2025年华东师大版选修3生物下册阶段测试试卷

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①精子发生顶体反应释放顶体酶。

②顶体酶的作用使精子穿过放射冠；透明带、卵细胞膜。

③卵子完成减数第一次分裂。

④精子的核变成雄原核；卵子的核成为雌原核。

⑤防止多精入卵的透明带反应，卵细胞膜反应A.①②⑤B.①④⑤C.②③④D.②④⑤8、小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种具有不同功能的细胞；制备流程如图所示。下列相关叙述错误的是（）

A.囊胚中b处的各个细胞不具有发育的全能性B.用胰蛋白酶处理a处的细胞后可获得分散的胚胎干细胞C.获得的胚胎干细胞可在CO2培养箱中进行培养D.a处的细胞与b处的细胞含有的核酸相同9、提高粮食产量，保证粮食安全是我国的重要政策。根据所学知识判断，下列说法与事实相符的是（）A.培育推广高产抗逆新品种，有利于提高农田产出，提高效益B.大量喷洒农药除虫、除草，减小了劳动强度，应该一直坚持C.收割作物时将秸秆直接粉碎还田，提高了人们对能量的利用率D.多种作物混种，能大幅降低人们对农田的干预，有效提高产量评卷人得分二、多选题(共5题，共10分)10、下列有关基因工程相关工具的叙述，正确的是A.DNA连接酶能将目的基因与质粒黏性末端的碱基随机黏合B.限制酶将一个线形DNA分子切成两个片段需破坏两个磷酸二酯键C.没有与目的基因重组的质粒也可以进入受体细胞D.使用质粒载体可以避免目的基因在受体内被分解11、所谓“设计试管婴儿”，是指将体外受精形成的胚胎（几个细胞期）在植入母体孕育前，将一个细胞取出进行某些基因检测，当检测结果符合人们需要时，再把胚胎植入母体孕育。下列有关叙述正确的是（）A.“设计试管婴儿”应用了细胞核移植、早期胚胎培养、胚胎移植等技术B.与“设计试管婴儿”相比，“试管婴儿”不需要经过遗传学诊断C.“设计试管婴儿”和“试管婴儿”都是有性生殖D.对于“设计试管婴儿”技术，我们应该强行禁止、反对争论12、H-Y抗原存在于雄性个体细胞的表面，决定性腺向雄性方向发育。可在牛早期胚胎培养液中添加抗H-Y单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列说法正确的是（）A.培养液中添加抗H-Y单克隆抗体能促进牛早期胚胎发育成雄性B.取内细胞团的细胞进行性别鉴定后再进行胚胎移植C.胚胎移植的供体会影响供体胚胎的遗传特性D.用H-Y抗原免疫母牛可以获得相应抗体13、小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞、制备流程如图所示。下列叙述错误的是（）

A.为获得更多的囊胚，采用激素注射促进雄鼠产生更多的精子B.细胞a和细胞b内含有的核基因不同，所以全能性高低不同C.用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞D.胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养14、下列关于胚胎干细胞及生物技术的叙述正确的是（）A.在胚胎工程中，胚胎干细胞可来自桑葚胚的内细胞团B.胚胎干细胞体积小、细胞核大、核仁明显，具有发育的全能性C.胚胎干细胞在滋养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中能维持不分化的状态D.胚胎干细胞可以治疗帕金森综合征等由于细胞坏死、退化或功能异常引起的疾病评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)15、生物学家利用基因工程技术通过生物反应器生产人的血清蛋白。请根据相关知识回答下列问题：

（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”是_______________________________

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是________

（3）基因工程中最常用的运载体是______

（4）人的基因在牛体内能表达，说明人和牛______16、自然条件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体，其主要步骤如图所示。回答下列问题：

（1）从供体奶牛获得的精子，需对其进行___________处理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞，为使其超数排卵常使用____________激素处理；采集到卵母细胞后，在体外将其培养到___________期；使其成熟。

（3）步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛，步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。

（4）进行步骤乙时，受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________，这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。17、基因治疗：基因治疗是指用正常基因_______或______患者细胞中有缺陷的基因，从而达到治疗疾病的目的。18、根据课本知识填空：

（1）神经元的轴突末梢经过多次分支；最后每个小枝末端膨大，呈杯状或球状，叫做________。

（2）抗体可以与病原体结合；从而抑制病原体的繁殖或___________________________。

（3）要检测目的基因是否转录出了mRNA；可以用____________________________做探针。

（4）所谓人工种子就是以植物组织培养得到的________________________（写出2个即可）等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子。

（5）胰岛素能促进组织细胞加速_______________葡萄糖。19、今年年初；爆发了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠状病毒通过其表面的S-蛋白与人细胞膜上的ACE2相互识别，感染人的呼吸道上皮细胞。请分析回答问题：

（1）新型冠状病毒表面的S-蛋白作为_________剌激淋巴细胞，使机体产生_________性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是_________。

（2）感染病毒后，免疫系统对肺细胞强烈攻击引发肺炎，此时可通过适度使用_________对病人进行治疗；使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）科学家采集了感染新型冠状病毒并已康复的甲、乙两人的血液，检测相关抗体的水平，结果如图1。据此分析，应选取_________的B淋巴细胞用以制备单克隆抗体（单抗）。

（4）将制备的多种单抗分别与病毒混合，然后检测病毒对宿主细胞的感染率，结果如图2。据此分析，对病毒抑制效果最好的单抗是__________号。

（5）患者康复后一段时间，若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的__________细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。20、下图表示哺乳动物精子和卵细胞发生和成熟的示意图。请据图回答下列问题：

（1）③过程中精子头部的顶体是由__________发育来的；④过程在__________内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带。为了阻止多精入卵，会发生__________反应和__________反应。

（3）精子的发生开始的时期是__________；雌性动物卵泡的形成的时期是__________。

（4）初级卵母细胞进行Ⅰ过程是在__________时期完成的，Ⅱ过程是在__________过程中完成的。21、请写出基因工程的概念：_________________。请写出胚胎移植的概念：_____________________。请分别写出植物组织培养和动物细胞培养的原理_________。22、自然条件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一头奶牛一年只能繁殖一头牛犊。通过胚胎工程技术可以快速繁育优良个体，其主要步骤如图所示。回答下列问题：

（1）从供体奶牛获得的精子，需对其进行___________处理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母细胞，为使其超数排卵常使用____________激素处理；采集到卵母细胞后，在体外将其培养到___________期；使其成熟。

（3）步骤甲、乙分别指___________、___________。为筛选出具有优良性状的母牛，步骤乙之前应鉴定胚胎中与___________有关的基因。

（4）进行步骤乙时，受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生___________，这为胚胎在代孕母牛体内的存活提供了可能。评卷人得分四、判断题(共5题，共25分)23、一般情况下一个卵细胞只能由一个精子发生融合形成受精卵()A.正确B.错误24、精子入卵后形成雄原核；同时卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核()A.正确B.错误25、受精包括受精前的准备阶段和受精阶段，在自然状态下，哺乳动物的受精在子宫内完成。（选择性必修3P56）()A.正确B.错误26、下图表示哺乳动物发育过程的几个阶段；请判断下列题的叙述是否正确？

（_____）（1）从A到C的过程中有机物的含量减少。

（_____）（2）A；B时期胚胎中的细胞都是全能细胞。

（_____）（3）胚胎移植必须使用处于B或C时期的胚胎。

（_____）（4）图示过程细胞通过有丝分裂增殖，遗传物质可能会发生改变。A.正确B.错误27、在生态工程建设中，只能遵循“先污染、破坏、再治理”的发展思路______A.正确B.错误评卷人得分五、非选择题(共3题，共6分)28、下列是基因工程的有关问题；请回答：

(1)限制性核酸内切酶可以识别双链DNA分子中的特定核苷酸序列；并可以使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的________(填化学键名称)断裂，形成的末端总体可分为两种类型，分别是________。

(2)目的基因和运载体重组时需要的工具酶是________；和限制性核酸内切酶相比，它对所重组的DNA两端碱基序列________(有或无)专一性要求。

(3)图1表示构建表达载体时的某种质粒与目的基因。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是－G↓GATCC－，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC－。分析可知，最好选择限制酶________切割质粒，限制酶________切割目的基因所在的DNA，这样做的好处分别是________、________。29、图甲和图乙分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培养过程示意图；请回答下列问题。

（1）图甲和图乙所示的过程中；都必须用到动物细胞工程技术手段是__________________。

（2）图甲中②过程所用的方法有________________________（至少写出两种方法）。

（3）过程④表示在____________________中培养杂交瘤细胞；从而获得单克隆抗体。单克隆抗体和传统的血清抗体相比具有________________________等优点。用单克隆抗体与治疗癌症的药物相结合的“生物导弹”能定向攻击癌细胞，主要是利用其能与癌细胞___________________的特点。

（4）关于图乙过程；下列表示不正确的是___________

A；克隆羊的性别由白面绵羊决定。

B；“多莉”的性状与黑面和白面绵羊都有关系。

C；重组细胞实现全能性；说明乳腺细胞分化程度低。

D；构建重组细胞的操作是在体外无菌条件下进行的。

（5）下列哪一项不属于图乙过程的用途_________

A；有选择地繁殖某一性别的家畜B、繁殖家畜中的优良个体。

C；用于保存物种D、改变动物的染色体数目。

（6）在目前现有技术条件下；还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体。而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞内，才能发育成新个体。你认为最可能的原因是_______

A；卵细胞大；便于操作。

B；卵细胞含有的营养物质多。

C；重组细胞才具有全能性。

D、卵细胞的细胞质可使体细胞细胞核全能性得到表达30、已知细胞合成DNA有D和S两条途径；其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在培养皿中混合，加促融剂促进细胞融合，获得杂种细胞，并生产单克隆抗体。请回答下列有关问题：

（1）生产单克隆抗体时，一般不直接利用B淋巴细胞，主要原因是____________________________________________________________________。

（2）①过程中，常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是__________。

（3）②过程为________培养，培养液中还需通入气体物质，其中通入CO2的目的是__________________________________________________________________。

（4）④表示杂交瘤细胞的扩大培养，其既可在体外培养，也可注射到小鼠________内培养，体内培养与体外培养相比，其优点是____________________。

（5）为了从培养液中分离出杂交瘤细胞，需要③过程向培养液中加入_____________，理由是杂交瘤细胞可利用__________________途径合成DNA，从而才能在该培养液中增殖。评卷人得分六、实验题(共4题，共40分)31、Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：

（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的_______。

（2）步骤②中，重组胚胎培养到____期时，可从_______分离出ES细胞。

（3）步骤③中，需要构建含有基因Rag2的表达载体。可以利用_______扩增Rag2基因片段。用HindIII和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有______和_______的酶切位点。

（4）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的_________________，用_______进行杂交实验。32、新型的微生物蛋白农药是由微生物产生的一类蛋白质药物；能够激活农作物的防御系统，提高农作物抗病抗虫的能力。科研人员在某个真菌菌株上发现了激活蛋白AP45，并进行了相关研究(见下图）。

（1）上图中的①是____________；②是__________________。

（2）所设计的引物对，应与________能互补配对，但在_____之间不应有能互补配对的核苷酸序列。

（3）据图分析，该实验以__________基因作为标记基因。

（4）如果要利用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否成功表达，则需要以_______为抗原；制备出其单克隆抗体。

（5）以此类激活蛋白制成的微生物蛋白农药并不会直接杀死害虫或者病原生物，是一种环境友好型的产品，具有_________等优点(要求一项）。此类农药的研制和使用，遵循了生态工程中的______原理(要求一项)。33、研究表明生物制剂W对不同种类动物细胞的分裂均有促进作用。有同学设计相关实验来验证这个观点。请根据以下提供的实验材料；完善该实验步骤，并预测实验结果。

实验材料：培养液；正常肝组织、肝癌组织、W、胰蛋白酶。

（要求与说明：答题时不考虑加入W后的体积变化等误差。提供的细胞均具有分裂能力；只进行原代培养且培养条件适宜）

（1）实验步骤：

①用_________分别处理正常肝组织和肝癌组织获得分散的细胞。将两种分散的细胞加入培养液中制成两种细胞悬液。培养液需要中加入__________等营养物质和__________用以灭菌。

②在显微镜下用_____________直接计数两种细胞悬液中细胞的数量；并进行记录。

③取灭菌后的培养瓶若干个均分为A、B两组，A组加入正常肝细胞悬液；B组加入_________。从A、B组中各取出一半培养瓶作为C、D组，分别加入_________。放入动物细胞培养箱在适宜条件下培养。

④各组样品在培养箱中培养一段合适的时间后，每组取部分样品，加入_____________后摇匀；在显微镜下计数并记录细胞数量。

⑤重复④若干次。

⑥统计并分析所得数据。

（2）预测实验结果（用坐标系和曲线示意图表示）_____________34、“基因靶向”技术；指的是应用DNA同源重组原理，通过一定的载体，用设计好的目的基因替代靶基因，从而达到使靶基因功能丧失的目的。借助这一技术，科学家可以用小鼠进行实验，使其体内的某种特定基因丧失功能，以帮助人们找到治疗疾病的有效方法。下面是该实验的基本过程．请回答有关问题：

（1）获得胚胎干细胞（ES细胞）。ES细胞是由______中分离出来的一类细胞。实验一般采用ES细胞作为目的基因的受体细胞，这是因为ES细胞具有发育的______。

（2）获取目的基因：

①目的基因是靶基因的同源片段。经过修饰使靶基因的功能改变或丧失，就可获得目的基因。如果要获得活性降低了的X酶蛋白的目的基因，可以根据此蛋白的结构及功能进行X酶基因的改造，这一技术叫做______工程。

②为了提高实验成功率，需要通过________技术扩增目的基因；以获得目的基因的大量拷贝。

（3）构建基因表达载体。一个基因表达载体的组成，除了目的基因以外，还必须有______基因，以便于细胞的筛选。质粒具有的一个或多个_________位点；使目的基因插入其中成为可能，因此常被选作运载体．

（4）_________；并从中筛选，然后培育出小鼠。

①由ES细胞培育出小鼠的过程中，需要采用______技术和______技术。

②为了确定该小鼠体内是否成功发生了基因的同源重组，可通过观察小鼠的性状来检测，这属于______水平的鉴定。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、B【分析】【分析】

分析题图：①表示以mRNA为模板逆转录合成DNA的过程；②表示基因表达载体的构建过程；该过程是基因工程的核心步骤；③表示将目的基因导入受体细胞；④为目的基因的检测与表达。

【详解】

①为逆转录过程；需要逆转录酶的参与，原料是碱基组成为A；T、G、C的四种游离的脱氧核苷酸，A错误；②表示基因表达载体的构建过程，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗产给下一代，B正确；如果受体细胞是细菌，不能使用炭疽杆菌，因为炭疽杆菌具有致病性，C错误；④过程包括转录和翻译，转录所用的原料包括四种含有A、U、G、C的核糖核苷酸，D错误。

故选B。

【点睛】

本题结合流程图，考查基因工程、遗传信息的转录和翻译、核酸的基本组成单位及化学组成，要求考生识记基因工程的原理、工具、操作步骤，能准确判断图中各过程的名称；识记遗传信息转录和翻译的过程、条件等知识；识记核酸的化学组成，能运用所学的知识准确判断各选项。2、D【分析】试管婴儿是采用体外受精、动物细胞培养、胚胎移植等技术形成的，属于有性生殖，会发生基因重组,A、B错误；克隆羊是采用体细胞核移植、胚胎移植等技术后形成的，体现了体细胞细胞核的全能性，C错误；这三者都能实现优良品种的快速大量繁殖，D正确。3、D【分析】【分析】

受精包括受精前的准备阶段和受精阶段：准备阶段1——精子获能；刚刚排出的精子，不能立即与卵子受精，必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力；准备阶段2——卵子的准备，动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂中期时，才具备与精子受精的能力。

卵细胞形成过程；其中减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成，场所在卵巢；减数第二次分裂是在受精过程中完成的，场所在输卵管中。

受精作用完成的标志：在卵黄膜和透明带之间的间隙可以观察到两个极体。

【详解】

A；刚采集的精子不能立刻与卵子受精；必须发生相应的生理变化获能后，才能获得受精能力，A错误；

B；排卵时排出的细胞多为次级卵母细胞；成熟度不同，且并非成熟卵细胞，B错误；

C；卵子形成时；其减数第二次分裂是在输卵管中进行的，并非卵巢，C错误；

D；当在卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到两个极体时；说明卵子已经完成了受精，这是判断卵子是否受精的重要标志，D正确。

故选D。4、D【分析】【分析】

1；基因工程的工具：

①限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。

②DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

③运载体：常用的运载体：质粒；噬菌体的衍生物、动植物病毒。

2；基因表达载体的构建：

（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在；并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。

（2）组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。

①启动子：是一段有特殊结构的DNA片段；位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。

②终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段；位于基因的尾端，终止子的作用是使转录在所需要的地方停止。

③标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因；从而将含有目的基因的细胞筛选出来，常用的标记基因是抗生素抗性基因。

【详解】

A；运载体不是构建基因表达载体需要的工具；A错误；

B；水解酶的范围太广；DNA水解酶分为两种外切核酸酶和内切核酸酶，构建基因表达载体需要的是内切酶，B错误；

C；运载体不是构建基因表达载体需要的工具；C错误；

D；构建基因表达载体需要限制酶切割目的基因和运载体；用DNA连接酶处理基因相同黏性末端的目的基因和运载体进而形成重组DNA，D正确。

故选D。5、B【分析】【分析】

根据题干信息分析；某些酶的化学本质是DNA，称为脱氧核酶或酶性DNA，其包括切割DNA的RNA的脱氧核酶；切割DNA的脱氧核酶、具有DNA连接酶功能的脱氧核酶等几种类型。

【详解】

脱氧核酶有多种类型，一种切割DNA的脱氧核酶只能特异性切割多种DNA分子的特定的序列，A错误；研究脱氧核酶，有助于在抗病毒、治疗肿瘤及遗传性疾病方面获得突破，B正确；有的脱氧核酶具有DNA连接酶功能，因此脱氧核酶能催化两个不同的DNA分子通过磷酸二酯键连接起来，该过程需要消耗ATP，C错误；脱氧核酶的活性也会受到温度和pH的影响，D错误。6、B【分析】1；体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。

2；非人灵长类核移植主要难在三个方面：以猕猴为例：一是猴细胞核不易识别；去核难度大；二是猴的卵母细胞容易提前激活。操作稍一不小心，卵母细胞就可能被激活，然后它就会先开始自主卵裂，体细胞就跟不上了，最后导致这个卵无法发育；三是猴的体细胞克隆胚胎发育差，培养囊胚效率低，优质囊胚比例低。

3；哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。由于动物胚胎细胞分化程度低；恢复其全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，因此，动物体细胞核移植的难度也就明显高于胚胎细胞核移植。

【详解】

A；非人灵长类动物的体细胞核移植难度较大；如细胞核不易识别，去核难度大及卵母细胞容易提前激活等，A正确；

B；由于动物胚胎细胞分化程度低；恢复其全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，因此，动物体细胞核移植的难度也就明显高于胚胎细胞核移植，B错误；

C；直接从活体动物卵巢中吸取采集的卵母细胞；需要在体外经人工培养至MII中期，C正确；

D；哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植；体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，D正确。

故选B。7、B【分析】【分析】

受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。

【详解】

①受精过程中；获能后的精子与卵子相遇时，首先发生顶体反应，顶体内的酶释放出来，①正确；

②顶体释放的顶体酶可溶解放射冠卵丘细胞之间的物质和透明带；形成精子通过的通道；精子与卵黄膜结合是由于卵细胞膜表面有大量微绒毛，当精子与卵细胞膜接触时，立即被微绒毛抱合，随后，精子外膜和卵细胞膜相互融合，这里不再是顶体酶的作用，②错误；

③精子入卵后被激活的卵子完成减数第二次分裂；卵子完成减数第一次分裂不是发生在受精作用过程中，③错误；

④精子入卵后；尾部脱落，原有核膜破裂，随后形成新的核膜，形成一个比原来精子核还大的核，叫做雄原核；减数第二次分裂后形成的成熟卵细胞的核叫做雌原核，④正确；

⑤透明带反应是在精子触及卵细胞膜的瞬间；产生阻止后来的精子进入透明带的生理反应，防止多个精子进入透明带，是引起多个精子入卵的第一道屏障，⑤正确。

综上所述；发生在受精过程中的是①④⑤，B符合题意。

故选B。8、D【分析】【分析】

分析题图：图中a为内细胞团细胞，b为滋养层细胞；其中内细胞团细胞具有发育的全能性，属于胚胎干细胞。

【详解】

A、a为内细胞团细胞，b为滋养层细胞；内细胞团的各个细胞具有发育的全能性，而滋养层细胞不具有发育的全能性，A正确；

B；胚胎干细胞（ES细胞）是由早期胚胎或原始性腺中分离出的一类细胞；可从内细胞团细胞分离得到，故用胰蛋白酶处理a处的细胞后可获得分散的胚胎干细胞，B正确；

C、动物细胞培养时需要在5%CO2的培养箱中进行培养；以维持培养液的pH，C正确；

D、细胞a和细胞b是由同一个受精卵经过有丝分裂和分化形成的，故核基因相同，a为内细胞团细胞，b为滋养层细胞，由于基因选择性表达，所以a处的细胞与b处的细胞含有的mRNA不完全相同；D错误。

故选D。

【点睛】9、A【分析】【分析】

研究能量流动的意义：实现能量的多级利用；提高能量的利用率，如建立沼气池；调整能量流动关系，使能量持续高效的流向对人最有益的部分，如除虫；除草。生态系统的抵抗力稳定性与物种多样性和营养结构的复杂程度有关。

【详解】

A；高产抗逆新品种的推广；可减少农药等使用，有利于提高农田的产量，提高效益，A正确；

B；大量使用农药；导致害虫等生物的抗性增强，而且污染环境，不可持续，B错误；

C；玉米、小麦秸秆直接还田；秸秆中的能量没有为人所用，能量的利用率并没有提高，发展生态农业可以提高能量利用率，C错误；

D；农田生态系统离不开人们的影响干预；按照农田生态规律科学地进行间作、套种、混种、复种等，能有效地提高自然资源的利用率，获得较好的经济效益、社会效益和生态效益，D错误。

故选A。二、多选题(共5题，共10分)10、B:C:D【分析】【分析】

1、关于限制酶，考生可以从以下几方面把握：

（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。

（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。

（3）结果：形成黏性末端或平末端。

注意：用限制酶切割DNA时，每切开一个切口需要水解两个磷酸二酯键。

2、DNA连接酶：

（1）根据酶的来源不同分为两类：E．coliDNA连接酶、T4DNA连接酶。这二者都能连接成黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。

（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

3、限制酶切割一个识别位点将断裂两个磷酸二酯键，因此限制酶切割质粒时断裂两个磷酸二酯键，形成两个黏性末端；而限制酶切割目的基因时，将断裂四个磷酸二酯键，形成四个黏性末端。

4；在基因工程；为了防止质粒和目的基因的自身环化，常使用不同的限制酶切割目的基因和质粒；并且不同的限制酶切割形成的黏性末端的碱基序列可能是相同的，因此它们也能发生重组。

【详解】

DNA连接酶能将目的基因与质粒黏性末端的两脱氧核苷酸之间通过形成新的磷酸二酯键连接起来；A错误；根据分析可知，限制酶将一个线形DNA分子切成两个片段需要切开一个切口，即破坏两个磷酸二酯键，B正确；质粒是一种裸露的；结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子，质粒与目的基因没有成功重组也可以被导入受体细胞，C正确；使用质粒运载体是为了将目的基因导入受体细胞，避免目的基因被分解，D正确。

故选BCD。11、B:C【分析】【分析】

试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

【详解】

A；“设计试管婴儿”没有应用细胞核移植技术；A错误；

B；“试管婴儿”技术不需要检测基因；也不需要经过遗传学诊断，B正确；

C；“设计试管婴儿”和“试管婴儿”都需要体外受精；都是有性生殖，C正确；

D；“设计试管婴儿”不同于为解决不孕夫妇的生育问题出现的试管婴儿。一般是为了救治病人；需要试管婴儿的骨髓、干细胞、脐带血等，这样的设计都符合伦理道德，D错误；

故选BC。12、C:D【分析】【分析】

题意分析；H-Y抗原存在于雄性个体细胞的表面，决定性腺向雄性方向发育，正常雌性体内不存在H-Y抗原，故利用抗体和抗原特异性结合的原理，用H-Y单克隆抗体筛选胚胎。

【详解】

A；培养液中添加H-Y单克隆抗体；可以和H-Y抗原特异性结合，但不能促进牛早期胚胎发育成雄性，A错误；

B；取滋养层的细胞进行性别鉴定；B错误；

C；因为供体胚胎的遗传性状是由卵细胞、精子的基因决定的；因此胚胎移植的供体会影响供体胚胎的遗传特性，C正确；

D；抗原是能够引起机体产生特异性免疫反应的物质；用H-Y抗原免疫母牛，使其体内发生体液免疫反应，产生相应的浆细胞，进而获得相应抗体，D正确。

故选CD。13、A:B:C【分析】【分析】

1；胚胎干细胞简称ES或EK细胞；来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）。

2；ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中；能够维持不分化的状态．在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段。

【详解】

A；为了获得更多的囊胚；可以采用激素促进成熟雌性个体超数排卵，然后将卵细胞从母体内取出，在试管内与人工采集的精子进行体外受精，培育成胚胎，A错误；

B、细胞a和细胞b是由同一个受精卵经过有丝分裂形成的；故核基因相同，B错误；

C；运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞；首先必须用胰蛋白酶处理内细胞团，分解细胞间的胶原蛋白等，使之分散成单个细胞，C错误；

D、动物细胞培养时需要在5%CO2的培养箱中进行培养；以维持培养液的pH，D正确。

故选ABC。14、B:D【分析】【分析】

胚胎干细胞（1）哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞；来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。（2）具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。

【详解】

A；在胚胎工程中；胚胎干细胞来自囊胚的内细胞团，A错误；

B；胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞；其体积小、细胞核大、核仁明显，具有发育的全能性，B正确；

C；胚胎干细胞在饲养层细胞上或在添加分化抑制因子的培养液中；能维持只增殖不分化的状态，而在有诱导因子存在的情况下，可以发生分化，C错误；

D；利用胚胎干细胞定向诱导分化形成新的组织细胞；并移植给病人，使坏死或退化的组织得以恢复，因此胚胎干细胞可以治疗帕金森综合征等由于细胞坏死、退化或功能异常引起的疾病，D正确。

故选BD。三、填空题(共9题，共18分)15、略

【分析】（1）在基因工程的操作中的“分子手术刀”即切割DNA的是限制核酸内切酶简称限制酶；

（2）在基因工程的操作中的“分子缝合针”是DNA连接酶；

（3）基因工程中最常用的运载体是质粒；

（4）人的基因在牛体内能表达；说明人和牛共用一套遗传密码。

【考点定位】基因工程的基本工具【解析】限制酶DNA连接酶质粒共用一套遗传密码16、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种)，如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期；充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。

【详解】

（1）体外受精前要对精子进行获能处理；使其具有受精能力。

（2）要使动物超数排卵；利用促性腺激素；需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。

（3）步骤甲是人工受精；将受精卵移入受体母牛，进行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。

（4）胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。

【点睛】

胚胎移植的实质：早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】取代修补18、略

【分析】【分析】

1；神经元由细胞体和突起两部分组成；突起又分为树突和轴突，树突短而多，轴突长而少。神经元的轴突末梢经过多次分支，最后每个小枝末端膨大，呈杯状或球状，叫做突触小体。

2；目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

3；人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料；经过人工薄膜包装得到的种子，在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗。

【详解】

（1）神经元由细胞体和突起两部分组成；突起又分为树突和轴突，树突短而多，轴突长而少；轴突末端的多次分支后，每个小枝末端膨大的部分称为突触小体。

（2）抗体可以与病原体结合；从而抑制病原体的繁殖或对人体细胞的黏附。

（3）检测目的基因是否转录出mRNA可采用分子杂交技术。

（4）人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体；不定芽、顶芽、腋芽为材料；经过人工包膜包装得到的种子，可以在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗．植物体细胞杂交技术的优点就是克服远缘杂交不亲和的障碍，或者是打破了生殖隔离。

（5）胰岛素能促进组织细胞加速摄取；利用和储存葡萄糖；从而使血糖水平降低。

【点睛】

本题考查教材基础知识，旨在考查考生的理解、记忆能力，要求考生熟记关键语句，并能运用专业术语准确作答。【解析】突触小体对人体细胞的黏附放射性同位素）标记的目的基因胚状体、不定芽、腋芽、顶芽摄取、利用和储存19、略

【分析】【分析】

分析图1：表示多年前感染EV并已康复的甲；乙两人的血液中抗EV-GP抗体的水平。根据曲线图可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组。

分析图2：表示单抗与病毒混合后病毒对宿主细胞的感染率。根据柱形图可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒对宿主细胞的感染率明显低于其他组别。

【详解】

（1）由题意可知；新型冠状病毒表面的S-蛋白作为抗原刺激淋巴细胞，使机体产生特异性免疫反应，人细胞膜上的ACE2的化学本质是蛋白质。

（2）免疫系统对被新冠病毒感染后肺细胞强烈攻击引发肺炎；此时可通过适度使用免疫抑制剂对病人进行治疗，使其免疫功能下降，以避免肺部严重受损。

（3）由图1可知；多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组，故应选取甲的B细胞用以制备单克隆抗体。

（4）由图2可知；单克隆抗体和病毒混合，加入单抗Ⅲ后，病毒对宿主细胞的感染率较低。因此抑制效果最好的单抗是Ⅲ。

（5）患者康复后一段时间；若再次受到该病毒的攻击，机体内相应的记忆细胞迅速增殖分化，产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。

【点睛】

本题结合图解，考查病毒、单克隆抗体的制备等，要求考生识记病毒的结构，明确病毒没有细胞结构；识记单克隆抗体的制备过程，掌握其优点及相关应用，能结合图中信息准确答题【解析】①.抗原②.特异③.糖蛋白（或蛋白质）④.免疫抑制剂⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.记忆20、略

【分析】【分析】

1；分析题图：①表示染色体复制；②是减数分裂，③是精细胞变形为精子过程，④是受精作用；

2；哺乳动物精子和卵子发生的不同点：（1）精子的减数两次分裂是连续的；场所唯一（MⅠ和MⅡ的场所都是睾丸）；而卵子的两次分裂是不连续的，场所不唯一，（MⅠ场所在卵巢，MⅡ场所在输卵管中）；（2）精子和卵子发生的时间不同：精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退；多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生前完成的；MⅠ是在雌性动物排卵前后完成的，MⅡ是在受精过程中完成的。

【详解】

（1）精子变形③过程中精子头部的顶体是由高尔基体发育来的；④过程是受精过程，在输卵管内完成。

（2）在④过程中发生顶体反应；释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质和透明带，透明带反应和卵细胞膜反应是阻止多精入卵的两道防线。

（3）雄性动物精子产生的时期是初情期；雌性动物卵泡细胞的形成是在胚胎期性别分化以后完成的，这是精子和卵子在发生上的重要区别。

（4）初级卵母细胞进行减数第一次分裂是在排卵前后时期完成的；减数第二次分裂是在受精作用过程中完成的。

【点睛】

本题考查卵细胞的形成过程和受精作用等相关知识，意在考查学生识记相关细节和解决问题的能力。【解析】高尔基体输卵管透明带反应卵细胞膜反应初情期胚胎期性别分化以后排卵前后受精作用21、略

【分析】【分析】

动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。植物组织培养又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织；器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

【详解】

1；基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术；是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。

2；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。

3；动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖，其原理是细胞增殖。

4；植物组织培养又叫离体培养；指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。

【点睛】

本题考查基因工程概念、胚胎移植、动植物细胞培养等相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技术或DNA重组技术②.又称受精卵移植，是指将雌性动物体内的的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状况相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术③.植物细胞全能性、细胞增殖22、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术，其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。(供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种)，如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期；充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。

【详解】

（1）体外受精前要对精子进行获能处理；使其具有受精能力。

（2）要使动物超数排卵；利用促性腺激素；需将卵子培养到MII中期后进行体外受精。

（3）步骤甲是人工受精；将受精卵移入受体母牛，进行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前应鉴定胚胎中与有关的优良基因。

（4）胚胎移植实现的前提是受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。

【点睛】

胚胎移植的实质：早期胚胎在生理状态相同的条件下空间位置的转移。【解析】精子获能促性腺MⅡ中期人工受精胚胎移植优良性状受体母牛对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥反应。四、判断题(共5题，共25分)23、A【分析】【详解】

由于存在防止多精入卵的两道屏障，故一个卵细胞一般只能同一个精子结合，形成受精卵，这句话是正确的。24、A【分析】【详解】

受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。精子入卵后形成雄原核，同时被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核，雄、雌原核充分发育后，相向移动，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵，故此说法正确。

故正确。25、B【分析】【详解】

受精包括受精前的准备阶段和受精阶段；在自然状态下，哺乳动物的受精在输卵管内完成。

故错误。26、B【分析】【分析】

据图分析；图中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原肠胚。图B中1是滋养层，2是内细胞团，3是透明带，4是囊胚腔；图C中5是外胚层，6是滋养层，7是原肠腔，8是内胚层。

【详解】

（1）从A到C的过程中细胞均需要消耗能量；故胚胎中有机物的含量均减少，（1）正确。

（2）桑椹胚之前所有细胞都具有发育成完整胚胎的潜能；属全能细胞，故A时期胚胎中的细胞都是全能细胞，囊胚期时细胞出现分化，滋养层细胞不是全能细胞，（2）错误。

（3）胚胎移植必须使用处于桑椹胚或囊胚时期的胚胎；处于A或B时期的胚胎，（3）错误。

（4）图示过程细胞通过有丝分裂增殖；有丝分裂过程中可能发生突变，遗传物质可能会发生改变，（4）正确。

故分别为√、×、×、√。27、B【分析】【详解】

生态系统的恢复力稳定性是有一定限度的，导致了生态工程的局限性，使生态工程并不能解决所有的污染、破坏问题，因此不能走“先污染、破坏，后治理”的老路，故错误。五、非选择题(共3题，共6分)28、略

【分析】试题分析：本题考查基因工程的原理及操作步骤；掌握基因工程的操作工具及各工具的作用，再结合所学的知识准确答题。

（1）限制性核酸内切酶（限制酶）能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式。分别为黏性末端和平末端。

（2）目的基因和运载体重组时需要DNA连接酶连接两个核苷酸之间的磷酸二酯键。多种限制酶切割；形成不同的切割位点，所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列就没有专一性要求。

（3）图1中显示，已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，酶Ⅰ切割质粒不会把两个标记基因都破坏，最好选择限制酶I切割质粒。限制酶Ⅱ的识别序列和切点是一↓GATC-，目的基因两端均有酶Ⅱ的识别序列，因此用限制酶II切割目的基因所在的DNA。【解析】磷酸二酯键粘性末端和平末端DNA连接酶无酶Ⅰ酶Ⅱ酶Ⅰ切割质粒不会把两个标记基因都破坏目的基因两端均有酶Ⅱ的识别序列29、略

【分析】【分析】

图甲为单克隆抗体制备过程，图中①表示给小鼠注射特定的抗原，②表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，③表示筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，④表示杂交瘤细胞的体内培养。图乙表示克隆羊培育过程，图中a表示细胞核移植，b表示胚胎移植技术。

【详解】

（1）动物细胞培养技术是其它动物细胞工程技术的基础。图甲和图乙所示的过程中；都必须用到动物细胞培养技术。

（2）图甲中②过程表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的过程；所用的诱导融合的方法有：聚乙二醇（或灭活的病毒，物理方法如离心；振动、电刺激也可）诱导细胞融合。

（3）形成的杂交瘤细胞可在体外条件下大规模培养；也可以注射到小鼠腹腔内进行体内培养。所以过程④表示在小鼠腹水内中培养杂交瘤细胞，从而获得单克隆抗体。单克隆抗体和传统的血清抗体相比具有特异性强，灵敏度高等优点。用单克隆抗体与治疗癌症的药物相结合的“生物导弹”能定向攻击癌细胞，主要是利用其能与癌细胞特异性结合的特点。

（4）A；克隆羊的性别由提供细胞核的白面绵羊决定；A正确；

B；“多莉”的性状是由黑面绵羊提供的细胞质和白面绵羊提供的细胞核共同决定的；B正确；

C；重组细胞实现全能性；说明乳腺细胞核具有全能性，C错误；

D；为了防止微生物的感染；构建重组细胞的操作需在体外无菌条件下进行，D正确。

故选C。

（5）动物体细胞核移植技术的应用：①加速家畜遗传改良进程；促进良畜群繁育；②保护濒危物种，增大存活数量；③生产珍贵的医用蛋白；④作为异种移植的供体；⑤用于组织器官的移植等。由于核移植动物的性别取决于提供细胞核的动物，所以可有选择地繁殖某一性别的家畜。体细胞核移植为无性繁殖，不能改变动物的染色体数目，综上分析，D符合题意，ABC不符合题意。

故选D。

（6）由于卵细胞的细胞质可使体细胞胞核全能性得到表达；所以选择卵细胞作为核移植的供体细胞，综上分析，D符合题意，ABC不符合题意。

故选D。

【点睛】

本题考查了单克隆抗体制备过程、应用，动物细胞培养，核移植的过程和应用等知识，意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。【解析】动物细胞培养聚乙二醇（或灭活的病毒，物理方法如离心、振动、电刺激也可）诱导细胞融合小鼠腹水内特异性强，灵敏度高特异性结合CDD30、略

【分析】【分析】

1；人淋巴细胞、鼠骨髓瘤细胞发生融合后；培养皿中有3中融合细胞（人淋巴细胞与人淋巴细胞融合细胞、鼠骨髓瘤细胞与鼠骨髓瘤细胞融合细胞、杂交瘤细胞）和人淋巴细胞、鼠骨髓瘤细胞。

2；鼠骨髓瘤细胞、鼠骨髓瘤细胞与鼠骨髓瘤细胞融合细胞中只有D途径；杂交瘤细胞中有D和S两条途径。

【详解】

（1）生产单克隆抗体时；一般不直接利用B淋巴细胞，主要原因是B淋巴细胞属于高度分化的细胞，不能无限增殖。

（2）植物细胞常采用电刺激；聚乙二醇等手段进行融合；而动物细胞采用电刺激、聚乙二醇、仙台病毒等手段进行融合。因此，①过程中常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是聚乙二醇。

（3）②过程为细胞培养，培养液中还需通入气体物质，其中通入氧气维持细胞呼吸，通入CO2维持培养液的pH。

（4）杂交瘤细胞既可在体外培养；也可注射到小鼠腹腔内培养。体内培养与体外培养相比，其优点是无需再提供营养物质以及无菌环境，操作简便。

（5）人淋巴细胞；鼠骨髓瘤细胞在培养皿中混合；加聚乙二醇促进细胞融合，培养液中的细胞有以下5种：人淋巴细胞、鼠骨髓瘤细胞、人淋巴细胞与人淋巴细胞融合细胞、鼠骨髓瘤细胞与鼠骨髓瘤细胞融合细胞以及杂交瘤细胞。其中，人淋巴细胞、人淋巴细胞与人淋巴细胞融合细胞不能无限繁殖，不久会衰老、死亡。向培养液中加入氨基嘌呤，氨基嘌呤可阻断D途径，只有D途径的鼠骨髓瘤细胞、鼠骨髓瘤细胞与鼠骨髓瘤细胞融合细胞无法增殖，而杂交瘤细胞可利用S途径合成DNA，继续繁殖，从而分离出杂交瘤细胞。

【点睛】

掌握动物细胞培养的条件和单克隆抗体的流程，分析人淋巴细胞和鼠骨髓瘤细胞发生融合后培养体系中细胞种类及其特点，结合题意进行解答便可。【解析】B淋巴细胞不能无限增殖聚乙二醇细胞维持培养液的pH腹腔无需再提供营养物质以及无菌环境，操作简便氨基嘌呤淋巴细胞中的S六、实验题(共4题，共40分)31、略

【分析】试题分析：本题结合图解，综合考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求学生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题；识记核移植的具体过程；识记体外受精的具体过程及早期胚胎发育的过程，能结合所学的知识准确答题。分析题图：图示是利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗的过程图解；其中①表示核移植过程，②表示早期胚胎培养过程，③表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞。

（1）核移植是将体细胞核移植到去核的卵母细胞中；所以实验前要去除卵母细胞的细胞核。

（2）步骤②中；重组胚胎培养到囊胚期，可从其内细胞团分离出ES细胞。

（3）步骤③是将目的基因导入ES细胞，该过程之前需要构建基因表达载体；可以根据基因Rag2的核苷酸序列设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片