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第2讲微生物的培育和利用(时间:30分钟)一、选择题1.(2021·东城区检测)欲从土壤中分别出能分解尿素的细菌,下列试验操作中不正确的是 ()。A.将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释B.同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板C.可将未接种的培育基在相同条件下培育作为对比D.用加入刚果红指示剂的培育基可筛选出分解尿素的细菌解析本题考查微生物的分别与培育,意在考查考生的试验分析力量。为了获得单个菌落,应将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释,A正确;为了使结果更加精确 ,同一浓度的土壤稀释液至少要涂布3个平板进行重复试验,然后计算平均值,B正确;加入刚果红的培育基用来筛选纤维素分解菌,D错误。答案D2.(2021·广东深圳一模,2)某学者欲争辩被石油污染过的土壤中细菌数量,并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是 ()。A.利用平板划线法对细菌进行计数B.用以石油为唯一碳源的培育基筛选C.接受稀释涂布平板法分别菌种D.称取和稀释土壤时应在火焰旁解析平板划线法能对细菌分别纯化,但不能对细菌进行计数,稀释涂布平板法可以分别菌种还可进行计数,A项错误。答案A3.(2021·成都模考)分别土壤中分解尿素的细菌,对培育基的要求是 ()。①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐A.①③⑤⑦B.①③⑤⑧C.②④⑥⑧D.①④⑥⑦解析土壤中分解尿素的细菌能够利用尿素作为氮源,因此若培育基中氮源只有尿素,分解尿素的细菌能生长,其他微生物不能生长;分别微生物要用固体培育基,必需加入琼脂;土壤中分解尿素的细菌属于异养型微生物,需要加葡萄糖作为碳源。答案B4.(2021·成都模考)关于制备牛肉膏蛋白胨固体培育基的叙述错误的是()。A.操作挨次为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C.等培育基冷却至50℃左右时进行倒平板D.待平板冷却凝固5~10min后将平板倒过来放置解析操作挨次为先灭菌再倒平板;牛肉膏会黏附在称量纸上,应当将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯;培育基冷却至50℃左右既没有凝固,同时又不烫手,可以进行倒平板;为了防止冷却过程中培育皿盖上凝集的水珠对平板的污染,培育基冷却凝固后就要将平板倒过来放置。答案A5.(2021·淮阴期末质量调研,14)如图是微生物平板划线示意图。划线的挨次为12345。下列操作方法正确的是 ()。A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌B.划线操作应在火焰上进行C.在5区域中才可以得到所需菌落D.在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌解析本题考查平板划线操作方法。在每次划线前后都要对接种环进行灭菌,接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧,接种时划线操作是在火焰旁进行。在5个区域中,只要有单个活细菌,通过培育即可获得所需菌落。答案D6.(2022·东城区检测)下列关于微生物分别和培育的叙述,错误的是 ()。A.微生物培育前,需对培育基进行消毒B.测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法C.分别土壤中不同的微生物,要接受不同的稀释度D.分别能分解尿素的细菌,要以尿素作为培育基中的唯一氮源解析微生物培育前,需对培育基进行灭菌,而不是消毒;测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法;分别土壤中不同的微生物,要接受不同的稀释度,由于不同的微生物在土壤中的含量不同;分别能分解尿素的细菌,要以尿素作为培育基中的唯一氮源。答案A7.(经典高考)下列是关于“检测土壤中细菌总数”试验操作的叙述,其中错误的是 ()。A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培育基,经高温、高压灭菌后倒平板B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL,分别涂布于各组平板上C.将试验组和对比组平板倒置,37℃恒温培育24~48hD.确定对比组无菌后,选择菌落数在300以上的试验组平板进行计数解析本题以“检测土壤中细菌总数”试验为命题点,考查考生对基础学问的识记状况。在细菌计数时,为保证结果精确 ,一般选择菌落数目在30~300的平板进行计数。答案D二、非选择题8.(203·潍坊三模A卷)白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一,应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵菌分生孢子在寄主表皮、气孔或消化道上,遇适宜条件开头萌发,生出芽管。同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮,通过芽管入侵虫体,在虫体内生长繁殖,消耗寄主体内养分,产生各种毒素,形成大量菌丝和孢子,布满虫体全身。请回答下面的问题:(1)从自然菌样中筛选较抱负的生产用菌种的一般步骤是:采集菌样→富集培育→________→性能测定。白僵菌的菌样应从________采集。(2)分别白僵菌菌种的培育基属于________培育基。在配制白僵菌培育基时常加入蔗糖、硫酸铵、硝酸钾等成分,蔗糖属于________养分物质。(3)白僵菌纯化培育常用的接种方法是________和________。(4)分别与培育过程中,培育基和接种工具都要进行________处理,利用高温可以使微生物的________等物质发生变性。答案(1)纯化分别感病昆虫(2)选择碳源(3)平板划线法稀释涂布平板法或稀释混合平板法(4)灭菌蛋白质和核酸9.(2021·山东潍坊一模,34)某试验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌,设计试验步骤如下,请赐予合理的补充。(1)采样与培育:将采集的土样混匀后称取1g,置于经过________法灭菌处理的________(填“固体”或“液体”)培育基中,28℃振荡培育。(2)接种与选择:为避开培育液中菌体浓度过高,需将培育液进行________处理之后,将菌液涂布接种于以________为唯一碳源的固体培育基上,30℃条件下培育。为避开污染,需将培育皿呈________状态放置。(3)筛选与纯化:将适量的碘液滴加在平板中的菌落四周,假如菌落四周的现象是________,则说明此种菌能够________。从平板中挑取试验效果明显的目的菌株,接受________法接种于新的培育基平板,可对菌株进行进一步的纯化。答案(1)高压蒸汽灭菌液体(2)系列稀释(或“梯度稀释”)淀粉倒置(3)消灭透亮 圈分泌淀粉酶使淀粉发生水解(平板)划线10.(2021·枣庄一模)为验证某种中药牙膏是否像其广告宣扬的一样具有较强的抑菌功效,某生物爱好小组的同学设计了如下试验(符合无菌操作要求)。请分析下述试验过程并回答下列问题。①用无菌水漱口,向漱口液中加入适量的该中药牙膏;②配制牛肉膏蛋白胨固体培育基;③将上述样品接种到培育基上,在适宜条件下进行培育;④一段时间后,对培育结果进行观看并进行菌落计数(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培育基的一般步骤是:计算、称量、溶化、灭菌、________;培育基在分装前往往要进行________。(2)本试验样品接种时最好接受________法。培育一段时间后,培育基表面长出菌落,每一个标准菌落来源于样品中的________。(3)食品平安检测时通常接受大肠杆菌作为致病微生物的指示菌,为测定哪些菌属于大肠杆菌,可选用________培育基对菌落进行鉴定,大肠杆菌的菌落在该培育基上呈现黑色。(4)本试验设计中的一个明显错误是________,请加以改正_________________________________________________________________。(5)证明所用培育基已经彻底灭菌的方法是_____________________________。答案(1)倒平板高压蒸汽灭菌(2)稀释涂布平板一个活菌(3)伊红—美蓝(4)没有设置对比试验应将漱口液分为两份,一份加牙膏,一份不加牙膏分别接种培育(5)对未接种的培育基进行培育,如无菌落消灭,则证明培育基已彻底灭菌11.(2021·淄博二模)生物乙醇是以生物质为原料生产的可再生能源,工业上利用微生物将木屑、废纸(主要成分为木质纤维)转化为乙醇的基本工艺流程如图所示,请回答:(1)筛选微生物X菌种的培育基中,应以________为唯一碳源,在培育基中加入________,并依据水解圈的大小来筛选微生物X。(2)微生物筛选常用的接种方法有________和________。(3)下表为筛选时,同一培育基上的单细胞形成的菌落状况:菌落编号菌落直径/mm水解圈直径/mm菌落特征27菌丝较粗而长,菌落干燥呈绒毛状或棉絮状,有霉味②12③25④313⑤311微生物X应是______________,筛选时应选择________号菌落,理由是________________________________________________________________。(4)微生物Y主要是________。答案(1)纤维素刚果红(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)霉菌④生长速度快,纤维素酶产量(活性)高(4)酵母菌12.苹果醋具有养分丰富,增加机体免疫力,护肤养肝等多种功效,以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程简图如下,请分析并回答:(1)过程甲中使用的微生物是________。将鲜苹果汁装入发酵瓶时,要留有大约________的空间,经过10~12天后,在酸性条件下用重铬酸钾检测样液,假如颜色变为________色,说明产生了酒精。(2)过程乙中使用的微生物是________,可以从食醋中分别纯化获得,步骤如下:第一步:配制________(填“固体”或“液体”)培育基。其次步:对培育基进行高压蒸汽灭菌。第三步:接种。微生物常用的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法。第四步:培育。温度把握在________℃范围内。第五步:选择符合要求的___________________________________________。(3)在________________的条件下,假如缺少糖源,乙中的微生物将甲过程的产物变为________________,再将其变为醋酸。解析(1)制作果酒应选用酵母菌。将鲜苹果汁装入发酵瓶时,要留有大约eq\f(1,3)的空间。重铬酸钾溶液与酒精反应呈灰绿色。(2)制作果醋应选用醋酸菌;分别纯化菌种需要固体培育基;醋酸菌生长的最适温度为30~35℃。(3)氧气充分时,假如缺少糖源,醋酸菌会将乙醇变为乙醛,再将其变为醋酸。答案(1)酵母菌eq\f(1,3)灰绿(2)醋酸菌固体30~35菌落(3)氧气充分(有氧)乙醛13.(2021·西安统考)35%~40%的甲醛水溶液(福尔马林)可作为防腐剂,其防腐的原理是使蛋白质变性。自然界中有能分解甲醛的细菌和真菌。下图为分别和纯化分解甲醛细菌的试验过程。请分析回答:(1)②过程的目的是________________________________________________,③过程培育出的是_________________________________________________。(2)上述试验中,不需要进行灭菌处理的是________,培育基灭菌的常用方法为_______________________________________________________________。(3)由③→④的接种可选用________法,通过培育能获得________。经过⑤过程后,取样测定甲醛浓度,选出________,再分别、培育菌株。此菌种异化作用的类型是___________________________________________________。(4)为争辩甲醛初始浓度对菌株降解甲醛力量的影响,进行了相应试验并得到如下结果。由图可知,当甲醛的初始浓度小于1200mg/L时,菌株________;当甲醛的初始浓度增高至1600mg/L时,48h后菌株对甲醛的降解力量很弱,甚至失去降解力量,其缘由可能是_______________________________________________________
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