的耐寒的番茄植株细胞中都含鱼的抗冻蛋白基因，因而能遗传给后代，C错误；

D；将外源生长素基因导入鲤鱼受精卵；培育出转基因鲤鱼细胞中都含外源生长素基因，因而能遗传给后代，D错误。

故选A。7、D【分析】【分析】

1；限制性核酸内切酶（限制酶）是“分子手术刀”。来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。

2；解答本题的关键是理解限制酶的特点。切割目的基因和运载体时；一般要使用同一种限制性内切酶，这样，切出的切口才一样，才能进行碱基互补配对连接起来。两个黏性末端只要相同就可以进行碱基互补配对，再通过DNA连接酶连接起来。

【详解】

BamHⅠ切割出的末端序列为—GATC—；EcoRI切割出的末端序列为－AATT－，HindⅢ切割出的末端序列为－AGCT－，BglⅡ切割出的末端序列为－GATC－，BamHⅠ与BglⅡ切割出的末端序列一致，故只有D项所示两种限制酶所切割出来的DNA片段末端才能互补黏合，D正确；

故选D。8、B【分析】【分析】

图1为所用载体图谱示意图，目的基因要插在启动子和终止子之间，可用EcoRⅠ和PvitⅡ两种不同限制酶切割，KpnⅠ在启动子和终止子之外还有切割位点，所以不用KpnⅠ切割；由图3可知，EcoRⅠ切割得到黏性末端，PvitⅡ切割可得到平末端，由于目的基因不含图1中限制酶的识别序列，所以要在目的基因两端分别加上EcoRⅠ和PvitⅡ切割后的序列末端，再用T4DNA连接酶将目的基因连接到载体上；完成基因表达载体的构建。

【详解】

A、通过PCR技术扩增phb2基因时需设计根据phb2基因特异性的引物；A正确；

B；目的基因应导入启动子和终止子之间；两者之间存在三种限制酶切点，但是由于KpnⅠ在质粒上不止一个酶切位点，所以应该选择EcoRⅠ和PvitⅡ两种不同限制酶的识别序列，B错误；

C、T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端；又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，但连接平末端的效率相对比较低，可以用T4DNA连接酶连接，C正确；

D、题干显示，目的基因大小约0.9kb，图2中3号的质粒酶切后得到约6kb片段和约1kb片段，约1kb片段很可能是目的基因；D正确。

故选B。9、A【分析】【分析】

基因工程的基本操作工具有：限制酶（具有特异性；不同的限制酶识别的是不同的DNA碱基序列）；DNA连接酶（使2个DNA片段之间形成磷酸二酯键）、运载体（常用的是质粒）。

【详解】

A；为了保证PCR过程中引物分别和解旋的DNA单链（一段碱基序列）结合；两种引物不能互补配对，否则两种引物也会结合，影响与模板链的结合，A错误；

B；DNA聚合酶（DNA复制时需要的酶）和DNA连接酶（基因工程中需要的“针线”）能催化形成相同的化学键—磷酸二酯键；B正确；

C；不同的限制酶识别的是不同的DNA碱基序列；但切割后所产生的黏性末端可能是一样的，C正确；

D；启动子和终止子都是一段特殊的DNA序列；属于基因的非编码区，分别位于基因编码区的上游和下游，负责调控基因的转录过程，D正确。

故选A。二、多选题(共9题，共18分)10、A:D【分析】【分析】

过程①是以mRNA为模板合成DNA的过程；即逆转录过程；过程②表示利用PCR扩增目的基因；过程③表示将重组质粒导入大肠杆菌；过程④培养并筛选转基因大肠杆菌，级工程菌。

【详解】

A；过程①是以mRNA为模板合成DNA的过程；即逆转录过程，需要逆转录酶的催化，故A正确；

B；过程②表示利用PCR扩增目的基因；在PCR过程中，不需要解旋酶，是通过控制温度来达到解旋的目的，故B错；

C；利用氯化钙处理大肠杆菌；使之成为感受态细胞，故C错；

D；检测目的基因是否成功导入受体细胞的染色体DNA中；可以采用DNA分子杂交技术，故D正确。

故选AD。

【点睛】11、A:B【分析】【分析】

在制备单克隆抗体的过程中；需要先对小鼠进行特定抗原免疫，使机体产生相应的浆细胞；在诱导细胞融合时，除了异种细胞融合外，还有同种细胞融合，因此需要在培养基中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞；效应B细胞不能分裂；在获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞时，可以将其注入小鼠腹腔中，以备获得大量的单克隆抗体。

【详解】

A；在制备单克隆抗体的过程中；需要先对小鼠进行特定抗原免疫，使机体产生相应的浆细胞，A正确；

B；在诱导细胞融合时；除了异种细胞融合外，还有同种细胞融合，因此需要在培养基中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞，B正确；

C；效应B细胞不能分裂；C错误；

D；在获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞时；可以将其注入小鼠腹腔中，以备获得大量的单克隆抗体，而不需要将胰蛋白酶注入小动物腹腔，D错误。

故选AB。12、A:C【分析】【分析】

【详解】

分析培养结果（图b）可知，乙、丙、丁三种致病菌不会产生抗生素，否则靠近乙、丙、丁的甲菌落不能生长。进一步由b图可知；乙菌的生长被抑制，最可能的原因是甲菌产生了抗生素，此种抗生素只能抑制乙菌的生长，而对丙；丁两种菌没有影响，AC正确。

故选AC。13、A:B【分析】【分析】

植物组织培养技术：

1；过程：离体的植物组织；器官或细胞(外植体)→愈伤组织→胚状体→植株(新植体)。

2；原理：植物细胞的全能性。

3；条件：①细胞离体和适宜的外界条件(如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等)；②一定的营养(无机、有机成分)和植物激素(生长素和细胞分裂素)。

【详解】

A；取材时可选用兔眼蓝莓的芽尖等分生组织作为外植体；这是因为芽尖分裂旺盛，且很少带有病毒，甚至不含毒，A正确；

B；用70%酒精和5%左右次氯酸钠对外植体消毒时；要控制好时间以避免造成伤害，否则外植体会受到损失，导致实验失败，B正确；

C；生长调节剂应该在培养基灭菌后添加；否则高温可能使其失去效果，C错误；

D；脱毒后的兔眼蓝莓果实体积更大；产量更高，后代个体中含病毒较少，但并不是不易被病毒感染，D错误。

故选AB。14、A:C:D【分析】【分析】

据图分析，过程①表示基因表达载体的构建过程，需用DNA连接酶将目的基因和运载体（质粒）连接形成重组Ti质粒。过程②表示将目的基因导入微生物细胞（农杆菌），需要用Ca2+处理；使其成为感受态细胞，使其易吸收周围环境中的DNA分子。农杆菌侵染棉花后，将自身的Ti质粒上的T-DNA整合到棉花细胞的DNA上，然后利用棉花细胞进行植物组织培养，获得抗虫棉。

【详解】

A、KanR为卡那霉素抗性基因；成功导入质粒的农杆菌具有卡那霉素抗性而普通农杆菌没有，因此可使用含卡那霉素的培养基来筛选含重组质粒的农杆菌，A正确；

B；为使目的基因DNA片段和质粒DNA片段在切口处的黏性末端匹配；需要选择能切出相同黏性末端的限制酶来进行切割，可以是同种限制酶，也可以是不同限制酶，但是必须要能产生相同黏性末端，B错误；

C；棉花细胞与农杆菌混合后；农杆菌在侵染棉花细胞时，可将自身的Ti质粒上的T-DNA整合到棉花细胞的DNA上，C正确；

D；植物组织培养时；培养基中生长素浓度高于细胞分裂素，可以诱导根的分化；若是细胞分裂素高于生长素浓度，则诱导芽的分化，从图上可知，④过程分化出芽，⑤过程分化形成根，继而形成试管苗，因此④和⑤中的培养基用到的激素的浓度不同，D正确。

故选ACD。15、B:C:D【分析】【分析】

选择培养基是用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。设计选择培养基时；主要考虑某些微生物的特殊营养需求或它们对某些化学物质具有的抗性。

【详解】

A；以尿素作为唯一氮源的培养基为选择培养基；可从土壤中分离出分解尿素的细菌，A正确；

B；平板划线法能将单个微生物分散到培养基上；从而分离得到单菌落，但是不可以用来测定样品中的活菌数，稀释涂布平板法可以计数，B错误；

C；样品的稀释度太大；会导致微生物数量太少，一般要求稀释后平板上的菌落数在30到300之间比较合适，C错误；

D；利用显微镜进行直接计数；可快速直观地测定样品中的活菌数和死菌数，D错误。

故选BCD。16、B:D【分析】【分析】

参与豆腐发酵的微生物有青霉；酵母、曲霉、毛霉等多种；其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一种丝状真菌，常见于土壤、水果、蔬菜、谷物上，具有发达的白色菌丝。毛酶等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【详解】

A；果酒的制作原理是酵母菌的无氧呼吸产生酒精；酵母菌属于兼性厌氧生物，在有氧条件下大量繁殖，A正确；

B；制作果醋需要醋酸菌；它是一种好氧的微生物，可将葡萄中的糖（或乙醇）分解为乙酸，B错误；

C；多种微生物参与了腐乳的制作；如酵母菌、毛霉、曲霉等，其中起主要作用的是毛霉，C正确；

D；制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物；可以通过无氧呼吸产生乳酸，D错误。

故选BD。17、A:C:D【分析】【分析】

科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞；获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，将它称之为诱导多能干细胞，简称iPS细胞。因为诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内，理论上可以避免免疫排斥反应，因此iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞。

【详解】

A；由题干可知；输卵管上皮细胞能合成、分泌细胞分化抑制因子，为了维持iPS细胞的未分化状态和全能性，培养iPS细胞时可加入输卵管上皮细胞，A正确；

B；通过病毒介导或者其他的方式将转录因子导入皮肤细胞；应用有活性的病毒，灭活病毒不能将外源DNA片段带入宿主细胞，B错误；

C；体细胞重编程为iPS细胞时；关闭了体细胞特异性的表达的基因，同时开启了使细胞全能性分化的基因，可以维持iPS细胞的未分化状态和全能性，C正确；

D；由题干可知；iPS细胞特性与胚胎干细胞极为相似，胚胎干细胞为圆形或扁圆形，因此可以通过观察细胞形态，初步鉴定iPS细胞是否诱导成功，D正确。

故选ACD。18、A:B:C【分析】【分析】

基因工程：目的基因的筛选与获取；构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

分泌蛋白的合成：首先；在游离的核糖体中以氨基酸为原料开始多肽链的合成。当合成了一段肽链后，这段肽链会与核糖体一起转移到粗面内质网上继续合成过程，并且边合成边转移到内质网腔内，再经过加工；折叠，形成具有一定空间结构的蛋白质。内质网膜鼓出形成囊泡，包裹着蛋白质离开内质网，到达高尔基体，与高尔基体融合，高尔基体对蛋白质做进一步的加工，然后形成包裹着蛋白质的囊泡转运到细胞膜，与细胞膜融合。

【详解】

A；科研人员根据AmyS2的氨基酸序列设计并人工合成了AmyS2基因；因此获得AmyS2基因并将其导入芽孢杆菌得到AmyS2的过程是通过蛋白质工程和基因工程实现的，A错误；

B；BamHI会破坏AmyS2基因；B错误；

C；在分泌蛋白的合成过程中；信号肽序列可帮助肽链进入内质网，在内质网被切割，因此信号肽基因表达的产物可帮助核糖体上合成的AmyS2进入内质网，但不能引导其进入高尔基体，C错误；

D；可用PCR技术检测芽孢杆菌的DNA上是否插入了AmyS2基因；如果经过PCR扩增，不出现扩增产物，说明没有插入基因，反之，则成功插入，D正确。

故选ABC。三、填空题(共9题，共18分)19、略

【解析】①.接种②.平板划线法③.稀释涂布平板法20、略

【分析】【详解】

（1）早在第二次世界大战中；侵华日军就组建了从事细菌战的731部位和100部队，并在中国领土上修建了几十座细菌武器工厂，大量培养鼠疫；霍乱、伤寒、炭疽和菌痢等一系列能使人致命的传染性疾病。曾用数千名中国人做实验，还曾在中国20多个地区使用了细菌武器，造成了几十万中国老百姓死亡。日本战败投降时，侵华日军又一次把培养的细菌释放出来，在中国造成传染病大流行。

（2）某些国家或恐怖组织大量生产肉毒杆菌毒素；肉毒杆菌毒素分子可以阻滞神经末梢释放乙酰胆碱，从而引起肌肉麻痹。

（3）1978年天花就已经在地球上消灭；但是某些国家至今保留着天花病毒菌株，今天，在年轻人普遍都没有接种天花疫苗的情况下，若有人用天花病毒或某些动物的痘病毒作为生物武器，后果不堪设想。

（4）目前，有一些国家对重组基因技术制造全新的致病菌表现了极大的兴趣，这些人类从来没有接触过的致病菌，可以让大批受感染者突然发病，而又无药可医。【解析】①.细菌武器②.细菌武器③.肉毒杆菌毒素④.乙酰胆碱⑤.天花⑥.从未接触过21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】单个核苷酸两个DNA片段22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】稳定存在遗传至下一代表达和发挥23、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2种引物DNA或RNA20—3024、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蒸馏水洗涤剂和食盐25、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】60—7526、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】个体生物学水平抗虫性状。27、略

【分析】【详解】

要提高酶的热稳定性，可采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，改善其功能，需要从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。【解析】采用蛋白质工程技术替换少数氨基酸，提高该酶的热稳定性，从改造控制该酶合成的基因着手，具体做法为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列→获得所需的蛋白质。四、判断题(共4题，共8分)28、A【分析】【详解】

转基因生物可能会破坏生态平衡，特别是对生物多样性的影响。大自然经过亿万年的演化，各种生物相对处于一种和谐的生态平衡状态。但是，如果我们用转基因技术把某种生物人为地变得更加“强悍”，那其他物种就会衰败以至灭绝，故本题正确。29、B【分析】【详解】

动物细胞核移植技术体现了动物细胞核的全能性，不能体现动物细胞的全能性，高度分化的动物细胞的全能性受到了限制，故错误。30、B【分析】【详解】

胚胎发育早期；细胞数量不断增加，但胚胎总体积不变或略有缩小。

故错误。31、A【分析】【详解】

蛋白质工程是在分子水平上通过基因修饰或基因合成来完成的，是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程。故该说法正确。五、实验题(共3题，共24分)32、略

【分析】【分析】

制备牛肉膏蛋白胨固体培养基；其基本过程为计算；称量、溶化、灭菌、倒平板。培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物生长，培养、分离出特定的微生物（如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐）。

(1)

制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本操作步骤是计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。金黄色葡萄球菌具有高度耐盐化的特性；培养基中加入7.5%NaC1不影响金黄色葡萄球菌生长的同时会抑制其他杂菌生长，起到了选择的目的。

(2)

在制作血平板时需要等平板冷却后；方可加入血液，以防止高温破坏血细胞。在血平板上，由于金黄色葡萄球菌可破坏红细胞而使其褪色，因此菌落的周围会出现褪色圈。

(3)

测定土壤中金黄色葡萄球菌的数量时，一般采用稀释涂布平板法。为了保证获得菌落数在30～300之间适于计数的平板，需要选用一定稀释范围的样品液进行培养。测定土壤中金黄色葡萄球菌的数量，一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养；测定放线菌的数量，一般选用103、104、105倍的稀释液进行平板培养；测定真菌的数量，一般选用102、103、104倍的稀释液进行平板培养。因此稀释倍数较低的是真菌。由于当两个或多个细胞连在一起时；平板上观察到的只是一个菌落，因此实验结果统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。

【点睛】

本题主要考查微生物的培养与分离，考查学生的实验与探究能力。【解析】(1)计算→称量→溶化→灭菌→倒平板7．5%NaC1不影响金黄色葡萄球菌生长的同时会抑制其他杂菌生长。

(2)高温破坏血细胞褪色圈（或溶血圈）

(3)稀释涂布平板30～300真菌当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落33、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目