微生物基础知识培训

微生物基础知识培训一、微生物的了解1.微生物的定义在自然界里，有许多是肉眼看不见的，必须是用光学显微镜或电子显微镜放大几百倍，甚至几万倍才能观察到的微小生物称微生物。2.微生物的特点数量多、分布广；新陈代谢旺盛，繁殖速度快；变异快、适应性强。3.微生物的特殊性能繁殖的活性细胞生物；分布不均匀；多数处于受损伤状态；生存环境的多样性和复杂性。4.微生物的分类微生物可分为细菌、放线菌、真菌、病毒和原核生物类（立克次氏体、衣原体、支原体、螺旋体）等五大类。引起人类疾病的微生物主要为：病毒、细菌和真菌。（1）病毒病毒体积最小，结构简单，没有细胞结构，而只能寄生在其他生物的细胞内，利用宿主细胞的酶系统和营养物质进行生长繁殖的原生物。病毒的形状多呈球形，少数呈杆状或砖块状。平均大小只有0.1μm，比细菌约小10倍。最小的病毒只有0.01μm，接近蛋白质分子。病毒大多能通过滤菌器，故称滤过性病毒。（2）真菌真菌比细菌大十倍左右。特点是真菌有菌丝体和孢子，在温度适宜时容易生长。真菌在自然界广泛存在。真菌分单细胞真菌和多细胞真菌，单细胞真菌通称为酵母菌，平均大小约为5.0μm，多细胞真菌通称为霉菌，菌体呈丝状，宽度平均约为3.0~10μm，长度无法计算。（3）细菌细菌能独立地生长繁殖，是非常小的单细胞微生物。在一定的条件下，细菌可发展成为芽孢，芽孢可以在干燥的环境中长期处于休眠状态，一旦条件适宜又会变成细菌。5.细菌的生长繁殖条件（1）水：水是细菌生活所不可缺少的物质。（2）气体：氧、二氧化碳和氨气与细菌的生长繁殖有密切的关系。（3）温度：细菌的冷冻干燥环境中，不易死亡、变异。在5℃以下处于生长静止状态，在10～25℃时缓慢生长，到37℃时能正常生长。一般病原菌的适宜的温度基本上与人的体温相同，实验室培养细菌均采用37℃。

（4）酸碱度：酸性条件碱性条件生长情况PH6～7生长最繁盛PH4～6PH7～9生长良好PH3～4PH9～10略受抑制，尚能生长PH2～3PH10～11生长受严重抑制PH≤1.5PH≥12不能生长（5）渗透压：微生物的细胞膜具有半透膜的性质，可以透水但对于其他物质的透过则有选择性，低渗药液可使细胞膜膨胀，但高渗药液可使细胞内水分渗出而处于脱水状态，所以一般微生物在浓盐、糖溶液中不易生长繁殖。6.细菌的代谢产物细菌在生长繁殖时，可产生大量的代谢产物。有些代谢产物对人体有益，如：抗生素、维生素等。有些则对人体有害，如：热原等。1、微生物污染的途径常见的微生物污染是空气和水的污染。（1）空气空气并不是微生物产生和生长的自然环境，没有细菌等微生物生长所需要的足够的水分和可利用的养料，但由于人们的生产和生活活动，使空气中存在某些微生物，包括一些病原微生物，如结核杆菌、白喉杆菌、金葡菌、流感病毒、麻疹病毒等，可成为空气传播疾病的病原。同时部分细菌、酵母菌及霉菌等微生物可附着于空气中的尘埃、飞沫上进入人体或药品而引起疾病和污染。（2）水水中微生物很多，无论地面水、地下水甚至雨水或雪水都含有多种微生物，水中的微生物大部分来自土壤，98%的污染是革兰氏阴性菌，也有其他微生物，如酵母菌、丝状真菌和放线菌等。二、微生物污染（3）建筑物与设备在临近公路和泥土、在潮湿环境内、大开窗和自然通风等建筑物内都有大量的微生物污染。厂区的排水渠、废水、废气的排放处、垃圾堆放处等，皆为微生物滋生物。设备中特殊的不易清洗的部位等“死角”，是微生物繁殖的场所。由于残留的药物，易于微生物生长。（4）原料植物性药材有适合微生物繁殖的营养物质，如：蛋白质、糖类、维生类、油脂等，因此，在条件适宜时，所带的微生物易于繁殖而致使药材发生霉变。原料贮存是增加或减少污染微生物存活率、增殖率的重要环节。（5）包装材料包装对药品的污染和保护都是十分重要的。优质的包装材料能防止外来微生物的污染。但包装材料本身污染微生物，却给被包装药品带来污染。包装材料污染程度取决于材料本身的成份和贮存有条件。（6）人员人是引起药品污染的最大污染源之一。包括自身产生和携带的两类污染源。1)人体自身产生的污染物自身产生：指的是头发、皮肤等脱落物；体表与呼吸道的排出物。

a.体表脱落物人体头发经常脱落，一个人每天大约要掉5根头发，有些人可多达60根。人的自然活动，每分钟能产生千百万粒大于0.3μm的粒子，粒子大部分是皮屑，其大小为10～300μm。人体各部位、创伤部位等都带有大量的细菌。人说话、咳嗽、打喷嚏等都会产生很多的微生物。b.体表排出物体表的排出物有多种，汗液、鼻屎、耳内分泌物，眼泪、眼屎。汗中有尿素、尿酸、乳酸、盐等废物，约占汗水的20%，每天分泌的皮脂约20～40克。

c.呼吸道排泄物呼吸、咳嗽都会使空气中的水份微滴大量增加。在洁净室内除正常呼吸之外，打喷嚏可以使周围空气中的0.2～50μm的尘粒骤然增加5～20倍。研究表明，呼吸中细菌发散量为3000～5000个/分钟。咳嗽一次可达710个，一次喷嚏可产生62000个细菌。d.人体的微生物人的机体也会给微生物的生长繁殖创造一个良好的环境。人的体表、鼻孔、喉咙、口腔以及肠道里面生长着各类微生物。微生物最多的部位是头、胯、腋窝、膝盖、手脚。存在于人体有关部位的菌群称为“常居菌群”，“常居菌群”有“皮肤常居菌群”、“口腔常居菌群”、“肠道常居菌群”等。2）人体携带的污染物人体携带：指任何可能附着在人体、衣服上的各种尘埃微粒子和微生物。a.附着在头发、衣服和鞋上的外界环境污染物质，以及衣服和鞋上的残留物，特别是附着在鞋底和隐藏在缝隙中的大量微粒子。b.人身涂抹物，如头油、香水、唇膏、脂粉等。c.服装的磨损脱落物。（7）其它污染老鼠、苍蝇、昆虫等，其常携带各种病菌。不但携带伤寒杆菌和绿脓杆菌，而且还传播黄曲霉素和其他病原微生物。我们日常生产过程会有吗？污染类型传播污染媒介造成污染原因尘埃污染空气原材料？微生物水内包装材料？残留物表面设备容器？人员生产环境？操作人员？生产过程？三、防治微生物污染的措施1.事前控制（1）人员条件：体检（直接接触药品人员每年至少体检一次，传染病患者，体表有伤口者，皮肤病患者、药物过敏者不得从事直接接触药品生产）、人员培训；（2）生产过程风险分析与评估；（3）过程设计：灭菌工艺设计、工艺审查；（4）检验方法：设计、实验室控制；（5）设施、设备设计、安装与验证：洁净等级、在线清洗与灭菌装置、验证（工艺、公用系统、检验方法验证）；2.事中控制（1）人员卫生a.卫生习惯勤洗手；生产区严禁吃东西、存放个人物品；不得戴手表、饰品和化妆；b.人员着装按要求对工作服、鞋和帽进行穿戴、清洗和更换。c.口罩按要求带好口罩，口罩要遮住口、鼻；口罩要经常清洗、消毒或换新；尽量使用一次性性口罩；（2）工艺卫生按工艺要求进行消毒、灭菌；控制进入洁净区的人数，包括进入房间的人数。（3）环境卫生定期做好压差、温湿度、风速、尘埃粒子、沉降菌、浮游菌等空气净化洁净度的监测。

（4）物料制定合理的内控质量标准，购进物料必须符合质量要求；按规定取样，取样过程不得污染物料；做好物料微生物检验；（5）质量控制与记录：严格按清洁操作规程操作、做好清洁记录；（6）包装、储存和运输要有适宜的储存条件，防止储存过程质变或外界污染，物料包装要密封；进入洁净区的物料要脱包或消毒处理；运输过程确保产品污染；3.事后控制检验结果偏差和生产质量偏差调查处理（1）质量调查；（2）污染菌种的判定；（3）污染产品处理四、灭菌与消毒1.定义消毒：是指减少微生物，使之达到安全或者相当安全的方法。灭菌：使物料所含有的活细胞和微生物完全死亡的方法。消毒与灭菌的异同点：相同点：都是通过物理或化学的方法进行的。不同点：消毒对部分和表面微生物有效，对芽胞和孢子无效。2.灭菌方法（1）干热灭菌法本法一般用于灭菌后保持干燥状态的物品。火焰灭菌法：常用于接种工具、试管口、瓶口、棉塞等。干热空气灭菌法：160～170℃，2～4小时。（2）湿热灭菌法湿热灭菌法系指利用饱和水蒸气或沸水来杀灭微生物的方法，包括热压灭菌、流通蒸气灭菌、煮沸灭菌和低温间歇灭菌等方法。

湿热灭菌法由于蒸气比热大，空透能力强，容易使微生物中蛋白质成分变性和凝固，灭菌效果可靠，而且操作简便，所以是目前制剂生产中应用最广泛的一种灭菌方法。（3）辐射灭菌在一定条件下利用射线进行灭菌的方法。较常用的有紫外线，其他还有电离辐射（射线加快中子等），如钴60。波长在25000～80000纳米之间的激光也有强烈的杀菌能力,以波长26500纳米最有效。辐射灭菌法仅限于某一定材料，因所需设备复杂，难于广泛使用。（4）气体灭菌：环氧乙烷3.消毒方法（1）75%乙醇，用于手和设备的消毒。（2）3%的甲酚皂溶液，用于地漏和工具消毒（3）0.2%新洁尔灭溶液，用于地漏和工具