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文档简介
第1节培养基对微生物的选择作用1.能说出培养基的类型、用途和基本成分。2.比较消毒和灭菌的区别。3.举例说明常用的消毒与灭菌的方法。4.能记住培养基的配制方法。5.研究培养基对微生物的选择作用。一二一、培养基的制备1.培养基(1)概念培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的
营养基质,用以培养、分离、鉴定和保存各种微生物。(2)成分一般包括水分、碳源、氮源、微量元素和无机盐等。(3)种类培养基按物理状态可分为液体培养基和固体培养基。后者常用琼脂做凝固剂。一二2.培养基的配制和灭菌(1)培养基的制备包括配制和灭菌两大步骤。(2)配制关键:准确称量、调准pH、规范制作棉塞、彻底灭菌。(3)主要制作流程:称量→溶化→调pH→分装→加塞和包扎→灭菌→摆斜面及倒平板。(4)由于配制培养基的各类营养物质和容器等含有多种不同的微生物,配制好的培养基必须立即灭菌,及时杀灭培养基中的微生物,同时防止微生物大量繁殖造成的培养基营养成分的改变。(5)常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。通过高压、高温蒸汽使菌体蛋白质凝固变性以达到灭菌的目的。一二思考:日常生活中的牛奶在进入市场销售前要进行消毒,可采用哪种消毒方法呢?提示:用巴氏消毒法对牛奶进行消毒,可以杀死牛奶中的微生物,同时使牛奶的营养成分不会被破坏。一二二、培养基对微生物的选择作用1.菌落微生物通过某种方法接种到适于生长的固体培养基表面上,在适宜的温度下培养一段时间后,单个的菌体或孢子就可以生长繁殖成一个个肉眼可见的细胞群体,称为菌落。2.培养基对微生物的选择作用的原理不同种微生物对营养要求不一样,通过选择不同的培养基,人为控制培养基的pH、碳源、氮源、渗透压等条件,使选择的培养基利于某类或某种微生物的生长,而不利于其他微生物的生存,可以达到分离、培养不同微生物的目的。例如,细菌生长需要的氮源高,pH中性或微碱性,因此培养细菌常采用牛肉膏蛋白胨培养基。酵母菌和霉菌生长所需的碳源含量高,pH偏酸性,因此分离真菌常采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基。一二3.培养基对微生物的选择作用的意义在科研和生产实践中具有重要意义,它是分离和纯化不同类型微生物的基础。1.培养基的成分与微生物生长所需的营养
2.培养基的类型及其应用
3.配制培养基的原则(1)目的要明确(2)营养要协调(3)pH要适宜4.消毒与灭菌的比较二者的区别:前者去除的是部分微生物,后者去除的是所有微生物。5.三种常用灭菌方法的比较
6.倒平板的注意事项(1)培养基灭菌后,需要冷却到50~60℃后,才能用来倒平板。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。(2)倒平板前,要将装有培养基的锥形瓶瓶口通过火焰灼烧,以防止瓶口的微生物污染培养基。(3)平板冷凝后,需将平板倒置。平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。(4)倒平板过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,空气中的微生物可能会在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此不要再继续使用这个平板培养微生物。题型一题型二题型三题型四微生物的营养【例题1】
下列关于微生物的营养的说法,正确的是(
)A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源B.凡是碳源都能提供能量C.除水以外的无机物仅提供无机盐D.无机氮源也可能提供能量解析:对某些微生物来说,含C、H、O、N的化合物既可以作为碳源,又可以作为氮源。CO2可以作为光能自养微生物的碳源,但不能提供能量。CO2和N2是无机物,也可以分别作为微生物的碳源和氮源。硝化细菌所利用的氮源是无机氮源氨,同时氨也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能量。答案:D题型一题型二题型三题型四易错警示含C、H、O、N的化合物既可以作为一部分微生物的碳源,又可以作为氮源;有机碳源能提供能量,无机碳源不能提供能量。题型一题型二题型三题型四无菌操作相关技术【例题2】
细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理方法,这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌?(
)A.接种针、手、培养基 B.高压锅、手、接种针C.培养基、手、接种针 D.接种针、手、高压锅解析:高压蒸汽灭菌锅通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手可以进行消毒。火焰灼烧可以迅速彻底地灭菌,适用于微生物的接种工具,如接种针。答案:C题型一题型二题型三题型四反思领悟微生物培养过程中的无菌操作包括消毒和灭菌两大类,各自具有不同的方法。应对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒;对用于培养微生物的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。题型一题型二题型三题型四培养基的制备【例题3】
下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述,错误的是(
)A.操作顺序为称量、溶化、分装、调pH、加塞和包扎、灭菌、摆斜面及倒平板B.将配制的培养基分装入试管或锥形瓶内C.待培养基冷却至50~60℃后,制成斜面或平板后备用D.配制好的培养基必须立即灭菌解析:制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序是称量、溶化、调pH、分装、加塞和包扎、灭菌、摆斜面及倒平板。答案:A题型一题型二题型三题型四选择培养基的特点与应用【例题4】
氯苯化合物是重要的有机化工原料,不易降解,会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(图甲)筛选出能高效降解氯苯化合物的微生物SP1菌。培养基配方如下表。题型一题型二题型三题型四(1)配制Ⅱ号固体培养基时,除添加Ⅱ号液体培养基成分外,还应添加1%的
。
(2)培养基配制时,灭菌与调pH的先后顺序是
。(3)从用途上来说,Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于
培养基和
培养基。在Ⅱ号培养基中,为SP1菌提供氮源的成分是
。
(4)在营养缺乏或环境恶劣时,SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体,这种休眠体被称为
。
题型一题型二题型三题型四(5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养,得到生长曲线(图乙)。从图乙可知,SP1菌在
的培养条件下最早停止生长,其原因是
。题型一题型二题型三题型四解析:(1)固体培养基必须含有适量的琼脂。(2)配制培养基时应先调pH,后灭菌。(3)Ⅰ号培养基是为了获得更多的菌株,属于通用培养基,Ⅱ号培养基是为了选择出SP1菌株,属于选择培养基,Ⅱ号培养基成分中含N物质为硝酸铵,则应由它为SP1菌株提供氮源。(4)在恶劣环境下,一些菌体会形成芽孢休眠体,以抵抗不良环境的影响。(5)SP1菌株以氯苯为碳源,当氯苯耗尽时,菌株因缺少碳源而不能继续生存,故氯苯含量越少,SP1菌株越早停止生长。答案:(1)琼脂(2)先调pH,后灭菌(3)通用选择硝酸铵(4)芽孢(5)20mg/L氯苯碳源最早耗尽123451.下列叙述错误的是(
)A.微生物学实验一般都要求在无菌条件下进行B.细菌生长只需要氮源C.培养基的配制包括配制和灭菌两大步骤D.不同培养基对微生物的选择作用是分离和纯化不同类型微生物的基础答案:B123452.在微生物培养过程中,需要对培养基等进行灭菌,其标准是(
)A.杀死所有的病原微生物B.杀死所有的微生物C.杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子D.使病原菌不生长答案:C123453.下列有关培养基配制的叙述,正确的是(
)A.任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水B.碳源和氮源必须具有一定比例,碳元素的含量最多,其次为氮元素C.微生物的生长除受营养因素影响外,还受到温度、pH、氧、渗透压等的影响D.营养物质的浓度越高越好答案:C解析:自养微生物的培养基不需要加碳源,自生固氮菌的培养基不需要加氮源。培养基中碳源和氮源必须具有一定比例,但含量最多的元素是氧。营养物质的浓度并不是越多越好,浓度过高会导致培养物细胞失水。123454.无菌技术常围绕着如何避免杂菌的污染展开,下列常见的无菌技术中,属于灭菌处理的是(
)A.操作者的双手用酒精擦拭B.实验室用紫外线照射C.对接种环进行灼烧处理D.水源用氯气处理答案:C解析:灭菌是用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法。123455.微生物培养过程中,肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是(
)A.细菌的大小、形状、颜色
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