2025年粤教版选择性必修3生物上册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年粤教版选择性必修3生物上册阶段测试试卷970考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、下列生物技术操作对遗传物质的改造，不能遗传给子代的是（）A.将含胰岛素基因的表达载体转入大肠杆菌，筛选获得的基因工程菌B.通过植物体细胞杂交获得的番茄--马铃薯杂种植株C.将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者，进行基因治疗D.将生长激素基因导入奶牛受精卵，培育出能分泌含生长激素乳汁的奶牛2、ES细胞的应用价值不包括（）A.可用于治疗人类的肝衰竭、少年糖尿病等B.可以培育出人造组织器官C.可以治疗人类的阑尾炎、过敏性反应等D.可作为研究体外细胞分化的理想材料3、初期出现高烧、疲累、头痛、背痛，继而在脸部、手臂和腿部出现红疹。由此症状可以判断是由下列哪种病毒引起（）A.天花病毒B.波特淋菌C.肉毒杆菌D.炭疽杆菌4、下列不属于利用基因工程技术制取的药物是（）A.从大肠杆菌体内获得白细胞介素B.从酵母菌体内获得干扰素C.从大肠杆菌体内获得胰岛素D.青霉菌生产青霉素5、“X基因”是DNA分子上一个有遗传效应的片段；若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”，需在PCR反应中加入两种引物，两种引物及其与模板链的结合位置如图甲所示。经4轮循环后，产物中有五种不同的DNA分子，如图乙所示，其中第③和④种DNA分子的个数有（）

A.8个B.6个C.4个D.2个6、某生物兴趣小组尝试对土壤中分解尿素的细菌进行分离并计数，相关叙述正确的是（）A.制备选择培养基时，需加入尿素、琼脂、葡萄糖、硝酸盐等物质B.用活菌计数法统计结果，活菌的实际数目往往比统计的菌落数低C.脲酶将尿素分解成氨使培养基的pH降低，加入酚红指示剂后变红D.每克样品中的菌株数＝（C÷V）×M，C为某一稀释度下平板上的平均菌落数7、穿刺接种是用接种针蘸取少量的菌种，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。下列叙述错误的是（）

A.穿刺接种可用于鉴定微生物的呼吸作用类型B.穿刺接种可用于保藏厌氧菌种或研究微生物的运动C.相对于平板划线法，穿刺接种所需的培养基添加的琼脂较多D.相对于稀释涂布平板法，穿刺接种不可用于样品中活菌数量统计8、下图表示形成DNA并进行PCR扩增的过程。据图分析，下列叙述正确的是（）

A.①过程需要逆转录酶B.②过程所需的原料是核糖核苷酸C.③过程需要解旋酶破坏氢键D.④过程的两种引物之间能互补配对9、世界上首只体细胞（猴胎儿的成纤维细胞）克隆猴“中中”于2017年11月27日诞生，10天后第二只克隆猴“华华”诞生。国际权威学术期刊《细胞》于2018年1月25日以封面文章形式在线发布这一重要成果，该成果表明我国在灵长类体细胞核移植技术研究方面已经走在世界前列。下列相关叙述错误的是（）A.该培育过程属于无性繁殖B.该培育过程涉及细胞核移植、早期胚胎培育和胚胎移植等技术C.该项研究的原理是动物细胞的全能性D.该项研究对于器官移植等具有重大的意义评卷人得分二、多选题(共6题，共12分)10、下列有关利用酵母菌发酵制作葡萄酒的叙述，错误的是（）A.葡萄糖在酵母菌细胞的线粒体内分解成丙酮酸B.制作葡萄酒时，酵母菌先在有氧条件下大量繁殖C.制作过程中，酵母菌始终处于碱性环境D.酵母菌的发酵产物不会影响自身的代谢活动11、微卫星DNA是广泛分布于真核生物基因组中的简单重复序列。由于重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性并且数量丰富，因此，微卫星DNA可以作为分子标记，并有着广泛应用。根据“微卫星DNA”的特点判断，这种分子标记可应用于（）A.人类亲子鉴定B.种群遗传多样性研究C.诱导基因突变D.冠状病毒遗传物质测序12、蛋白质工程就是通过对蛋白质化学、蛋白质晶体学和蛋白质动力学的研究，获得有关蛋白质理化特性和分子特性的信息，在此基础上对编码蛋白质的基因进行有目的的设计和改造，通过基因工程技术获得可以表达蛋白质的转基因生物，中华鲟是一种濒危野生动物。研究者试图通过蛋白质工程改造中华鲟体内的某些蛋白质，使其更加适应现在的水域环境。下列有关说法错误的是（）A.蛋白质工程可定向改变蛋白质分子的结构B.改造蛋白质可通过改变基因结构实现C.改造后的中华鲟和现有中华鲟不再是同一物种D.改造后的中华鲟的后代不具有改造的蛋白质13、下列有关动物细胞培养和植物组织培养的叙述，正确的是（）A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基中的成分不同B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶C.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖组织培养可获得脱毒植株D.烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞培养能得到细胞代谢产物14、细菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在与其他细菌的竞争中占优势，其中tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白。研究人员利用野生型细菌X及其不同突变体进行了实验：在固体培养基表面放置一张能隔离细菌的滤膜，将一种菌（下层菌）滴加在滤膜上后再放置第二张滤膜，滴加等量的另一种菌（上层菌），共同培养后，对上、下层菌计数得到如图结果。下列分析正确的是（）

A.实验中的培养皿、固体培养基和滤膜均需要进行灭菌处理B.对上、下层菌计数时应采用稀释涂布平板法而不能用显微镜直接计数C.由甲、乙、丙三组结果可推测tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性D.野生型细菌X在与tcel-tcil双突变体和tcel突变体的竞争中均占优势15、治疗性克隆的做法是先从需要救治的患者身上提取细胞，然后将该细胞的遗传物质植入一个去除了细胞核的卵细胞中，该卵细胞开始自行分裂，直至形成一个早期胚胎，从早期胚胎中提取胚胎干细胞后将其培养成人们所需要的各种人体器官。下列有关说法正确的是（）A.可采用开放式培养的方式，置于CO2培养箱中培养胚胎干细胞B.该早期胚胎发育始于受精卵，胚胎是由囊胚内部的细胞团不断增殖分化而来C.治疗性克隆中运用胚胎移植技术，一般不选择原肠胚进行胚胎移植D.我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何克隆性实验评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)16、原核基因采取______获得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。17、对于DNA的粗提取而言，就是利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在__________方面的差异，提取DNA，去除杂质。（人教P54）18、注意：a生理基础：______，______

b植物细胞融合前需用______和______除去细胞壁19、请写出基因工程的概念：_________________。请写出胚胎移植的概念：_____________________。请分别写出植物组织培养和动物细胞培养的原理_________。20、生物数据库的知识与正在迅猛发展的生物信息学有关。什么是生物信息学________？21、研究表明，转基因抗虫棉的大面积种植有效遏制了棉铃虫害，也显著地降低了化学农药的使用量｡但是，科研人员也发现，棉田中一种体型很小的盲蝽蟓却容易爆发成灾｡有人认为这与大面积种植转基因抗虫棉有关｡我们应如何看待这种观点_____？如果回答问题有困难，可以请教老师或通过互联网寻找答案。评卷人得分四、实验题(共4题，共24分)22、铁皮石斛是我国名贵中药；生物碱是其有效成分之一，应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验流程如下：

在固体培养基上；PLBs的重量；生物碱含量随增殖培养时间的变化如图所示，请回答下列问题：

⑴选用新生营养芽为外植体的原因是_____，诱导外植体形成PLBs的过程称______。

⑵与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在_______，_______，____。

⑶脱落酸（ABA）能提高生物碱含量；但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养，推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案是探讨了以下问题：

①ABA的浓度梯度设置和添加方式：设4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复。因ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基______后按比例加入。②实验进程和取样：实验50天完成，每10天取样，将样品（PLBs）称重（g/瓶）后再测定生物碱含量。如初始（第0天）数据已知，实验过程中还需测定的样品数为______。

③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品（重复样）的_____时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。23、餐厨垃圾废液中的淀粉；蛋白质、脂肪等微溶性物质可以被微生物分解并利用；但由于初期有益微生物数量相对较少，存在发酵周期长、效率低等缺点，极易对环境造成污染。为探究用圆褐固氮菌、巨大芽孢杆菌处理某餐厨垃圾废液时，单独接种和混合接种的效果差异及最佳接种量比，以制备微生物菌剂，研究者做了如下实验：

（1）将两种菌液进行不同配比分组处理如下表所示：。编号R0R1R2R3圆褐固氮菌：巨大芽孢杆菌1：00：11：12：1

将上表菌液分别接种于l00mL________________中进行振荡培养。本实验还需设置空白对照，对照组接种________________。

（2）培养3天后测定活菌数，取一定量菌液用_____________法接种于基本培养基中培养，该方法包括_____________和____________两个操作。进行计数时，可依据______________对两种菌进行区分，并选取菌落数在__________内的平板。实验结果如下图所示，由实验结果可知___________________。

24、有研究表明CDKN2B基因与小鼠的寿命有关；科学家将该基因导入小鼠体内，统计其寿命是否高于正常小鼠。图1表示CDKN2B基因与相关限制酶酶切位点，该基因转录出的mRNA碱基序列与A链的碱基序列相同（T；U视为相同的碱基），图2为质粒简图，请回答下列有关问题：

（1）科学家首先采用PCR技术对目的基因进行扩增。PCR过程中每一循环有两次升温一次降温，其中降温的目的是_______________________________________________________。

（2）科学家在构建基因表达载体过程时，目的基因应插在___________和___________之间才能正常表达。单独使用限制酶HindⅢ分别切割目的基因和载体后产生黏性末端。携带CDKN2B基因的重组质粒成功导入细胞后，发现约一半的细胞中没有检测到CDKN2B蛋白，原因是___________。为了避免这种现象的发生，应对以上方法进行改进，改进措施为___________。

（3）若想让一个转入了目的基因的受精卵发育成多个个体，可以采用___________技术，操作时应注意做到_______________________________________________________。25、T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子；可通过污染饲料引起畜禽中毒反应。CYP3A是猪体内降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导CYP3A基因表达水平升高。

(1)T-2毒素是霉菌的_____（选填“初级”或“次级”）代谢产物，主要以_____方式进入猪细胞。

(2)B1和B2是CYP3A基因启动子上游的两个调控序列，为研究T-2毒素诱导CYP3A基因表达的机理，研究者首先将不同调控序列分别和CYP3A基因启动子及荧光素酶基因（LUC基因）连接构建表达载体，再分别导入猪肝细胞，然后向各组猪肝细胞培养液中加入_____，适宜条件下进行培养；24h后检测LUC酶活性，计算启动子活性相对值，结果如图1所示。据图可知，B1和B2调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件，理由是_____。

(3)研究表明NF-Y和Sp1两种蛋白均参与T-2毒素对CYP3A的诱导；B2是Spl的结合位点。研究者推测，NF-Y通过与B1结合，与Sp1共同调控CYP3A基因的表达。

①为证明Bl是NF-Y的结合位点，研究者依据B1序列制备了野生型和突变型探针，分别与猪肝细胞核蛋白提取物混合，实验分组及结果如图2．据实验结果推测，第4组出现阻滞带的原因是_____，进而推测第5组结果产生的原因是_____。

②研究者设计实验进一步证明了NF-Y和Spl通过互作共同发挥调控功能，实验设计思路是：增大或缩小B1和B2两者之间的距离，检测CYP3A基因的启动子活性。据此分析，实验假设是_____。评卷人得分五、综合题(共3题，共15分)26、泡菜是人们日常生活中比较喜欢食用的一种食品；但是泡菜中却含有亚硝酸盐。某研究性学习小组的同学为了探究泡菜在发酵过程中不同食盐浓度和发酵时间对亚硝酸盐含量变化的影响，设计了相关实验进行研究。请回答下面的问题：

（1）制作泡菜的原理是______________________，制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料，原因是______________。

（2）测定亚硝酸盐含量的实验原理是：在_________条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生_________反应后，与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合形成_________色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较；可以估测出泡菜中亚硝酸盐的含量。

（3）如图是该活动小组记录的三种食盐浓度的泡菜中的亚硝酸盐含量与发酵天数的关系图。

根据此实验结果，你认为制作泡菜比较适合的食盐浓度为______________。

（4）泡菜的制作方法不当，很容易造成泡菜变质，甚至发霉变味，试分析可能的原因________________。27、体细胞胚发生是植物体细胞经体外培养再生成胚状体并发育为完整植株的过程。研究发现L基因在棉花胚状体形成过程中差异表达；研究者对其功能进行研究。

(1)棉花体细胞胚发生通过_____技术实现，外植体需经过_____形成非胚性愈伤组织，再分化成胚性愈伤组织并进一步形成胚状体。

(2)研究者取L基因过表达和干扰L基因表达的转基因棉花的下胚轴；接种在培养基上诱导胚状体的发生，结果如图1。

①培养基应含有_____（有机物、无机物至少各1种）等营养物质。接种前，下胚轴需进行_____处理。

②据图1可知，L基因表达_____胚性愈伤组织的提前分化。

(3)L基因表达产物可结合靶基因启动子并激活转录；研究发现L基因过表达的棉花细胞中P蛋白含量增加。为探究P基因是否为L基因调控的靶基因，研究者克隆出P基因的启动子，经处理后连接荧光素酶（LUC）基因构建表达载体，导入烟草的原生质体，结果如图2。

实验组原生质体还应导入_____。

结果说明_____。

(4)P蛋白可抑制生长素极性运输。为探究生长素运输对胚状体形成的影响，研究者将生长素运输抑制剂添加到培养基中，检测胚性愈伤组织的分化率；结果如图3。

①比较图1、图3结果，表明生长素运输抑制剂处理可以_____。

②实验结果不能说明“L基因仅通过影响生长素的运输进而影响胚状体的形成”，理由是_____。28、人乳铁蛋白（hLF）广泛分布于乳汁等外分泌液，初乳中含量较高，对细菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人员开展人乳铁蛋白基因乳腺特异性表达载体构建及转染研究，主要流程如图，图中AseⅠ、NheⅠ、SalⅠ、BamHⅠ代表相关限制酶切点，neor为新霉素抗性基因；BLG基因为β乳球蛋白基因，GFP基因为绿色荧光蛋白基因。请回答：

(1)过程①方法的基本原理是先以人乳腺细胞总RNA为模板通过逆转录合成cDNA（互补DNA），再通过PCR技术扩增相应的DNA片段——hLF基因。但是过程①中，不能从人肌肉细胞中提取RNA用于RT-PCR，这是因为____________，在RT-PCR过程中，加入的引物需在____________端添加识别序列的限制酶是____________；以便于hLF基因插入pEB质粒中。

(2)过程②中，hLF基因插入到BLG基因之后，利用后者的启动子的目的是____________。

(3)将转染后的山羊乳腺上皮细胞先置于含新霉素的培养液中培养，能够存活的细胞应该是导入了____________的细胞，再利用荧光显微镜观察山羊乳腺上皮细胞是否有____________以筛选出转染成功的细胞。

(4)科研过程中，可以用PCR技术检测受体细胞中的染色体上DNA上是否____________或检测____________。可以用____________技术，检测hLF基因是否翻译成人乳铁蛋白。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、C【分析】【分析】

基因治疗是指将外源正常基因导入靶细胞；以纠正或补偿缺陷和异常基因引起的疾病，以达到治疗目的。其中也包括转基因等方面的技术应用，也就是将外源基因通过基因转移技术将其插入病人的适当的受体细胞中，使外源基因制造的产物能治疗某种疾病。从广义说，基因治疗还可包括从DNA水平采取的治疗某些疾病的措施和新技术。

【详解】

A；将含胰岛素基因的表达载体转入大肠杆菌；筛选获得的基因工程菌可以通过二分裂的方式遗传给后代，A不符合题意；

B；通过植物体细胞杂交获得的番茄--马铃薯杂种植株；遗传物质发生改变，可以通过无性繁殖遗传给子代，B不符合题意；

C；将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞；只是淋巴细胞含有这个基因，其生殖细胞的该基因没有改变，因此不能遗传给子代，C符合题意；

D；将生长激素基因导入奶牛受精卵；受精卵含有生长素基因，受精卵培育成的奶牛含有该基因，因此可以遗传给后代，D不符合题意。

故选C。2、C【分析】【分析】

哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞；是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。ES细胞具有胚胎细胞的特性，在形态上，表现为体积小；细胞核大、核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞。

【详解】

A；ES细胞可用于治疗人类的某些顽症；如帕金森综合症、肝衰竭、少年糖尿病等疾病，与题意不符，A错误；

B；ES细胞具有发育的全能性；可培育出人造器官，解决目前临床上存在的供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题，与题意不符，B错误；

C；人类的阑尾炎是炎症引起的；过敏反应是免疫失调病，ES细胞不能用于治疗这些疾病，与题意相符，C正确；

D；ES细胞具有自我更新和分化的潜能；可作为研究体外细胞分化的理想材料，与题意不符，D错误。

故选C。

【点睛】3、A【分析】【分析】

1；生物武器种类：包括致病菌、病毒、生化毒剂；以及经过基因重组的致病菌等．把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。

2；生物武器的特点：单位面积效应大；有特定的伤害对象；具有传染性；危害时间久；不易被发现和鉴定；使用者本身易受伤害；生物武器造价低；技术难度不大，隐秘性强，可以在任何地方研制和生产。

【详解】

高烧、疲累、头痛继而在明显部位出现红疹是天花患者的症状，是由天花病毒引起的，A正确，BCD错误。4、D【分析】【分析】

基因工程药物（1）来源：转基因工程菌。工程菌是指采用基因工程的方法；使外源基因得到高效率表达的菌株类细胞系。

（2）成果：人胰岛素；细胞因子、抗体、疫苗么长激素、干扰素等。

【详解】

A；利用基因工程技术可制取药物；如外源白细胞介素基因在大肠杆菌中表达制取白细胞介素，属于基因工程制药，A错误；

B；利用基因工程技术可制取药物；如使外源干扰素基因在酵母菌体内表达获得干扰素，属于基因工程制药，B错误；

C；利用基因工程技术可制取药物；如使外源胰岛素基因在大肠杆菌体内表达获得胰岛素，属于基因工程制药，C错误；

D；青霉素是青霉菌自身基因表达产生的；因此在青霉菌体内提取的青霉素不属于基因工程药品，D正确。

故选D。5、B【分析】PCR：

（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；

（2）原理：DNA双链复制；

（3）条件：模板DNA；四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；

（4）过程：高温变性；低温复性、中温延伸。

（5）结果：经过n次扩增，形成的DNA分子数是2n个；其中只有2条单链不含有引物。

【详解】

通过图中信息可知；“X基因”第1次复制得到两个DNA：①和②各1个；“X基因”第2次复制得到4个DNA：①复制得①和③；②复制得②和④；“X基因”第3次复制得到8个DNA：①复制得①和③、③复制得③和⑤、②复制得②和④、④复制得④和⑤；“X基因”第4次复制得到16个DNA：①复制得①和③、②复制得②和④、2个③复制得2个③和2个⑤、2个④复制得2个④和2个⑤、两个⑤复制得到4个⑤。

从上面的推测可知，经4轮循环产物后，产物中有8个⑤、3个④、3个③、1个②、1个①。因此，经4轮循环后，第③和④种DNA分子的个数有：3+3=6个，故选B。6、D【分析】1；培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素；只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。

2；分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨；氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。

3；统计菌落数目的方法：

（1）显微镜直接计数法①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板；在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数；③缺点：不能区分死菌与活菌；

（2）间接计数法（活菌计数法）①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。②操作：a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性；b；为了保证结果准确；一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。

【详解】

A；分离土壤中分解尿素的细菌；培养基中要有尿素、琼脂糖、葡萄糖，尿素给分解尿素的细菌提供氮源，不能加硝酸盐，否则无法起到选择出尿素分解菌的作用，A错误；

B；用活菌计数法统计结果时；有的活菌在培养过程中会死亡，而有的菌落是由多个活菌共同形成的，故活菌的实际数目往往比统计的菌落数高，B错误；

C；脲酶将尿素分解成氨使培养基的pH增加；加入酚红指示剂后变红，C错误；

D；每克样品中的菌株数=（C÷V）×M；其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数，D正确。

故选D。7、C【分析】【分析】

穿刺接种在保藏厌氧菌种或研究微生物的运动时常采用此法。做穿刺接种时；用的接种工具是接种针。用的培养基一般是半固体培养基。它的做法是：用接种针蘸取少量的菌种，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。

【详解】

A、由分析可知，穿刺接种可用于鉴定微生物的呼吸作用类型，A正确；

B、穿刺接种常用于保藏厌氧菌种或研究微生物的运动，因此需要接种在半固体培养基中，B正确；

C、由分析可知，相对于平板划线法，穿刺接种所需的培养基添加的琼脂较少，C错误；

D、稀释涂布平板法可用于活菌计数，而穿刺接种不可用于样品中活菌数量统计，D正确。

故选C。8、A【分析】【分析】

分析题图：①是以RNA为模板形成单链DNA的逆转录过程；②是以单链DNA为模板合成双链DNA的DNA复制过程；③④⑤依次是PCR反应过程中的变性；复性、延伸阶段。

【详解】

A；①过程为逆转录；需要逆转录酶，A正确；

B；②过程由DNA单链合成DNA双链过程；所需要的原料为脱氧核糖核苷酸，B错误；

C；③过程为变性；温度上升到90℃至95℃时，双链DNA解聚为单链，不需要解旋酶破坏氢键，C错误；

D；④过程为复性；温度降到55℃至60℃时，两种引物通过碱基互补配对与两条DNA单链结合，但引物对之间不能互补配对，D错误。

故选A。9、C【分析】【分析】

细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

【详解】

A；克隆猴的诞生属于动物体细胞核移植；形成过程没有经过生殖细胞的融合，所以属于无性繁殖，A正确；

B；获得克隆猴的培育过程中用到的细胞工程技术主要有核移植、动物细胞培养、胚胎移植等；B正确；

C；克隆猴的原理是动物细胞核具有全能性；C错误；

D；该项研究对于器官移植等具有重大的意义；D正确。

故选C。二、多选题(共6题，共12分)10、A:C:D【分析】【分析】

酵母菌是单细胞的真核生物；属于真菌，代谢类型是兼性厌氧型。在氧气充足时，酵母菌进行有氧呼吸，将葡萄糖分解为二氧化碳和水；在无氧条件下，进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。

【详解】

A；利用酵母菌发酵的方式制作葡萄酒时；酵母菌进行无氧呼吸，葡萄糖在酵母菌细胞质基质内被分解成丙酮酸，A错误；

B；酵母菌繁殖需要空气；在完全隔绝空气的情况下，酵母菌繁殖几代就停止了，要维持酵母菌长时间发酵，必须供给一定的氧气，故制作葡萄酒时酵母菌先在有氧条件下大量增殖，B正确；

C、酵母菌发酵的后期，由于产生的CO2和其他代谢产物的积累；发酵液呈酸性，C错误；

D；酵母菌发酵产生的酒精会对酵母菌的生长产生抑制作用；D错误。

故选ACD。11、A:B【分析】【分析】

微卫星DNA是真核生物基因组中的简单重复序列；由于重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性并且数量丰富，可以作为分子标记应用于人类亲子鉴定；种群遗传多样性研究。

【详解】

AB；微卫星DNA是真核生物基因组中的简单重复序列；且重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性，因此可用于人类亲子鉴定、物种间亲缘关系鉴定、物质和遗传多样性的研究等，AB正确；

C；诱导基因突变的因素有物理因素、化学因素和生物因素；与微卫星DNA的特性无关，C错误；

D；冠状病毒的遗传物质是RNA；其测序与微卫星DNA的特性无关，D错误。

故选AB。12、C:D【分析】【分析】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。也就是说，蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，是包含多学科的综合科技工程领域。

基本流程：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相对应的脱氧核糖核苷酸序列（DNA）。

【详解】

A；蛋白质工程可以通过改造基因来定向改变蛋白质分子的结构；A正确；

B；因为基因指导蛋白质的合成；所以改造蛋白质可通过改变基因结构实现，B正确；

C；改造后的中华鲟具有新的性状；但其和现有中华鲟之间没有生殖隔离，仍是同一物种，C错误；

D；蛋白质工程改造的是基因；可以遗传给子代，因此改造后的中华鲟的后代也具有改造的蛋白质，D错误。

故选CD。13、A:C:D【分析】【分析】

植物组织培养和动物细胞培养的比较。比较项目植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞增殖培养基性质固体培养基液体培养基培养基成分营养物质（蔗糖）、植物激素等营养物质（葡萄糖）、动物血清等培养结果植物体细胞株、细胞系培养目的快速繁殖、培育无毒苗等获得细胞或细胞产物分散处理无有脱分化有无

【详解】

A；动物细胞培养和植物组织培养所用培养基中的成分不同；如动物细胞培养需要加血清，植物细胞培养不需要添加血清，A正确；

B；植物组织培养不需要胰蛋白酶；B错误；

C；动物细胞培养可用于检测有毒物质；茎尖组织培养可获得脱毒植株，C正确；

D；烟草叶片离体培养能产生新个体；小鼠杂交瘤细胞培养能得到细胞代谢产物，D正确。

故选ACD。14、A:B:C【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；为避免杂菌的污染；实验中的滤膜、培养皿、固体培养基等均需灭菌处理，A正确；

B；对活菌进行计数的方法是稀释涂布平板法；具体方法是：先将菌体进行梯度稀释，再涂布到滤膜的表面，待菌落数稳定时进行计数，不能用显微镜直接计数的原因是显微镜直接计数不能区分死菌和活菌，B正确；

C；tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白；乙组中野生型可产生tce1蛋白作用于tcel-tcil双突变体，后者无法产生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生菌在竞争中占据优势；而在丙组中，野生型可产生tce1蛋白作用于tcel突变体，后者可以产生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生型的生长受到抑制，由此推测，tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性，C正确；

D；由甲组、乙组可知；野生型细菌X在与tcel-tcil双突变体的竞争中均占优势，由甲组、丙组可知，野生型细菌X在与tcel突变体的竞争中不占优势，D错误。

故选ABC。15、C【分析】【分析】

治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞和组织（皮肤；神经或肌肉等）用于治疗性移植。中国政府的态度是禁止生殖性克隆人；不反对治疗性克隆。

【详解】

A；开放式组织培养一般是指使组织培养脱离严格无菌的操作环境；在自然、开放的有菌环境中进行操作。，动物细胞一般不能采用这种方式，A错误；

B；胚胎是由整个受精卵发育而来的；囊胚内部的细胞不能发育为完整的胚胎，B错误；

C；胚胎移植技术；一般采用桑椹胚或囊胚进行移植，C正确；

D；我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何形式的生殖性克隆；但是不反对治疗性克隆，D错误。

故选C。三、填空题(共6题，共12分)16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】直接分离人工合成反转录法化学合成法17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】物理和化学性18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】细胞膜流动性植物细胞全能性纤维素酶果胶酶19、略

【分析】【分析】

动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。植物组织培养又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织；器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

【详解】

1；基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术；是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品的遗传技术。

2；胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎；或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其它雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。

3；动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖，其原理是细胞增殖。

4；植物组织培养又叫离体培养；指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。

【点睛】

本题考查基因工程概念、胚胎移植、动植物细胞培养等相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。【解析】①.又叫基因拼接技术或DNA重组技术②.又称受精卵移植，是指将雌性动物体内的的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状况相同的其他雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术③.植物细胞全能性、细胞增殖20、略

【分析】【详解】

生物信息学是研究生物信息的采集、处理、存储、传播,分析和解释等各方面的学科，也是随着生命科学和计算机科学的迅猛发展，生命科学和计算机科学相结合形成的一门新学科，生物信息学主要是核酸和蛋白质序列数据的计算机处理和分析。【解析】生物信息学是研究生物信息的采集、处理、存储、传播,分析和解释等各方面的学科，也是随着生命科学和计算机科学的迅猛发展，生命科学和计算机科学相结合形成的一门新学科21、略

【分析】【详解】

生物之间存在（种间）竞争多关系，该区域的棉铃虫与盲蝽蟓之间共同以棉花为食，种植转基因抗虫棉后，棉铃虫不能存活，盲蝽蟓的食物等资源充足，故大量繁殖，爆发成灾。【解析】该区域的棉铃虫与盲蝽蟓之间存在竞争关系，种植转基因抗虫棉后，棉铃虫不能存活，盲蝽蟓大量繁殖四、实验题(共4题，共24分)22、略

【分析】【分析】

【详解】

⑴新生营养芽分裂能力强；细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs；根据题干可知，PLBs，类似愈伤组织，外植体形成愈伤组织的过程是脱分化。⑵据图分析，光照下PLBs的重量高于黑暗条件下，原因可能是生长起始较快，快速生长时间较长，PLBs产量较高。⑶①由于ABA受热易分解，所以各种液体培养基灭菌后，冷却，再加入不同浓度的ABA。②根据题干可知，实验50天完成，每10天取样，需要取5次样；空白组不需要重复，处理组，每组重复三次，因此每次取样中，需要记录15个样品中的数据，取样5次共需要测定的样品数为75。③适量的ABA可提高生物碱产量，当样品的PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。

【考点】

本题主要考查植物组织培养和设计实验，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系、具有对一些生物学问题进行初步探究的能力和并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理的能力。【解析】细胞分化程度低，容易诱导形成PLBs细胞的脱分化生长起始较快快速生长时间较长PLBs产量较高灭菌、冷却75PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大23、略

【分析】微生物实验室培养的实验操作：1；制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程为：计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板。2、纯化大肠杆菌：（1）原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞；使其长成单个的菌落，这个单个菌落就是一个纯化的细菌菌落。（2）微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在-起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法:将待分离的菌液经过大量稀释后均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

（1）将上表菌液分别接种于100mL餐厨垃圾废液中进行振荡培养；振荡处理的目的是增加溶液中的溶氧量；有利于目的菌与溶液充分接触；本实验还需设置对照组为接种等量无菌水。

（2）测定活菌数；需要利用稀释涂布平板法，接种时故需要取一定量菌液进行梯度稀释，然后分别取0.1mL的菌液采用涂布法接种于基本培养基中培养。进行计数时，可依据菌落的特征对两种菌进行区分，并选取菌落数在30-300内的平板。由实验结果可知：两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种；两菌种接种量比例为1:1时，废液中两种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化。

【点睛】

本题结合图表，考查微生物的分离和培养，要求考生识记制备培养基的过程;识记接种微生物常用的两种方法及微生物的计数方法，能结合柱形图中信息准确答题。【解析】某餐厨垃圾废液等量无菌水稀释涂布平板系列（梯度）稀释涂布平板菌落特征30~300两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种；两菌种接种量比例为1：1时，废液中两种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化24、略

【分析】【分析】

1；PCR扩增的过程是：目的基因DNA受热变性后解链为单链；引物与单链相应互补序列结合，然后在DNA聚合酶作用下进行延伸，如此重复循环多次。

2；构建基因表达载体过程时；目的基因应插在启动子和终止子之间才能正常表达。

【详解】

（1）PCR过程中每次循环两次升温（变性和延伸）和一次降温（复性）；其中降温（复性）的目的是让两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。

（2）基因表达载体包括标记基因；目的基因；启动子和终止子，科学家在构建基因表达载体过程时，目的基因应插在启动子和终止子之间才能正常表达。单独使用限制酶HindⅢ切割目的基因和载体后，由于部分基因反向连接，导致携带CDKN2B基因的重组质粒成功导入细胞后，约一半的细胞中没有检测到CDKN2B蛋白。为了避免这种现象的发生，可以同时用两种酶进行切割，由于SmaⅠ会破坏CDKN2B基因，不能选用该酶切割，HindⅢ会破坏质粒的两种标记基因，不能选用该酶切，PstⅠ和EcoRⅠ能切下完整的CDKN2B基因，并不会破坏抗四环素基因基因，因此为了避免这种现象的发生，可以同时用PstⅠ、EcoRⅠ分别对目的基因和载体进行酶切。

（3）来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质；因此要让一个受精卵发育成多个个体，可采用胚胎分割技术，然后经移植获得多胎。分割时应注意将囊胚的内细胞团均等分割。

【点睛】

本题考查基因工程和胚胎分隔技术相关知识，掌握基因工程和胚胎分割操作步骤是解决本题的关键。【解析】让两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合启动子终止子部分基因反向连接同时用PstⅠ、EcoRI分别对目的基因和载体进行酶切胚胎分割将囊胚的内细胞团均等分割25、略

【分析】【分析】

图1可知：T-2毒素是一种常见的菌素；CYP3A是降解T-2毒素的关键酶，T-2毒素可诱导其表达水平升高，当用两种调控序列同时连接启动子，启动子的活性最高。

图2可知：野生型探针能与NF-Y结合；突变型探针不能与NF-Y结合，NF-Y抗体一定能与NF-Y结合。

【详解】

（1）初级代谢产物一般是霉菌生命活动所必需的，大多存在于细胞内。次级代谢产物不是霉菌生命活动必需的，并且分泌到体外，故T-2毒素是霉菌的次级代谢产物。T-2毒素是一种由霉菌分泌的脂溶性小分子，脂溶性小分子以自由扩散的方式进入细胞。

（2）实验的自变量是有无调控序列；根据单一变量原则，对照组的目的是为了排除无光变量的影响，除了没有调控序列，其他处理和实验组相同，所以对照组和实验组猪肝细胞均导入含CYP3A基因启动子及LUC基因的表达载体，然后向各组猪肝细胞培养液中加入加入等量T-2毒素，适宜条件下进行培养。从图中信息可知，缺失两个调控序列和对照组活性一致，缺失一个比对照组活性略强，两个都存在活性最高，说明这两个调控序列是CYP3A基因响应T-2毒素的核心元件。故缺失两个调控序列或其中任一个，T-2毒素都不能诱导启动子活性明显增强。

（3）①实验的目的是要验证NF-Y能与B1结合；根据第2组和第3组结果，依据B1序列制备的NF-Y结合位点野生型探针能与NF-Y结合，根据第4组结果，突变型探针不能与NF-Y结合。第5组加入了NF-Y抗体，一定能与NF-Y结合。故可以解释为：结合位点突变的探针不能结合核蛋白中的NF-Y，也不会竞争NF-Y与标记探针的结合，所以第4组与第2组同样位置出现阻滞带。第5组，NF-Y的抗体结合NF-Y，因此第5组中出现标记探针；NF-Y和NF-Y抗体的结合物，结合物分子量大，阻滞带的位置更靠后。

②假设NF-Y和Sp1通过互作共同发挥调控功能，它们之间的距离是发挥作用的最佳距离，故增大或缩小B1和B2两者之间的距离都会降低CYP3A基因的启动子的活性。【解析】(1)次级自由扩散。

(2)等量的T-2毒素缺失两个调控序列或其中任一个；T-2毒素都不能诱导启动子活性增强。

(3)结合位点突变的探针不能结合核蛋白中的NF-Y，也不会竞争NF-Y与标记探针的结合，所以第4组与第2组同样位置出现阻滞带。NF-Y的抗体结合NF-Y，因此第5组中出现标记探针、NF-Y和NF-Y抗体的结合物，结合物分子量大，阻滞带的位置更靠后。NF-Y和Sp1通过互作共同发挥调控功能，它们之间的距离是发挥作用的最佳距离。五、综合题(共3题，共15分)26、略

【分析】【分析】

1；泡菜制作的原理是乳酸菌发酵；制作的流程是原料的修整、洗涤、晾晒、切分等加工过程+泡菜盐水→加入调味料装坛→发酵→成品。

2；由于在泡菜制作过程中；微生物会将原料中的硝酸盐还原形成亚硝酸盐，因此在发酵初期亚硝酸盐含量会逐渐升高，发酵后期亚硝酸盐又会被某些微生物氧化成硝酸盐，亚硝酸盐含量又会逐渐下降，因此在泡菜制作过程中要检测亚硝酸盐的含量，确定合适的取食时间。

3；亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后；与N-1-萘基乙二胺盐酸盐反应呈现玫瑰红色，因此制作不同浓度的亚硝酸盐溶液制成标准显色液，再与泡菜溶液的显色情况进行比较从而确定泡菜中亚硝酸盐的含量。

（1）

泡菜制作的原理是乳酸菌发酵；乳酸菌是一种厌氧菌，在无氧条件下，乳酸发酵将葡萄糖分解产生乳酸，形成一种独特的风味。有些蔬菜如小白菜；萝卜等，含有丰富的亚硝酸盐，放置时间过久，亚硝酸盐含量升高，而新鲜蔬菜的亚硝酸盐含量低，因此制作泡菜时要用新鲜的蔬菜或其他原料。

（2）

测定亚硝酸盐含量的方法是比色法；其原理是：在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，将显色反应的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。

（3）

据实验结果可知；因为食盐浓度为5%的泡菜中亚硝酸盐含量变化最快，说明乳酸菌代谢最旺盛，且在发酵11天后亚硝酸盐降到最低值，所以比较适合制作泡菜的食盐浓度为5%。

（4）

制作泡菜时；若泡菜坛子密封不严；取食工具不卫生或盐的比例过小，都会引起杂菌