《猪细管冻精解冻复苏及深部输精技术规程》

ICS65.020.30

B43

DB52DB52/TXXXX—XXXX

贵州省地方标准

DB52/TXXXX—XXXX

猪细管冻精解冻复苏及深部输精技术规程

Technicalprotocolfordeepspermdeliveryofporcinefinetubefrozensemen

(征求意见稿)

2022-XX-XX实施

2022-XX-XX发布

贵州省市场监督管理局发布

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猪细管冻精解冻复苏及深部输精技术规程

1范围

本文件制定了猪细管冷冻精液深部输精的技术程序，规定了发情鉴定、冻精解冻、稀释分装、深

部输精、妊娠检查等技术环节要求等。

本文件适用于猪细管冷冻精液（以下简称“猪冻精”）深部输精操作。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可缺少的条款。其中，注日期的引用

文件，仅注日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件,其最新版本（包括所有的修改单）适

用于本文件。

GB/T5458液氮生物容器

GB23238—2021种猪常温精液

NY/T636猪人工授精技术规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1冷冻精液frozensemen

经特殊方法处理的精液超低温冷冻后在液氮中（-196℃）长期保存。

[来源：GB20557-2006，3.5]

3.2细管冷冻精液Frozensperminfinetubes

原精经过特殊处理液灌注到细管中，再通过超低温冷冻程序处理制成的冻精产品，简称“细管冻

精”。细管冻精可以在液氮中（-196℃）长期保存。

3.3细管冷冻精液解冻Thawingoffrozensperminfinetubes

细管冻精使用前迅速放入一定温度的水浴锅解冻，使其精子快速复苏的方法。

3.4深部输精DeepSpermTransfusion

通过人工采用套管式输精管将精液通过子宫颈皱褶输配到子宫内，使其受孕的辅助技术，称深部

输精。

4.猪冷冻精液深部输精技术的构成

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猪冷冻精液深部输精技术程序包括发情鉴定、精液解冻、稀释分装、深部输精、妊娠检查等5个

技术环节，其中母猪发情鉴定细分有3个阶段。深部输精技术流程见图1。

发情初期（见5.1）

1.母猪发情鉴定（见第5部分）发情中期（见5.2）

发情末期（见5.3）

2.冻精解冻（见第6部分）

3.稀释、分装（见第7部分）

4.深部输精（见第8部分）

5.母猪妊娠检查（见第9部

分）

图1猪冷冻精液深部输精流程图

（见9）

5母猪发情鉴定

5.1发情初期

发情初期主要表现如下：

a）外观表现兴奋不安，不停发出叫声，游走，采食量减少，追逐、爬跨其它母猪。公猪试情不

接受其猪爬跨，手用力按压发情母猪的背部，此时母猪会表现不停走动。

b）生殖器官变化阴户肿胀、松弛、翻开充血、发亮，有稀薄透明黏液流出，黏液不呈牵丝。

5.2发情中期

发情中期主要变化如下：

a）外观表现不愿意采食，多表现呆立不动，愿意接受其它猪爬跨，即静立反射。公猪试情愿意

接受公猪爬跨、驱赶不走，手用力按压发情母猪的背部，此时母猪会站立不动。这是配种的最佳时期。

b）生殖器官变化阴户肿胀、红润，有大量透明而黏稠的黏液流出，呈牵丝状。

贵州省标准化公共服务平台注：如流出的黏液为化脓状、呈豆腐渣样、颜色偏黄或带有血丝、气味臭等症状，则为严重炎症，应采取先

治疗，治愈后再进行输精。

5.3发情末期

发情末期主要变化如下：

a）外观表现母猪兴奋度降低，神情表现平静，开始正常采食。不接受其他猪爬跨，手用力按

压发情母猪的背部，此时母猪会表现不停走动。

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b)生殖器官变化外阴阴户肿胀、红润，有大量透明而黏稠的黏液流出，呈牵丝状。

6细管冻精解冻

6.1解冻前准备

6.1.1细管冷冻精液的贮存

贮存细管冷冻精液的液氮生物容器性能完好，符合GB/T5458的规定。由专人负责，及时补充液

氮的消耗，确保细管冷冻精液始终浸泡在液氮中。

6.1.2稀释液的配制

稀释液现配现用，使用前应置于37℃水浴中预热待用。稀释液配方见附录A，商品稀释液的使用

按说明书要求。

6.2解冻

6.1测算受体母猪需要解冻细管冷冻精液的数量

6.1.1确定母猪输配的头数

根据受体母猪发情数量确定母猪输配的头数。

6.1.2受体母猪需要输配有效精子数

根据受体母猪品种，确定需要输配有效精子数，参照GB232382021.4.表1。

6.1.3每头母猪输精需要的细管冷冻精液数量

根据细管冷冻精液的质量参数（精子活力、每剂量中前向运动精子数）、受体母猪需要输配的有

效精子数及输精方式等综合因素，具体测算每头母猪输精需要的细管冷冻精液数量。参照附录B。

6.2解冻操作

用长柄镊子将细管冷冻精液从液氮容器中快速取出，冷冻精液离开液氮低温环境不得超过5s。取

出的细管冷冻精液应迅速置于37℃水浴中晃动3s，立即移至50℃水浴中轻微晃动13s取出，用吸水

纸擦干管壁上的水珠，查看封口是否严密，管壁有无破损。

贵州省标准化公共服务平台7稀释、分装

7.1稀释

冻精解冻后，用20倍的稀释液去稀释精液。

7.2分装

细管冷冻精液解冻后，剪去细管封口端，用细管推针将精液分别推至已预热的输精瓶（袋）中，

受体为外来品种或培育品种的稀释至60mL/瓶（袋）；受体母猪为本地品种的，稀释至40mL/瓶（袋），

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摇匀后放入17℃待用。

7.3贴上标签

及时将配好的输精瓶或输精袋上标记公猪品种、耳号等相关信息，放入17℃冰箱保存备用。

7.4使用要求

细管冷冻精液解冻输配要求现配现用；输配前精液从17℃恒温箱中取出，需要用毛巾包住输精瓶

使其保温。

8深部输精

8.1输精时间确定

发情母猪出现静立反射后8h～12h进行第一次输精，之后间隔8h～12h进行第2次输精。

8.2输精前准备

8.2.1输精人员需要经过专业训练，并具有一定的专业知识。

8.2.2输精工作时应穿着洁净工作衣、帽，洗净双手。

8.2.3确认与配母猪的耳号

从精液贮存箱取出解冻分装好的输精瓶（20mL精液），确认母猪品种、耳号及配种方案后，

开始输配。

8.2.4母猪输精前应用洁净水清洗外阴、尾根及臀部周围，再用温水浸湿的毛巾热敷，擦干外阴。

8.2.5深部输精

可采用单只独立包装的一次性深部输精管，其外套管、内导管及海绵头的组成，见NY/T636-

2021中8.3的结构图示。经产母猪采用输精头直径20mm(大号)输精管，后备母猪采用输精头直径

15mm(小号)输精管。

8.3输精操作

8.3.1输精操作按以下步骤

a)从密封袋中取出输精管，检查海绵头是否松动，海绵头涂润滑剂，手不得接触输精管前2/3

部分。

贵州省标准化公共服务平台b）输精管以45°角向上插入母猪生殖道内，当有阻力时，缓慢逆时针旋转，同时前后移动，直

到输精管被子宫颈锁定(轻轻回拉不动)。

c）待母猪平静5min左右后，将内管缓慢向前推送，如遇阻力时可等待20s～30s继续向前推

送，通过3～5个褶皱，感觉前方空旷即可，插入深度一般为10～15cm。

d)从精液贮存箱取出解冻并分装好的精液瓶（袋），再次确认公猪品种、耳号及配种预案。摇

均精液，剪去瓶嘴（或袋口），连接内接内导管输精口。

e)通过母猪子宫收缩自动吸收精液或缓慢挤压输精液瓶（袋）向子宫内输入精液，如果出现挤

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压困难，可适当回撤内导管或暂停缓解母猪紧张片刻，再次挤压精液瓶（袋），精液输入过程约

3min～5min。

注：如发生回流，可能输精管未处于正确位置，需要轻轻抽出内管再重新插入。

f)输精完成后，将内管连同输精瓶（袋）一并缓慢抽出，内管抽出外管抬高保持30s左右，再

顺时针轻轻拔出外管。

g)为防止精液倒流可采取人工强制驱赶母猪前行活动、双手按压抚摸母猪背部两侧或驱赶公猪

与母猪产生性刺激，促使子宫收缩、蠕动形成负压减少精液倒流。

8.3.2记录母猪深部输精的相关信息，记录表见附录C。

9妊娠检查

9.1通过外部观察，母猪配种后第2个发情期内未出现返情，则可初步判定为母猪已妊娠。

9.2必要时采用B超检查判断母猪是否妊娠。

10生产记录表

输精后应记录输精母猪的品种、耳号、发情日期、输精日期、输精操作人员及使用细管冷冻精液

的公猪耳号等信息，具体见附录C.2。

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附录A

（资料性附录）

冻精解冻后稀释液的配制

解冻后稀释液配方

葡萄糖（C6H12O6）3.7g

柠檬酸钠（C6H5Na3O70.6g

碳酸氢钠(NaHco2)0.125g

乙二胺四乙酸（EDTA）0.125g

氯化钾（KCL2）0.075g

双蒸水（ddH2O）100mL

解冻后稀释液配制：电子天平分别称取葡萄糖37g、无水柠檬酸钠6g、碳酸氢钠1.25g、乙二胺四乙

酸（EDTA1.25g）、氯化钾0.75g放入洁净的锥形瓶中，慢慢加新鲜制取的双蒸水1000mL，搅拌均匀，

用过滤纸过滤入另一锥形瓶中，煮沸15分钟，放置至常温备用，用前置于36℃水浴锅中加热。

商品解冻稀释液按说明书稀释使用

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附录B

（规范性附录）

细管冷冻精液深部输精剂量

表1细管冷冻精液深部输精剂量要求

供体公猪供体公猪

项目剂量为引入品种、为地方品种（推

备注

培育品种广利用）

剂量（mL）/支中型0.5mL≥0.45

活力（前向运动精子％）≥45≥40

前向运动精子数/（108个/

细管冷冻精液N≥2.0N≥1

支）

质量

精子畸形率％≤20

受体母猪

受体母猪

项目剂量为引入品种、

为地方品种

培育品种

GB232382021.4.

母猪需要输配的有效目标精

≥12个亿≥10个亿表1。

子数（108个/剂）

每个输精瓶需要解冻稀释细

深部输精12个亿/N10个亿/N

管冻精数(支)

GB232382021.4.

深部输精量剂量（mL）/份4040表1。