2025年粤教版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案

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A.甲、乙、丙黏性末端是由两种限制性内切核酸酶作用产生的B.图乙中的酶切位点在A与G之间C.如果甲中的G突变为A，则原限制性内切核酸酶不能识别该切割位点D.构建基因表达载体所用的限制酶和DNA连接酶分别作用于a处和b处2、下列有关细胞工程的说法正确的是A.在愈伤组织形成过程中，除适宜的温度、pH和无菌条件外，还需要有植物激素进行调节B.植物体细胞杂交前需要用酶去除细胞壁获得原生质体，然后再用灭活的病毒促进融合C.动物细胞核移植技术可以使生物多样性大大增加D.动物细胞培养应在含5%CO2的恒温箱中培养,CO2的作用是为细胞提供碳源3、“设计试管婴儿”与一般所说的“试管婴儿”多了哪一步（）A.体外受精B.胚胎移植C.基因检测D.细胞核移植4、Tet3基因控制合成的Tet3蛋白具有解除DNA甲基化的功能。利用DNA甲基化抗体对小鼠胚胎发育过程中的各期细胞进行免疫荧光检测，结果如下图。下列相关叙述正确的是（）

A.同卵双胞胎中一人的DNA被甲基化，则二人的DNA碱基序列就不同B.受精卵中父源染色体与母源染色体的甲基化同步进行.C.前3次卵裂中，第3次卵裂的子细胞中荧光强度最低D.免疫荧光的检测原理是碱基的互补配对5、下列关于生物技术安全性与伦理问题的叙述，正确的是（）A.利用转基因技术制造的新型致病菌不会引起人体发生特异性免疫B.生殖性克隆与治疗性克隆的本质区别在于后者不会面临伦理问题C.为争夺科学技术的制高点，我们不能回避技术安全和伦理的争论D.只要有证据表明生物技术产品有害，就应该禁止生物技术的使用6、图是采用平板划线法的划线后的示意图。下列有关说法错误的是（）

A.划线前，应在培养皿的皿底外侧用记号笔画出直线进行分区、标号B.在培养基表面连续划线，除第一次划线外，每一次划线都从上一次划线的末端开始C.接种和划线都要在酒精灯火焰旁进行D.该实验中，接种环的灼烧次数有3次评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)7、营养缺陷性菌株是野生型菌株经过人工诱变或自发突变失去合成某种成长因子的能力；只能在补充了相应的生长因子的基本培养基中才能正常生长的变异菌株。某研究小组对酵母菌用紫外线照射后将其接种到甲培养皿的培养基上，一段时间后将甲培养皿的菌落影印接种（不改变菌落位置）到乙；丙两培养皿的培养基中，进一步培养得到如下图所示结果。

下列分析正确的是（）A.接种到甲培养皿采用的是稀释涂布平板法B.甲、丙两培养皿中的培养基是基本培养基C.甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少D.甲、乙、丙三个培养皿都可能存在营养缺陷型8、下列关于生物技术与伦理问题的正确观点是（）A.利用体外受精技术筛选早期胚胎性别，设计试管婴儿B.基于科学和理性讨论转基因作物的安全性问题C.当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验，但不反对治疗性克隆D.大量引入国外转基因作物与本地近缘作物品种杂交9、下列关于生物技术的叙述，不正确的是（）A.烟草叶片可离体培养产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖B.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒C.目的基因必须位于重组质粒的起始密码和终止密码之间，才能进行转录D.目的基因与荧光标记的DNA探针进行分子杂交，能形成磷酸二酯键10、下列关于基因工程中的基本工具的说法中，正确的是（）A.基因工程中的工具酶有限制性内切核酸酶和DNA连接酶B.DNA连接酶可将任意的DNA片段通过形成磷酸二酯键而连接起来C.质粒上必须有标记基因才可作为载体D.限制性内切核酸酶一般不仅仅能切割外源DNA，也能切割自身的DNA分子11、微卫星DNA是广泛分布于真核生物基因组中的简单重复序列。由于重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性并且数量丰富，因此，微卫星DNA可以作为分子标记，并有着广泛应用。根据“微卫星DNA”的特点判断，这种分子标记可应用于（）A.人类亲子鉴定B.种群遗传多样性研究C.诱导基因突变D.冠状病毒遗传物质测序12、下面为制备单克隆抗体过程示意图，下列相关叙述错误的是（）

A.①表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾脏中提取的B.④中的筛选是通过抗原—抗体反应进行的C.④中的筛选是为了获得能产生多种抗体的杂交瘤细胞D.⑤可以无限增殖13、熔喷布是口罩生产的重要原料；主要成分是聚丙烯，其易降解程度是评价口罩合格性的重要指标之一。某研究小组从土壤中分离出高效降解聚丙烯的细菌，部分流程如图所示。下列说法正确的是（）

A.②中的选择培养基以聚丙烯为唯一碳源B.步骤③所用的接种工具是接种环C.在配制步骤②、③的培养基时，应先调pH后高压蒸汽灭菌D.对③中平板上的菌落进行计数，可以计算出土壤浸出液中细菌的浓度14、抗菌肽又名多肽抗生素，广泛存在于昆虫以及两栖类动物、哺乳动物体内，具有广谱抗菌活性。其作用原理是在细菌细胞膜上形成跨膜的离子通道，造成细胞内容物泄漏，最终导致细菌死亡。最新研究表明，某些抗菌肽对癌细胞甚至感染了病毒的宿主细胞均具有杀伤作用。下列相关叙述正确的是（）A.从免疫调节的方式分析，抗菌肽参与特异性免疫过程B.抗菌肽改变了细胞膜的通透性，使细胞不能保持正常渗透压而死亡C.利用转基因技术生产抗菌肽时，常选用大肠杆菌作为受体菌D.对抗菌肽的研究可为治疗癌症、新型冠状病毒肺炎等提供新思路评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)15、DNA连接酶与DNA聚合酶作用的异同:

DNA聚合酶只能将______加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接_____的末端，形成磷酸二酯键。16、通常将DNAD的羟基（—OH）成为_______________端，而磷酸基团的末端成为___________端。由于_______________，因此DNA需要引物，因此DNA的合成方向总是从_________________延伸。17、蛋白质工程是指以______作为基础，通过______，对现有蛋白质进行_____，或制造一种______，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产______的蛋白质）

18、动物细胞培养的条件：_____、_____、_____、_____等。19、科学家采用定点诱变的方法构建T4溶菌酶的新蛋白质，发现其中一种新蛋白质的第9和第164位氨基酸残基被转换为半胱氨酸残基，并形成一个二硫键。这种新蛋白质的热稳定性会有什么变化？这项技术的要点是什么？_________评卷人得分四、判断题(共2题，共20分)20、胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。()A.正确B.错误21、利用基因工程技术建立移植器官工厂是目前基因工程取得实际应用成果非常多的领域。（选择性必修3P90）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共12分)22、霍山石斛多糖具有显著的免疫调节效应。为探究引起该免疫调节效应的物质是大分子霍山石斛多糖还是多糖小分子片段；某科研小组进行了如下实验：将霍山石斛的某种多糖与牛血清蛋白偶联制作成抗原；并生产出单克隆抗体，利用该抗体探究霍山石斛多糖引起的免疫调节效应。制备单克隆抗体的流程如图所示。请回答：

（1）图中细胞a是免疫后小鼠体内的___________，通常情况下该细胞不能进行增殖，原因是___________。

（2）与植物原生质体融合相比，①过程特有的诱导因素是___________。若只存在细胞的两两融合，融合体系中除未融合的细胞外，还可能有__________和__________。筛选时，需用特定的____________培养基才能把实验所需细胞选择出来。

（3）在筛选过程中需进行__________和__________，以便获得足够数量的能分泌特异性抗体的细胞，还需用___________作为检测特异性抗体的物质。

（4）将筛选出的细胞注射到小鼠腹腔内，可从小鼠____________中提取单克隆抗体。

（5）研究发现，霍山石斛多糖可降解产生小分子片段，这些片段不能与获得的单克隆抗体结合。科研小组用霍山石斛多糖给小鼠灌胃后，取出小肠、肝、脾、肾和肺进行抗原-抗体杂交实验，发现除肠腔外其他组织均未检测到霍山石斛多糖。该实验____________（填“能”或“不能”）说明引起免疫调节效应的是大分子霍山石斛多糖，理由是___________。23、氨基丁酸（GABA）是具有降血压；抗焦虑等功能的水溶性氨基酸。科研人员通过实验研究了白方腐乳在前发酵盐腌和后发酵过程中GABA的含量变化；为寻找生产富含GABA腐乳的工艺奠定基础。实验步骤如下：

①豆腐白坯表面接种毛霉孢子后；在适宜的温度和湿度下培养48h，获得毛坯。

②将毛坯分层整齐地摆放在瓶中；盐腌5天。

③腌制后加入卤汤；置于28℃恒温箱中后发酵90天。

④分别采集各时段的腐乳坯样品；测定GABA含量，结果如图。

请分析并回答问题：

（1）前发酵过程中，毛坯的GABA含量发生明显变化的原因是毛霉产生的_______促进蛋白质水解产生GABA。

（2）步骤②中，加盐腌制的正确操作是______________。此过程腐乳干重中的GABA含量下降，一方面与食盐抑制毛霉生长，酶活性降低有关；另一方面，豆腐中的水分渗出，部分GABA会____________而导致测定值减小。

（3）后发酵所加的卤汤中，具有抑菌防腐和调味的成分主要有_______。此过程中，发酵_______天后的白方腐乳出厂销售比较适宜。24、进行垃圾分类收集可以减少垃圾处理时间；降低处理成本。科研小组欲分离及培养若干种微生物用于处理湿垃圾，如剩菜剩饭；骨头、菜根菜叶、果皮等食品类废物。请分析回答：

(1)科研小组从土壤中筛选产脂肪酶的菌株时，配制的培养基需要以__________为唯一碳源。制备固体培养基的步骤是；计算→称量→溶化→__________→__________。接种微生物最常用的方法是__________。

(2)获得产脂肪酶的菌株后，在处理含油垃圾的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。现获得可产脂肪酶的A、B两种菌株，并进行了培养研究，结果如图1所示。据图分析，应选择菌株__________进行后续相关研究，理由是______________________________。

(3)科研小组从土壤中筛选淀粉分解菌时，加碘液染色后，选择培养基上出现了A、B和C三种菌落（如图2所示）。若要得到淀粉酶活力最高的菌株，应选择__________（填“A”“B”或“C”）菌落进一步纯化。经检测A菌落为硝化细菌，A菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈的原因是____________________。

(4)在微生物分解处理垃圾的过程中，纤维素分解菌能够分泌纤维素酶，该酶可将纤维素分解为葡萄糖。纤维素酶由三种复合酶组成，其中__________酶可将纤维二糖分解为葡萄糖。25、柑橘溃疡病是由地毯草黄单胞杆菌引起的；发生在柑橘的一种病害；植株受害后会发生落叶、落果，严重时叶片落光，整株枯死。利用基因工程将来自水稻的Xa27基因导入柑橘可获得抗柑橘溃疡病的植株，利用植物组织离体培养技术则可培育无病毒植株。回答下列问题：

(1)为了获得脱毒苗，通常可以选取植株______附近的组织进行离体培养，选取该部位组织的原因是______。

(2)如图1表示科研人员利用柑橘幼苗获得抗病转基因植株的过程：

①基因表达载体必需的结构除复制原点、启动子、终止子、目的基因外，还有______。

②共培养时，Ti质粒的作用是______。

③共培养后，要利用选择培养基进行培养，目的是______。

④再分化过程中，诱导愈伤组织生根、生芽的先后顺序为______。

⑤从个体生物学水平鉴定柑橘再生植株时可采用______（填具体操作）的方法。经鉴定有几棵植株没有抗病的能力，分别提取这几棵植株的DNA，依据______的特异性碱基序列设计引物，扩增后利用______进行检测；结果如图2。

据图2分析，植株A、E、F不具有抗病能力的原因可能是______，植株B、C不具有抗病能力的原因可能是______。评卷人得分六、综合题(共4题，共8分)26、某研究小组将含有相同浓度抗生素I~Ⅳ的四个纸片分别贴放在生长有测试菌的琼脂平板上；在合适的温度条件下孵育16h，结果如图所示：

（1）衡量本实验结果的指标是_____。

（2）细菌的抗药性产生于环境变化之_____（填“前”“中”或“后”）。

（3）在相关试验操作均严谨规范的情况下；在含有抗生素Ⅳ的纸片周围出现了较大的抑菌圈，抑菌圈中存在有若干个测试菌的菌落。

试对上述现象的成因作出分析：_____。

（4）本实验的目的是：_____。

（5）若挑选抗生素Ⅲ；并通过稀释法（下图中I~Ⅳ代表不同浓度抗生素Ⅲ）来确定其能抑制测试菌肉眼可见生长的最低药物浓度称为最小抑菌浓度（MIC）。

结合图中所示的实验结果，其中抗生素Ⅲ的最小MIC是_____。（用I~Ⅳ表示）27、酵母菌在工业生产中具有重要的用途；常用YPD进行培养。YPD又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，其配方为1%酵母膏；2%蛋白胨、2%葡萄糖。酵母膏是指采用新鲜酵母为原料，经酶解自溶、分离过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。请回答：

（1）YPD中为酵母菌提供氮源的是________________。一位同学在用稀释涂布平板法纯化土壤中的酵母菌时；发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是______________。

（2）对酵母菌进行计数时；既可在显微镜下用__________________直接计数，也可选用_______________法统计活菌数目，选用后者测定菌体密度时，实际活菌数量要比测得的数量多，是因为_________________________。

（3）在对酵母菌的扩大培养过程中，将发酵液稀释107倍后，每个平板使用0．1毫升进行接种，理论上平板上生长的平均菌落数为________时，可认为发酵液达到每毫升6×109个活细胞的预期密度。28、CD47是一种跨膜糖蛋白；肺癌；结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量明显高于正常细胞。研究发现，利用抗体抑制肿瘤细胞表面的CD47蛋白的活性，可促进巨噬细胞吞噬肿瘤细胞。为制备抗CD47的单克隆抗体，科学家按如下流程进行相关实验。请回答下列问题：

(1)上图EcoRI等均为限制酶，Kanr、Tcr分别为卡那霉素抗性基因、四环素抗性基因。为了构建基因表达载体，应该选用___________酶切割外源DNA和质粒DNA。

(2)为筛选成功导入重组质粒的大肠杆菌，利用图中两种标记基因，筛选出_________________的大肠杆菌；利用该菌种获得大量CD47蛋白。

(3)下图①是指从小鼠________中获得免疫后B细胞，经过选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行操作②______________才可获得能分泌抗CD47抗体的杂交瘤细胞。体外培养该细胞获得大量单克隆抗体，需要满足以下条件：无菌无毒环境，充足的营养和适宜温度与pH，含有____________的气体环境。

(4)为验证抗CD47抗体对巨噬细胞吞噬肿瘤细胞的促进作用，研究人员将巨噬细胞和肿瘤细胞共同培养，加入适量抗CD47抗体，测定巨噬细胞的吞噬能力。要得出该结论还需要进行的操作是________________________________。29、研究人员将从种植烟草的土里分离得到的尼古丁（C10H14N2）降解菌株SC接种到含尼古丁的培养基中；置于摇床恒温（30℃）培养并定时取样，测定并计算发酵液中的尼古丁浓度和菌体浓度，得到的结果如图所示。回答下列问题：

(1)发酵液中的尼古丁为菌株SC提供的营养物质有_____，此外培养基中还需要加入_____等物质。

(2)分离菌株SC时可用的接种方法是稀释涂布平板法或___。当培养最少___h时；菌株SC的数量即可达到该种群的环境容纳量。

(3)三位同学用稀释涂布平板法测定某一时间段内菌株SC的数量，在对应稀释倍数为106的稀释液中各取0.1mL涂平板；得到以下统计结果:

甲同学涂布了两个平板；统计的菌落数是236和260，取平均值248；

乙同学涂布了三个平板；统计的菌落数是209；240和250，取平均值233；丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163。

在三位同学的统计中，___同学的统计是正确的。据此计算，每克土壤样品中含该细菌____个。稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是______。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、C【分析】【分析】

1、关于限制酶：（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（3）结果：形成黏性末端或平末端。2、分析题图：图中a处为磷酸二酯键，b处为氢键。产生甲黏性末端的限制酶的识别序列为GAATTC；产生乙黏性末端的限制酶的识别序列为CAATTG，产生丙黏性末端的限制酶的识别序列为CTTAAG。

【详解】

A；根据题图结果可知；切割甲的限制酶的识别序列是—GAATTC—，切割乙的限制酶的识别序列是—CAATTG—，切割丙的限制酶的识别序列是—CTTAAG—，故甲、乙、丙三个黏性末端是由三种限制酶作用产生的，A错误；

B；图乙中的酶切位点在A与C之间；而不是A与G之间，B错误；

C；限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列；如果甲中的G发生突变，则限制酶不能识别该切割位点，C正确；

D、构建基因表达载体所用的限制酶和DNA连接酶的作用位点均是磷酸二酯键，b处为氢键；D错误。

故选C。2、A【分析】【分析】

【详解】

A；在脱分化形成愈伤组织的过程中；除适宜的温度、pH和无菌条件外，还需要生长激素和细胞分裂素进行调节，A正确；

B；植物原生质体融合不能用灭活的病毒；该方法用于动物细胞融合，B错误；

C；动物细胞核移植技术属于无性繁殖；不能使生物多样性增加，C错误；

D、动物细胞培养应在含5%CO2的恒温箱中培养,CO2的作用是调节pH；D错误。

故选A

【点睛】3、C【分析】【分析】

1；试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

2；设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎；然后从中选择符合要求的胚胎，再经移植后产生后代的技术。

【详解】

结合分析可知；“设计试管婴儿”与一般所说的“试管婴儿”相比，多了一步基因检测的过程，C符合题意。

故选C。4、C【分析】【分析】

1；DNA分子的特异性取决于碱基序列不同；

2；卵裂的方式是有丝分裂；细胞数目随分裂次数而成倍增加；

3；免疫荧光的检测是抗原和抗体的特异性结合。

【详解】

A；DNA甲基化后；DNA碱基序列未发生变化，A错误；

B；由题图可知；受精卵中父源染色体DNA甲基化水平与母源染色体DNA变化不同步，B错误；

C；由题图可知；8细胞时DNA甲基化水平最低，故荧光程度最低，8细胞为第三次卵裂，C正确；

D；免疫荧光的检测是抗原和抗体的特异性结合；D错误。

故选C。5、C【分析】【分析】

转基因技术作为一项技术本身是中性的；由这项技术研发出来的产品需要经过一系列安全性评价，符合相应标准后才能上市，理性看待转基因技术不是人云亦云，更不是诋毁科学创新；造谣惑众。

【详解】

A；利用转基因技术制造的新型致病菌；对于人体来说属于外来物质，也会引起人体发生特异性免疫，A错误；

B；生殖性克隆与治疗性克隆的本质区别在于前者目的是产生个体；后者是为了治疗疾病，B错误；

C；转基因技术作为一项技术本身是中性的；为争夺科学技术的制高点，我们不能回避技术安全和伦理的争论，C正确。

D；科技是一把双刃剑；要发展有利的一面，限制有危害的一面，不能因噎废食，D错误。

故选C。6、D【分析】【分析】

平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。不能用于计数。

【详解】

A；实验过程中使用的平板较多；避免混淆，使用前做好标记，应在划线前，在培养皿的皿底外侧用记号笔画出直线进行分区、标号，A正确；

B；在培养基表面连续划线；除第一次划线外，每一次划线都从上一次划线的末端开始，目的是使微生物数目随划线次数的增加而逐渐减少，最终分散成单个细胞，B正确；

C；微生物实验操作要防止杂菌污染；因此接种和划线都要在酒精灯火焰旁进行，C正确；

D；每次划线前后都要对接种环进行灼烧灭菌；该实验划线三次，因此灼烧次数为4次，D错误。

故选D。二、多选题(共8题，共16分)7、A:C【分析】【分析】

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落。

【详解】

A；甲培养皿的菌落均匀分布；接种方法应为稀释涂布平板法，A正确；

B；甲、丙培养基菌落数目多；包括野生型酵母菌菌株和某种营养缺陷型酵母菌菌株，乙培养皿菌株是某种营养缺陷型酵母菌菌株，乙培养皿的培养基是基本培养基，甲和丙是加入了同种营养成分的培养基，B错误；

C；由于基因突变具有不定向性；接种到甲培养皿的酵母菌可能还有其他营养缺陷型，且有些菌落不一定由一个酵母菌形成，所以，甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少，C正确；

D；乙培养皿的培养基是基本培养基；形成的菌落只可能是野生型菌落，D错误。

故选AC。8、B:C【分析】【分析】

转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应；过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

我国反对以克隆人为目的任何实验和举动；主要是基于以下四方面的伦理考虑：

1；克隆人是对人权和人的尊严的挑战；

2；克隆人违反生物进化的自然发展规律；

3；克隆人将扰乱社会家庭的正常伦理定位；

4；克隆人的安全性在伦理上也难以确认。

【详解】

A；设计试管婴儿性别会引起性别比例失调；违背伦理道德，我国不允许利用体外受精技术筛选早期胚胎性别，A错误；

B；基于科学和理性讨论转基因作物的安全性问题；B正确；

C；当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验；但不反对治疗性克隆，C正确；

D；大量引入国外转基因作物与本地近缘作物品种杂交；可能造成基因污染和环境安全，D错误。

故选BC。9、C:D【分析】【分析】

基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建（核心）；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。细胞工程中用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体和用胰蛋白酶处理动物组织得到单个细胞都采用了酶的专一性原理。诱导原生质体融合和动物细胞融合都采用了生物膜的流动性原理；植物组织培养的原理是细胞的全能性，动物细胞培养的原理是细胞增殖。

【详解】

A；由细胞工程原理可知；植物细胞或组织离体培养可以得到植物个体，动物细胞可以进行培养而实现增殖，A正确；

B；细胞工程应用非常广泛；动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒，B正确；

C；基因表达载体构建必须使目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间；这样才能有利于目的基因表达，C错误；

D；DNA分子杂交的原理是碱基互补形成杂交带；不能产生磷酸二酯键，D错误。

故选CD。10、A:C【分析】【分析】

基因工程的工具：

（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。

（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

（3）运载体：常用的运载体：质粒；噬菌体的衍生物、动植物病毒。

【详解】

A；限制性内切核酸酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶；A正确；

B；DNA连接酶只能催化具有互补黏性末端或平末端的DNA片段之间形成磷酸二酯键；B错误；

C；质粒上必须有标记基因才可作为载体；便于筛选含有目的基因的受体细胞，C正确；

D；限制性内切核酸酶的作用是不切割自身DNA分子；只切割外源DNA，以保护自身DNA的安全，D错误。

故选AC。

【点睛】11、A:B【分析】【分析】

微卫星DNA是真核生物基因组中的简单重复序列；由于重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性并且数量丰富，可以作为分子标记应用于人类亲子鉴定；种群遗传多样性研究。

【详解】

AB；微卫星DNA是真核生物基因组中的简单重复序列；且重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性，因此可用于人类亲子鉴定、物种间亲缘关系鉴定、物质和遗传多样性的研究等，AB正确；

C；诱导基因突变的因素有物理因素、化学因素和生物因素；与微卫星DNA的特性无关，C错误；

D；冠状病毒的遗传物质是RNA；其测序与微卫星DNA的特性无关，D错误。

故选AB。12、A:C【分析】据图分析；①过程表示获取B淋巴细胞和骨髓瘤细胞；②过程促进细胞融合，采用离心；电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导，筛选出杂交瘤细胞；④过程通过专一抗体检验阳性，筛选出能够产生特异性抗体的细胞群；⑥过程表示动物细胞培养。

【详解】

A；B淋巴细胞是从小鼠的脾脏中提取的；骨髓瘤细胞不是，A错误；

B；④中筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞；可以通过检测抗原、抗体反应，如果有反应说明表达了抗体，B正确；

C；④中的筛选是为了获得能产生一种抗体的杂交瘤细胞；C错误；

D；⑤可以无限增殖；也能产生特异性抗体，D正确。

故选AC。13、A:C【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；根据题意；熔喷布是口罩生产的重要原料，主要成分是聚丙烯，本实验目的是筛选出可以高效降解一次性口罩的细菌，②中的选择培养基要以聚丙烯为唯一碳源，A正确；

B；步骤③接种方法为稀释涂布平板法；接种工具为涂布器，B错误；

C；在配制步骤②、③的培养基时；为避免杂菌污染，应先调pH值后再进行高压蒸汽灭菌，C正确；

D；对③中平板上的菌落进行计数；可以计算出土壤浸出液中细高效降解聚丙烯的细菌的浓度，D错误。

故选AC。14、B:D【分析】【分析】

1；病毒同所有生物一样；具有繁殖、遗传、变异、进化的特点，病毒是一种体积非常微小，结构极其简单的生物，仅由蛋白质外壳和内部的遗传物质组成，没有细胞结构。不能独立生活，只能寄生在活细胞内，并在寄主细胞内进行繁殖。一旦离开了活细胞，病毒就无法生存，就会变成结晶体。

2；真菌较细菌作为受体细胞的优势是真菌为真核微生物；含有内质网和高尔基体可对蛋白进行加工和修饰。

【详解】

A；通过题干信息可知；抗菌肽具有广谱抗菌活性，抗菌肽不参与特异性免疫过程，A错误；

B；根据题干信息；抗菌肽“在细菌细胞膜上形成跨膜的离子通道，造成细胞内容物泄漏，最终导致细胞死亡”，即改变了细胞膜的通透性，使细胞不能保持正常渗透压而死亡，B正确；

C；抗菌肽“是广泛存在于昆虫以及两栖类动物、哺乳动物体内的抗菌活性物质”；即来源于真核细胞，如利用转基因技术提高抗菌肽的产量，但最好选择真菌作为受体菌，因为真菌是真核细胞，繁殖速度快，遗传物质少，C错误；

D；根据题干信息；“某些抗菌肽对癌细胞甚至病毒等均具有强有力的杀伤作用”，则对抗菌肽的研究可为治疗癌症、新型冠状病毒肺炎等提供新思路，D正确。

故选BD。

【点睛】三、填空题(共5题，共10分)15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】单个核苷酸两个DNA片段16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】3，5，DNA聚合酶不能从头开始合成，而只能从3，端延伸DNA子链的5，端向3，端17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系基因修饰或基因合成改造新的蛋白质自然界已存在18、略

【分析】略【解析】营养无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压气体环境19、略

【分析】【详解】

蛋白质形成二硫键，使蛋白质的结构更加稳定，因此T4溶菌酶的热稳定性会提高。这项技术属于蛋白质工程技术，其步骤为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。【解析】会提高T4溶菌酶的耐热性。这项技术属于蛋白质工程技术，该技术的要点是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。四、判断题(共2题，共20分)20、A【分析】【分析】

早期胚胎发育从受精卵开始；当卵裂分裂到16-32个细胞时，卵裂产生的子细胞逐渐形成致密的细胞团，形似桑葚时，这时的胚胎称为桑葚胚，这一阶段及之前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，属于全能细胞。胚胎进一步发育，细胞开始出现分化，形成内细胞团；滋养层；随着胚胎进一步发育，胚胎内部出现了含有液体的囊腔—囊胚腔，这个时期的胚胎叫做囊胚。胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。

【详解】

囊胚时期聚集在胚胎一端的细胞形成内细胞团，将来发育成胚胎的各种组织，即发育成完整的胚胎，而沿透明带内壁拓展和排列的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发育成胎膜和胎盘，为胚胎的发育提供营养，故“胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化表述”正确。21、B【分析】【详解】

基因工程技术可以使建立移植器官工厂的设想成为现实；说明并未开始实际应用。

故题中描述错误。五、实验题(共4题，共12分)22、略

【分析】【分析】

1.体液免疫的具体过程：

(1)感应阶段：除少数抗原可以直接刺激B细胞外；大多数抗原被吞噬细胞摄取和处理，并暴露出其抗原决定簇；吞噬细胞将抗原呈递给T细胞，再由T细胞呈递给B细胞；

(2)反应阶段：B细胞接受抗原刺激后；开始进行一系列的增殖；分化，形成记忆细胞和浆细胞；

(3)效应阶段：浆细胞分泌抗体与相应的抗原特异性结合；发挥免疫效应。

2.单克隆抗体的制备：

(1)细胞来源：B淋巴细胞：能产生特异性抗体；在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。

(2)杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖；又能产生特异性抗体。

(3)两次次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。

(4)两次抗体检测：专一抗体检验阳性。

(5)提取单克隆抗体：从培养液或小鼠腹水中提取。

(6)单克隆抗体的优点：特异性强；灵敏度高；并可能大量制备。

【详解】

（1）图为单克隆抗体的制备的流程；图中细胞a是免疫后小鼠体内的B细胞（或浆细胞），该细胞是高度分化的细胞，不能进行分裂。

（2）与植物原生质体融合相比；动物细胞融合特有的诱导因素是灭活的病毒。若只存在细胞的两两融合，融合体系中除未融合的细胞外，还有两两融合的细胞，由于细胞的融合是随机的，两两融合的细胞包括杂交瘤细胞和同种细胞融合成的细胞。筛选时，需用特定的选择性培养基才能从中筛选出杂交瘤细胞。

（3）要想获得足够数量的能分泌特异性抗体的细胞；在筛选过程中需进行克隆化培养和抗体检测，该过程是将霍山石斛的某种多糖与牛血清蛋白偶联制作成抗原；并生产出单克隆抗体，因此还需用（霍山石斛）多糖与牛血清蛋白偶联物作为检测特异性抗体的物质。

（4）若将筛选出的细胞注射到小鼠腹腔内；则可从小鼠腹水中提取单克隆抗体。

（5）科研小组用霍山石斛多糖给小鼠灌胃后；取出小肠；肝、脾、肾和肺进行抗原-抗体杂交实验，发现除肠腔外其他组织均未检测到霍山石斛多糖。霍山石斛多糖可降解产生小分子片段，该实验不能证明具有免疫调节效应的物质是多糖还是降解后的小分子片段，因此该实验不能说明引起免疫调节效应的是大分子霍山石斛多糖。

【点睛】

本题考查免疫调节、单克隆抗体的制备等知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力以及获取信息、分析问题的能力。【解析】B细胞（或浆细胞）该细胞是高度分化的细胞，不能进行分裂灭活的病毒杂交瘤细胞同种细胞融合成的细胞选择性克隆化培养抗体检测（霍山石斛）多糖与牛血清蛋白偶联物腹水不能霍山石斛多糖在肠腔中被降解，产生的多糖小分子片段可能具有免疫调节效应（或该实验不能证明具有免疫调节效应的物质是多糖还是降解后的小分子片段）23、略

【分析】【分析】

腐乳的制作过程主要是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。

1；让豆腐上长出毛霉：将豆腐块平放在笼屉内；将笼屉中的温度控制在15～18℃，并保持在一定的湿度。约48h后，毛霉开始生长，3d之后菌丝生长旺盛，5d后豆腐块表面布满菌丝。豆腐块上生长的毛霉来自空气中的毛霉孢子。

2；加盐腌制：将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中；同时逐层加盐，随着层数的加高而增高盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些。加盐研制的时间约为8d左右．加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期的制作过程中不会过早酥烂。同时，盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。

3；加卤汤装瓶：卤汤直接关系到腐乳的色、香、味。卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的。卤汤中的酒可以选用料酒、黄酒、米酒、高粱酒等；含量一般控制在12%左右。加酒可以抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味。香辛料种类很多，如胡椒、花椒、八角、桂皮、姜、辣椒等。香辛料可以调制腐乳的风味，也具有防腐杀菌的作用。可据个人口味配置卤汤。

4；密封腌制。

【详解】

（1）前发酵过程中，毛霉等微生物产生的蛋白酶促进豆腐中的蛋白质水解产生GABA，使得毛坯的GABA含量明显升高。

（2）步骤②中；加盐腌制的正确操作是将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中，同时逐层加盐，随着层数的加高而增高盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些。盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。此过程腐乳干重中的GABA含量下降的原因可能是：①食盐会抑制毛霉生长，酶的活性降低；②豆腐中的水分渗出，部分GABA会溶解于水而导致测定值减小。

（3）卤汤是由料酒及各种香辛料配制而成的；可以抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味。后发酵过程中GABA的含量变化曲线图显示，在60天以后，GABA的含量达到最大值且保持相对稳定，所以此时出厂销售白方腐乳比较适宜。

【点睛】

解答本题的关键是掌握腐乳的制作的相关流程和知识要点，主要依靠学生对课本知识的理解和掌握，并结合题目中所给的GABA为水溶性氨基酸这一关键信息回答问题，同时需要学生在做题时思考符合经济效益的选择。【解析】蛋白酶逐层加盐随着层数的加高增加盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些随水流失（溶解于水中）香辛料和料酒6024、略

【分析】【分析】

分析图1可知，菌株A的细胞密度增殖速率低于菌株B，脂肪剩余量菌株A高于菌株B。

从图2中可知，ABC三种菌株中，BC菌落周围出现透明圈，而A菌落周围未出现透明圈。

【详解】

（1）科研小组从土壤中筛选出产脂肪酶的菌株时，需设置只利于产脂肪酶的菌株生长，而其他杂菌生长受抑制的培养基，因此配制的培养基需要以脂肪为唯一碳源。制备固体培养基的步骤是：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，其次还有穿刺接种和斜面接种。

（2）据图1分析可知，菌株B增殖速度快，且脂肪剩余比例小，降解脂肪能力强，故应选择菌株B进行后续相关研究。

（3）科研小组从土壤中筛选淀粉分解菌时，加碘液染色后，选择培养基上出现了A、B和C三种菌落，淀粉遇碘液会变蓝，而淀粉酶能够分解淀粉，则不同产酶活力的菌株周围会形成不同直径的透明圈，淀粉酶活力越强的菌株周围的透明圈越大，因此若要得到淀粉酶活力最高的菌株，应选择C菌落进一步纯化，这是因为C菌株的透明圈直径与菌落直径比值最大。经检测A菌落为硝化细菌，A菌落能在此培养基上生长且没有形成透明圈的原因是硝化细菌为自养细菌，能够利用空气中的二氧化碳合成有机物，但硝化细菌不能产生淀粉酶，所以无透明圈。

（4）纤维素酶由三种复合酶组成，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记相关知识，意在考查学生识记所学知识要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力，同时获取题图信息准确答题。【解析】(1)脂肪灭菌倒平板稀释涂布平板法和平板划线法。

(2)B该菌株增殖速度快；且脂肪剩余比例小，降解脂肪能力强。

(3)C硝化细菌为自养细菌；能够利用空气中的二氧化碳合成有机物，但硝化细菌不能产生淀粉酶，所以无透明圈。

(4)葡萄糖苷25、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步骤：①目的基因的获取和筛选；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定；

2；植物顶端分生区附近(如茎尖)的病毒极少；甚至无病毒，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗。

【详解】

（1）为了获得脱毒苗；通常选取植株茎尖（或顶端分生区附近的组织）进行离体培养，选取该组织的原因是此处病毒极少甚至无病毒。

（2）①基因表达载体上除有复制原点；启动子、终止子、目的基因外；还有标记基因（便于筛选目的基因）；

②农杆菌Ti质粒上的T-DNA片段可以携带目的基因并整合至植物细胞的染色体DNA上；

③选择培养的目的是筛选出含有目的基因的柑橘细胞；

④先诱导生芽有利于生根；故再分化阶段，需要先诱导愈伤组织生芽，待长出芽后，再将其转接到诱导生根的培养基上，进一步诱导形成试管苗；

⑤在个体生物学水平可用接种地毯草黄单胞杆菌（或喷施地毯草黄单胞杆菌菌液）的方法，观察植株是否患有柑橘溃疡病来直接鉴定再生植株；分析再生植株没有抗病能力的原因，可以提取各植株的DNA，依据Xa27基因（目的基因）的特异性碱基序列设计引物，扩增后用（凝胶）电泳分离PCR产物进行检测；植株B、C没有出现条带，则可能是因为没有导入目的基因；植株A、E、F出现条带但不具有抗病能力，则可能是因为导入植物细胞的目的基因不能转录或转录后未翻译或翻译出的蛋白质没有活性等。【解析】(1)茎尖（或顶端分生区）此处病毒极少甚至无病毒。

(2)标记基因携带目的基因并整合至植物细胞的染色体DNA上筛选出含有目的基因的植物细胞先诱导生芽，再诱导生根接种地毯草黄单胞杆菌（或喷施地毯草黄单胞杆菌菌液）Xa27基因（凝胶）电泳导入植物细胞的目的基因不能表达（或不能转录，转录后不能翻译，翻译出的蛋白质没有活性等，合理即可）没有导入目的基因六、综合题(共4题，共8分)26、略

【分析】【分析】

1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基其基本过程为计算；称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板。

2．纯化大肠杆菌。

（1）原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞；使其长成单个的菌落，这个单个菌落就是一个纯化的细菌菌落。

（2）微生物常见的接种的方法。

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

（1）衡量实验的指标即对实验结果的表述；本实验是利用抗生素抑制细菌的生长来表述实验结果，通过抑菌圈的大小来确定杀菌能力，即抑菌圈越大杀菌能力越强。

（2）突变在前；选择在后，环境的作用不是诱发定向突变，只是选择有利的变异，故细菌的抗药性产生于环境变化之前。

（3）在相关试验操作均严谨规范的情况下；在含有抗生素IV的纸片周围出现了较大的抑菌圈，抑菌圈中存在有若干个测试菌的菌落。说明抗生素IV对于测试菌具有较强的抑制作用，但测试菌中已经出现能抵抗抗生素IV的抗性突变株。

（4）本实验的目的是：研究抗生素I~Ⅳ对测试菌的抑制作用。

（5）MIC是药敏试验中评价抗生素药效的常用指标；其定义为某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度。分析图解可知，II浓度时可见抑菌圈，且抑菌圈最小，即抗生素Ⅲ的最小MIC是II。

【点睛】

本题综合考查了细菌对各种抗生素的药敏程度实验设计及该过程中的生物进化，意在考查学生的理解和综合运用知识的能力，试题难度中等。【解析】抑菌圈的大小前抗生素IV对于野生型测试菌具有较强的抑制作用，但测试菌中已经出现能抵抗抗生素IV的抗性突变株研究抗生素I~Ⅳ对测试菌的抑制作用Ⅱ27、略

【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】