2025年苏人新版选择性必修3生物下册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年苏人新版选择性必修3生物下册阶段测试试卷409考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共6题，共12分)1、地钱具有重要的药用价值，可用植物组织培养的方法进行快速人工繁育。有关此过程的叙述不正确的是（）A.发生了细胞的脱分化、再分化B.形成的愈伤组织分化程度较高C.依据的原理是植物细胞的全能性D.若发生杂菌污染则难以获得目的植株2、下列关于动物细胞工程的叙述，错误的是（）A.动物细胞培养过程中通常会出现细胞贴壁现象B.胚胎干细胞可以用于治疗人类的某些疾病C.动物细胞培养过程中需使用胃蛋白酶D.动物细胞培养液中通常需加入血清、血浆等天然成分3、CRISPR/Cas9是应用最广泛的基因组编辑技术；其操作过程如下：

①人工合成的短链RNA作为向导（简称gRNA）；它将部分与细胞某目的基因中希望被编辑的序列相结合；

②来自细菌的核酸酶Cas9与gRNA结合；切割与gRNA结合的DNA，使DNA双链断裂；

③加入大量用于修复的模板DNA（即大部分序列与被切割位点附近序列相同；个别位点被人工改变）。这样，细胞启动修复机制，人类希望改变的碱基序列被引入基因组中，基因组的准确编辑由此实现。

以下关于该技术叙述正确的是（）A.gRNA的序列与目的基因特定碱基序列部分结合，结合区域最多含6种核苷酸B.Cas9经内质网、高尔基体加工才具有切断DNA的活性C.CRISPR/Cas9技术对不同基因进行编辑时，应使用相同的gRNAD.CRISPR/Cas9技术可改变基因结构，也可以使某个基因失去功能4、以下为植物体细胞杂交技术流程图，其中甲和乙分别表示两种二倍体植物细胞，所含有的染色体组分别是AA和BB。据图分析，下列叙述正确的是（）

A.经过程①获得的a、b称为原生质层，②过程利用了细胞膜的流动性B.c细胞只有AABB这一种类型，再生出细胞壁标志着原生质体融合完成C.过程③和④分别是脱分化和再分化，脱分化与再分化过程具有基因选择性表达D.获得的植物d，因为在减数分裂时同源染色体能正常配对，所以理论上是可育的5、用盆栽优质铁皮石斛品种的茎进行快速繁殖时，给茎组织消毒无需使用的是（）A.75%乙醇B.无菌水C.0．5-0．6mol/L的甘露醇D.10%次氯酸钠6、下列有关基因工程基本操作程序的叙述，正确的是（）A.转基因生物的目的基因都是从供体细胞中直接分离得到的B.目的基因主要是指编码蛋白质的基因C.将目的基因导入受体细胞的过程存在碱基互补配对D.检测目的基因是否表达可用DNA分子杂交技术评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)7、下列关于人早期胚胎发育过程中桑椹胚和囊胚的叙述中，正确的是（）A.囊胚与桑椹胚相比，每个细胞内DNA总量增加B.囊胚期出现了细胞分化，但遗传物质未发生改变C.囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异不是复制水平上的差异，而是转录水平上的差异引起D.桑椹胚的形成在卵巢，囊胚的形成在输卵管8、模型是人们为了某种特定目的而对认识的对象所做的一种简化的概括性描述。对图示生物概念模型的分析正确的是（）

A.若该模型表示体外受精技术，则C不能直接移植到代孕母体B.若该模型表示核移植技术，则C→D过程与胚胎移植技术有关C.若B表示培养液和胚胎干细胞，则C→D的培养过程中有可能出现分化现象D.若该模型表示农杆菌转化法操作流程，则C可表示Ti质粒，D是植物细胞9、谷氨酸棒状杆菌发酵过程中会生成大量的谷氨酸，经加工后可制成味精。在其发酵过程中，发酵罐中碳氮比（碳元素与氮元素的比值）为4：1时，菌体大量繁殖而产生的谷氨酸少；当碳氮比为3：1时，菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增。下列相关叙述正确的是（）A.谷氨酸棒状杆菌可以从自然界中筛选，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得B.分离、提纯产物是发酵工程的中心环节，有利于获得更多的优质发酵产品C.由题干信息可推知发酵过程中需调整发酵罐内营养成分的比例D.在发酵罐内发酵无需严格控制溶解氧、温度、pH等条件10、研究人员从土壤中筛选得到酵母菌纤维素酶高产菌株；并对其降解纤维素的条件进行了研究。据图分析正确的是（）

A.筛选该高产菌株需要在纤维素为唯一碳源的培养基中培养B.探究最适温度时应尽可能将发酵液的pH控制在9左右C.该酵母菌高产菌株产生纤维素酶的最适温度是35℃D.利用该高产菌株降解纤维素时需严格保持厌氧环境11、甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状；但属于胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，成功地将乙品种细胞质中的可育基因引入甲中，下图为该操作示意图。下列相关叙述正确的是（）

A.人工诱导原生质体融合可使用离心法B.融合的原生质体再生出细胞壁后再进行组织培养C.杂种细胞经过一定激素和营养的诱导，发育成为杂种植株D.筛选出的杂种植株含有控制甲青花菜优良性状的基因，但只能通过母本进行传递12、青蒿素主要用于恶性疟疾的症状控制以及耐氯喹虫株的治疗。为了快速检测青蒿素；科研人员利用细胞工程技术制备了抗青蒿素的单克隆抗体，其基本操作过程如下图。以下相关叙述正确的是（）

A.过程②体现了细胞膜的流动性，过程⑤若在体内进行则操作更简单B.过程③常使用选择培养基，过程④常使用抗原-抗体杂交技术C.若细胞乙均由细胞两两融合而成，则细胞乙、丙、丁的染色体组数一定相同D.骨髓瘤细胞通常是从小鼠脾脏中提取的，其表面糖蛋白减少，培养时失去接触抑制13、研究人员用无机盐、琼脂和石油配制的培养基从被石油污染的土壤中筛选出了一种石油降解菌，下列相关表述正确的是（）A.培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利B.这种培养基是一种选择培养基C.利用这种石油降解菌可以降解石油，修复土壤D.相对于未被污染的土壤，从被石油污染的土壤中更容易分离到石油降解菌14、某牧场引进一只产肉性能优异的良种公羊；为了在短时间内获得具有该公羊优良性状的大量后代，该牧场通过以下流程进行了相关操作。下列有关叙述错误的是（）

A.在体外受精前对采集到的精子要进行获能处理B.用孕激素对供体母羊进行处理，可获得更多的卵母细胞C.为避免受体母羊对植入胚胎产生排斥反应，应注射免疫抑制剂D.为了提高已有胚胎的利用率，可采用胚胎分割技术评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)15、通过统计平板上的________________，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在_________________________的平板进行计数。16、基因工程的原理是_____，又叫_____或_____。通俗地说，就是按照_____，把一种生物的_____提取出来，加以_____，然后放到_____，_____地改造生物的遗传性状。17、______——“分子缝合针”18、回答下列问题。

（1）果酒的制作离不开酵母菌，温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，酒精发酵时一般将温度控制在_________，醋酸菌是一种________细菌，它的最适生长温度为_______________，乳酸菌是________细菌，在无氧的情况下，将葡萄糖分解成___________。

（2）微生物的接种方法很多，最常用的是_____________和__________________，稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目___________，这是因为______________________________。

（3）饮用水中大肠杆菌的数目可以通过滤膜法来测定，将滤膜放在____________培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现___________；从而计算出水样中大肠杆菌的数目。

（4）固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括化学结合法、____________和物理吸附法。酶更适合采用__________和___________固定化，而细胞多采用___________固定化。19、_________℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度控制在_______________℃。20、第一步：______21、动物细胞培养的流程：

取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用______处理分散成______→制成______→转入培养瓶中进行______培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续_____培养。22、基因表达载体的组成及其作用。

一个基因表达载体的组成，除了______________、_______________外，还必须有__________、______________等(如图所示)。

①______________②______________③______________

④______________⑤______________⑥______________

⑦______________评卷人得分四、判断题(共2题，共18分)23、胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。()A.正确B.错误24、生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等。（选择性必修3P111）()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共1题，共5分)25、研究人员从血管内皮瘤中发现了一种新的血管增生抑制剂——内皮抑素；它能有效地抑制血管增生。下面是获得重组内皮抑素的方法，请分析回答下列问题。

（1）将人的内皮抑素基因导入大肠杆菌细胞中，能合成人的内皮抑素，其原因是_____________________________________________________________。

（2）扩增的目的基因与pUC18质粒(如下图所示)都用EcoRⅠ和BamHⅠ进行双酶切；然后用DNA连接酶进行连接，构建重组质粒。

双酶切避免了目的基因与载体__________连接；还减少了目的基因与目的基因；载体与载体的连接，提高了重组质粒的比例。

（3）大肠杆菌pUC18质粒的LacZ基因中如果没有插入外源基因，LacZ基因便可表达出β半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和Xgal时，Xgal便会被β半乳糖苷酶水解成蓝色物质，大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之，则形成白色菌落。选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入的物质有_____________________和氨苄青霉素。成功导入重组质粒的大肠杆菌在培养基中形成____________颜色的菌落，原因是__________________。

（4）从选择培养基中挑取所需的单个菌落接种于液体培养基中培养；获得粗提表达产物。将等量毛细血管内皮细胞接种于细胞培养板，37℃培养。将等量不同浓度的粗提表达产物加进培养孔中，72h后在显微镜下观察细胞存活情况并统计(或记录)活的内皮细胞数目，实验结果如下表所示。

。粗提表达产物浓度/(μg·mL－1)0246810活的内皮细胞数目(×102)126210．50．5实验结果说明_____________________________________________________。评卷人得分六、综合题(共4题，共12分)26、阅读下面的材料；回答问题。

胰岛素的应用是糖尿病治疗历史上的一个里程碑。胰岛素自1922年用于临床以来；就成为治疗糖尿病的特效药物。目前全世界糖尿病患者已超过四亿，为临床提供充足；质量可靠的胰岛素制剂是现代生物制药领域的一项重要工程。

人胰岛素由胰岛β细胞合成；核糖体上最初形成的是前胰岛素原单链多肽，进入内质网腔后，信号肽被切除，形成胰岛素原。高尔基体内的特异性肽酶将胰岛素原的C肽区域切除，A链和B链通过二硫键形成共价交联的活性胰岛素（如图）。

最初用于临床的胰岛素几乎都是从猪；牛胰脏中提取的。猪、牛胰岛素与人胰岛素生理功能相似；但氨基酸序列有微小差异。接受动物胰岛素治疗的患者有5％～10％出现不同程度的过敏反应，抗动物胰岛素抗体还可能对患者的胰岛β细胞功能产生负面影响。

随着基因工程技术的发展；重组人胰岛素逐渐取代动物胰岛素。早期的重组人胰岛素生产，采用A；B链分别表达法。后来该方法被胰岛素原表达法取代，即由大肠杆菌合成胰岛素原，然后经细胞外酶切获得胰岛素。1987年用酵母菌生产重组人胰岛素的方法出现。重组人胰岛素的结构与人体自身分泌的胰岛素结构完全相同，但无法完全模拟生理胰岛素曲线，容易导致血糖波动，甚至导致低血糖发生。

上世纪90年代；科学家通过改变胰岛素的氨基酸序列和结构，研制出能更好模拟生理胰岛素分泌特点的胰岛素类似物，包括速效胰岛素和长效胰岛素类似物。例如，将人胰岛素B链第28位的脯氨酸替换为天门冬氨酸，可有效抑制胰岛素单体的聚合，皮下注射这种速效胰岛素类似物后，起效快（10-20分钟起效）；血药浓度峰值高、药效消失快，已经在临床上广泛应用。

（1）用猪胰岛素进行治疗，易诱导人体产生抗猪胰岛素抗体，原因是____________。

（2）人胰岛素基因有2个内含子。利用大肠杆菌通过胰岛素原法生产重组人胰岛素，获取目的基因时，不宜采用的方法是________

a．直接从细胞内总DNA中分离目的基因。

b．用化学方法直接人工合成目的基因。

c．以mRNA为模板逆转录合成目的基因。

d．利用PCR扩增人胰岛素原基因的编码序列。

（3）与大肠杆菌相比，利用酵母菌生产胰岛素的优势有_____________________。

（4）重组人胰岛素工程菌构建完成后，还需要通过________工程技术进行胰岛素的生产。

（5）正常人胰岛素的生理性分泌，可分为基础胰岛素分泌（24小时持续脉冲式分泌微量胰岛素，维持空腹状态下血糖稳定）和进餐后的胰岛素分泌。能更好地模拟餐时生理胰岛素曲线的是________（选填“速效”或“长效”）胰岛素类似物。27、塑料膜的主要成分聚乙烯是一种碳氢化合物；稳定性好，不易被分解，易造成“白色污染”。研究人员经过分离筛选最终获得一种能降解聚乙烯的真菌-桔青霉，为利用微生物降解农用地膜提供依据。回答下列问题：

(1)在实验过程中，研究人员将获得的聚乙烯粉末均匀洒在培养基甲上，从培养基的碳源及物理性质分析，培养基甲是以____________________________培养基，对配制的甲培养基常采用____________法进行灭菌。一段时间后，从培养基甲上挑选能生长的菌株，采用____________________法接种获得5个真菌的单菌落，储存备用。若要长期保存菌株，常采用的方法是________________。

(2)为确定分离得到的不同菌株分解地膜能力的强弱，可将分离纯化获得的真菌分别接种到含________________的液体培养基中，在一定转速下的摇床上进行培养，摇床培养的目的是________________________________________________________（答两点）；最后观察比较各组培养液中地膜体积（面积）的大小，进而筛选出高效降解地膜的菌株。

(3)为确定某一培养液中桔青霉的数量，从中吸取1mL培养液，稀释100倍，取0.1mL接种到4个培养基平板上，一段时间后获得的菌落数分别为：25、35、40、42个，则统计的平均菌落数是___________个。

(4)在不同的土壤使用桔青霉分解地膜的效果存在差异的原因是____________________________。28、供体细胞的分化状态和表观遗传修饰模式是影响体细胞核移植胚胎发育的重要因素。为研究供体细胞RNAm6A修饰（即RNA某位点的甲基化）水平对猪核移植胚胎发育的影响；研究者进行系列实验。

(1)核移植的受体是_____细胞，核移植后的重构胚发育至_____阶段可利用_____技术转移到代孕母体子宫内以获得子代个体，从早期胚胎中分离获得的具有自我更新和分化潜能的_____可用于医学研究。

(2)RNAm6A修饰可通过提高mRNA结构稳定性来影响早期胚胎发育。猪骨髓间充质干细胞（甲组）属于多能干细胞，猪胎儿成纤维细胞（乙组）则是处于分化终端的体细胞。研究者比较了两细胞内RNAm6A修饰水平及其作为核供体时重构胚的发育效率；结果如图1；2。

结果表明，核供体细胞的分化程度越高，_____越低。

(3)研究发现甲组细胞内甲基转移酶M（催化RNAm6A修饰）的表达水平高于乙组，为验证RNAm6A修饰与核移植胚胎发育能力的关系，研究者进行如下实验：。组别对核供体细胞。

的处理方法核移植胚胎发育能力的检测结果胚胎总数胚胎卵裂率囊胚率胚胎卵裂率囊胚率对照组导入空载体18759．4%16．8%实验组导入M基因过表达载体18571．3%27%

导入空载体是为了排除_____等对实验结果的干扰。结果表明，_____可提高核移植胚胎的发育能力。

(4)为研究导致不同供体细胞RNAm6A修饰水平差异的原因；研究者分析了M基因启动子的甲基化水平，发现骨髓间充质干细胞中M基因启动子的甲基化水平为22%，而猪胎儿成纤维细胞则为50%。

据此设计实验：实验组用DNA甲基化抑制剂处理骨髓间充质干细胞；对照组不处理；检测两组的M基因启动子甲基化水平。

请修正实验方案：_____

研究者通过实验证实了M基因启动子的甲基化是导致不同供体细胞RNAm6A修饰水平差异的原因。

(5)进一步研究表明，RNAm6A修饰水平高的供体细胞核移植胚胎中DNA损伤位点较少。综上，推测猪骨髓间充质干细胞核移植胚胎发育的能力较高的原因：_____。29、PHB2蛋白具有抑制细胞增殖的作用。为初步探究某动物PHB2蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因，研究者从基因数据库中获取了该蛋白的基因编码序列（简称phb2基因），大小为0．9kb（1kb=1000碱基对）；利用大肠杆菌表达该蛋白。回答下列问题：

（1）为获取phb2基因，提取该动物肝脏组织的总RNA，再经__________过程得到cDNA；将其作为PCR反应的模板，并设计一对特异性引物来扩增目的基因。

（2）图1为所用载体图谱示意图，图中限制酶的识别序列及切割位点见下表。为使phb2基因（该基因序列不含图1中限制酶的识别序列）与载体正确连接，在扩增的phb2基因两端分别引入__________和__________两种不同限制酶的识别序列。经过这两种酶酶切的phb2基因和载体进行连接时，可选用__________（填“E．coliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”）。

相关限制酶的识别序列及切割位点。

。名称识别序列及切割位点名称识别序列及切割位点HindⅢA↓AGCTTTTCGA↑AEcoRIG↓AATTCCTTAA↑GPvitⅡCAG↓CTGGTC↑GACPstICTGC↓AGGA↑CGTCKpnIG↓GTACCCCATG↑GBamHIG↓GATCCCCTAG↑G注：箭头表示切割位点。

（3）转化前需用CaCl2处理大肠杆菌细胞，使其处于__________的生理状态；以提高转化效率。

（4）将转化后的大肠杆菌接种在含氨苄青霉素的培养基上进行培养，随机挑取菌落（分别编号为1、2、3、4）培养并提取质粒，用（2）中选用的两种限制酶进行酶切，酶切产物经电分离，结果如图2，________号菌落的质粒很可能是含目的基因的重组质粒。

注：M为指示分子大小的标准参照物；小于0．2kb的DNA分子条带未出现在图中。

（5）将纯化得到的PHB2蛋白以一定浓度添加到人宫颈癌细胞培养液中，培养24小时后，检测处于细胞周期（示意图见图3）不同时期的细胞数量，统计结果如图4。分析该蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖可能的原因是将细胞阻滞在细胞周期的__________（填“G1”或“S”或“G2/M”）期。

参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、B【分析】【分析】

植物组织培养技术：

（1）过程：离体的植物组织；器官或细胞（外植体）→愈伤组织→胚状体→植株（新植体）；

（2）原理：植物细胞的全能性；

（3）条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度；适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）；

（4）植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖；作物脱毒；人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。

【详解】

A；此过程中外植体脱分化形成愈伤组织；愈伤组织再分化胚状体，A正确；

B；愈伤组织是没有分化的细胞；B错误；

C；已分化的植物细胞具有发育成完整个体的潜能；即植物细胞具有全能性，利用此特性可将细胞培育成植株体，C正确；

D；植物组织培养要求全程在无菌条件下进行；若发生杂菌污染则难以获得目的植株，D正确。

故选B。2、C【分析】【分析】

动物细胞培养过程取动物胚胎或幼龄动物器官；组织。将材料剪碎；并用胰蛋白酶（或用胶原蛋白酶）处理（消化），形成分散的单个细胞，将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时，细胞就会停止分裂增殖，出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定浓度的细胞悬浮液。另外，原代培养就是从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。

【详解】

A；结合分析可知；动物细胞培养的过程中通常会出现细胞贴壁生长的现象，A正确；

B；胚胎干细胞经过诱导可分化成多种组织细胞；因而可以用于治疗人类的某些疾病，B正确；

C；动物细胞培养过程中需使用胰蛋白酶将组织细胞分散成单个细胞制成单细胞悬液；而不能使用胃蛋白酶，C错误；

D；动物细胞培养液中通常需加入血清、血浆等天然成分；从而有利于动物细胞增殖，D正确。

故选C。

【点睛】3、D【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。

2；从分子水平上检测目的基因的方法：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。

【详解】

A；gRNA与目的基因结合区域最多含8种核苷酸（4种脱氧核苷酸和4种核糖核苷酸）；A错误；

B；Cas9来自于细菌；细菌无内质网、高尔基体，B错误；

C；对不同基因进行编辑时；由于基因序列不同，可能需要使用不同的gRNA，C错误；

D；CRISPR/Cas9技术可改变基因碱基排列顺序；也可以使某个基因因为碱基序列改变而无法表达，D正确。

故选D。4、D【分析】【分析】

题图分析：图示为植物体细胞杂交技术流程图；其中①是去除植物细胞壁获得原生质体的过程；②是诱导原生质体融合的过程；③是再生形成新的细胞壁的过程；④是脱分化过程，⑤是再分化过程。

【详解】

A、经①去除植物细胞壁过程获得的a、b称为原生质体；A错误；

B；若只考虑两两融合；则融合的细胞有三种：AA.BB.AABB，B错误；

C；由分析可知；过程④和⑤分别是脱分化和再分化，C错误；

D；通过植物体细胞杂交获得的植物d；因为细胞中有同源染色体存在，在减数分裂时能正常的联会、配对，所以可育，D正确。

故选D。5、C【分析】【分析】

植物组织胚芽王过程中外植体的消毒：外植体用体积分数为70%的酒精浸泡30s→无菌水冲洗→吸干表面的水分；放入质量分数为0.1%的氯化汞和10%的次氯酸钙溶液中2～4min→无菌水再冲洗3～5次。

【详解】

根据分析；在对外植体消毒的过程中，首先用70%的酒精浸泡30s，再用无菌水冲洗，然后用10%的次氯酸钙溶液中浸泡2～4min，再用无菌水冲洗，而适宜浓度甘露醇能维持细胞内外的渗透压，防止细胞吸水胀破，因此给茎消毒时无需使用甘露醇。

故选C。6、B【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；培育转基因动物所需的目的基因可以从供体细胞中直接分离得到；也可从基因文库中获得或人工合成，A错误；

B；目的基因主要是指编码蛋白质的基因；也可以是一些具有调控作用的因子，B正确；

C；由分析可知；将目的基因导入受体细胞时，不存在碱基互补配对，C错误；

D；检测目的基因是否表达出产物用的是抗体-抗原杂交法；D错误。

故选B。

【点睛】二、多选题(共8题，共16分)7、B:C【分析】【分析】

胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。

【详解】

A；由桑椹胚发育到囊胚进行的是有丝分裂；形成的每个细胞内DNA总量不变，A错误；

B；囊胚期细胞出现了细胞分化；但细胞分化的实质是基因的选择性表达，因此其遗传物质未发生改变，B正确；

C；囊胚期内细胞团和滋养层细胞的差异不是DNA复制水平上的差异；而是转录水平上的差异，即基因的选择性表达，C正确；

D；受精卵在输卵管中形成；后在子宫中发育，故胚胎发育的早期不可能在卵巢，D错误。

故选BC。8、A:B:C【分析】【分析】

1；基因表达载体是目的基因和载体重组后形成的。

2；体外受精是指获能的精子和成熟的卵细胞结合形成受精卵的过程。

3；胚胎干细胞具有发育的全能性；能够分裂和分化。

4；动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核；移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物。

【详解】

A；若该模型表示体外受精技术；则C（受精卵）不能直接移植到代孕母体，需要将C移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。当胚胎发育到适宜的阶段时，才可以将其取出向受体移植，A正确；

B；若该模型表示核移植技术；A和B表示供体细胞核和去核的卵细胞，则C→D过程表示胚胎体外培养和胚胎移植技术，B正确；

C；若A、B表示培养液和胚胎干细胞；则C→D的传代培养过程中有可能出现分化现象，C正确；

D；若该模型表示农杆菌转化法操作流程；则C可表示重组Ti质粒，D是农杆菌，D错误。

故选ABC。9、A:C【分析】【分析】

微生物发酵指的是利用微生物；在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。谷氨酸棒状杆菌为原核生物，为异养需氧型。

【详解】

A；用于发酵的谷氨酸棒状杆菌可以从自然界中筛选；也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，A正确；

B；发酵工程的中心环节是发酵过程；B错误；

C；由题意可知“在其发酵过程中；发酵罐中碳氮比（碳元素与氮元素的比值）为4∶1时，菌体大量繁殖而产生的谷氨酸少；当碳氮比为3∶1时，菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增”，说明在发酵过程中需调整发酵罐内营养成分的比例以保证先获得大量谷氨酸棒状杆菌，在获得大量发酵产物的目的，C正确；

D；谷氨酸棒状杆菌为需氧菌；其发酵过程需要适宜的温度和pH，所以在发酵罐内发酵需严格控制溶解氧、温度、pH等条件，D错误。

故选AC。10、A:B【分析】【分析】

分解纤维素微生物的分离实验原理：

（1）土壤中存在着大量纤维素分解酶；包括真菌；细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。

（2）在培养基中加入刚果红；可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。

【详解】

A；筛选该高产菌株需要在纤维素为唯一碳源的培养基中培养；A正确；

B；由pH与纤维素酶活性的曲线图分析可知；当pH为9时，纤维素酶的活性最高，故在探究最适温度时应尽可能将发酵液的pH控制在9左右，B正确；

C；由温度与纤维素酶活性的曲线图分析可知；当温度为35℃时纤维素酶的活性最大，但是由于缺少35℃之后的温度实验组，故无法判断该酵母菌高产菌株产生纤维素酶的最适温度是35℃，C错误；

D；酵母菌是兼性厌氧微生物；在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，故在降解初期需要给酵母菌提高有氧环境，以保证酵母菌的数量，D错误。

故选AB。

【点睛】11、A:B:C【分析】【分析】

题图分析：该图为体细胞杂交过程；其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可以用酶解法，B为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇处理，融合的杂种细胞应该具备乙品种细胞质中的可育基因，甲品种的控制多种优良性状的核基因，该过程的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。

【详解】

A；人工诱导原生质体融合的方法有化学法（聚乙二醇）和物理法（离心、振动、电刺激等）两大类；A正确；

B；杂种细胞再生出细胞壁是细胞融合成功的标志；融合成功之后再进行组织培养，B正确；

C；杂种细胞经过外源生长素和细胞分裂素的诱导；脱分化形成愈伤组织，再分化形成胚状体，进一步成为杂种植株，C正确；

D；甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状；杂种植株细胞核内含有控制甲青花菜优良性状的基因，具备乙品种细胞质中的可育基因，因此精子中具备一半核基因，并可通过父本（精子）进行传递，D错误。

故选ABC。12、A:B:C【分析】【分析】

题图分析：过程①为注射抗原；诱导小鼠产生具有免疫能力的B细胞；过程②为将具有免疫能力的B细胞和骨髓瘤细胞融合；过程③用选择性培养基筛选杂交瘤细胞；过程④用抗体检测和克隆培养得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞；过程⑤为提取单克隆抗体。

【详解】

A；过程②为将具有免疫能力的B细胞和骨髓瘤细胞融合；体现了细胞膜的流动性；过程⑤为提取单克隆抗体，若在体内进行（可从小鼠腹水中提取），则操作更简单，A正确；

B；过程③是筛选杂交瘤细胞；常使用选择培养基（未融合的细胞，融合的具有相同核的细胞均死亡，杂交瘤细胞能正常生存）；过程④用抗体检测和克隆培养得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞，常使用抗原—抗体杂交技术，B正确；

C；因细胞甲和细胞乙均来源于小鼠；若细胞乙均由细胞两两融合而成，则细胞乙和经筛选后的丙、丁的染色体组数一定相同，C正确；

D；骨髓瘤细胞是从小鼠的骨髓中提取的；脾脏中无骨髓瘤细胞，D错误。

故选ABC。13、B:C:D【分析】【分析】

在微生物学中；将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水；碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。

【详解】

A；培养基中的营养物质浓度过高会导致微生物不能从培养基中吸水；将出现失水过多而死亡的现象，对生长不利，A错误；

B；这种培养基以石油为唯一碳源；只有石油降解菌可在该培养基上正常存活，因此是一种选择培养基，B正确；

C；被石油污染的土壤通气性极差；利用这种石油降解菌可以降解石油，修复土壤，C正确；

D；根据生物与其生存环境相适应的特点；未被污染的土壤中几乎不含石油分解菌，从被石油污染的土壤中更容易分离到石油降解菌，D正确。

故选BCD。14、B:C【分析】【分析】

胚胎移植的基本程序主要包括:

①对供；受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体；有健康的体质和正常繁殖能力的受体）。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。

②配种或人工授精。

③对胚胎的收集；检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查；此时的胚胎应发育到桑甚胚或胚囊胚阶段。④对胚胎进行移植。

⑤移植后的检查。

【详解】

A；采集到的良种公羊的精子；在体外受精前要进行获能处理，A正确；

B；对本地母羊注射促性腺激素可促使其超数排卵；进而获得更多卵母细胞，B错误；

C；受体母羊对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应；不需要注射免疫抑制剂，C错误；

D；采用胚胎分割技术可提高已有胚胎的利用率；D正确。

故选BC。三、填空题(共8题，共16分)15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】菌落数30～30016、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】基因重组基因拼接技术DNA重组技术人们意愿某种基因修饰改造另一种生物细胞里定向17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】DNA连接酶18、略

【分析】【分析】

果酒制作菌种是酵母菌；来源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌种保藏中心，条件是无氧；温度是18～25℃，pH值呈酸性．果醋制备的菌种是醋酸菌，条件是发酵过程中充入无菌氧气，温度为30～35℃。

【详解】

（1）酒精发酵时一般将温度控制在18～25℃；醋酸菌是一种好氧细菌，它的最适生长温度为30～35℃。乳酸菌是厌氧细菌，在无氧的情况下，将葡萄糖分解成乳酸。

（2）微生物的接种方法很多；最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

（3）饮用水中大肠杆菌的数目可以通过滤膜法来测定；将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现黑色，从而计算出水样中大肠杆菌的数目。

（4）固定化技术一般包括化学结合法；包埋法和物理吸附法。酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定化；而细胞多采用包埋法固定化。

【点睛】

本题考查果酒和果醋制备原理，意在考查学生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构，属识记内容。【解析】18－25℃好氧30－35℃厌氧乳酸平板划线法稀释涂布平板法低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落伊红美蓝黑色包埋法化学结合法物理吸附法包埋法19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】2018～2520、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因的获取21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】胰蛋白酶单个细胞细胞悬液原代传代22、略

【分析】略【解析】目的基因标记基因启动子终止子启动子上游RNA聚合酶终止子下游转录标记四、判断题(共2题，共18分)23、A【分析】【分析】

早期胚胎发育从受精卵开始；当卵裂分裂到16-32个细胞时，卵裂产生的子细胞逐渐形成致密的细胞团，形似桑葚时，这时的胚胎称为桑葚胚，这一阶段及之前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，属于全能细胞。胚胎进一步发育，细胞开始出现分化，形成内细胞团；滋养层；随着胚胎进一步发育，胚胎内部出现了含有液体的囊腔—囊胚腔，这个时期的胚胎叫做囊胚。胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。

【详解】

囊胚时期聚集在胚胎一端的细胞形成内细胞团，将来发育成胚胎的各种组织，即发育成完整的胚胎，而沿透明带内壁拓展和排列的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发育成胎膜和胎盘，为胚胎的发育提供营养，故“胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化表述”正确。24、A【分析】【详解】

生物武器是利用生物战剂杀伤人员、牲畜、毁坏植物的武器。生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等。故该说法正确。五、实验题(共1题，共5分)25、略

【分析】【分析】

此题考查了基因工程技术；目的基因的获得方法有三种：从基因文库中获取；PCR技术扩增、人工合成法；基因表达载体中的LacZ基因被插入灭活。

（1）

将人的内皮抑素基因导入大肠杆菌细胞中；能合成人的内皮抑素，其原因是各种生物共用一套密码子，且蛋白质的合成都经过转录和翻译过程。

（2）

双酶切后；目的基因两端的黏性末端不同，被切开的运载体两端的黏性末端也不同，这样可以避免目的基因与载体反向连接，还能减少目的基因与目的基因；载体与载体的连接，还减少了目的基因和质粒的自身连接，提高了重组质粒的比例。

（3）

大肠杆菌pUC18质粒的LacZ基因中如果没有插入外源基因；LacZ基因便可表达出β半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和Xgal时，Xgal便会被β半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之，则形成白色菌落。选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖；氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入的物质有IPTG、Xgal和氨苄青霉素，要使其形成菌落还要加入琼脂形成固体培养基。因为重组质粒的LacZ基因中插入了目的基因，使LacZ基因不能表达出β﹣半乳糖苷酶，所以成功导入重组质粒的大肠杆菌在培养基中形成白色菌落。

（4）

由表中数据可知；粗提表达产物浓度越高，活的内皮细胞数目越少，说明重组内皮抑素（或粗提表达产物）能够抑制毛细血管内皮细胞的增殖。

【点睛】

本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生的理解应用能力和信息转化能力，属于中等难度题。【解析】（1）各种生物共用一套密码子；且蛋白质的合成都经过转录和翻译过程。

（2）反向(任意)

（3）IPTG；Xgal、琼脂白重组质粒的LacZ基因中插入了目的基因；使LacZ基因不能表达出β－半乳糖苷酶。

（4）重组内皮抑素(或粗提表达产物)能够抑制毛细血管内皮细胞的增殖六、综合题(共4题，共12分)26、略

【分析】【分析】

1；获得目的基因的方法：①从基因文库中获取；②利用PCR技术扩增；③人工合成（化学合成）。

2；原核细胞的细胞质中只有核糖体一种细胞器。

（1）

猪胰岛素可以作为抗原；引起人体产生体液免疫，从而产生抗猪胰岛素抗体，因此用猪胰岛素进行治疗，易诱导人体产生抗猪胰岛素抗体。

（2）

a；人胰岛素基因有2个内含子；而大肠杆菌的基因没有内含子，为了使目的基因能够在大肠杆菌中表达出正确的蛋白质，获取的目的基因不应该含有内含子，而直接从细胞内总DNA中分离的目的基因含有内含子，a符合题意；

b、用化学方法直接人工合成的目的基因不含内含子，可在大肠杆菌内准确表达，b不符合题意；

c；以mRNA为模板逆转录合成的目的基因不含内含子；可在大肠杆菌内准确表达，c不符合题意；

d；利用PCR扩增人胰岛素原基因的编码序列；获得的目的基因不含内含子，可在大肠杆菌内准确表达，d不符合题意。

故选a。

（3）

与大肠杆菌细胞相比；酵母菌细胞属于真核细胞，利用酵母菌生产胰岛素的优势是具有原核生物无法比拟的真核生物蛋白翻译后修饰加工系统（内质网和高尔基体加工），可对前胰岛素原进行翻译后加工。

（4）

重组人胰岛素工程菌构建完成后；进行大规模培养生产胰岛素还需要采用发酵工程技术进行胰岛素的生产。

（5）

进餐后；血糖浓度升高，胰岛素分泌增加，根据“皮下注射这种速效胰岛素类似物后，起效快（10-20分钟起效）；血药浓度峰值高、药效消失快”，可知能更好地模拟餐时生理胰岛素曲线的是速效胰岛素类似物。

【点睛】

本题考查基因工程的应用，要求考生识记基因工程的操作步骤，掌握基因工程技术的相关应用，能结合题中信息准确答题。【解析】（1）猪胰岛素可作为抗原；引起人体产生体液免疫。

（2）a

（3）具有原核生物无法比拟的真核生物蛋白翻译后修饰加工系统；可对前胰岛素原进行翻译后加工。

（4）发酵。

（5）速效27、略

【分析】【分析】

1；培养基的制作过程是:计算、称量、溶化、调整pH、分装、灭菌、倒平板冷凝后；应将培养皿倒置。

2；选择培养基是指通过培养混合的微生物；仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。

3；实验室常用的接种方法有平板划线法或稀释涂布平板。

(1)

根据题干信息可知；要分离筛选出一种能降解聚乙烯的真菌-桔青霉，则应该选用以聚乙烯为唯一碳源的固体培养基；经常使用高压蒸汽灭菌对培养基进行灭菌；实验室常用的接种方法有平板划线法或稀释涂布平板，故从培养基甲上挑选能生长的菌株，采用平板划线法或稀释涂布平板法接种获得5个真菌的单菌落，储存备用；获得菌种后若要短期保存，可将菌种接种在固体斜面培养基上，放在4℃冰箱中；若要长期保存，常采用甘油管藏法。

(2)

确定分离得到的不同菌株分解地膜能力的强弱；自变量为菌株种类，因变量为分解地膜能力，地膜条大小为无关变量，则应该保持培养基中的地膜条大小相同；摇床培养的目的是使降解菌能充分吸收营养物质；增大培养液中的氧容量，有利于降解菌的生长繁殖；有利于降解菌的代谢废物排出等。

(3)

4个培养基平